人胰腺癌与端粒酶及其亚单位表达的关系

目的：探讨粒酶活性及其亚单位表达水平与人胰腺癌发生及其临床病理特征的关系。方法：应用聚合酶链反应－银染法（PCR－银染，聚合酶链反应－酶联免疫吸附试验（PCR－ELISA）、逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）及DNA测序等技术，对24例人胰腺癌中端粒酶活性及其亚单位的表达情况进行研究。结果：24例胰腺癌标本中端粒酶活性及hTERTmRNA表达表达阳性率为87．5％、83．3％，而癌旁组织为12．5％，两组差异有显著性（P＜0．05）。hTERTmRNA的表达是人端粒酶活性表达的关键性因素。端粒酶活性的表达水平与肿瘤的分化程度，有无淋巴结的转移及临床分期明显相关。结论：端粒酶参与了胰腺癌的寻生；hTERTmRNA表达水平的上调可在胰腺癌形成过程中起重要作用。端粒酶活性的表达与人胰腺癌的生物学行为及临床病理特征有关，且有助于判断胰腺癌的恶性程度的患者的预后。     

hTERT基因与端粒酶活性调节

目的 介绍端粒酶催化亚单位（hTERT)基因及评价其在端粒酶活性调节中的意义。方法 复习近4年相关文献,并作综述报道。结果 hTERT属逆转录酶系,hTERT基因的表达调控可分为转录调控与转录后加工;hTERT是调控端粒酶活性的主要因素,其调控可分为转录调控和转录后mRNA选择性剪接调控。结论 在众多调控端粒酶活性的因素中,hTERT的调控起关键作用。     

血管瘤组织中端粒酶逆转录酶基因表达与端粒酶活性的关系

目的　探讨端粒酶逆转录酶 (hTERT )基因在血管瘤组织中的表达及其与端粒酶活性的关系。方法　采用原位逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )和链霉抗生物素蛋白 过氧化物酶(SP)免疫组织化学方法分别检测 40例 (增生期 2 0例、退化期 2 0例 )血管瘤组织及 2 0例正常皮肤组织中hTERTmRNA表达 ,并采用端粒重复序列扩增 (TRAP)法测定血管瘤组织中端粒酶活性。结果　增生期血管瘤组织中hTERTmRNA阳性表达率为 80 .0 % ,退化期血管瘤组织中hTERTmRNA阳性表达率为 15 .0 % ,而正常皮肤组织中hTERTmRNA无阳性表达 ,增生期血管瘤与退化期血管瘤hTERTmRNA表达率差异具有显著性 (P <0 .0 1)。增生期血管瘤组织中端粒酶活性为81.4% ,退化期血管瘤组织中端粒酶活性 2 1.6% ,正常皮肤组织中无端粒酶活性 ,增生期血管瘤与退化期血管瘤组织中端粒酶活性比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　端粒酶活性与血管瘤内皮细胞增殖状况和hTERTmRNA表达密切相关 ,在血管瘤的发生和发展中起着重要的作用。     

Applications of telomerase in urologic oncology

Summary Vertebrates have special structures at the ends of their chromosomes, known as telomeres, which are composed of 5- to 15-kb pairs of a guanine-rich hexameric repeat (TTAGGG)n. In normal somatic cells there is a progressive degradation of telomeres with aging., The cell can afford to lose only a finite number of these telomeres before significant sequences of the parent DNA are lost, resulting in chromosomal instability and cell death. However, germ-cell telomeres are maintained despite multiple rounds of replication. This suggests that they produce an enzyme that maintains their telomere length. This enzyme, a ribonucleoprotein, is called telomerase. In this review, we discuss the presence of telomerase activity in various human cancers and, in particular, in urologic tumors. We describe the potential clinical utility of detection of the presence of telomerase activity in cells from voided urine samples of patients with bladder cancer.     

端粒酶反义寡核苷酸对乳腺癌端粒酶活性及细胞生长的影响

目的　探讨端粒酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞端粒酶活性的影响及抑制端粒酶活性以控制乳腺癌细胞生长的可能性。方法　采用 10 μmol/L与端粒酶催化亚基 (hTRT )mRNA互补的反义寡核苷酸处理乳腺癌细胞 ;于处理后 2 4、72h用端粒重复序列扩增及酶联免疫吸附方法检测细胞端粒酶活性 ;于处理后 72h以流式细胞术测定细胞周期 ;于处理后 12 0h采用原位末端标记法检测细胞凋亡。结果　经hTRT反义寡核苷酸作用后 ,细胞端粒酶活性明显受到抑制 ,至作用后 72h ,端粒酶活性较对照组降低 65 .6% (P <0 .0 5 ) ;细胞生长明显受到抑制 ;细胞周期发生显著变化 :G0 /G1期细胞数增多 ,S期及G2 /M期细胞数则减少 ;细胞增殖指数由 0 .46降低至 0 .2 5 ;并可观察到凋亡细胞的出现 ,凋亡发生率为 12 .5 % ;而无义组及空白对照组以上各指标均无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论　端粒酶反义寡核苷酸可明显抑制乳腺癌细胞端粒酶活性 ,抑制细胞生长和增殖 ,诱导细胞凋亡 ;表明应用反义技术抑制端粒酶活性治疗乳腺癌具有广阔的前景。     

端粒和端粒酶与永生化软骨细胞

关节软骨细胞凋亡与增殖在正常情况下处于动态平衡,维持着关节软骨的细胞数量及其形态和功能的稳定.软骨细胞凋亡过盛可能是关节软骨退变发展成骨关节炎的重要原因之一.关节软骨细胞凋亡主要与细胞的端粒长短和端粒酶活性密切相关,细胞的"末端复制问题"使端粒不可避免地随着复制逐渐缩短,端粒缩短达到临界长度时细胞将无法进行分裂而凋亡.端粒酶的逆转录反应弥补细胞分裂过程的端粒丢失,实现细胞永生化.有效地调控软骨细胞端粒长短、端粒酶的活性,抑制关节软骨细胞过度凋亡,意味着部分软骨细胞功能得以保护,延缓或减轻关节软骨的退变,促进软骨修复,从而缓解症状,改善关节功能,可能为骨关节炎的防治开辟一条新途径.     

Telomeres and telomerase in renal health

The role of telomeres and telomerase in human biology has been studied since the early 1990s because telomere attrition is implicated in various diseases including cardiovascular dysfunction, carcinogenesis, and the progression of acute kidney injury. Telomeric length is a reliable indicator of intrinsic biologic age and a surrogate for the mitotic clock. Because the prevalence of chronic kidney disease increases with age, telomere length and telomerase activity may play a role in its progression.     

端粒酶反义寡核苷酸对肾癌细胞端粒酶活性及其体外增殖的影响

目的　探讨端粒酶反义核酸对肾癌细胞端粒酶活性和体外增殖的影响。　方法　以端粒酶RNA模板区为靶点 ,序列为TAGGGTTAGACAA的硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸 (ASON )与肾癌细胞株RCZ细胞共同孵育 ,计 1～ 2 8天细胞数 ,MTT比色法测细胞生长抑制率 ,PCR ELISA法检测端粒酶活性。　结果　ASON实验组与随机引物及空白对照组比较 ,端粒酶活性明显降低 (P<0 .0 0 1) ,细胞增殖数目显著减少 (P <0 .0 1) ,抑制率显著增加 (P <0 .0 0 1) ,抑制效果显示剂量依赖性 (P <0 .0 5 ) ,具有序列选择的特异性。　结论　以端粒酶RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸抑制肾癌RCZ细胞的端粒酶活性和体外增殖 ,可能对肿瘤治疗有潜在的意义。     

膀胱癌组织中端粒酶活性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）为基础的端粒酶活性检测方法（ＴＲＡＰ法），对５例正常膀胱组织、４例膀胱炎症组织、４２例膀胱癌组织和癌旁正常组织进行检测。正常膀胱组织和膀胱炎症组织无端粒酶活性，膀胱癌组织端粒酶表达阳性率７６．２％，癌旁组织阳性率为２６．２％，端粒酶活化与膀胱癌分期分级呈正相关。结果提示：端粒酶活化与膀胱癌浸润发展密切相关，癌旁组织端粒酶活化提示肿瘤微浸润可能。     

人类染色体端粒酶基因在食管癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨人类染色体端粒酶(hTERC)基因在食管癌及各相关组织中的表达及其l临床意义.方法 选取食管正常组织45例、Ⅰ度不典型增生组织27例、Ⅱ/Ⅲ不典型增生组织22例、癌组织55例,应用荧光原位杂交(FISH)技术检测各组织中hTERC基因的表达.结果 hTERC基因在食管正常组织、Ⅰ度不典型增生组织、Ⅱ/Ⅲ度不典型增生组织及食管癌组织中表达率分别为0%、25.9%、54.5%及90.9%,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);癌前病变及癌基因平均拷贝数分别为2.19±0.11、2.35±0.30及2.64±0.27,显示出扩增趋势.食管癌组织中hTERC基因表达在组织分化程度、浸润深度、大体类型、淋巴结转移差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 hTERC基因与食管癌的发生发展有关.

Abstract：

Objective To evaluate the dual-color interphase fluorescence in situ hybridization (FISH) of human telomerase gene (hTERC) in the esophageal cancer and preneoplastic lesions. Methods The fluorescence signals of hTERC in the esophageal cancer and preneoplastic lesions were detected by using interphase FISH. According to histology, biopsy and pathology certification, the samples include 45 cases of esophageal normal tissue, 27 cases of atypical hyperplasia Ⅰ , 22 cases of atypical hyperplasia Ⅱ / Ⅲ and 55 cases of squamous cell carcinomas (SCC) of the esophagus. Results None normal samples revealed copy number increases of 3q, while 25.9% of atypical hyperplasia Ⅰ , 54. 5% of atypical hyperplasia Ⅱ/Ⅲ, 90. 9% of the squamous esophageal cancer showed extra copies of 3q. The comparison between groups showed statistically significant difference ( P ＜ 0. 05 ). The mean copy number was 2. 19 ±0. 11,2. 35 ± 0. 30, 2. 64 ± 0. 27 respectively. The positive amplification of the hTERC gene was not correlated with histological stages, lymph nodes metastasis and the grades of carcinoma differentiation in SCC (P ＞ 0. 05 ). Conclusion The presence of hTERC gene may play an important role in the development of SCC.     

前列腺组织端粒酶活性检测对前列腺癌的诊断价值

目的 通过检测前列腺穿刺组织端粒酶活性,探讨其在前列腺癌诊断和预后中的临床价值。方法 ２０例前列腺癌标本和１６例癌旁组织均来自前列腺穿刺活检,１４例良隆前列腺增生（ＢＰＨ）标本取自前列腺摘除手术,均经病理证实。采用改良的ＴＲＡＰ－银染方法检测端粒酶活性,并进行半定量分析。结果 ２０例前列腺癌标本中１８例测得端粒酶活性。１６例前列腺癌旁组织中,７例前列腺上皮内瘤（ＰＩＮ）,２例癌旁ＢＰＨ组织有端粒酶     

卵泡发育与端粒酶表达及调控

端粒酶是一种核糖核蛋白,具有合成端粒的功能。细胞的年龄和寿命与端粒酶的活性和端粒的长度密切相关。卵巢是一个以周期性的细胞增殖分化和凋亡为特征的器官,在正常的卵巢中端粒酶的表达随卵泡发育的不同阶段而变化。故卵巢端粒酶的活性是衡量卵泡功能的重要指标。端粒酶活性受雌激素和孕激素调控,并且均通过有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)路径介导。