一氧化氮在吗啡后处理对心肌缺血再灌注损伤保护中的作用

【目的】 探讨吗啡后处理对急性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用以及对信号通路eNOS/NO的影响?【方法】 SD大鼠56只随机分成4组,每组14只: S组(假手术,只穿线,不结扎), I/R组(单纯缺血再灌注), M组(吗啡后处理 + 缺血再灌注),L + M组(L-NAME + 吗啡后处理 + 缺血再灌注)?除S组外,所有大鼠心脏都经历45 min缺血和120 min再灌注?观察血流动力学指标,于再灌注120 min时,各组随机取9只大鼠,用TTC法染色,计算心肌缺血梗死区(IA/AR);其余5只大鼠,取心肌,用Western Blot技术分析总eNOS和磷酸化eNOS的蛋白表达,硝酸盐还原酶法测定心肌NO含量?运用SPSS 12.0统计软件,统计学分析采用方差分析及SNK检验?【结果】 与I/R组比较,M组梗死面积明显缩小,(32 ± 2.8) % vs (49 ± 2.9) % (P < 0.01);磷酸化eNOS的蛋白表达明显增加;心肌组织内NO含量也明显增加?非选择性一氧化氮合成酶抑制剂,l-NAME完全消除吗啡后处理对心肌的保护作用,明显降低吗啡后处理所诱导的心肌组织内NO含量的增加,但并没有抑制吗啡后处理所诱导的磷酸化eNOS蛋白表达的增加? 【结论】 大鼠在体心脏缺血模型,吗啡后处理可通过eNOS/NO信号通路,抗心肌缺血/再灌注损伤     

坎地沙坦对兔心肌缺血再灌注微血管功能障碍的影响

目的 探讨坎地沙坦预处理对兔心肌缺血/再灌注(I/R)微血管功能障碍的影响.方法 40只健康雄性新西兰大白兔随机分为假手术组、心肌I/R模型组、坎地沙坦低剂量组(0.5 mg/kg)、中剂量组(2.5mg/kg)、高剂量组(5.0mg/kg),每组8只.造模前各组灌胃给药2周.假手术组左前降支近端穿线但不结扎,其余4组予60min缺血,360min再灌注.取缺血梗死区心肌组织,HE染色后计算微血管腔内中性粒细胞数及心肌灶性出血发生率;采用硝酸还原酶法检测心肌组织一氧化氮(NO)水平,免疫组化法测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达;透射电镜观察毛细血管超微结构.结果 与模型组比较,坎地沙坦低剂量组、中剂量组、高剂量组微血管腔内中性粒细胞数、心肌灶性出血发生率均明显减少(P<0.01),心肌组织NO含量、eNOS表达均明显增加(P<0.01),并呈剂量依赖性;电镜示坎地沙坦低剂量组、中剂量组、高剂量组毛细血管内皮细胞肿胀均较模型组减轻.结论 坎地沙坦可上调eNOS的表达,升高NO水平,缓解血管内皮细胞肿胀,保护微血管的完整性,抑制中性粒细胞黏附聚集,缓解微血管堵塞,从而改善兔心肌I/R微血管功能障碍,且该作用具有一定的剂量依赖性.     

奥扎格雷钠对实验性心肌缺血大鼠心肌组织NO及eNOS的影响

目的:观察奥扎格雷钠对实验性心肌缺血大鼠心肌组织NO及eNOS的影响。方法:将心电图正常的健康大鼠随机分成空白对照组(0.15mL生理盐水)、模型对照组(0.15mL生理盐水)、低剂量组(8g/kg奥扎格雷钠)、中剂量组(12g/kg奥扎格雷钠)、高剂量组(16g/kg奥扎格雷钠)和阳性对照组(81.0mg/kg复方丹参滴丸),连续灌胃给药7d,从第3d起除空白对照组外,其余各组均于给药后1h皮下注射异丙肾上腺素5mg/kg.d,连续5d,时间间隔为24h,正常对照组给予等量生理盐水皮下注射,末次注射异丙肾上腺素2h后取心肌组织测定NO、eNOS的活性。结果:与空白对照组相比,模型对照组大鼠的eNOS活力、总NOS活力明显提高,NO浓度明显降低(P<0.05);与模型对照组相比,低剂量组大鼠eNOS活力、总NOS活力降低,NO浓度提高(P>0.05),差异不显著,无统计学意义,而中剂量组及高剂量组、阳性对照组大鼠血清eNOS活力、总NOS活力明显减轻,NO浓度明显提高(P<0.05);中剂量组及高剂量组与阳性对照组比较,eNOS活力、总NOS活力降低程度,NO浓度提高程度相当。结论:奥扎格雷钠能有效地升高心肌组织NO浓度,抑制eNOS及总NOS活力系数,清除自由基,减轻心肌损伤。     

心肌eNOS表达和NO的改变对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤的影响

【目的】测定不同周期链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠心肌eNOS表达、NO变化及其对缺血/再灌注（I/R）损伤的影响。【方法】阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌I/R模型,用TTC染色,测定大鼠心肌I/R后梗死面积;免疫印迹分析测定心肌eNOS表达;形态测定（Morphometric）法测定硝基酪氨酸（Nitrotyrosine,NT）的水平;用硝酸还原酶法测定NO含量。【结果】在STZ处理后2周,糖尿病组（2WD）心肌梗死面积比相应周期对照组（2WC）明显缩小,STZ处理后16周（16WD）,梗死面积比相应对照组（16WC）增加;内皮一氧化氮合酶（eNOS）在心肌的表达在2WD比2WC组增加34%,然而在16WD比16WC明显减少;超氧亚硝酸根离子（Peroxynitrite,ONOO-）生成的标志性产物硝基酪氨酸（nitrotyrosine,NT）在2WD组中较2WC组低约49%,但在16WD组中较16WC组显著增加;血一氧化氮（Nitric oxide,NO）水平2WD组中较2WC组增高,但是16WD组较16WC组显著减少。【结论】STZ诱导糖尿病早期、晚期对心肌I/R损伤呈现相反的作用。这可能是由于早、晚期糖尿病相反的心肌eNOS表达及NO改变而引起的。     

心肌eNOS表达和NO的改变对糖尿病大鼠缺血 再灌注损伤的影响

 【目的】 测定不同周期链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠心肌eNOS表达?NO变化及其对缺血/再灌注(I/R)损伤的影响? 【方法】 阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌 I/R 模型,用TTC 染色,测定大鼠心肌 I/R 后梗死面积;免疫印迹分析测定心肌eNOS表达;形态测定(Morphometric)法测定硝基酪氨酸(Nitrotyrosine,NT)的水平;用硝酸还原酶法测定NO含量?【结果】 在 STZ 处理后2周,糖尿病组(2WD)心肌梗死面积比相应周期对照组(2WC)明显缩小,STZ 处理后16周(16WD),梗死面积比相应对照组(16WC)增加;内皮一氧化氮合酶(eNOS)在心肌的表达在 2WD 比 2WC 组增加34%, 然而在 16WD 比 16WC 明显减少;超氧亚硝酸根离子(Peroxynitrite,ONOO-)生成的标志性产物硝基酪氨酸 (nitrotyrosine ,NT) 在 2WD 组中较 2WC 组低约49%,但在 16WD 组中较 16WC 组显著增加;血一氧化氮(Nitric oxide,NO)水平 2WD 组中较 2WC 组增高, 但是16WD 组较 16WC 组显著减少?【结论】 STZ 诱导糖尿病早期?晚期对心肌 I/R 损伤呈现相反的作用?这可能是由于早?晚期糖尿病相反的心肌 eNOS 表达及 NO 改变而引起的?     

健心平律丸抗心律失常的机理研究

【目的】探讨健心平律丸抗心律失常的机理。【方法】SD大鼠90只,随机分成3组,即模型对照组,健心平律丸高、低剂量组;后两组分别按1．6、0．8g／kg剂量灌胃给药,模型组给予等容积生理盐水,连续7d后,3组动物均复制阻断左冠状动脉致大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,采用心电图Ⅱ导联记录、连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)免疫组化染色方法,观察健心平律丸对心肌缺血再灌注大鼠的心律失常发生率、病死率和心肌组织Cx43表达的影响。【结果】健心平律丸可减少缺血再灌注大鼠心律失常的发生率及病死率,增强心肌组织Cx43的表达。【结论】健心平律丸直接拮抗心肌损伤令Cx43表达增强的作用,可能是其抗心律失常的机理之一。     

急性心肌缺血/再灌注HSP70和Fos蛋白的表达 及其法医病理学意义

【目的】研究大鼠急性心肌缺血后不同时间再灌注心脏不同区域HSP70和Fos蛋白表达的规律,为心肌缺血/再灌注损伤所致心性猝死的法医学诊断提供形态学依据。【方法】结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血/再灌注模型。用免疫组织化学方法,观察心肌缺血后不同时间再灌注HSP70和Fos蛋白在心肌组织表达的改变。【结果】对照组心肌组织无Fos和HSP70表达。心肌缺血15min再灌注0.5h后Fos蛋白即在缺血区域表达,随着再灌注时间延长表达增强;非缺血区域1h始有表达,缺血区域表达明显强于非缺血区域。心肌缺血区域再灌注1h后HSP70始有表达,随着再灌注时间延长表达增强;非缺血区域心肌2h始有表达,且明显弱于缺血区域。再灌注早期HSP70和Fos首先在心肌内层表达,随着时间延长表达向心肌外层扩展。【结论】心肌缺血/再灌注早期不同时间HSP70和Fos蛋白表达有不同的区域性及强度,有可能为早期心肌缺血/再灌注提供一项新的辅助诊断的形态学指标。     

Urantide对实验性心肌缺血及缺氧再给氧损伤的影响

目的探讨urantide对心肌细胞急性缺血及缺氧再给氧损伤的保护作用。方法采用皮下注射(sc)异丙肾上腺素(Iso)诱导小鼠急性心肌缺血,测定小鼠心肌组织及血清中肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量,计算心肌含水量(MWC)及心肌指数(MI)。建立乳鼠原代心肌细胞缺氧再复氧模型,观察细胞存活情况并检测urantide对细胞培养上清液中CK活性和MDA含量的影响。结果10、30μg/kgurantide可显著降低小鼠心肌组织及血清中CK活性,明显升高NO含量;3～30μg/kgurantide可呈浓度依赖性降低小鼠血清及心肌组织中MDA含量,升高SOD活性。同时,urantide10、30μg/kg剂量组可显著降低小鼠的MWC,显著抑制其MI的升高。在乳鼠原代心肌细胞缺氧再复氧模型中,10-6和10-7mol/L的urantide能明显增加细胞存活率,urantide在10-6～10-10mol/L浓度范围内能呈剂量依赖性抑制细胞培养上清液中CK活性和MDA含量的增高。结论实验表明urantide对心肌缺血损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与改善低灌流、清除氧自由基及抗脂质过氧化有关。     

复方黄芪胶囊长期毒性试验研究

【目的】观察复方黄芪胶囊长期毒性反应,为临床用药提供科学依据,保证用药安全。【方法】以高剂量组5g/kg ,中剂量组3g/kg ,低剂量组1g/kg给大鼠连续灌服12w、停药2w ,分别测量大鼠体重,测定血液学和血液生化学指标,并作组织病理学检查。【结果】复方黄芪胶囊各剂量组动物的观测指标与空白对照组比较,均无显著性差异。病理检查各脏器组织均未见药物中毒性病理形态学改变。停药后也未见药物延迟性毒性反应。【结论】复方黄芪胶囊长期用药对大鼠无明显毒性,推论临床拟用剂量是安全的。     

小红参对心肌缺血/再灌注损伤NO、氧化应激及线粒体能量代谢的影响*

目的研究小红参对心肌缺血/再灌注损伤中NO、氧化应激及线粒体能量代谢的影响。方法 选取Wistar雄性大鼠48只随机分为假手术组、模型组、复方丹参片组（300 mg/kg）、小红参低、中、高剂量组（56.7、170、280 mg/kg）。各组预防性给药14 d，除假手术组外，其余各组均通过结扎心脏冠状动脉左前降支30 min，再灌注2 h的方法，复制心肌缺血/再灌注损伤模型。分别使用试剂盒检测血清中NO含量、eNOS活性和心肌组织中ROS、CAT、T-AOC、ATP的含量及心肌细胞线粒体ATP酶和膜电位的变化。结果 与假手术组比较，模型组中NO、CAT、T-AOC的含量和eNOS的活性，线粒体能量代谢ATP酶及心肌细胞的线粒体膜电位均下降，心肌组织中ROS水平升高（P<0.05）。与模型组比较，小红参低剂量组对Na+-K+-ATP酶和心肌细胞线粒体膜电位变化差异无统计学意义，而复方丹参片组和其它小红参剂量组均能提高NO、CAT、T-AOC的含量和eNOS的活性及线粒体能量代谢ATP酶和心肌细胞线粒体的膜电位，同时降低心肌组织中ROS水平（P<0.05）。结论 小红参对心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与升高血清中NO水平、抗氧化及改善线粒体能量代谢有关。     

马来丝虫和牛指状腹腔丝虫抗原化学及免疫学特性的分析

应用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶联免疫印迹技术，分析了马来丝虫成虫抗原、微丝蚴抗原及牛指状腹腔丝虫成虫原化学及免疫学特性。结果表明三者分别有６条、４条和２条丝虫抗原特异性组分，这些丝虫特异性组分与肠道线虫病人血及健康人血清均无交叉和假阳性反应，而ＳＡ－Ａｇ价廉易得，用于丝虫病免疫依断和人群血清学监测可望获得较 好效果。     

Modulatory effect of catecholamines and corticosterone on proliferative activity of thymic and splenic lymphocytes

<正> Epinephrine (E) in concentrations of 10-1000 nmol/L,norepinephrine (NE) in concentrations of 100-300 nmol/L and corticosterone (CS) in concentrations of 1 - 50 pmol/L potentiated the reactivity of thymic and splenic lymphocytes to Con A as well as the spontaneous proliferation of thymocytes in normal mice. It is first reported in the present paper that catecholamines (CA's) and CS showed a synergistic effect in potentiating the reactivity of thymic and splenic lymphocytes to Con A when they were added to culture in concentrations ineffective each of its own. The implications of these results were discussed.     

人血浆载脂蛋白E的分离纯化及其抗血清制备

用短时间超速离心结合制备性 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化人血浆 apoE.以此纯品免疫家兔制备了单价兔抗人 apoE 抗血清,与常规方法相比,本法具有操作简单、费用低和提纯周期短等优点,是一种简单实用的方法。     

利福平乙基纤维素微球的制备及质量评价

分析下丘脑背内侧核（ｎｕｃｌｅｕｓ ｄｏｒｓｏｍｅｄｉａｌｉｓ ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉ, ＮＤＭ）升压反应的机制。 方法：大鼠脑内或静脉注射不同药物,记录血压和心率的变化。结果：（１）谷氨酸（ｇｌｕｔａｍａｔｅ,Ｇｉｎ）注入ＮＤＭ,Ｐ物质注入室旁核（ｎｕｃｌｅｕｓ 　ｐａｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｉｓ,ＮＰＶ）或延髓头端腹外侧区（ｒｏｓｔｒａｌ　ｖｅｎｔｒｏｌａｔｅｒａｌ　ｍｅｄｕｌｌａ,ＲＶＬ）均引起升压反应;（２）ＮＤＭ升压反应可被双侧ＮＰＶ或ＲＶＬ内注入Ｐ物质拮抗剂衰减,但ＲＶＬ内注入阿托品无此效应;（３）静脉注射酚妥拉明也能使ＮＤＭ升压反应减小,而心得安或甲基阿托品静脉注射对该反应无影响。结论：Ｇｌｕ注入 ＮＤＭ可通过ＮＰＶ（Ｐ物质受体）和ＲＶＬ（Ｐ物质受体）－交感缩血管神经系统引起升压反应。     

青少年牙周炎与口腔螺旋体及梭形杆菌感染的关系

由40例80个牙位的青少年牙周炎患者(实验组)的龈下菌斑标本中分离出小齿密螺旋体19株(包括3株口腔螺旋体),大齿密螺旋体4株,疏螺旋体4株,梭形杆菌21株.而40例80个牙位的口腔系学生(对照组)的牙周袋及龈沟标本中,仅分离出螺旋体2株及梭形杆菌3株,两者之间差异有高度显著性.说明青少年牙周炎与螺旋体和梭形杆菌的感染关系非常密切.并对分离出的菌株进行了常用抗菌素的药敏试验.     

可手术胃癌血清HER-2/neu ECD水平与临床特征及疗效的研究

目的：探讨可手术胃癌患者血清HER-2/neu胞外域部分(ECD)水平与临床特征及疗效的关系。方法：收集江苏省连云港市第二人民医院2010年01月至2010年12月,可手术胃癌患者46例进入研究,术前、术后收集血清,同时获取15例正常人、22例胃良性病变患者血清为对照组。另外收集7例血清HER-2/neu ECD阳性患...     

肝癌中血管内皮生长因子及a-平滑肌肌动蛋白的表达与临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子和a-平滑肌肌动蛋白在肝癌中的表达。方法:对29例肝癌、19例癌旁组织进行血管内皮生长因子和a-平滑肌肌动蛋白免疫组化染色,并对血管内皮生长因子和a-平滑肌肌动蛋白染色阳性的非成对动脉进行计数,结合肝癌的临床病理学特征进行分析。结果:血管内皮生长因子在肝癌组织中阳性表达率高于癌旁组织,血管内皮生长因子表达水平与门静脉癌栓形成有关,与肝癌组织学分级和肿瘤包膜形成无关;肝癌组织中非成对动脉计数水平高于癌旁组织,非成对动脉计数与组织学分化分级有关,与肝癌包膜形成和门静脉癌栓形成无关。血管内皮生长因子表达水平与肝癌组织中非成对动脉计数有关。结论:血管内皮生长因子在肝癌的血管生成过程中起重要作用,可以作为肝癌的抗血管生成治疗的靶点。     

蓖麻毒素的提取及其抗肿瘤作用研究

目的:研究蓖麻毒素的提取方法和对肿瘤细胞的杀伤作用.方法:根据Nicolson和Blaustein的方法稍加改良,通过PBS提取、硫酸铵分段盐析、Sephrose 4B亲和层析和Sephadex G100凝胶过滤等步骤,从去壳蓖麻籽中提取天然蓖麻毒素;采用细胞培养,以MTT法分析不同浓度蓖麻毒素对肿瘤细胞的杀伤作用.结果:用亲和层析和凝胶过滤等步骤提纯的蓖麻毒素,分子量为63 kD,由2个亚基组成.细胞毒性分析:蓖麻毒素在高浓度下(5×10-8mol/L～5×10-10mol/L)对正常细胞和结肠癌细胞的杀伤效率无差异(P>0.05),而在低浓度下(5×10-11mol/L～5×10-13mol/L)两者有显著性差异(P<0.01);各种浓度蓖麻毒素对白血病细胞K562和大肠癌细胞SW480的杀伤作用无统计学上的差别(P>0.05).结论:蓖麻毒素在低浓度下对肿瘤细胞的杀伤有选择性,对白血病细胞K562和大肠癌细胞SW480的杀伤作用在各种浓度下无选择性.     

实验性腹膜炎时的肝肺损伤及腑安冲剂的影响

目的观察大肠杆菌性腹膜炎时肝肺的损伤及腑安冲剂对其影响。方法用O111B4大肠杆菌和10%BaSO4佐剂腹腔注射诱发急性腹膜炎模型。将SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。采用鲎试剂法测定内毒素,放免法测定肿瘤坏死因子(TNF),赖氏法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT),荧光法测定谷胱甘肽(GSH),改良八木国夫法测定丙二醛(MDA)。并对肝和肺组织做镜下检查。结果与对照组相比,模型组大鼠外周血及门脉血内毒素、外周血TNF含量,以及肝、肺和外周血MDA的含量明显增高(P<0.01),而GSH含量明显下降(P<0.01)。治疗组大鼠外周血及门脉血内毒素、外周血TNF含量,以及外周血和肝、肺的MDA含量明显低于模型组(P<0.01),而GSH含量明显高于模型组(P<0.01),接近于对照组。结论大肠杆菌性腹膜炎时大鼠肝肺受到严重损伤。腑安冲剂对实验性大肠杆菌性腹膜炎有明显的治疗作用。     

脑挫裂伤并四肢骨折脱位的中西医结合治疗

本文总结了脑挫裂伤合并四肢骨折脱位的中西医结合治疗４８例，方法是以西医常规治疗处理脑挫裂伤的同时，及早用中医手法复位外固定治疗四肢骨折脱位，并配合中药治疗，结果疗效良好。认为：（１）中西医结合有利于脑挫裂伤和骨折脱位治疗同时并举，互为补充，可以缩短病程，提高疗效。（２）脑挫裂伤与四肢骨折脱位两者治疗用药有一定的共通性，这有益于中西医结合和疗效提高。（３）在特别情况下，对于脑挫裂伤和骨折脱位应按急缓重轻先后处理。