不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA的检验结果对比研究

目的:讨论研究Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex16扩增试剂盒用于检验血样DNA检验结果的差异,并研究其扩张不平衡和基因丢失现象的发生几率。方法:选取150例完全无血缘关系的个体作为研究对象并采集其血样,分别使用两种扩增试剂盒进行检验。对所得不同结果的同一对象再使用3种扩增试剂盒进行检验。将检验所得结果进行比较。结果:3种试剂盒检测的等位基因缺失率比较差异无统计学意义(P0.05)。Profiler PlusTM检测扩张不平衡率显著高于其余两种试剂盒(P0.05)。结论:使用PCR扩增试剂盒对血样DNA进行检测时,会出现不同位置的异常基因,可表现为基因缺失及扩增不平衡。但Profiler PlusTM检验扩增不平衡发生率显著高于其余两种试剂盒。在实际生活对血样DNA进行检测时,除需准备主要检测扩增试剂盒外,还需准备其他不同类备用试剂盒用于互相验证及对比,尽量降低基因等位缺失及扩张不平衡发生率。     

法医DNA试剂盒在人员血样检验中应用

目的 验证法医DNA试剂盒在人员血样检验中的分型效果.方法 提取DNA扩增或直接扩增,AB公司3500XL或3130测序仪电泳检测,GeneMapperID-X软件进行等位基因分型.结果 7种商业化的法医DNA试剂盒在人员血样DNA检验中均获得满意的STR分型.结论 使用文中介绍DNA试剂盒,可以满足法医DNA人员血样检验需求.     

博尔纳病病毒荧光定量PCR试剂盒扩增缓冲液的优化

目的 选择并优化博尔纳病病毒荧光定量PCR TaqMan探针法反应体系中的扩增缓冲液,使PCR反应体系对该病毒p24模板基因的扩增效率得到明显提高.方法 通过常规PCR比较选择3种常用酸(盐酸、磷酸和硫酸)所滴定的缓冲液体系,在其基础上选择适合浓度的硫酸铵配制TSS buffer,在TSS buffer中分别加入四甲基...     

几种酶免法试剂盒检测艾滋病抗体结果比较

酶免法是一种灵敏度较高的初筛检验方法，但试剂质量关系到检测结果的准确性和可靠性。本文用几种艾滋病抗体酶免法试剂盒检测，并进行了比较，以便选择一种较好的艾滋病抗体酶免法试剂盒。     

原发性非小细胞肺癌DNA标本中EBV基因的PCR扩增

目的 探讨非小细胞肺腺癌与肺鳞癌DNA标本中EB病毒(Epstein-Barr vins，EBV)的存在情况，以及EBV与非小细胞肺癌的关系。方法 以非小细胞肺腺癌和肺鳞癌DNA标本为模板，EBV持续感染细胞系B95—8细胞DNA为阳性对照，用PCR方法扩增EBV的BamHI-W部分片段。结果 在53例非小细胞肺癌标本中有36例扩增出EBV基因的特异性产物，PCR扩增产物为129bp，与目的片段一致。其中肺腺癌中EBV基因的阳性检出率为94．1％(16／17)，肺鳞癌中的阳性检出率为55．6％(20／36)。结论 非小细胞肺癌DNA标本中有EBV基因的存在，其阳性检出率与非小细胞肺癌的病理类型有关。     

一种简便快速回收DNA的试剂盒研制

多年来已提出过许多从凝胶中回收DNA的方法[1],但没有一种方法能够完全满足进一步实验的要求.目前国内多使用进口DNA回收试剂盒,但价格昂贵.我们通过对进口DNA回收试剂盒的分析研究,采用国产玻璃毛为DNA载体,依据化学键与分子结构理论及分子运动规律,结合DNA分子的特性,研制出一种简便、快速、高质量、低成本的DNA回收试剂盒,所回收的DNA量大、纯度高,可以用于分子生物学等的各种实验.     

3种HBV DNA荧光定量PCR试剂检测结果比较

目的 比较及评价3种HBV-DNA荧光定量PCR试剂检测结果的差异.方法 同时用3种HBV-DNA荧光定量PCR试剂对已知结果的质控血清、标准品及本院79份HBsAg阳性的临床标本进行检测,并对检测结果进行比较分析.结果 试剂A、B、C检测阳性率分别为41.77%(33例)、45.57%(36例)和41.77%(33例).3种方法结果一致者66例,总符合率83.54%.试剂A、B与试剂C检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05),试剂A与B检测结果相比差异无统计学意义(P>0.05).试剂A与C的灵敏度、特异性均为77.78%、88.37%;试剂B灵敏度为89.66%、特异性80.00%.结论 试剂A与B总体性能优于试剂C,适于临床检测与筛查.实验室必须选择质量好且符合自己实验室要求、与本实验室仪器相匹配的试剂以保证检验质量.     

DNA快速提取联合家兔α胶原Ⅷ型基因PCR扩增综合性实验的探讨

以微量标本的chelex-100DNA提取方法，联合PCR扩增技术设计开发成一个综合性实验为例，阐述了该实验方案，分析其取得的实验效果，进而对生物化学综合性实验教学进行初步探讨。     

血液标本质量和检验结果的相关性分析

目的 探讨血液标本质量与检验结果相关性.方法选取489份血液标本为研究对象,分析标本采血时间、采血部位、送检时间、容量对标本质量的影响.结果 12份(2.45％)血液标本因采血部位导致结果出现误差,异侧和同侧钠、钾、尿酸、尿素氮值差异均有统计学意义(均P＜0.05);17份(3.48％)标本因送检时间导致结果误差,不同送检时间钾、葡萄糖、CK、LDH、AST差异均有统计学意义(均P＜0.05);9份(1.84％)血液标本因溶血导致钠、钾、尿酸差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).多因素分析显示,采血部位、送检时间和溶血标本与检验结果有关.结论 正确部位采集血液,控制采血时间、送血时间和溶血标本容量,可有效提高血液标本质量,减少检验误差,提高检验结果准确性.     

临床研究3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的比较

目的 比较3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV) DNA的灵敏度和特异度,初步探讨其用于HBV DNA检测的临床价值.方法 用3种免核酸提取PCR试剂盒分别检测30例慢性乙型肝炎患者及30例阴性参比血清标本中的HBV DNA,以荧光定量PCR结果为标准,比较3种试剂检测灵敏度和特异度.结果 3种试剂盒的HBV DNA阳性检出率分别为93.3%(28/30)、96.7%(29/30)、100%(30/30);3种试剂检测HBV阴性的特异度均为100%;3种试剂检测灵敏度A公司为103 IU/mL,B、C公司均为102 IU/mL.结论 使用免核酸提取PCR试剂检测HBV快速、简便、高效,可用于临床HBV DNA快速检测.     

3种保存血样方法对猪总DNA制备的影响

探索不同保存血样方法对猪全血中总ＤＮＡ制备的影响。方法采取全血４℃保存,沉淀白细胞加消化液室温保存和全血加ＳＤＳ－ＥＤＴＡＮａ２缓冲液室保存等３种方法保存血样,用常规方法制备总ＤＮＡ并对其效果进行评价。     

从石蜡包埋和甲醛浸泡组织中提取DNA进行PCR扩增

对石蜡色埋组织用二甲苯或水浴法脱石蜡,乙醇进行梯度水化,溶液A裂解细胞,对经抽提、纯化后的DNA进行PCR扩增,获得了较满意的效果。同时对石蜡包埋组织与甲醛浸泡组织中的DNA受损程度进行了比较,此工作为能使肿瘤等症病将在基因水平上进行回顾性分析提供了一个良好开端.     

改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增检测陈旧性人骨DNA

目的：探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法：用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和GodeneyeTM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic Analyzer软件对基因位点进行检测和分析。结果：改良酚-氯仿法提取及3种试剂盒对陈旧性人骨DNA基因位点检出469、262、588个,高于传统法的307、175、436个。结论：改良酚-氯仿法、3种试剂盒PCR复合扩增能对陈旧性人骨DNA进行有效提取和检测。     

不同检验方法对慢性肝病的检验结果比较

目的：探讨不同检验方法对慢性肝病检验结果的影响。方法：将我院收治的 HBeAg、HBeAb均检查为阳性的肝病患者100例,对其临床检验结果进行分析。结果：采用乙型肝炎病毒e抗原一酶联免疫吸附法、血清透明质酸（ HA）测定法、PCR检测法的检出率分别为80％、48％和98％,聚合酶链式反应法（ PCR）检测的灵敏度明显高于ELISA法与血清HA检测方法,差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论：聚合酶链式反应法（PCR）检测HBV-DNA其结果更精准,值得推广应用。     

试论血样检验分析中质量控制应该注意的几个因素

目前,随着公众健康意识的增高及对医疗服务质量要求的增强,加之临床检验科检验技术、项目的拓宽,对检验结果的可靠性和准确性要求更为严格。血样标本采集及检验为较为重要的环节,对标本的合格性有更高的要求,对质量控制中可能出现的问题进行分析,并采取针对性的措施预防,是降低不良事件发生率,确保血样检验的准确性的关键,临床血样检验中,检验前的质量控制是整体质量控制需重视的首要环节,对血样采集前、采集中、送检过程中需注意的要点进行分析,并针对性实施预后措施,可为检验结果的质量提供保障,以为临床提供可靠的、准确的、及时的检测结果。对大限度的提高疾病治愈率,改善患者的生存质量。     

5种提取恶性疟原虫DNA方法用于PCR的结果评价

目的 比较5种DNA模板制备方法的优缺点。方法 采用5种方法所制备的DNA进行PCR扩增，经统计学处理比较制备的成功率，与6对不同引物PCR反应的敏感性，方便性，快速和费用等因素进行综合。结果 用于PCR，方法1－3的成功率显高于法4和5（P＜0．001）；法3制备的DNA敏感性最高，适用性最强。结论 5种方法各有其优缺点，应根据实验目的的选用。     

实验模型下两种全基因组扩增技术对指纹DNA检验的效能

目的对简并寡核苷酸引物PCR（Begenerate oligonucleotide-primed PCR,DOP-PCR）和扩增前引物延伸PCR（Primer extension pre-amplification PCR,PEP-PCR）用于指纹检材DNA检验的价值进行研究。方法建立2种指纹检材DNA模型,分别用普通PCR、DOP技术和PEP技术三种方法对指纹DNA样本进行STR分型,对三种方法的效能进行比较评价。结果实验模型1条件下,三种方法均不能获得满意分型结果;模型2条件下,DOP和PEP两种方法可以增加STR分型的成功率和信息量。结论 DOP和PEP技术必须结合高效的DNA提取技术才能最大程度发挥其检验效能。     

基于PCR指纹技术鹿鞭鉴定方法的建立及检测试剂盒的研制

目的 建立鹿鞭及其伪品指纹鉴定方法,开发鹿鞭DNA检测试剂盒.方法 采用改良的SDS方法从鹿鞭及牛鞭基因组中提取DNA.以鹿鞭线粒体细胞色素b作为靶基因,设计鹿鞭特异性引物,利用现代DNA指纹技术,研制了鹿鞭DNA提取和检测试剂,建立鹿鞭指纹鉴定方法,开发出鹿鞭DNA检测试剂盒.结果利用PCR指纹技术提取的鹿鞭基因组DNA为21000 bp,纯度为1.80±0.10之间;应用特异性引物可准确鉴别鹿鞭及牛鞭样品,鹿鞭特异性扩增产物DNA分子片段为307 bp,而牛鞭及阴性对照无扩增条带;自主研发鹿鞭DNA检测试剂盒经反复冻融依然有效,多次进行特异性、稳定性和重现性试验,结果完全一致.结论 鹿鞭DNA检测试剂盒可作为鹿鞭鉴定的有效方法,该方法客观、准确、方便,可有效区分鹿鞭及其伪品.     

三种全血基因组DNA提取方法的比较

目的：比较三种不同的DNA提取方法提取人全血基因组DNA对DNA提取效率、纯度以及PCR扩增的效果影响。方法：分别应用中山医科大学达安公司：DNA提取液，珠海黑马医学仪器有限公司DNA提取液，胍盐酸法三种不同的方法提取人全血基因组DNA。结果：三种方法提取的DNA纯度平均分别为：1．48，1．51，1．56，各组间差异无显著性。200μL全血中所提取DNA总量平均分别为1．6μg，2．3μg，4．1μg。用0．8％琼脂糖凝胶电泳鉴定胍盐酸法制备的DNA效果较其它两种方法好，PCR扩增效果差异不明显。结论：胍盐酸法提取的DNA总量明显高于其它两种方法，提取效率高，为三种全血基因组DNA提取方法中之首诜。     

常用实验室检验结果的判读

随着医学检验日新月异的发展,实验室检验项目不断增多。现代医学的诊断、治疗、预防及科研越来越重视和依赖各种辅助检查,实验室检测就是应用最广泛的一类。卫生部颁布的《医疗机构临床检验项目目录》中的检验项目就有1100多项,美国的实验室检验项目可达4 000项。这些项目随仪器、试剂、方法的发展进步而不断变化,使许多临床医生,尤其是基层医疗单位的医生感到不适应,甚至因误解而误诊。