仅黏菌素敏感的多重耐药铜绿假单胞菌分子流行病学研究

目的 从基因水平了解多重耐药铜绿假单胞菌中仅黏菌素敏感铜绿假单胞菌(COS-PA)的流行情况.方法 ①收集本院灼伤科2001年3月至2003年12月临床分离的铜绿假单胞菌52株,其中COS-PA 32株.②收集外科重症监护病房(SICU)2003年1月至2003年12月临床分离的铜绿假单胞菌57株,其中COS-PA 22株;收集SICU水池下水口非仅黏菌素敏感铜绿假单胞菌(non-COS-PA)1株.③采用多种引物随机扩增DNA多态性(RAPD)技术和统计学方法分析其流行情况.结果 ①灼伤科2001～2003这3年的COS-PA,经RAPD(引物ERIC2、325、272)分型均为同一型别(Burn-A型).②SICU 2003年收集的COS-PA,经RAPD(引物325)分型为同一型别(SICU-A型);在SICU收集的non-COS-PA也多数呈同一型别(SICU-B型),自SICU水池下水口收集到的1株non-COS-PA也属于此型.③灼伤科及SICU经RAPD(引物325)联合分析证实,两个科室的COS-PA为不同型别,无同源性.结论 灼伤科和SICU都存在科室内COS-PA流行,SICU还存在non-COS-PA流行.应严格消毒隔离措施,加强对铜绿假单胞菌在潮湿环境及患者中流行情况的严密监测.多种引物RAPD分析是判断铜绿假单胞菌流行情况的有利工具.     

铜绿假单胞菌医院感染流行病学分子研究及基因分型

目的 建立随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法检测铜绿假单胞菌(PA),调查铜绿假单胞菌医院感染流行病学的情况,为控制院内感染提供直接可靠的参考依据.方法 对2008～2009年分离的180株铜绿假单胞菌进行统计分析其临床分布;通过抗生素敏感性试验进行抗菌谱分型;再采用PAPD基因分型方法进行分析.结果 标本主要来自ICU、烧伤科、呼吸内科等.从痰液标本中分离的铜绿假单胞菌占58.9％,其次伤口分泌物标本占18.9％、中段尿16.7％,其它类型标本占5.5％.抗菌谱分型分为5型.180株铜绿假单胞菌用RAPD分型共得178株,分型率98.9％(178/180),分为9种类型:Ⅰ～Ⅸ.结论 RAPD分型技术对铜绿假单胞菌临床分离株分型率较高;同一抗菌谱型的基因型可能不同,同一基因型的抗菌谱也可能不同.     

重症监护病房铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA研究

目的建立随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法监测重症监护病房(ICU)铜绿假单胞菌医院感染。方法收集2005年1月~6月从各科ICU内分离出的21株铜绿假单胞菌,提取DNA后进行RAPD分型,同时进行抗生素敏感性试验。结果全部菌株均能产生指纹图谱,分型率100%。21株铜绿假单胞菌共分为14型,其中9株6型分布于脑外科,3株同型分布于神经内科,4株4型分布于呼吸科,5株3型分布于普外科。抗生素敏感性试验表明21株铜绿假单胞菌均为多重耐药菌株,对哌拉西林、头孢菌素类、喹诺酮类及阿米卡星等耐药,仅对亚胺培南/西司他丁、头孢哌酮/舒巴坦等敏感。结论ICU内存在铜绿假单胞菌感染局部流行,RAPD分型技术分型率高、简便快速。     

医院感染的耐亚胺培南铜绿假单胞菌临床流行特点

目的 分析医院感染的耐亚胺培南铜绿假单胞菌的体外药敏情况和其多重耐药菌株的基因多态性,以掌握医院铜绿假单胞茼(PAE)感染和流行情况.方法 调查分析广东省人民医院2007年医院感染的PAE,筛选出耐亚胺培南菌株并分析其临床分布和对常用抗生素的耐药性;同时用ERIC-PCR方法对其多重耐药株进行基因多态性分析.结果 耐亚胺培南PAE为75株.主要来自年老的呼吸系统疾病患者,对常用抗生素耐药率高;其中22株多重耐药株基因分型为10个流行型别.结论 医院感染耐亚胺培南铜绿假单胞菌临床分布广泛,且多重耐药PAE引起的医院感染主要呈散在多克隆流行,是临床PAE感染难以控制的潜在因素.     

某ICU病房内铜绿假单胞菌交叉感染调查分析

目的 调查ICU病房铜绿假单胞菌医院交叉感染发生的危险因素和传播规律。方法 应用生物、血清、耐药谱和质粒谱等分型方法对某ICU病房从患者和周围环境分离到的7株铜绿假单胞菌进行同源性分析。结果 铜绿假单胞菌的四种分型结果显示．质粒谱分型和血清分型的一致性较好，7株菌具有相同的血清型和质粒谱型，说明此次医院内铜绿色假单胞菌感染来源于氧气湿化瓶液体，并通过患者周围物品及陪护人员手接触发生交叉感染的同一克隆菌株。结论 质粒分型和血清分型用于铜绿假单胞菌医院感染流行病学调查追溯传染源，是一种较实用的方法，生物分型和耐药潜分型有不足，但作为实验室的常规方法对早期发现流行株和抗菌药物的合理应用具有重要参考价值。本次调查结果显示，加强医疗器具及周围环境消毒和陪护人员管理是预防医院交叉感染的重要措施。     

铜绿假单胞菌临床感染特征及其产超广谱β-内酰胺酶危险因素分析

目的探讨郑州市2家医院临床分离铜绿假单胞菌的感染特征及其与产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的关系。方法选取2016年1月至2017年8月郑州市2家医院临床标本中分离出的51株非克隆铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法筛选出产ESBLs铜绿假单胞菌,采用肠杆菌基因间重复共有序列(ERIC)-聚合酶链反应(PCR)对51株铜绿假单胞菌株进行同源性分析,采用单因素和Logistic回归分析探讨铜绿假单胞菌产ESBLs的危险因素。结果51株铜绿假单胞菌共检测出产ESBLs菌株22株,产ESBLs菌株阳性率为43. 1%。51株铜绿假单胞菌ERICPCR同源性分析显示I型29株,Ⅱ型17株,Ⅲ型5株。单因素分析显示,内科来源的菌株中产ESBLs阳性菌株所占比例(59. 2%)显著高于ICU来源的菌株(20. 0%)(P <0. 05),ERIC-PCR分型I型菌株产ESBLs阳性率(55. 2%)显著高于Ⅱ型菌株(23. 5%)及Ⅱ、Ⅲ型菌株之和(27. 3%)(P <0. 05)。Logistic多因素分析显示,ERIC-PCR分型I型、内科来源菌株为铜绿假单胞菌产ESBLs的危险因素(P <0. 05)。结论郑州地区铜绿假单胞菌感染以内科多见,性别分布上以男性患者为主,同源性分析以Ⅰ型和Ⅱ型为主,内科来源及ERIC-PCR分型Ⅰ型菌株是郑州地区医院内铜绿假单胞菌产生ESBLs的危险因素。     

产碳青霉烯酶铜绿假单胞菌的耐药基因检测及药敏分析

目的:研究临床分离铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶的主要基因型和药敏分布。方法:收集2020年11月～2022年1月芜湖市中医医院住院患者微生物送检标本,培养分离铜绿假单胞菌,采用最低抑菌浓度(MIC)法检测药敏结果,胶体金及PCR法检测耐药表型及基因。结果:临床分离铜绿假单胞菌共46株,科室分布构成占比以重症医学科为主(32.6%),其次为呼吸内科(21.7%);其中碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌(CRPA)分布以重症医学科构成占比最高(44.4%)。46株铜绿假单胞菌对替卡西林/克拉维酸、左氧氟沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、黏菌素耐药率分别为26.1%、30.4%、2.2%、19.6%、13.0%、19.6%、4.3%。9株CRPA对替卡西林/克拉维酸、左氧氟沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、黏菌素耐药率分别为66.7%、66.7%、11.1%、55.6%、66.7%、100.0%、0%。碳青霉烯酶阳性铜绿假单胞菌基因型主要为新德里金属β内酰胺酶(NDM)型、其次为亚胺培南酶(IMP)型。结论:铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶主要为NDM型,且耐药广泛,临床和院感应加强检测...     

多重耐药铜绿假单胞菌临床分布及耐药性观察

目的探讨多重耐药铜绿假单胞菌临床分布及耐药性情况。方法收集2014年1月~2015年4月长兴县中医院重症监护室248例患者铜绿假单胞菌临床标本,采用培养鉴定和药敏试验进行检测。结果分离铜绿假单胞菌210株,其中,多重耐药菌60株,多重耐药菌检出率为28.6%。60株多重耐药铜绿假单胞菌主要分布在痰液(40株,66.7%),其次为伤口分泌物(11株,18.3%)、尿液(9株,15.0%)。耐药情况分析结果显示,头孢他啶(41.7%)、头孢吡肟(38.3%)、哌拉西林(48.3%)、替卡西林(58.3%)、哌拉西林/他唑巴坦(58.3%)、替卡西林/克拉维酸(58.3%)、氨苄西林/舒巴坦(100.0%),耐药率均较高;氨曲南(33.3%)、亚胺培南(30.0%)、美罗培南(30.0%)、庆大霉素(40.0%)、阿米卡星(26.7%)、环丙沙星(33.3%)、左氧氟沙星(33.3%),耐药率均较低。检出10株泛耐药菌株,检出率为16.7%,通过补充药敏实验,6株(60.0%)对头孢哌酮/舒巴坦耐药,对于多黏菌素B无耐药发生。结论对于多重耐药铜绿假单胞菌可以采用青霉烯类、喹诺酮类联合用药治疗,对于泛耐药菌株可以应用多黏菌素B进行治疗。     

铜绿假单胞菌引起的院内感染分析

目的 分析由铜绿假单胞菌引起的院内感染情况及该菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况.方法 收集自2008年1月至2009年3月共107株铜绿假单胞菌,通过双纸片协同试验初筛和E-试验确证,检测其ESBLs阳性菌株,归纳总结107株铜绿假单胞菌的耐药特点,同时分析ESBLs阳性铜绿假单胞菌的药物敏感情况.结果 107株铜绿假单胞菌中共检出ESBLs阳性菌32株,占29.9%,药敏分析结果显示107株铜绿假单胞菌对阿米卡星、环丙沙星和左氧氟沙星的敏感率较高.结论 怀疑铜绿假单胞菌的感染可使用环丙沙星、阿米卡星和左氧氟沙星作为培养前的经验用药.     

铜绿假单胞菌耐药性分析及主要β-内酰胺酶基因检测

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特征;调查β-内酰胺酶基因在多重耐药铜绿假单胞菌中的流行状况。方法收集广东省两家医院2012-2013年临床分离的铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,同时,设计合成β-内酰胺酶的引物序列进行PCR扩增和测序分析。结果 230株铜绿假单胞菌对11种抗生素的耐药率为亚胺培南32.17%,美罗培南34.78%,头孢他啶24.35%、头孢吡肟35.65%、庆大霉素51.30%、阿米卡星35.65%、环丙沙星32.17%、左旋氧氟沙星37.39%、氨曲南48.70%、哌拉西林35.65%、哌拉西林/三唑巴坦32.17%,多重耐药菌占34.78%(80/230);80株多重耐药铜绿假单胞菌中PER-1引物扩增阳性25株(31.25%),PSE-1阳性24株(30%),TEM-1阳性12株(15%),OXA-10阳性8株(10%),OXA-1阳性2株(2.5%),另各有2株分别扩出VIM-2和IMP-9基因型。结论铜绿假单胞菌的耐药情况严重,多重耐药铜绿假单胞菌中β-内酰胺酶基因型以PER-1、PSE-1、TEM-1和OXA-10为主。     

Prolonged outbreak of nosocomial urinary tract infection with a single strain of Pseudomonas aeruginosa.

Sixty-six hospitalized patients became infected with a single strain of multiply resistant Pseudomonas aeruginosa over a 22-month period. The catheterized urinary tract was the site of the infection in 59 patients (89%). The outbreak was confined to a urology ward until an infected patient from this ward spent 2 weeks in the surgical intensive care unit (SICU). Subsequently patients who acquired the infection in the SICU were discharged to surgical wards throughout the hospital. Urine measuring containers and urometers used in the SICU were the reservoir of the P. aeruginosa; daily sterilization of this equipment terminated the outbreak. Urometers appeared to be the reservoir of the epidemic strain in subsequent outbreaks. Five patients were still infected when they were readmitted 3 to 12 months after the first admission, and therefore represented an additional reservoir of infection.     

医院流行性多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药及同源性分析

目的了解重症监护病房爆发流行的多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药谱特征及其同源性。为临床防治提供依据。方法4株多重耐药鲍曼不动杆菌分离自外科重症监护病房（SICU）的感染惠者，采用E—TEST检测药物的MIC值，肠杆菌科基因组内重复一致序列聚合酶链反应（ERIC—PCR）进行克隆株的DNA分型。结果4株菌除对头孢哌酮／舒巴坦复合制剂的MIC值较低外，对头孢菌素类、氨基糖甙类和氟喹喏酮类等抗菌素均显示出了较高水平的多重耐药性；DNA分型证实为同一克隆株。结论本组鲍曼不动杆菌为多重耐药株，同一克隆株在不同感染个体间的相互传播导致了本次医院内感染的流行。     

多重耐药鲍曼不动杆菌中仅黏菌素敏感菌株的分子流行病学研究

目的从基因水平了解多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-AB）中仅黏菌素敏感鲍曼不动杆菌（COS-AB）的流行情况，为控制其流行暴发提供实验数据。方法收集并分析上海瑞金医院2004年6月至2005年5月136例COS—AB临床感染患者的临床资料，同时收集2004年5月至2004年12月临床分离的鲍曼不动杆菌66株，其中COS-AB33株，非黏菌素敏感鲍曼不动杆菌（non-COS-AB）33株，采用随机引物PCR（RAPD）和脉冲场凝胶电泳（PFGE）等分子流行病学方法和统计学方法分析其流行情况。结果证实2004年6月至2005年5月出现COS-AB的暴发流行，经RAPD（引物ERIC2、272）分型均为一个型别，而PFGE分型为两个型别，其中烧伤科COS-AB为PFGEB型，为单一克隆的科室内流行；而烧伤科以外的其他科室为A型，为科室间流行，且主要集中于外科系统。结论COS-AB交叉感染严重，应严格消毒隔离措施，加强对COS-AB在环境及患者中流行情况的严密监测。用PFGE对鲍曼不动杆菌进行分型更为精确。     

重庆某三甲医院2014-2016年铜绿假单胞菌耐药表型及金属酶、外膜孔蛋白耐药基因型分析

目的 检测亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属酶基因分布和外膜孔蛋白OprD2基因缺失情况,了解铜绿假单胞菌的耐药状况.方法 收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所2014-2016年临床分离的非重复铜绿假单胞菌1 887株,VITEK-MS质谱仪进行菌株鉴定,最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)法测定其对10种常用抗菌药物的敏感性,利用WHONET5.6软件对药敏资料进行统计分析,同时采用亚胺培南-EDTA纸片法筛选金属酶表型阳性的菌株,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)测铜绿假单胞菌金属β-内酰酶(metallo-β-1actamase,MBL)相关基因(IMP、VIM、SPM、GIM、SIM、NDM)和外膜孔蛋白OprD2基因的情况.结果 3年中铜绿假单胞菌每年的分离数量分别为756株(9.4％)、579株(9.5％)和552株(10.7％),主要来自ICU病房和呼吸内科病房,标本类型以痰液为主;2014-2016年分离出的铜绿假单胞菌对妥布霉素、庆大霉素的耐药率逐年下降,其耐药率分别从2014年的11.3％、13.2％下降至2016年的7.8％、9.0％,对左旋氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率呈上升趋势,其耐药率从2014年的10.7％、9.2％上升至2016年的23.5％、11.6％.从基因型分布情况来看,269株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中MBL基因阳性51株(18.9％),外膜孔蛋白OprD2缺失158株(58.7％);51株产酶菌株中VIM型阳性29株,SPM型阳性22株,未检测出其他基因型.结论 铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率较高;产MBL和外膜孔蛋白OprD2基因缺失是引起铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因.     

Random Amplification of Polymorphic DNA Based Typing of Pseudomonas Aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa was isolated from various sources during the course of an epidemic outbreak of bacterial endophthalmitis following an eye camp at Sangli, Maharashtra. 15 distinct isolates were obtained from clinical samples. Typing of the 15 isolates was performed by random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis, pyocin typing and antibiogram. RAPD typing was rapid, labour friendly and could be done within six hours. RAPD analysis produced reproducible electrophoretic band patterns on the basis of which three distinct amplification patterns could be visualised. The conventional typing methods were labour intensive and took about 48 hours. However, the results of RAPD typing, pyocin typing and antibiogram did not correlate with each other. This study suggests that RAPD typing could be an additional rapid typing method for studying the epidemiology of infectious disease outbreaks due to P aeruginosa.Key Words: Antibiogram, Pseudomonas aeruginosa, Pyocin     

Characterization of multidrug-resistant and metallo-beta- lactamase-producing Pseudomonas aeruginosa isolates from a paediatric clinic in China

Background In the present study, we characterized multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa （MDRP） clinical isolates from a paediatric facility and investigated the types and features of the metallo-β-lactamases （MBLs） produced by carbapenem-resistant strains. Methods Four hundred and ninety-eight strains of Pseudomonas aeruginosa were isolated from patients at Beijing Children＇s Hospital between January 2005 and December 2006. The minimal inhibition concentrations （MICs） of the strains for 13 antibiotics were measured. A combination of the E test and PCR amplification/DNA sequencing was used to define the carbapenem-resistant strains. Results We found that 24.1% （120/498） of the isolates were MDRP. The frequencies of resistance to imipenem and meropenem were 34.2% and 35.8%, respectively, and the MIC50 and MIC90values for the two antibiotics were identical at 4 pg/ml and 32 pg/ml, respectively. The detection rate for carbapenem resistance was 49.2% （59/120）. Among the 59 carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa strains, 39 （66.1%） were positive for the MBL genotype; 35 （89.7%） strains carried the blaiMp gene and 4 （10.3%） strains carried the blavm gene. Neither blasPM nor blaGiM was amplified from any of the 59 isolates. DNA sequencing revealed that IMP-1 was present in 35 IMP-producing isolates and VIM-2 was detected in four VIM-producing isolates. Conclusions These MDRP isolates exhibited high frequencies of resistance to carbapenems among clinical isolates from a paediatric facility in Beijing, China. The production of MBL appears to be an important mechanism for carbapenem resistance in Pseudomonas aeruginosa.     

Characterization of Sporothrix schenckii by random amplification of polymorphic DNA assay

Objectives To investigate the DNA polymorphism of Sporothrix schenckii(S.schenckii)and to find the relationship between DNA patterns and geographic areas and clinical manifestations.Method The total DNA was extracted with hexadecyltrimethyl-ammonium gromide.Random Amplification of Polymorphic DNA(RAPD) assay was used to study DNA typing of 24 strains of S.schenckii collected from different aress and isolated from different clinical types.Results Of seven random primers used,three primers(OPAA1,OPD18 AND OPB07)gave good reactions,the sequences of which were 5‘-ACCCGACCTG-3‘,5‘-GAGAGCCAAC-3‘,5‘-GGTGACGCAG-3‘ respectively.The RAPD patterns of the 24 isolated were not completely identical,showing certain degrees of hereditary variability.Different isolates showed a common conserved dna band with the same primer.Dirrerent clinical types showed different genotypes.Conclusion RAPD analysis is useful in DNA typing of S.schenckii,the DNA band type of which is related to geographic origin and Clinical manifestation.     

汕头地区医院感染多重耐药铜绿假单胞菌的基因型特征分析

目的 了解汕头地区ICU和非ICU医院感染多重耐药铜绿假单胞菌分离株的基因型特征.方法 收集汕头地区两家三级甲等医院的医院感染铜绿假单胞菌菌株,对这些菌株的耐药性和基因型进行分析.采用纸片扩散法进行药敏试验,脉冲场凝胶电泳法对多重耐药菌株进行基因分型,电泳结果 用Bionumerics V4.0软件进行聚类分析.结果 ...     

烧伤病房常见病原菌分布及耐药性分析

目的 对比分析近5年烧伤病房感染病原菌分布及耐药情况.方法 收集2010年1月至2014年11月笔者单位烧伤病房住院患者的血液、痰、粪、中段尿、创面分泌物、静脉导管、气管套管等标本分离获得的菌株,对各年度检出菌株的菌种分布特点及耐药性进行分析.结果 5年间送检标本检出细菌中,革兰阴性(G-)菌株数远远多于革兰阳性(G+)菌株数(平均分离率G-菌占83.2％,G+菌占16.8％),其中铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌是近5年来主要病原菌.动态观察病原菌耐药性可见,耐药率大幅度上升,对常用抗菌药物严重耐药,部分检出菌株对常用抗菌药物已完全耐药.结论 烧伤科病房存在多种院内感染病原菌,且菌种不断变迁,鲍曼不动杆菌已成为仅次于铜绿假单胞菌的第二大优势菌种,且细菌耐药情况严重.