非小细胞肺癌组织中miR-92a、miR-196b表达水平及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中微小核糖核酸-92a(miR-92a)、微小核糖核酸-196b(miR-196b)表达水平及其临床意义。方法以经手术治疗的120例NSCLC患者作为研究对象,根据随访期间患者复发转移情况将患者分为出现复发或转移的预后不良组(62例)和未出现复发和转移的预后良好组(58例),临床资料、癌组织标本和随访2年的资料进行NSCLC患者预后不良的单因素、多因素Logisitic回归分析以及ROC曲线分析,探讨癌组织中miR-92a、miR-196b的表达水平、相关性及其与预后的关系。结果经实时定量RT-PCR检测,预后不良组癌组织中miR-92a、miR-196b的相对表达量明显高于预后良好组(P<0.05),且miR-92a与miR-196b的表达存在明显的正相关性(P<0.05);单因素分析结果显示,两组在肿瘤TNM分期、术前淋巴结转移、癌组织miR-92a表达和癌组织miR-196b表达方面存在明显差异(P<0.05);多因素回归分析结果显示,TNM分期为Ⅲ期~Ⅳ期、术前有淋巴结转移、癌组织miR-92a≥3.0和癌组织miR-196b≥3.3是NSCLC患者出现预后不良的独立预测因素;ROC曲线分析结果显示,癌组织中miR-92a、miR-196b表达量单独预测NSCLC患者预后不良的ROC曲线下面积分别为0.718和0.736,均低于两指标联合预测的ROC曲线下面积0.804(P<0.05)。结论miR-92a、miR-196b在NSCLC预后不良患者癌组织中呈高表达,并互为正相关性;两者联合检测对于临床上预测NSCLC患者预后具有较好的应用价值,可作为预测NSCCL患者术后不良预后的分子标志物。     

甲状腺癌组织中miR-93-5p、BRMS1L的表达水平及其临床意义

目的 探讨微小RNA-93-5p(miR-93-5p)与乳腺癌转移抑制基因1相似基因(BRMS1L)在甲状腺癌组织内的表达与临床意义。方法 选取68例甲状腺癌患者，术中采集甲状腺癌组织与癌旁正常组织，以逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)与免疫组织化学法分别测定miR-93-5p与BRMS1L表达水平；分析miR-93-5p、BRMS1L表达与患者性别、年龄、体重指数(BMI)、TNM分期、淋巴结转移、分化程度等病理特征之间的关系。另外，随访3年，以Kaplan-Meier法分析miR-93-5p、BRMS1L表达与患者预后的关系。结果 癌组织miR-93-5p相对表达量高于癌旁组织，BRMS1L阳性表达率低于癌旁组织，有统计学差异(P<0.05)。miR-93-5p、BRMS1L表达与患者的性别、BMI无关(P>0.05),与患者的年龄、TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier结果显示：随访3年内，miR-93-5p高表达患者[47.62%(20/42)]与BRMS1L阴性表达患者[51.11%(23/45)]的3年生存率低于...     

miR-138-5p在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨微小RNA-138-5p（miR-138-5p）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测102例NSCLC组织和98例癌旁组织中miRNA-138-5p表达， 分析miRNA-138-5p表达与NSCLC临床病理特征（性别、年龄、TNM分期、肿瘤直径和淋巴结转移）的关系；Kaplan-Miere法绘制生存曲线，差异行Log-rank检验；Cox回归模型分析影响总生存（OS）的因素。结果 QPCR检测结果显示，NSCLC组织中miR-138-5p表达水平为0.42±0.11，显著低于癌旁组织的1.03±0.28，差异具有统计学意义 （P＜0.05）。miR-138-5p表达与TNM分期、肿瘤直径及淋巴结转移均有关（P＜0.05）。miR-138-5p高表达者的中位OS＞36个月，显著高于低表达者的26个月，差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox单因素分析显示除miR-138-5p表达外，淋巴结转移、肿瘤直径和TNM分期也与OS有关（P＜0.05）。结论 miR-138-5p在NSCLC中表达下调，其表达与NSCLC发生发展、预后有关， miR-138-5p可作为NSCLC诊断和预后预测新的靶点。     

STAT3和p38MAPK在胃癌中的表达及临床意义

[目的]探讨STAT3和p38MAPK在胃癌中的表达及临床意义.[方法]采用免疫组化法检测80例胃癌组织及40例癌旁组织中STAT3和p38MAPK的表达.[结果]80例胃癌组织中STAT3的阳性表达率为72.5％,明显高于癌旁组织的17.5％ (P＜0.001); STAT3的表达与胃癌患者性别、年龄、浸润深度无关(P＜0.05),而与分化程度、淋巴结转移、TNM分期、远处转移有关(P＜0.001).80例胃癌组织中p38MAPK的阳性表达率为71.3％,明显高于癌旁组织的12.5％(P＜0.05);p38MAPK的表达与胃癌患者性别、年龄、淋巴结转移无关(P＞0.05),而与分化程度、浸润深度、TNM分期、远处转移有关(P＜0.001).胃癌中STAT3和p38MAPK的表达呈正相关(r=0.6986,P＜0.01).[结论]胃癌中STAT3和p38MAPK均过表达,可能与胃癌的发生发展有关.     

miR-452-5p靶向SOX7促进食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭及EMT

目的：检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。方法：收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对应的癌旁组织,用qPCR法检测miR-452-5p及其他相关基因在ESCC组织和细胞中的表达;向KYSE-150细胞中分别转染miR-452-5p mimic或pcDNA3.1-SOX7构建过表达的细胞株。分析miR-452-5p表达与ESCC病理特征和患者5年OS的关系。用MTS、Tanswell法检测miR-452-5p过表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响;用双荧光素酶报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测miR-452-5p与SRY盒转录因子（SOX7）3’UTR区的结合作用及对Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。结果：miR-452-5p在ESCC组织中呈明显高表达（P<0.01）,并与ESCC患者的淋巴结转移、TNM分期及5年OS密切相关（均P<0.01）。mi...     

miR-340-5p、c-Myc、TCF-4在喉癌组织中表达及与其临床病理特征的相关性分析

目的 探讨喉癌组织内微小RNA(miR)-340-5p(miR-340-5p)、原癌基因(c-Myc)与转录因子-4(TCF-4)的表达及其临床意义。方法 选取64例喉癌患者为研究对象。于术中采集癌组织及癌旁正常组织，应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测癌组织及癌旁正常组织miR-340-5p、c-Myc与TCF-4的表达水平，另外统计分析三项指标表达水平与喉癌患者临床病理特征的关系。结果 癌组织中miR-340-5p相对表达量(2.15±0.27)低于癌旁正常组织(6.76±0.89),c-Myc、TCF-4相对表达量[(4.95±0.63)、(4.36±0.48)]高于癌旁正常组织[(0.94±0.16)、(0.90±0.17)],差异有统计学意义(P<0.05);miR-340-5p、c-Myc、TCF-4与喉癌患者年龄、体重指数(BMI)、肿瘤分化程度、肿瘤位置、是否伴有淋巴结转移无关(P>0.05);miR-340-5p、c-Myc、TCF-4与喉癌患者的肿瘤分期有关(P<0.05)。结论miR-340-5p、c-Myc、TCF-4在喉癌患...     

miR-383-5p、KIF3B mRNA在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的 探讨皮肤鳞状细胞癌内miR-383-5p、驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)mRNA的表达及临床意义。方法 选取73例皮肤鳞状细胞癌患者作为研究对象，均行手术采集肿瘤标本及癌旁标本。比较肿瘤组织及癌旁组织内miR-383-5p、KIF3B mRNA表达水平，并分析其与病理特征间的关系。结果 肿瘤组织内miR-383-5p表达量低于癌旁组织，KIF3B mRNA表达量高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移及侵袭程度深部患者miR-383-5p表达低于肿瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、淋巴结未转移及侵袭程度浅表患者，KIF3B mRNA表达高于肿瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、淋巴结未转移及侵袭程度浅表患者，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-383-5p在皮肤鳞状细胞癌内呈低表达，KIF3B mRNA呈高表达，两者均与肿瘤分期、淋巴结转移及侵袭程度有关，共同参与肿瘤发展，可为临床诊治提供重要参考。     

结肠癌患者血清中miR-653-5p的表达及其临床意义

目的：探讨结肠癌患者血清中microRNA miR-653-5p的表达及其临床意义。方法：选取2019年1月—2020年1月在商丘市第一人民医院就诊的76名结肠癌患者作为实验组，以同期76名健康体检者作为对照组。采集研究对象空腹静脉血5 mL，提取血清miRNA，采用实时定量荧光PCR(qPCR)检测血清中miR-653-5p的表达水平。根据miR-653-5p相对表达水平的平均值将实验组结肠癌患者分为高、低表达组，分析miR-653-5p表达与结肠癌临床病理指标之间的相关性；采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-653-5p的临床诊断价值；采用Kaplan-Meier和多因素COX回归分析结肠癌生存预后的影响因素。结果：对照组人群血清中miR-653-5p的相对表达水平为0.622±1.319，实验组结肠癌患者为0.471±1.076，实验组较对照组明显降低(P<0.01)；结肠癌患者血清中miR-653-5p表达水平与患者临床T分期、远处转移、淋巴结转移、脉管癌栓及肿瘤分化程度相关(均为P<0.01);miR-653-5p对临床诊断结肠癌的曲线下面积为0.823(...     

miR-28-3p通过抑制BIN1表达促进三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的恶性生物学行为

目的：探讨 miR-28-3p 在三 阴 性 乳 腺 癌（triple negative breast cancer,TNBC）组 织 和 细 胞 系 中 的 表 达 及 其 对MDA-MB-468细胞恶性生物学行为的影响。方法：收集2013年1月至2014年1月河北医科大学第四医院乳腺中心手术切除的、经病理证实的 83 例女性 TNBC 患者的癌组织和癌旁组织标本,以及 TNBC 细胞系 MDA-MB-468、HCC-1937、MDA-MB-231、MDA-MB-436、MDA-MB-453和人正常乳腺上皮细胞MCF10A,用qPCR检测组织和细胞系中miR-28-3p的表达水平并分析其表达与患者临床病理特征的相关性。用miR-28-3p抑制剂转染MDA-MB-468细胞后,用CCK-8、流式细胞术、细胞划痕和Transwell实验分别检测miR-28-3p抑制剂对MDA-MB-468细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,用Western blotting检测MDA-MB-468细胞中桥接整合因子1（bridging integrator-1,BIN1）蛋白的表达水平。通过生物信息学工具预测miR-28-3p的靶基因BIN1,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-28-3p对BIN1的调控作用。结果：TNBC组织及细胞系中miR-28-3p表达水平显著高于癌旁组织及MCF10A细胞（均P<0.01）;83例TNBC组织中共有56例（67.47%）高表达miR-28-3p,其高表达与患者的Ki-67表达水平、肿瘤大小和TNM分期密切相关（均P<0.05或P<0.01）。与miR-NC组比较,miR-28-3p抑制剂组MDA-MB-468细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,凋亡率升高（均P<0.05或P<0.01）。双荧光素酶报告基因和实验证实BIN1是miR-28-3p的靶基因,miR-28-3p抑制剂可上调MDA-MB-468细胞中BIN1蛋白的表达（P<0.05）。结论：miR-28-3p在TNBC组织及细胞中呈高表达状态,miR-28-3p抑制剂上调BIN1表达进而抑制MDA-MB-468细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡。     

miR-7及SP-1与非小细胞肺癌患者放疗敏感性的相关性研究

目的 探讨miR-7及其下游靶点特异性蛋白1（specific protein 1,SP-1）与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者放疗敏感性的相关性。方法 收集湖南师范大学附属第一医院2018年7月—2020年9月收治的116例原发性NSCLC患者癌组织及其相应癌旁组织,并采集外周血。采用实时荧光定量PCR法测定组织和外周血血清中miR-7的表达水平,免疫组化检测SP-1蛋白表达水平,Logistic回归模型分析影响NSCLC患者放射敏感性的因素。结果 NSCLC患者癌组织中miR-7表达水平低于癌旁组织（P<0.001）,SP-1阳性表达率高于癌旁组织（P<0.001）。Pearson相关分析显示,血清miR-7与癌组织中的miR-7表达呈正相关（r=0.492,P<0.001）,SP-1表达阳性患者血清中的miR-7相对表达量低于阴性表达患者（P=0.005）。T3~4分期、TNM分期ⅢA~B期、有吸烟史、发生放射性肺损伤者血清和癌组织中的miR-7表达水平降低（均P<0.05）;癌组织中SP-1阳性表达率升高（均P<0.05）。与放射敏感组比较,放射抵抗组血清和癌组织中miR-7相对表达量降低（均P<0.001）,SP-1阳性表达率升高（P<0.001）。受试者工作特征曲线显示,血清miR-7预测NSCLC患者发生放射抵抗的曲线下面积为0.822 （95%CI：0.746~0.897）。血清miR-7表达水平降低是放疗敏感性的危险因素（P=0.009）。结论 血清miR-7在预测放疗抵抗中具有良好的效能,miR-7及其下游靶分子SP-1可能是潜在的放疗增敏靶点。     

miR-627-3p在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其对癌细胞恶性生物学 行为的影响

目的：探讨 miR-627-3p 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组织中的表达及其对 ESCC细胞生物学行为的影响。方法：收集2015年1月至2015年10月河北医科大学第四医院胸外科手术切除的ESCC组织86例及对应的癌旁组织标本20例。通过qPCR法检测miR-627-3p在86例ESCC组织及癌旁组织中的表达,分析其表达与ESCC患者临床病理学指标及预后的关系;利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库进一步分析数据库中hsa-miR-627的表达与ESCC患者预后的关系;通过qPCR法检测miR-627-3p在4株ESCC细胞系中的表达,选取表达水平最低的食管癌细胞转染miR-627-3p mimic,选取表达水平最高的ESCC细胞转染miR-627-3p inhibitor,采用CCK-8法检测细胞的增殖,采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;采用 KEGG分析探讨 miR-627-3p可能介导的信号转导通路,并采用 qPCR法验证 miR-627-3p对信号通路中关键基因表达的影响。结果：miR-627-3p在 ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达,miR-627-3p的表达与 ESCC患者淋巴结转移和临床分期相关（均 P<0.05）;miR-627-3p高表达的 ESCC 患者的 5年生存率明显高于 miR-627-3p低表达的食管癌患者（P<0.05）。ESCC细胞系 KYSE170中 miR-627-3p表达最低,KYSE30中 miR-627-3p表达最高;在 KYSE170细胞中转染 miR-627-3p mimic后,细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05）,但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著降低;在 KYSE30 细胞中转染 miR-627-3p inhibitor 后,细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05）,但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著增高。KEGG 分析结果显示,miR-627-3p介导了多条与肿瘤相关的信号转导通路。结论：miR-627-3p在ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达,其低表达与ESCC患者的不良预后相关,miR-627-3p抑制ESCC细胞的迁移和侵袭,可能是通过干扰多条与肿瘤相关的信号通路发挥生物学功能。     

微小RNA-380-5p 在宫颈癌组织及细胞中的表达及其通过下调RHOA抑制C33A细胞的增殖和迁移

[摘要] 目的：检测微小RNA-380-5p（miR-380-5p）在人宫颈癌组织和细胞系中的表达,探讨其抑制宫颈癌C33A细胞增殖和迁移的作用机制。方法：收集2016 年12 月至2017 年7 月同济医学院附属武汉中心医院妇产科手术切除的16 例宫颈癌患者癌组织和对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系HCC94、C33A、Hela、SiHa 和人子宫颈上皮永生化细胞H8,用qPCR 法检测miR-380-5p 在癌及癌旁组织、4 种宫颈癌细胞及H8 细胞中的表达。用脂质体转染技术将miR-380-5p mimic（实验组）和miR-NC（阴性对照组）瞬时转染C33A细胞,用qPCR法检测转染后细胞中miR-380-5p 表达,CCK-8 法和Transwell 小室法分别检测转染细胞的增殖和迁移能力。用生物信息学软件TargetScan 预测miR-380-5p 的下游基因,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-380-5p 对下游基因Ras 同源基因家族成员A（Ras homolog gene family member A,RHOA）的结合作用,qPCR 法和Western blotting 检测miR-380-5p 下游基因RHOA的表达。结果：宫颈癌组织中miR-380-5p 表达水平明显低于癌旁组织（P<0.01）,宫颈癌细胞系中miR-380-5p 表达水平均明显低于H8 细胞（P<0.05）,以C33A细胞中的表达水平最低（P<0.01）。与阴性对照组比较,转染miR-380-5pmimic 能显著抑制C33A细胞的增殖（P<0.05）和迁移能力（P<0.01）,且下调RHOA、ROCK1、ROCK2、CDK2和N-cadherin蛋白的表达（均P<0.01）。生物信息学软件预测RHOA可能为miR-380-5p 的调控基因,双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-380-5p 可与RHOA 3’-非编码区（UTR）特异性结合,miR-380-5p 可明显下调RHOA基因的表达（P<0.01）。结论：miR-380-5p 在宫颈癌组织及细胞系中低表达,过表达miR-380-5p 可能通过下调RHOA及其下游蛋白的表达抑制宫颈癌C33A细胞的增殖和迁移。     

MiR-144-5p在胃癌中的表达及其生物学功能

摘 要：［目的］ 探讨miR-144-5p在胃癌组织和细胞中的表达及生物学功能。［方法］ 采用qRT-PCR 检测miR-144-5p在胃癌组织和细胞系中的表达水平,并验证miR-144-5p mimics的转染效率;分别采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞仪、Transwell实验检测miR-144-5p mimics对胃癌细胞AGS和HGC-27增殖、克隆形成能力、细胞周期和侵袭能力的影响。［结果］ MiR-144-5p在胃癌组织的表达水平明显低于癌旁组织（0.607±0.257 vs 1.000±0.360,t=5.616,P<0.001）。MiR-144-5p低表达与胃癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期显著相关（P<0.05）。MiR-144-5p在胃癌细胞SNU-1、HGC-27、SGC-7901、KATO Ⅲ及AGS中表达水平显著低于正常人胃黏膜上皮细胞GES-1（F=12.17,P<0.001）。转染miR-144-5p mimics后,AGS（t=4.902,P=0.001）和HGC-27（t=4.154,P=0.003）细胞中miR-144-5p的表达水平显著增高;AGS和HGC-27细胞的增殖能力、克隆形成能力、侵袭能力均被抑制（P<0.05）,G1期细胞比例增加、而S期的细胞比例减少（P<0.05）。［结论］ MiR-144-5p在胃癌组织和细胞中表达降低,与胃癌患者的TNM分期较晚和胃癌细胞恶性程度较高有关,提示miR-144-5p在胃癌的恶性进程中起重要作用。     

MiR-28-5p靶向DOK4对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的影响

目的 探讨微小RNA(miR)-28-5p通过靶向酪氨酸激酶下游蛋白4(DOK4)对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的调控作用。方法 下载癌症基因组图谱(TCGA)口腔癌数据库,分析miR-28-5p、DOK4与口腔鳞状细胞癌临床表型的关系;转染miR-28-5p模拟物(mimics)、miR-28-5p抑制剂(inhibitor)及对照物(NC)、pcDNA3.1-DOK4及空载体(Vector)、DOK4干扰序列(siDOK4)。CCK-8法和克隆集落形成实验检测口腔鳞状细胞癌的细胞增殖能力;检测各组细胞的抗氧化能力和细胞活性氧(ROS)含量;双荧光素酶报告基因实验验证miR-28-5p与DOK4的靶向关系;观察DOK4过表达对细胞增殖和口腔鳞状细胞癌裸鼠移植瘤生长的影响。结果 生物信息学分析显示,相较于癌旁口腔组织,miR-28-5p在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调,DOK4 mRNA下调(P<0.05);临床分期Ⅳ期、M₁期、G₃～G₄分级患者miR-28-5p水平高于临床分期Ⅰ～Ⅲ期、M₀期、G...     

lncRNASNHG10靶向调控miR-532-3p促进结直肠癌SW620细胞的侵袭和迁移

目的： 探讨lncRNA SNHG10在结直肠癌组织和细胞中的表达情况及其对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响与可能的机制。 方法： 收集2018年1月至2019年12月在河南省人民医院行根治性结直肠癌切除术的78例患者的癌组织及对应癌旁组织标本,采用qPCR法检测结直肠癌组织、结直肠癌细胞（SW480、SW620、HT-29和LoVo）及人正常结直肠黏膜细胞FHC中lncRNA SNHG10和miR-532-3p的表达水平,并分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系及在组织中表达的相关性。采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SNHG10和miR-532-3p间的靶向关系。向SW620细胞中转染si-SNHG10或miR-532-3p mimic或共转染si-SNHG10+miR-532-3p inhibitor,采用Transwell实验检测其侵袭和迁移能力的改变,采用WB法检测E-cadherin,N-cadherin和vimentin蛋白表达水平变化。 结果： SNHG10 在结直肠癌组织和细胞中呈高表达（P<0.05 或 P<0.01）,其表达水平与TNM分期和远处转移有关（均P<0.05）;miR-532-3p在结直肠癌组织和细胞中呈低表达,其表达水平与TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关（P<0.05或P<0.01）,SNHG10和miR-532-3p在结直肠癌组织中的表达呈负相关（r=-0.225, P=0.048）。双荧光素酶报告基因实验证实SNHG10靶向调节miR-532-3p的表达。下调 SNHG10 或上调 miR-532-3p 的表达后,SW620 细胞的侵袭和迁移能力显著降低（P<0.01）,E-cadherin蛋白表达水平升高（P<0.05）、N-cadherin和vimentin蛋白表达水平降低（均P<0.05）。抑制miR-532-3p表达后,敲低lncRNA SNHG10表达对结直肠癌细胞侵袭和迁移的抑制作用被逆转（均P<0.05）。 结论： lncRNA SNHG10在结直肠癌中高表达并与TNM分期和远处转移相关,lncRNASNHG10靶向调控miR-532-3p表达并通过EMT途径影响结直肠癌细胞的侵袭和转移。     

长链非编码RNA PVT1和miR-30d-5p在肝内胆管癌组织中的表达及其与预后相关性分析

目的:分析肝内胆管癌（ICC）组织中长链非编码RNA PVT1（lncRNA PVT1）和miR-30d-5p的表达,探讨其与ICC患者临床病理因素及预后的关系。方法:收集2012年3月至2015年9月间经手术切除的47例ICC组织和相应癌旁组织（≥5 cm）。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测组织中lncRNA PVT1、miR-30d-5p表达水平,分析二者表达与临床病理因素及3年总生存率（OS）的关系。结果:ICC组织中lncRNA PVT1表达水平显著高于癌旁组织（P＜0.05）,miR-30d-5p表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.05）。lncRNA PVT1表达与ICC患者肿瘤直径、组织分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关（P＜0.05）,miR-30d-5p表达与ICC患者组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关（P＜0.05）。ICC组织中lncRNA PVT1表达与miR-30d-5p表达呈负相关（P＜0.05）。lncRNA PVT1低表达者3年OS明显高于高表达者（P＜0.05）,miR-30d-5p高表达者3年OS显著高于低表达者（P＜0.05）。组织分化程度、TNM分期、lncRNA PVT1表达、miR-30d-5p表达均是影响ICC患者预后的独立危险因素（P＜0.05）。结论:ICC组织中lncRNA PVT1高表达、miR-30d-5p低表达,二者表达与ICC患者组织分化程度、TNM分期及预后有关。     

miR-1271-5p在肾细胞癌组织和细胞中的表达及其对A-498 细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨miR-1271-5p 在肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）组织和细胞系中的表达及其对RCC细胞株A-498 增殖及凋亡的影响。方法：用实时荧光定量PCR（qPCR）检测手术切除并经病理确诊为RCC组织和癌旁组织,以及RCC细胞系ACHN、A498、HK-2、786-O、CaKi-1 和人胚肾细胞株HEK293 中miR-1271-5p 的表达水平。用miR-1271-5p（实验组）和miR-NC（对照组）分别转染A-498 细胞。通过生物信息学预测鸟嘌呤交换因子DOCK1 为miR-1271-5p 可能的靶基因,构建DOCK1 基因的3’UTR 野生型及突变体序列双荧光素酶报告基因载体并进行荧光素酶活性检测,qPCR检测两组细胞中DOCK1 mRNA表达水平,Western blotting 检测两组细胞中DOCK1、p-ERK、p-AKT、Bcl-2 和Bax蛋白的表达情况,MTS法、集落形成实验和流式细胞术检测A-489 细胞增殖、集落形成数目和凋亡情况。结果：RCC组织和细胞系中miR-1271-5p 表达水平显著低于癌旁组织和人胚肾HEK293 细胞（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因系统结果显示DOCK1 是miR-1271-5p 的靶基因(P<0.01)。与miR-NC组细胞相比,miR-1271-5p 组A-498 细胞中DOCK1 mRNA的表达水平显著下降(P<0.01);DOCK1、p-ERK、p-AKT、Bcl-2 蛋白表达水平显著下调(P<0.05),Bax 蛋白明显上调(P<0.05);A-498 细胞增殖活力显著降低(P<0.01);集落形成数显著减少(P<0.05);细胞凋亡率显著增高(P<0.01)。结论：RCC组织和细胞系中miR-1271-5p 表达下调,通过干扰DOCK1 基因表达能明显抑制A-489 细胞的增殖及诱导其凋亡,miR-1271-5p 可能成为未来RCC治疗的分子靶标。     

高危人乳头状瘤病毒感染宫颈癌患者miR-34a-5p表达及意义

摘 要：［目的］ 探讨高危人乳头状瘤病毒（high risk human papillomavirus,HR-HPV）感染宫颈癌患者组织及血清miR-34a-5p的表达以及血清miR-34a-5p对宫颈癌的诊断价值。［方法］ 采用RT-PCR检测70例HR-HPV阳性宫颈癌组织和癌旁组织、100例HR-HPV阳性宫颈癌患者血清、80例HR-HPV阳性宫颈上皮内瘤病变(CIN)患者血清、80例健康体检者血清中miR-34a-5p的表达水平。Pearson法分析组织和血清中miR-34a-5p表达量的相关性,分析miR-34a-5p与宫颈癌临床病理特征的关系,分析血清miR-34a-5p诊断宫颈癌的价值。［结果］ 宫颈癌组织miR-34a-5p相对表达量明显低于癌旁组织（P＜0.05）。宫颈癌患者血清miR-34a-5p相对表达量明显低于CIN患者和正常人（P＜0.05）,CIN患者血清miR-34a-5p相对表达量明显低于正常人（P＜0.05）。癌组织miR-34a-5p相对表达量与淋巴结转移有关(P<0.05)。血清miR-34a-5p相对表达量与淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05)。miR-34a-5p在癌组织与血清中的相对表达量呈正相关（r=0.459,P＜0.05）。血清miR-34a-5p诊断宫颈癌的ROC曲线下面积为0.860（95%CI：0.803~0.917）。［结论］ HR-HPV宫颈癌患者血清miR-34a-5p下调,与癌组织miR-34a-5p表达呈正相关,有望成为宫颈癌诊断的分子标志物。     

TACC3和p53蛋白在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨TACC3蛋白和p53蛋白在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义。方法 本院原发性肝癌患者138例,酶联免疫吸附法及免疫组化法测定癌旁组织、原发性肝癌组织中TACC3、p53蛋白的表达水平,分析其与临床病理参数和预后的关系。结果 原发性肝癌组TACC3蛋白、p53蛋白表达水平高于癌旁组(P＜0.05);原发性肝癌组TACC3、p53阳性率高于癌旁组(P＜0.05);TACC3、p53蛋白表达与年龄无关(P＞0.05);与TMN分期、病理学分级、复发、浸润深度、淋巴血管间隙浸润、肿瘤最大径、淋巴结转移有关,且TNM分期越高、病理学分期越高、有复发、浸润深度越深、有淋巴血管间隙浸润、肿瘤最大径≥5 cm、有淋巴结转移,TACC3、p53蛋白阳性表达率越高(P＜0.05);TACC3、p53阴性组3年生存率均明显高于TACC3、p53阳性组(P＜0.01)。结论 原发性肝癌组织中TACC3、p53蛋白表达量增加,其与原发性肝癌的进展呈正相关;TACC3、p53蛋白低表达能提高原发性肝癌患者预后。     

透明细胞肾细胞癌外泌体miR-133a表达及临床意义

目的 探讨外泌体微小RNA(miR)-133a在透明细胞肾细胞癌(ccRCC)中的表达及临床意义。方法 收集2015年9月至2019年1月在我院行根治性肾切除术的293例ccRCC患者的血清样本，另外收集200例健康体检者的血清样本作为对照组。提取血清及组织外泌体总RNA,采用TaqMan低密度芯片(TLDA)鉴定差异表达的miRNA,并通过实时荧光定量PCR(qPCR)进行验证。随访患者的总生存期(OS)和无病生存期(DFS)。结果 与健康对照组血清和癌旁正常组织比较，TLDA筛选得到3个在ccRCC患者血清外泌体和肿瘤组织中差异表达的miRNAs(miR-133a、miR-210、miR-7-1)。qPCR证实外泌体miR-133a表达在ccRCC患者中显著下调(P<0.001)。ccRCC患者外泌体miR-133a表达与肿瘤组织表达呈正相关(r=0.467,P<0.001)。受试者工作特征(ROC)曲线证实血清外泌体miR-133a诊断ccRCC曲线下面积(AUC)为0.78(95%CI:0.747～0.729)。术前血清外泌体miR-133a表达与TNM分期、Fuh...