裸花紫珠化学成分及细胞毒活性研究

综合运用HP-20大孔吸附树脂柱粗分、硅胶柱和Sephadex LH-20凝胶柱等色谱法分离纯化海南道地药材裸花紫珠Callicarpa nudiflora 中的化学成分,借助波谱数据解析化合物的结构。采用MTT法测定其粗提物和单体化合物的细胞毒活性。发现裸花紫珠醇提物50%,70%乙醇洗脱物对肿瘤细胞的增殖有较强的抑制作用。从上述活性部位分离和鉴定得到12个化合物,其中6个黄酮：木犀草苷（1）,木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）,6-羟基木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）,木犀草素-7-O-新橙皮苷（4）,野漆树苷（5）,木犀草素-7,4'-二-O-葡萄糖苷（6）;3个苯乙醇苷：连翘酯苷（7）,类叶升麻苷（8）,alyssonoside（9）;3个环烯醚萜苷：梓醇（10）,nudifloside（11）,益母草苷（12）。化合物 3~6,10和12为首次从该属植物中分离得到,化合物9为首次从该种植物中分离得到。单体化合物的细胞毒活性实验显示,黄酮类化合物1~6整体均显示出对宫颈癌Hela,肺癌A549和乳腺癌MCF-7细胞不同程度的抑制作用,化合物3,5和11的细胞毒活性比较突出。综合分析表明,黄酮类化合物是裸花紫珠活性部位的主要化学成分,有抑制肿瘤细胞增殖的潜在功效;苯乙醇苷类化合物含量较高,但不表现细胞毒活性;环烯醚萜苷类成分少量存在,表现出微弱的细胞毒活性。     

HPLC法测定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及连翘酯苷的含量

目的:测定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及连翘酯苷的含量,建立裸花紫珠片具专属性的含量控制方法.方法:采用Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.1%醋酸水溶液(40∶60);流速:1.0 mL/min;检测波长:334 nm;进样量:10μL.结果:毛蕊花糖苷在0.48～9.60 μg(r=0.999 4,n=7)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为95.94%,RSD为1.54%;连翘酯苷在0.54-10.80 μg(r=0.999 7,n=7)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为98.33%,RSD为1.68%.结论:经过系统的方法学考察,该方法专属性强,重复性好,结果准确,为裸花紫珠片提供了科学、专属的质量控制方法.     

黄酮苷类化合物分离鉴定的研究进展

对近 5年间有关黄酮苷的提取分离、结构鉴定的新进展作了综述 ,对质谱、紫外光谱、核磁共振等波谱方法用于结构研究的最新应用作了介绍     

裸花紫珠的化学成分及其止血活性研究

目的:研究马鞭草科紫珠属植物裸花紫珠Callicarpa nudiflora的化学成分,并筛选其止血活性成分。方法:应用硅胶及Sephadex LH-20柱色谱方法分离纯化,运用波谱数据解析鉴定化合物结构;测定分离得到的化合物对家兔体外血液凝集参数凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)及纤维蛋白原(FIB)含量的影响。结果:分离鉴定了11个化合物,其中2个二萜:7α-hydroxy sandaracopimaric acid(1),16,17-dihydroxy-3-oxophyllocladane(2);2个酚苷:acte-oside(3),samioside(4);3个三萜:2α,3α,24-三羟基-乌索烷-12-烯-28-酸(5),2α,3α,19α-三羟基-乌索烷-12-烯-28-O-β-D-葡萄糖苷(6),2α,3α,19α,23-四羟基-乌索烷-12-烯-28-O-β-D-葡萄糖苷(7);4个黄酮:鼠李秦素(8),5-羟基-3,7,4′-三甲氧基黄酮(9),5-羟基-3,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(10),木犀草苷(11)。与空白对照组相比,所有化合物均无明显缩短PT的作用(P0.01),化合物3,4,7,10有显著缩短APTT的作用(P0.01),化合物5对TT有明显的延长作用(P0.01),化合物8对FIB有显著增加的作用(P0.01)。结论:化合物2,4,10为首次从紫珠属植物中分离得到,化合物1,3,5,6,7,9为从裸花紫珠中首次分得。裸花紫珠可能是通过影响内源性凝血途径发挥止血作用。     

中药裸花紫珠研究现状

裸花紫珠为马鞭草科小灌木植物,其全草包括根、茎、花、皮均可入药,有止血、收敛、凉血、清热解毒之功效。目前市场已经有单味药制成的成品药出售。但是对裸花紫珠的相关研究十分少,现将其相关研究综述如下,为深入研究做准备。     

裸花紫珠醋酸乙酯部位化学成分及抗炎活性研究

目的 研究裸花紫珠Callicarpa nudiflora叶的化学成分,并对分离的化合物进行初步的抗炎筛选。方法 采用各种色谱方法（硅胶、MCI、羟丙基葡聚糖凝胶、ODS）进行分离纯化,并结合核磁、质谱数据明确其结构。通过Griess法对分离得到的化合物进行初步的抗炎活性筛选。结果 从裸花紫珠叶中醋酸乙酯部位分离得到17个单体化合物,分别鉴定为(6S,7R)-3-oxo-megastigma-4,8-dien-7-O-β-D-glucoside（1）、phoebenoside A（2）、(6R,9R)-3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside（3）、blumenol C glucoside（4）、异毛蕊花糖苷（5）、myricoside（6）、肉苁蓉苷D（7）、地黄苷（8）、木通苯乙醇苷B（9）、4,4''-dimethoxy-3''-hydroxy-7,9'':7'',9-diepoxylignan-3-O-β-D-glucopyranoside（10）、木犀草素-7-O-葡萄糖苷（11）、木犀草素- 7-O-β-D-葡萄糖苷（12）、木犀草素-4′-O-β-D-葡萄糖苷（13）、大波斯菊苷（14）、luteolin-7-O-β-L-rhamnopyranosyl (1→2)-β-D- glucopyranoside（15）、芹菜素-7-O-β-D-新橙皮苷（16）、2-O-butyl-1-O-(2′-ethylhexyl) benzene-1,8-dicarboxylate（17）。化合物7、14对NO生成抑制率达到45%以上。结论 化合物1～4、9～11、17为首次从该属植物中分离获得。其中化合物7和14能显著抑制NO的产生,具有良好的体外抗炎效果。     

裸花紫珠片治疗慢性咽炎的疗效观察

慢性咽炎是耳鼻喉科常见病、多发病，临床上分为单纯性、肥厚性、萎缩性3型。患者症状常反复发作，久治不愈。笔者应用裸花紫珠片（海南九芝堂中元药业生产）治疗慢性咽炎252例，取得较好疗效，现报道如下。     

正交试验优选裸花紫珠叶中苯乙醇苷类成分的水提取工艺

目的优选裸花紫珠叶中苯乙醇苷类成分的水提取工艺。方法以浸膏得率和毛蕊花糖苷及异毛蕊花糖苷的提取得率为评价指标,考察浸泡时间、加水倍量、提取时间、提取次数等因素,采用正交试验法优选最佳水提取工艺。结果裸花紫珠叶水提取最佳工艺为药材加水浸泡2 h、提取3次、加水倍量分别为20、15、15,每次提取1 h。结论优选出的水提取工艺简单可行,可用于裸花紫珠叶中苯乙醇苷类成分的提取。     

裸花紫珠的临床应用研究进展

<正>裸花紫珠Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.为马鞭草科紫珠属植物,国内主要分布于广东、广西、海南等地,药用部位为地上干燥部分,是一种海南大宗性地道药材,同时也是海南黎族医生常用药材之一。裸花紫珠全年均可采收,除去杂质,晒干,枝叶有抗菌止血、消炎解毒、散瘀消肿、祛风祛湿之功效,主治化脓性炎症、急性传染性肝炎、呼吸道及消化道出血、创伤出血等症,外用治烧、烫伤及外伤出血等[1]。笔者查阅了     

海南岛裸花紫珠种质资源调查报告

通过查阅文献、走访药农、实地调查等方式对海南岛裸花紫珠野生及栽培资源进行了调查,结果显示,裸花紫珠野生资源虽在全岛大部分地区均有分布,但蕴藏量较小。此次调查共收集了96份野生繁殖材料,分布于海南岛14个县市。不同的气候条件对裸花紫珠的生长影响较大;裸花紫珠的栽培始于2006年前后,目前栽培资源主要分布于白沙县、五指山市等地区,2016年全省栽培总面积约为493 hm~2,产量约为962 t(干品),其中以白沙县种植面积最大(约333 hm~2),年产量最高,为650 t(干品)。虽然裸花紫珠的种植已成一定的规模,但目前仍然缺乏规范化的种植技术,生产管理仍处于粗放无序的状态,且品种选育工作薄弱,并无优势品种出现。     

HPLC同时测定裸花紫珠药材中毛蕊花糖苷和木犀草素

目的:建立同时测定裸花紫珠药材中毛蕊花糖苷和木犀草素的方法。方法:采用高效液相色谱法,PhenomenexGemini C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,以甲醇(A)-0.3%磷酸水溶液(B)为流动相线性梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长350 nm,柱温30℃。结果:毛蕊花糖苷和木犀草素线性范围分别在29.6～740.0,1.0～25.0μg(r=0.999 9),平均回收率分别为99.08%,99.93%,RSD分别为1.53%,1.65%。结论:方法精密度高,重复性好,可用于裸花紫珠药材中毛蕊花糖苷和木犀草素的含量测定。     

FOLIN-酚比色法测定裸花紫珠中总酚含量

目的:建立裸花紫珠总酚的含量测定方法.方法:采用Folin-酚比色法测定裸花紫珠中总酚的含量,确定以没食子酸为对照品的最佳测定条件.结果:Folin-酚用量为0.5 mL,7.5％ Na2CO3用量为1.5 mL,反应条件为40℃下加热10 min,显色条件为25℃下显色60 min,没食子酸浓度在0～18 μμg时与其吸光度有良好线性关系,其回归方程Y=32.262X-0.001 2(n-7),r=0.999 9,根据此线性回归方程进行裸花紫珠总酚的含量测定.结论:该方法简单方便、稳定性好、准确度高,可用于裸花紫珠原料及其制剂的质量控制和定量分析.     

裸花紫珠提取物促血小板活化作用及其机制

目的:研究裸花紫珠Callicarpa nudiflora提取物对血小板活化的影响,并探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为空白组,云南白药组(0.930 g·kg-1),裸花紫珠提取物低、中、高剂量(0.131,0.263,0.525 g·kg~(-1))组,连续给药10 d。给药结束后分别提取各组动物血小板,采用微量版法测定二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板聚集率;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血小板中血栓素(thromboxane B2,TXB2),5-羟色胺(5-serotonin,5-HT)含量。采用ELISA法检测血小板中环磷酸腺苷(cyclic adenosine 5'-monophosphate,c AMP)的释放量。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测裸花紫珠提取物对血小板中磷酸化-磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinases,p-PI3K)蛋白表达的影响。结果:给药后,裸花紫珠提取物可明显增强ADP诱导的血小板聚集反应(P0.05),可明显促进血小板释放TXB2和5-HT(P0.05)。另外,裸花紫珠提取物低、高剂量组血小板c AMP含量分别为(3.074±0.538),(3.340±0.265)nmol·L~(-1),较空白组(3.795±0.586)nmol·L~(-1)明显降低(P0.05),裸花紫珠提取物中剂量组血小板中c AMP为(3.003±0.242)nmol·L-1,较空白组有显著提高(P0.01)。裸花紫珠提取物可显著提高p-PI3K激酶蛋白表达量(P0.01)。结论:裸花紫珠提取物可显著上调ADP诱导的血小板活化,其机制可能与其显著增强血小板ADP受体(P2Y12)所介导的信号转导有关。     

裸花紫珠指纹图谱研究及10种成分的含量测定

建立裸花紫珠叶的HPLC指纹图谱,并同时测定其中10种成分的含量,为其质量控制及鉴定提供科学依据.采用Waters Sunfire C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱,流速为1 mL·min^-1,检测波长330 nm,柱温30 ℃.运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012) 进行分析.各批次裸花紫珠叶的指纹图谱相似度较高,10种成分分离度良好.裸花紫珠枝及同属4种紫珠与裸花紫珠叶对照图谱存在明显差异,定量分析条件通过方法学验证,平均加样回收率在96.0%~105.0%.所建立的定性、定量分析方法简便,准确度高,专属性强,可作为裸花紫珠鉴定及质量控制的依据.     

尖尾枫化学成分研究

目的: 研究马鞭草科植物尖尾枫的化学成分。方法: 应用溶剂萃取及柱色谱方法分离尖尾枫的化学成分,通过波谱技术鉴定化合物的结构。结果: 从尖尾枫中分离得到 10 个化合物,分别鉴定为乌苏酸(1)、齐墩果酸(2)、seco-hinokiol(3)、乌发醇(4)、高根二醇(5)、野鸦椿酸(6)、山楂酸(7)、金合欢素(8)、β-谷甾醇(9)、胡萝卜苷(10)。结论: 化合物 2~10 均首次从该植物中分离得到。     

裸花水竹草化学成分

目的:研究鸭跖草科裸花水竹草的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、重结晶等方法分离和纯化,并通过IR,EIMS及NMR等波谱学方法对分离得到的化学成分进行结构鉴定。结果:从裸花水竹草中共分离得到15个化合物,分别为正三十九烷(1),二十烷酸辛酯(2),胆甾-7-烯-3-酮(3),22,23-二氢菠菜甾酮(4),二十四烷酸(5),三十烷酸(6),谷甾醇(7),菜油甾醇(8),豆甾醇(9),麦角甾醇(10),豆甾-7-烯-3-醇(11),豆甾醇-3-O-葡萄糖苷(12),胡萝卜苷(13),二十七烷酸甘油酯(14),bracteanolide A(15)。结论:其中化合物1~15均为首次在该植物中分离得到。     

聚酰胺树脂精制裸花紫珠总黄酮的工艺优选

目的：优选聚酰胺树脂分离纯化裸花紫珠总黄酮的工艺条件。方法：以总黄酮含量为指标,利用静态-动态吸附-洗脱试验考察聚酰胺树脂纯化总黄酮的行为,通过单因素试验考察饱和吸附量、pH、洗脱溶剂用量等工艺参数。结果：最佳精制工艺参数为上样液质量浓度0.073 g·mL^-1,上样量2 BV,上样液pH 3.0,加水3 BV洗脱杂质,用80%乙醇3 BV洗脱,收集乙醇洗脱液;总黄酮纯度由5.6%提高至42.3%,平均保留率89.6%（RSD 3.56%）。结论：采用聚酰胺树脂纯化裸花紫珠总黄酮的效果良好,为裸花紫珠新制剂的开发提供实验依据。     

裸花紫珠化学成分与药理活性研究进展

裸花紫珠为海南省的道地药材,并被录入《中国药典》2015年版新增中药品种。通过对国内外1996—2016年文献调研显示,其化学成分主要有苯丙素类、黄酮类、三萜类、二萜类、环烯醚萜类、酚酸类及其苷和甾醇等。现代药理活性研究表明其具有止血、抗炎、抑菌、增强免疫、细胞毒等作用。通过完成对裸花紫珠的化学成分系统总结和药理活性的概述,为其药材的质量控制、药理作用研究和深层次开发利用提供参考依据。