穿山龙总皂苷提取工艺研究

目的:优化穿山龙中总皂苷的提取工艺。方法:采用回流提取法,通过单因素(料液比、乙醇浓度、提取时间、提取次数、酸的浓度、水解时间、酸的用量等因素)及正交设计法L9(34),探讨穿山龙总皂苷提取工艺。结果:单因素试验结果显示:最佳料液比为1:60,乙醇浓度为70%,提取时间为3h,提取次数为2次,酸的用量为40mL,酸的浓度为2.5mol/L,水解时间3h。水解前正交试验结果显示:用60%的乙醇提取2次,每次1.5h,料液比为1:60;水解后正交试验结果显示:2.5mol/L的硫酸水解3.5h,酸的用量为50mL。结论:该提取工艺操作简单,条件易控制,为穿山龙的开发利用提供参考。     

大孔吸附树脂法富集纯化穿山龙总皂苷工艺研究

目的：探讨大孔吸附树脂法富集纯化穿山龙总皂苷的工艺。方法：以洗脱所得总固物的量及总固物中穿山龙总皂苷的含量为考察指标,考察树脂型号、洗脱溶剂用量等工艺条件与药材-树脂比例、色谱柱径高比、洗脱流速、收集洗脱液的量等工艺参数。结果：最佳工艺为药材-树脂（1：2）,色谱柱径高比1：13,收集8BV洗脱液的量。总固物得率为5．79％～6．27％,穿山龙总皂苷的含量为55．08％～57．79％。结论：方法操作简单、安全、稳定,适合广泛应用推广。     

大孔吸附树脂法富集纯化穿山龙总皂苷工艺研究

目的:探讨大孔吸附树脂法富集纯化穿山龙总皂苷的工艺。方法:以洗脱所得总固物的量及总固物中穿山龙总皂苷的含量为考察指标,考察树脂型号、洗脱溶剂用量等工艺条件与药材-树脂比例、色谱柱径高比、洗脱流速、收集洗脱液的量等工艺参数。结果:最佳工艺为药材-树脂(1:2),色谱柱径高比1:13,收集8BV洗脱液的量。总固物得率为5.79%～6.27%,穿山龙总皂苷的含量为55.08%～57.79%。结论:方法操作简单、安全、稳定,适合广泛应用推广。     

剪藤对巴戟天无机元素及总糖含量影响的研究

以等离子发射光谱法及分光光度法分别研究了剪藤前后巴戟天无机元素含量及水溶性总糖含量。结果表明:剪藤后,巴戟天根、茎、叶Cd含量均显著增加,营养叶Fe含量以及肉质根总糖年增长率均显著降低。作者认为传统的“齐兜”剪藤法不利于巴戟天植株的营养生长及其药材质量。     

土壤无机元素对赤芍无机元素及芍药苷含量的影响

目的:探讨土壤无机元素对赤芍中无机元素和芍药苷含量的影响。方法:对不同产地赤芍中芍药苷含量、药材无机元素含量及根际土壤中无机元素含量进行测定,所得数据用SPSS13.0软件进行差异比较和相关分析。结果:赤城所产赤芍中芍药苷和有益元素Sr,Ca含量均显著低于围场,而Ni,Cr以及有害元素Cd,Pb含量显著高于围场,且其根际土壤中Cd,Pb,Cr,Ni,Fe,Co,Cu,As,Zn,Hg8种元素含量亦显著高于围场。赤芍中Cd,Pb,Ni3种元素均与芍药苷呈显著负相关。赤芍药材中Cd,Pb,Cr,Ni两两间呈显著正相关,且均与Sr呈显著负相关。赤芍药材与土壤中Cd,Pb,Cr,Ni,Se呈显著正相关。结论:Sr可能会抑制赤芍对Cd,Pb,Cr,Ni的吸收,而Ca可能会抑制赤芍对Cr,Ni的吸收。Cd,Pb,Ni,Cr,Se在土壤中的含量对其在赤芍药材中的含量有较大影响,而其中Cd,Pb,Ni的含量还可能影响到赤芍中芍药苷的含量。     

土壤无机元素对黄芩无机元素及黄芩苷含量的影响

目的:探讨黄芩土壤无机元素对药材无机元素和黄芩苷含量的影响。方法:测定河北承德黄芩中黄芩苷含量、无机元素含量及黄芩根际土壤中无机元素含量,用SPSS 13.0软件对所得数据进行方差分析和相关分析。结果:黄芩对P有明显富集作用,对Zn和Se也有一定的富集。P,Zn,Se的土壤-黄芩迁移能力显著大于其他元素。黄芩中Se含量与其土壤含量显著正相关。黄芩苷与药材中P显著正相关,与Sr,Se呈显著负相关。结论:本实验所用黄芩样品中无机元素含量普遍偏低,尤以微量无机元素明显。黄芩中多数无机元素含量并不直接受制于相应的土壤含量。黄芩药材中无机元素含量与黄芩苷含量具有相关性趋势。     

穿山龙总皂苷对CIA大鼠关节滑膜组织AP-1表达的影响

目的观察穿山龙总皂苷对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜组织激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)mRNA表达水平及活性的影响,旨在探讨穿山龙总皂苷治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法将造模成功的36只CIA大鼠随机分为CIA模型组、雷公藤组(阳性对照组)、穿山龙总皂苷组,另设正常对照组,每组12只。造模成功以后分别给予相应的药物灌胃,连续治疗35 d。应用原位杂交方法检测滑膜组织中AP-1的两个亚单位c-fos和c-jun的mRNA表达水平;凝胶电泳迁移率实验检测滑膜组织核蛋白提取物AP-1的DNA结合活性。结果与正常对照组相比,CIA模型组大鼠滑膜组织中c-fos和c-jun的mRNA表达水平以及滑膜细胞核蛋白提取物中AP-1的DNA结合活性均显著增高(P0.01);与CIA模型组相比,穿山龙总皂苷组、雷公藤组的c-fos和c-jun的mRNA表达水平以及滑膜细胞核蛋白提取物中AP-1的DNA结合活性均显著降低(P0.01)。结论穿山龙总皂苷可能通过抑制转录因子AP-1来调控血管新生相关基因的表达,抑制血管新生来起到治疗RA的作用。     

穿山龙总皂苷对胶原性关节炎大鼠炎性细胞因子的影响

目的 观察穿山龙总皂苷(total saponin from Rhizoma Dioscorea nipponica,TSRDN)对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen -induced arthritis,CIA)大鼠血清中炎性细胞因子的影响,初步探讨穿山龙总皂苷治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)可能的作用机制.方法 建立CIA大鼠模型.于初次免疫后第14天,将造模成功的大鼠随机分为CIA模型组,穿山龙总皂苷高、中、低剂量组,雷公藤组.其中穿山龙总皂苷高、中、低剂量组分别经胃灌服100 mg·kg-1·d-1,50 mg·kg-1·d-1、25 mg·kg-1·d-1剂量的穿山龙总皂苷,雷公藤组灌服12 mg·kg-1·d-1剂量的雷公藤多苷,正常对照组、CIA模型组灌服等体积溶媒.用药后21 d,记录各组大鼠后肢体积、足垫厚度、关节炎指数;测定血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平;观察关节滑膜病理变化.结果 经穿山龙总皂苷灌胃治疗21 d后,与模型组相比,治疗组大鼠后肢体积、足垫厚度、关节炎指数有降低趋势(P＞0.05),大鼠滑膜增生减轻,炎细胞浸润减少,软骨及骨组织侵蚀破坏减轻,血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P＜0.01).结论 穿山龙总皂苷能明显降低CIA大鼠血清中TNF-α、IL-Iβ和IL-6水平,减轻滑膜组织的病理损伤,表明其对治疗类风湿关节炎有一定作用.     

穿山龙总皂苷对佐剂性关节炎大鼠免疫调节作用的实验研究

目的:研究穿山龙总皂苷对佐剂性关节炎大鼠(AA)的免疫调节作用。方法:将大鼠随机分为对照组、阳性药物组和实验组。连续灌胃给药8天,停药后处死大鼠,计算胸腺指数、脾指数,观察血清和关节液IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平,观察ConA诱导的脾细胞增殖反应。结果:不同剂量穿山龙总皂苷治疗能使AA大鼠降低的胸腺指数基本恢复到正常,也能使AA大鼠明显增大的脾指数显著降低。高、中、低剂量组给药大鼠的血清、关节液内炎性细胞因子IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平较AA模型组明显降低(P<0.01),ConA诱导的脾细胞增殖反应明显提高。结论:穿山龙总皂苷有良好的抗炎及免疫调节作用,其机理部分可能与调节机能依赖性的双向免疫及抑制炎性细胞因子产生有关。     

不同生境下多花黄精无机元素含量分析

目的:比较不同生境下多花黄精无机元素含量的差异.方法:采用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定多花黄精中15种元素的含量,采用紫外分光光度法检测多花黄精的多糖含量,应用相关性分析、隶属函数法和主成分分析法,对不同生境多花黄精无机元素营养价值进行评价.结果:多花黄精样品中Mg、P、K、Ca、Mn、Fe、Zn含...     

穿山龙配方颗粒质量标准研究

目的：建立穿山龙配方颗粒质量标准。方法：采用薄层色谱法（TLC）对穿山龙配方颗粒进行定性鉴别;用高效液相色谱法（HPLC）对其中的薯蓣皂苷进行含量测定。结果：薄层色谱鉴别特征斑点清晰,专属性强;薯蓣皂苷进样量在0.6048～7.5600μg 与峰面积线性关系良好,r ＝0.9999,平均回收率为97.46％,RSD 为1.84％（n ＝6）。结论：本试验建立的定性及定量方法简单可行、重复性好,能有效地控制穿山龙配方颗粒的质量。     

中药穿山龙新的药理作用及其有效部位的实验研究

目的：本实验首次通过探索性、创新性研究探讨中药穿山龙降低血尿酸的药理活性并筛选其有效部位。方法：对穿山龙的不同溶剂提取物进行筛选,结果显示穿山龙水提取物降低血尿酸的作用最为显著,采用D101型大孔吸附树脂柱进一步分离,将洗脱部分通过药效学指标筛选,得出穿山龙降尿酸有效部位。结果：水提取物30%乙醇洗脱部分可显著降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平。结论：穿山龙水提取物的30%醇洗脱部分为降低血尿酸的有效部位。     

穿山龙治疗急性痛风性关节炎有效部位的实验研究

目的：确定穿山龙治疗大鼠急性痛风性关节炎的有效部位。方法：应用微晶尿酸钠诱导大鼠急性痛风性关节炎和氧嗪酸钾诱导小鼠高尿酸血症模型,依据抗炎、镇痛、降尿酸等药效学指标的筛选,确立穿山龙抗急性痛风性关节炎的有效部位。结果：30%乙醇洗脱液可显著降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平、明显改善大鼠关节滑膜组织的病理形态学改变、减少扭体次数。结论：穿山龙水提取物的30%醇洗脱部分为其治疗急性痛风性关节炎的有效部位。     

火焰原子吸收光谱法测定山药中微量元素含量

目的:使用火焰原子吸收光谱法测定山药药材中微量元素含量。方法:利用浓硝酸-高氯酸(4∶1)混合溶液进行样品消解,采用火焰原子吸收光谱法对6种不同来源的山药样品中Mn、Fe、Cu、Zn、Mg元素含量进行了测定。结果:山药药材中富含微量元素,其含量高低依次为Mg>Fe>Cu>Zn>Mn。5种元素含量测定方法的回收率在95.50%～103.50%。结论:该方法灵敏、快速、稳定,可供山药微量元素含量测定。     

RP-HPLC同时测定穿山龙药材中原薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷和伪原薯蓣皂苷的含量

目的:建立测定产地黑龙江大兴安岭穿山龙供试品中水溶性皂苷含量的方法.方法:采用RP-HPLC,Diamonsil (钻石)C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温30℃.结果:原薯蓣皂苷浓度在50 ～ 500 mg·L-1、甲基原薯蓣皂苷在35 ～350 mg·L-1、伪原薯蓣皂苷质量浓度在15 ～ 150 mg·L-1与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999(n =6).方法学考察中各项实验结果的RSD均＜3％.结论:方法重复性好,具有良好的回收率,稳定性佳,为穿山龙药材的质量控制提供了参考.     

分散固相萃取-气相色谱质谱联用法测定穿山龙中23种农药残留

 目的 本实验建立了穿山龙中有机氯,有机磷,拟除虫菊酯类等23种农药残留的（QuEChERS提取及其气相色谱质谱分析法。方法 样品经乙腈提取并浓缩后加入N-丙基乙二胺(PSA、石墨化碳黑(GCB进行分散固相萃取净化,气相色谱-电子轰击离子源质谱分时段选择离子监测技术测定与确证,外标法定量。结果 在5、20和50 μg·kg^-13个添加水平下所有农药的平均回收率在 80.2%～118.5%,RSD在1.6%～8.5%,可以满足农药残留分析的要求。结论 方法简便、快速,可应用于穿山龙药材中农药多残留的检测。     

山药及其麸炒品的多糖部位对小鼠免疫功能的影响

目的比较生山药及麸炒山药多糖部位对免疫低下小鼠免疫功能调节作用的差异。方法采用碳粒廓清法及血清溶血素试验法,比较生山药及其麸炒品不同提取方法所得的多糖对小鼠非特异性和特异性免疫功能的影响。结果山药经麸炒后冷浸提取的多糖在增加碳粒廓清指数K,增强单核巨噬细胞的吞噬功能及提高溶血素水平方面较生品有更强的作用。结论山药经麸炒后冷浸提取的多糖较生品具有更强的增强细胞免疫和体液免疫的作用,与麸炒山药临床用于补益方剂用法相符合,为进一步阐明麸炒山药的炮制机理奠定了实验基础。     

穿山龙提取物抗急性痛风性关节炎的尿液代谢组学分析

目的:对急性痛风性关节炎大鼠给予穿山龙提取物后的尿液代谢组学进行研究,寻找相关的潜在生物标志物及相关代谢通路。方法:采用尿酸钠(MSU)诱导的急性痛风性关节炎大鼠模型,将SD大鼠40只随机分为空白组、穿山龙提取物组、模型组、穿山龙提取物干预组,每组10只。给药组灌胃给予穿山龙提取物,给药剂量0. 48 g·kg~(-1),每天1次,连续5 d,于末次给药后,收集大鼠尿液,运用UPLC-Q-TOF/MS结合模式识别方法分析,采用正、负离子扫描模式下电喷雾离子源,数据采集范围m/z 100～1 500,采用全扫描方式。结果:鉴别出了12个共同的潜在生物标志物,分别为肌氨酸,二甲基甘氨酸,脱氧胞苷,尿酸,5-HT,L-胱硫醚,4-吡哆酸,脱氧尿苷,褪黑激素,5-甲氧基色胺,富马酸和胞苷。与空白组比较,穿山龙提取物组中这12个潜在生物标志物均明显下调;与模型组比较,在穿山龙提取物干预组的潜在生物标志物中,有10个上调,2个下调,穿山龙提取物对肌氨酸,尿酸,L-胱硫醚,4-吡哆酸,脱氧尿苷,5-甲氧基色胺,胞苷,二甲基甘氨酸,褪黑激素,富马酸这10个标志物均表现出了纠正异常表达的趋势;与急性痛风性关节炎相关性最强的代谢通路为半胱氨酸和甲硫氨酸代谢、色氨酸代谢。结论:穿山龙提取物可能是通过促进半胱氨酸和甲硫氨酸代谢中胱硫醚向半胱氨酸的转化水平,上调色氨酸代谢中褪黑激素,实现对痛风性关节炎的防治作用。     

山药总皂苷提取工艺研究

目的：优化山药总皂苷提取工艺。方法：采用UV法和HPLC法测定山药总皂苷和薯蓣皂苷,以二1者的含量为指标,通过单因素循环试验和正交设计试验考察乙醇体积分数、溶剂倍量、提取时间和提取次数对提取过程的影响,优化提取工艺。结果：确定最佳提取工艺为30倍量60%的乙醇回流提取三次,每次2h,总皂苷的含量为2.174mg·g-1,薯蓣皂苷的含量为0.790mg·g-1。结论：优化后的提取工艺稳定、可行,适用于山药总皂苷的提取。