褪黑素对淋巴细胞功能的影响

本文采用~3H-TdR掺入法和ConA活化脾细胞检测IL-2的方法观察了松果腺褪黑素(MT)对ConA和LPS诱导小鼠脾T_1,B淋巴细胞增殖反应及ConA诱导大鼠脾淋巴细胞产生IL-2的影响。结果表明,MT0.01～1μmol/L和0.01～10μmol/L分别促进ConA和LPS诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应,ATl～10μmol/L对ConA诱导大鼠脾淋巴细胞产生IL-2亦有促进作用,但MT对未经ConA或LPS活化的淋巴细胞功能则无明显影响,提示丝裂原活化的淋巴细胞可能是MT作用的靶细胞之     

rhIL-10对银屑病动物模型的治疗作用及免疫功能的影响

目的　研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法　用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋巴细胞增殖、NK细胞活性及细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1、TNF α)水平。结果　rhIL 10 (5 ,2 0 ,80μg·kg-1·d-1,sc)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用 ,促进小鼠尾鳞片颗粒层的形成。对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及IL 2、IFN γ产生有抑制作用 ;对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNF α具有抑制作用 ;对NK细胞活性有抑制作用 ;对LPS诱导B淋巴细胞增殖有促进作用。结论　rhIL 10可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化 ,并参与抗炎与免疫调节过程而发挥治疗银屑病动物的作用     

螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后抗肿瘤及免疫活性的研究

比较螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后体内外抗肿瘤及免疫活性.采用MTT比色法研究药物在体外对人肿瘤细胞株的抑制作用,促进正常小鼠脾淋巴细胞的增殖活性以及对荷瘤小鼠NK和CTL细胞活性的影响.采用移植性肿瘤实验方法考察了药物对小鼠S180肉瘤的抑制作用.结果显示,螺旋藻多糖（NPSP）对肿瘤细胞株几乎无细胞毒作用,硫酸酯化螺旋藻多糖（SNPSP）对肿瘤细胞株具有显著的细胞毒作用,其中对SMMC-7721人肝癌细胞株抑制率最高达50%.NPSP50 mg/kg对小鼠S180肉瘤无抑制,相同剂量的SNPSP对小鼠S180肉瘤的抑制率达35.42%.NPSP具有促进脾淋巴细胞增殖作用,但对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应无促进作用,SNPSP促进脾淋巴细胞增殖作用较NPSP增强,同时对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应也具有明显的促进作用.NPSP和SNPSP均能促进荷瘤小鼠NK细胞和CTL细胞活性,其中SNPSP促进CTL细胞活性较NPSP增强.     

金刚胺及其异构体2-氨基金刚烷抑制淋巴细胞增殖,影响Lyt-2~+T细胞而对L3T4~+T细胞无作用

金刚胺(AmTd)是临床防治甲型流感病毒感染的有效药物。应用体外实验研究AmTd 及其类似物2-氨基金刚烷(2-NH_2-Adam)、1-硝基金刚烷(1-NO_2-Adam)及2-硝基金刚烷(2-NO_2-Adam)对丝裂原诱导的小鼠淋巴细胞增殖、IL-2诱导的 T 杀伤细胞株 CTLL 细胞增殖以及对 T 细胞亚群的影响。结果表明,AmTd 及其异构体2-NH_2-Adam 可明显抑制 T 细胞丝裂原 ConA 和 B细胞丝裂原 LPS 诱导的淋巴细胞增殖及 IL-2诱导的 CTLL 细胞增殖。对上述细胞增殖反应的50%抑制率(IC_(50))AmTd 分别为0.14,     

雷帕霉素对小鼠脾淋巴细胞走后门殖及产生细胞因子的影响

目的：研究雷帕霉素（RAPA）对ConA、PHA、LPS诱导的小鼠脾细胞增殖反应,混合淋巴细胞反应,脾T淋巴细胞亚型及细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α含量的影响。方法：MTT法测定淋巴细胞增殖实验、混合淋巴细胞反应,流式细胞法测定脾T淋巴细胞亚型,结晶紫染色法测定TNF-α,E-LASI法测定IL-2,IFN-γ。结果：RAPA可显著抑制ConA、PHA和LPS诱导的小鼠脾细胞增殖和混合淋巴细胞反应（MLR）,对小鼠脾T淋巴细胞亚型无明显影响。RAPA还可明显抑制小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2,IFN-γ,但对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α无效。结论：RAPA抑制小鼠免疫功能的作用机制与CsA不同。     

芍芪多苷对迟发型变态反应小鼠细胞免疫功能的影响

目的探讨在不同免疫状态下,芍芪多苷(Shaoqid-uogan,SQDG)对迟发型变态反应(DTH)小鼠细胞免疫功能的作用。方法采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导小鼠DTH模型及环磷酰胺(Cy)诱导小鼠免疫低下或亢进模型。SQDG予小鼠连续灌胃7d。MTT法检测ConA诱导的小鼠胸腺T淋巴细胞增殖,小鼠胸腺细胞增殖法检测ConA诱导的小鼠胸腺T淋巴细胞培养上清中白细胞介素2(IL-2)的活性。结果在小鼠DTH模型,SQDG(120mg·kg-1)可降低耳肿胀、胸腺指数、ConA诱导的胸腺T淋巴细胞增殖反应以及ConA诱导的胸腺T淋巴细胞培养上清中IL-2的活性。DNCB初次致敏当日腹腔注射(ip)Cy(150mg·kg-1)可以造成DTH低下模型,致敏前3 d ip Cy(250mg·kg-1)可造成DTH亢进模型;SQDG(60和120mg·kg-1)能明显上调DTH低下模型小鼠耳肿胀、ConA诱导的小鼠胸腺T淋巴细胞增殖及小鼠胸腺T淋巴细胞培养上清中IL-2的水平;且能明显下调DTH亢进模型小鼠上述指标的水平。结论SQDG对小鼠细胞免疫具有双向调节的作用。     

淋巴细胞活性染色质诱导系统性红斑狼疮样小鼠模型

目的建立活性染色质诱导系统性红斑狼疮(SLE)样小鼠模型。方法从ConA活化的BALB/c小鼠脾淋巴细胞中提取活性染色质,分别于d 0、d 14、d 21和d 28以染色质100μg在BALB/c小鼠尾根部及背部皮内注射免疫4次,诱导SLE样小鼠模型。目测半定量尿蛋白试纸法检测动物的尿蛋白变化,HE染色法检查动物的肾脏、脾脏病理改变,计算动物的胸腺和脾脏指数,MTT法检测ConA和LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖反应,全自动生化分析仪检测血清中Crea和BUN水平,ELISA法检测小鼠血清中ANA、抗dsDNA、IgG1、IgG2a、IL-10、IFN-γ水平,流式细胞术检测脾脏T、B淋巴细胞亚群变化。结果诱导模型小鼠尿蛋白水平升高,出现肾小球肾炎、脾脏增生等病理改变;脾脏指数明显升高,LPS诱导的B淋巴细胞增殖反应增强;血清Crea、BUN、ANA、抗dsDNA、IgG1、IgG2a、IL-10和IFN-γ水平明显升高;脾脏CD19+、CD19+CD21+、CD19+CD23+、CD19+IgD+B淋巴细胞亚群百分比明显升高,CD4+CD25+T淋巴细胞百分比明显下降。结论 ConA活化淋巴细胞的染色质免疫同系BALB/c小鼠成功诱导了SLE样小鼠模型,其血清学、组织病理学及免疫学方面特征与人类SLE临床特征表现相似。     

乙双吗啉对有丝分裂原诱导的小鼠淋巴细胞增殖反应的抑制作用

当浓度为1.56mg/L时,乙双吗啉就可明显抑制LPS诱导的体外小鼠淋巴细胞增殖反应,其作用随浓度的增高而加强。当此药浓度增大到6.25mg/L时,ConA和PHA诱导的体外小鼠淋巴细胞增殖反应才开始出现明显抑制。表明乙双吗啉对B细胞增殖反应的抑制作用强于对T细胞增殖反应。乙双吗啉对淋巴细胞无非特异细胞毒作用。     

黄芪皂甙Ⅳ对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞功能的影响(英文)

目的:探讨黄芪皂苷Ⅳ(ASI)对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的影响.方法:采用MTT法检测T、B淋巴细胞的增殖;采用分光光度计测定法检测抗体活性;IL-1活性用胸腺细胞增殖法测定;TNF-α活性用L929细胞杀伤法测定.结果:1)ASI50-200mg/kg ig 7天能够促进T淋巴细胞增殖和抗体生成,而ASI 50-100mg/kg能够促进B淋巴细胞增殖,但是220mg/kg对B淋巴细胞增殖无影响;2)ASI体外仅在100nmol/L对T、B淋巴细胞有促进作用;3)ASI 1 nmol/L可以促进腹腔巨噬细胞分泌IL-1,而100-1000nmol/L则抑制腹腔巨噬细胞分泌IL-1;4)ASI体外可以抑制LPS刺激或无LPS刺激下的腹腔巨噬细胞分泌TNF-α.结论:ASI能够促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖和抗体生成,同时可以抑制腹腔巨噬细胞体外分泌IL-1和TNF-α.     

五味子宁神口服液的免疫调节作用研究

目的:研究五味子宁神口服液(WOL)的免疫调节作用.方法:采用测定小鼠碳粒廓清率、二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠迟发型超敏反应、血清溶血素抗体IgM水平,以及测定ConA和LPS诱导的脾T、B淋巴细胞的增殖转化实验(MTT法).结果:WOL提高小鼠血清溶血素抗体IgM水平及免疫功能低下小鼠的吞噬指数、吞噬系数、耳肿胀度、脾和胸腺指数,增强ConA和LPS诱导的脾T、B淋巴细胞增殖转化反应.结论:WOL对小鼠具有一定的免疫增强作用.     

伤疡愈软膏在伤口愈合中对细胞生长水平的影响

目的:通过对用药各个时期伤口渗出组织液细胞生长水平的测定,探讨伤疡愈软膏在促进伤口愈合中对细胞的影响。方法:通过台盼蓝染色计数法、MTT细胞数测定法的比对及Con A和LPS诱导的细胞增殖反应。结果:伤疡愈软膏能增加细胞增生,促进B细胞、T细胞淋巴细胞增殖。结论:伤疡愈软膏具促进伤口内细胞增殖,促伤口愈合的作用。     

当归多糖组分AP-3对不同淋巴细胞亚群的作用

目的观察当归多糖组分AP-3对不同淋巴细胞亚群的作用。方法免疫磁珠法制备T、B细胞亚群;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞术观察CD4+T细胞亚群比例的变化。结果在30~300μg/ml范围内,AP-3能显著促进小鼠脾淋巴细胞、巨噬细胞、混合淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖反应,而对B细胞增殖有一定的抑制作用;显著增加培养的脾细胞中CD4+T细胞亚群的比例。结论当归多糖具有独特的免疫调节特性,活化巨噬细胞、T细胞以及辅助性T细胞(Th细胞),但对B细胞有一定的抑制作用。     

Lymphocyte proliferation assays as potential biomarkers for toxicant exposures

Recently there has been interest in developing assays that can be used as indicators (biomarkers) of exposure to toxic agents. We have been exploring the potential utility of three lymphocyte proliferation assays [the responses of B lymphocytes to the mitogen lipopolysaccharide (LPS), the responses of T lymphocytes to the mitogen concanavalin A (ConA), and the responses of T lymphocytes to antigenic stimuli in a mixed lymphocyte culture (MLC) assay] as biomarkers of toxicant exposure. Studies were initiated to assess the applicability and specificity of these assays and to investigate the mechanisms by which toxicants alter lymphocyte proliferation. All studies were performed using cells isolated from Fischer 344 rats. To assess applicability, mitogen assays were performed using in vitro exposures to eight different toxicants: hydroquinone, benzoquinone, Aroclor 1254, styrene oxide, and the salts of mercury, cadmium, chromate, and nickel. In vitro concentrations spanned five orders of magnitude (100 to 0.01 mg/l). At the lowest concentration tested, all eight compounds induced changes in at least one mitogen assay, indicating that these assays may be applicable to a wide range of toxicants. Variations of the ConA and MLC assays were used to test for specificity. In both assays, splenocytes taken from rats exposed in vivo to either chromate or to cadmium responded differently when the cells were cocultured with exogenously added chromate or cadmium ions, indicating that it may be possible to detect exposure to a specific toxicant by performing modified lymphocyte proliferation assays. In the mechanistic studies, splenocytes from cadmium and chromate-treated rats altered the ConA-induced proliferation of cocultured syngeneic cells. In addition, the antigenicity of splenocytes isolated from cadmium-treated rats was enhanced when these cells were used as stimulators for allogeneic splenocytes. The results of these studies indicate that lymphocyte proliferation assays may be useful for detecting exposure to a wide range of toxicants and that variations of these assays may be useful for implementing immunologically based tests for detecting exposures to specific chemicals.     

青藤碱治疗类风湿性关节炎免疫作用和机制

目的研究青藤碱(sinomenine,SIN)对动物免疫功能和细胞凋亡的影响及对人滑膜细胞增殖影响。方法 MTT法测定脾淋巴细胞增殖反应及滑膜细胞增殖反应。采用流式细胞术测定脾T淋巴细胞亚型。流式细胞仪和DNA Ladder测定脾淋巴细胞凋亡。结果SIN在体给药抑制LPS及PMA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖。SIN离体给药可抑制ConA，LPS和anti-CD3 mAb诱导小鼠脾淋巴细胞增殖；SIN可使AA大鼠升高的CD4⁺/CD8⁺比值降低。SIN体外使小鼠脾淋巴细胞早期凋亡百分比显著增加。SIN对人类风湿关节炎滑膜细胞增殖也有抑制作用。结论 SIN对小鼠和类风湿关节炎大鼠脾淋巴细胞免疫功能具有抑制作用，诱导细胞凋亡可能是SIN免疫抑制作用的机理之一。     

Induction of proliferation and cytokine production in human T lymphocytes by lipopolysaccharide (LPS)

Lipopolysaccharide (LPS), also known as endotoxin, is a compound of the cell wall of Gram-negative bacteria, which has been demonstrated to induce inflammatory reactions in vitro as well as in vivo, including lethal shock. A great number of different cells have been documented to be reactive to LPS, e.g. monocytes/macrophages, vascular cells, polymorphonuclear cells, and even B lymphocytes. We have now established that T lymphocytes could also contribute to an inflammatory reaction to LPS. LPS is a potent inducer of human T-lymphocyte proliferation and cytokine production. The activation of T lymphocytes by LPS requires direct cell-to-cell contact with viable accessory monocytes. This interaction was found to be MHC-unrestricted, but strongly dependent on costimulatory signals provided by B7/CD28 interactions. The frequency of responding T lymphocytes is less than 1:1000. A very exciting finding was that not only monocytes, but also CD34+ hematopoietic stem cells, which circulate in peripheral blood in very low frequency, exert essential accessory cell activity during stimulation of T lymphocytes by LPS. In contrast, the response of T lymphocytes to conventional recall antigens is not controlled by blood stem cells. These conclusions are based on the observation that depletion of CD34-positive blood stem cells resulted in a complete loss of LPS-induced T-lymphocyte stimulation. Addition of CD34-enriched blood stem cells led to a recovery of reactivity of T lymphocyte to LPS. The characteristics of T-lymphocyte activation indicate that LPS is neither active as a mitogen, or as a superantigen, or as a classical antigen, but may activate T lymphocyte through a new, so far undescribed, mechanism. Furthermore, the involvement of hematopoietic blood stem cells in the activation of T lymphocytes by LPS demonstrates a role of these cells in inflammatory and immunological events.     

杨梅素对淋巴细胞活化及增殖的影响

目的研究杨梅素(myricetin)对小鼠T细胞活化及增殖的影响,探讨其作为免疫调节药物开发的可能性并提供相关实验依据。方法无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的杨梅素预先孵育1h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆抗体双染技术,流式细胞仪检测杨梅素对小鼠CD3+T细胞CD69表达的影响;采用3H-TdR参入法检测杨梅素对淋巴细胞增殖的影响,采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测杨梅素对IL-2mRNA表达的影响。采用ELISPOT检测杨梅素对IFN-γ分泌的影响。结果杨梅素能抑制T细胞早期活化标志CD69的表达,并能抑制淋巴细胞增殖反应,同时对淋巴细胞活化后IL-2 mRNA的表达及IFN-γ的分泌也有抑制作用。结论杨梅素对淋巴细胞的活化增殖反应具有抑制作用。     

ClC-3反义寡核苷酸对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响

目的　研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法　采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果　①ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的ClC 3蛋白的表达 ;②ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖。结论　ClC 3蛋白参与了ConA诱导的T淋巴细胞的增殖过程     

黄芪多糖对免疫功能影响的体外实验研究

目的探讨黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响,为黄芪多糖的临床应用提供理论依据。方法取小鼠脾细胞,置于96孔细胞培养板中,设黄芪多糖组和空白对照组,WST-1法测细胞的增殖活性;ELISA测细胞因子IL-2、IFN-γ;流式细胞术（FCM）检测细胞表型。结果黄芪多糖组细胞增殖活性显著高于空白对照组（P〈0.01）;黄芪多糖组IL-2、IFN-γ的浓度随黄芪多糖浓度的增加而增多,在一定浓度范围内呈剂量依赖关系;黄芪多糖既能刺激B淋巴细胞增殖,也能刺激T淋巴细增殖。结论黄芪多糖可增强免疫功能,它不仅能提高体液免疫功能,而且能提高细胞免疫功能。     

白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用初探

目的探讨白芷提取物对地塞米松致大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用的影响。方法建立地塞米松致大鼠免疫抑制模型,考察白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞的增殖活性、自然杀伤细胞（NK细胞）活性的影响。结果白芷提取物（5．0g/kg）对刀豆蛋白A（ConA）诱导脾淋巴T细胞增殖能力有升高作用,但对脂多糖（LPS）诱导脾淋巴B细胞增殖能力未见明显影响,对脾淋巴细胞的NK细胞活性也有增强作用。结论白芷提取物（5．0g／kg）曲能提高大鼠脾淋巴T细胞和NK细胞的增殖活性。