尼莫通对大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响

①目的 探讨尼莫通过大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。②方法 对实验大鼠于脑缺血前应用尼莫通进行干预,在脑缺血再灌注不同时间内,用免疫组化法检测凋亡相关基因ｃ－ｆｏｓ及ｂｃｌ－２蛋白表达的变化。③结果 尼莫通组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小（ｔ＝２．７９,Ｐ〈０．０５）;尼莫通组脑缺血再灌注时皮层和基底核区ｃ－ｆｏｓ的表达明显下降（ｔ＝４．８４,６．１４,Ｐ〈０．００１）,而ｂｃｌ－２蛋白的表达明     

川芎嗪对脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的：探讨川芎嗪对脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法：对实验大鼠于脑缺血前应用川芭嗪进行干预,然后采用免疫组化法检测脑缺血再灌注不同时间内凋亡相关基因ｃ－ｂｃｌ－２蛋白表达的变化。结果：川芎嗪组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小,川芎嗪组脑缺血再灌注时皮层和基底节区ｃ－ｆｏｓ的表达明显下降,而ｂｃｌ－２的表达明显增高。结论 川芎嗪可抑制脑缺血再灌注时细胞凋亡的发生,具有神经保护作用。     

全脑缺血大鼠原癌基因c-fos表达及小檗碱的影响

采用结扎大鼠双侧颈总动脉合并低血压后再恢复供血造成大鼠脑缺血再灌注模型，运用斑点杂交技术，观察大鼠全脑缺血再灌注中海马ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达变化，并观察小檗碱的作用。     

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

观察大鼠海马ＣＡ－１区缺血再灌注损伤后ＭＤＡ值和ＡＴＰａｓｅ活性的动态变化及川芎嗪的保护作用。方法：Ｗｉｓｔａｒ大鼠双侧颈总动脉夹闭２０ｍｉｎ;造成不完成性脑缺血,松夹即为再灌注。大鼠随机分为假手术对照组（ＳＯＣ）、缺血再灌注组（ＩＲ）和川芎嗪治疗组（ＴＭＰ）。     

尼莫通对脑缺血再灌注细胞凋亡相关基因表达影响

①目的探讨尼莫通对脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。②方法对实验大鼠于脑缺血前应用尼莫通进行干预,然后采用免疫组化法检测脑缺血再灌注不同时间内凋亡相关基因c-los及BCL-2蛋白表达的变化。③结果尼莫通组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小,脑缺血再灌注时皮质和基底核区c-los的表达明显下降,而BCL-2的表达明显增高（t=2．482,x^2=229．939～719．966,P〈0．05）。④结论尼莫通可抑制脑缺血再灌注时细胞凋亡的发生,具有神经保护作用。     

大鼠小脑缺血再灌注损伤的细胞凋亡航尼莫通的保护作用

目的：探讨小脑缺血再灌注损伤神经元的死亡方式及尼莫通的保护作用。方法：将实验用ＳＤ大鼠１５只分为三组，即缺血再灌组、药护组、正常对照组。采用四血管闭塞法制作全脑缺血再灌注动物模型，再灌后４８小时取小脑，石蜡包埋切片。应用末端转移酶介导的缺口末端标记法原位检测凋亡细胞。药护组缺血前３０分钟腹腔注射尼莫通。结果：在小脑皮质及小脑核均见反应阳性的凋亡细胞，药护组的凋亡细胞数显著少于缺血组。结论：细胞凋亡     

川芎嗪对脑缺血再灌注后大鼠大脑皮质COX-2表达的影响

①目的 探讨川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注后COX-2表达的影响.②方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫印记、H-E染色和神经行为相结合的方法,观察缺血再灌注侧大脑皮质内COX-2的表达、脑组织的病理变化及神经功能的变化.③结果 与缺血再灌注组(I2h/R24h)比较,川芎嗪组的COX-2的表达量明显下降,脑组织的病理损伤和神经异常行为明显减轻.④结论 川芎嗪可抑制COX-2的表达,减轻缺血区脑组织的病理损伤及明显改善神经症状,对脑缺血再灌注损伤有保护作用.     

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注后线粒体功能的影响

目的:探讨川芎嗪对局灶性脑缺血再灌注后大鼠线粒体膜流动性和线粒体膜脂质堆积密度的影响,从线粒体角度探讨其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组,即假手术组、模型对照组、川芎嗪组、尼莫地平组,每组10只。建立脑缺血再灌注模型,川芎嗪组腹腔注射川芎嗪注射液40mg/kg。结果:川芎嗪组线粒体膜η,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);川芎嗪组线粒体膜脂质堆积密度显著高于模型组(P<0.01)。结论:川芎嗪能提高大鼠脑缺血再灌注损伤时脑组织线粒体膜脂流动性,可显著提高脑缺血再灌注大鼠脑组织线粒体膜脂质堆积密度。     

脑缺血后c-fos原癌基因表达

近年研究表明 ,缺血性脑组织损伤有缺血性坏死 (necrosis)和凋亡 (apoptosis) 2种形式。脑缺血时伴有多种凋亡相关基因和蛋白的表达 ,提示细胞凋亡机制参与了缺血性脑损伤的形成。凋亡相关基因通常分为 2类 :一类是促凋亡基因 ,如c fos、c jun、c myc、p5 3、bax、fas等 ;另一类是抗凋亡基因 ,如bcl 2、bcl xl等。而原癌基因 ( proto oncogene)是近10余年来生命科学的一项重大发现 ,当今对原癌基因的研究已远远超出了肿瘤学这一领域。在脑缺血研究中 ,已发现多种原癌基因的异常表达 ,如c fos基因族 ,包括c fos、fos B、fra 1和fra 2 ;jun基…     

大鼠脑缺血—再灌注损伤的实验研究及川芎嗪的保护作用

目的 观察大鼠海马CA1区缺血－再灌注损伤后MDA值和ATPase活性的动态变化及川芎嗪的保护作用。方法 Wistar大鼠双侧颈总动脉夹闭20min；造成不完全性脑缺血，松夹即为再灌注。大鼠随机分为假手术对照组（SOC）、缺血－再灌注组（IR）和川芎嗪治疗组（TMP）。结果 ①IR组MDA值再灌注6h后恢复至对照水平，川芎嗪能显著降低异常增高的MDA值（P＜0．01）。②IR组ATPase活性再灌注24h后恢复至对照水平，川芎嗪能明显升高酶活性（P＜0．01），且能缩短酶活性恢复时程。结论 川芎嗪能减少大鼠脂质过氧化，使ATPase活性回升，减轻海马结构缺血－再灌注损伤。     

EFFECTS OF PHYCOCYANIN ON EXPRESSION OF CytC mRNA AND CASPASE-3 mRNA AFTER FOCAL CEREBRAL ISCHEMIA／REPERFUSION IN RATS

Objective To study the effects of phycocyanin on the expression of Cytochrome C (CytC) genes and Caspase-3 genes after focal cerebral ischemia/reperfusion in rats. Methods A rat middle cerebral artery occlusion (MCAO)/reperfusion model was produced using the intraluminal filament method. The rats were divided into three groups: sham operation group, model control group and phycocyanin group. After MCAO, the neurobehavioral testing of all rats was made. The infarction area was evaluated with the method of 2,3,7-triphenylt-etrazolium chloride (TTC) staining. The expression of CytC mRNA and Caspase-3 mRNA were determined by in situ hybridization. Results In the sham operation group and the model control group, there was only a few CytCpositive cells were seen in the normal cerebral tissue. In the model control group, the upregulation of CytC mRNA began 6h after ischemia, reached a maximum at 12h (cortex)-24h (striatum) , then subsided gradually, but still in high level. In the phycocyanin group, CytC-positive cells were also mainly in cortex and striatum, but the number of the cells was significantly lower than the number of the model control group. The time-phase pattern of CytC mRNA in the phycocyanin group was similar to the pattern of the model control group. In the sham operation group and the model control group, there was only a few Caspase-3-positive cells were seen in the normal cerebral tissue. In the model control group, the upregulation of Caspase-3 mRNA began 6h after ischemia, reached a maximum at 24h and subsided at 48h, but still in high level. In the phycocyanin group, Caspase-3-positive cells were also mainly in the penumbral area, but the number of the cells were significantly lower than the number of the model control group. The time-phase pattern of Caspase-3 mRNA in the phycocyanin group was similar to the pattern of the model control group. Conclusion The over-expression of CytC mRNA and Caspase-3 mRNA might play a key role in ischemic cerebral injury after MCAO. Phycocyanin could inhibit the over-expression of CytC mRNA and Caspase-3 mRNA in the cerebral cortex, and might play an important role in the protection of ischemic neurons.     

脑缺血再灌注后生长相关蛋白和突触素表达及其意义

（１）目的 研究脑缺血再灌注后生长相关蛋白－４３（ＧＡＰ－４３）和突触素ｐ３８表达的变化规律,探讨中枢神经损伤后修复的可塑性。（２）方法 成年健康雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３６只,随机分为实验组和对照组。采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注大鼠模型,应用免疫组织化学方法观察脑缺血再灌注后ＧＡＰ－４３和突触素ｐ３８的表达。（３）结果 脑缺血再灌注６ｈ后,ＧＡＰ－４３表达逐渐增高,第７天达高峰,以后逐渐降低,     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑缺血半影区的界定

①目的 界定大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑缺血半影区的范围。②方法 应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型，氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、甲苯胺蓝染色、焦油紫染色和苏木精-伊红染色界定脑缺血半影区和中心区。③结果 脑缺血再灌注2h，缺血病灶位于纹状体外侧区和额顶叶皮质下部，随着缺血再灌注时间的延长病灶范围逐渐扩大；再灌注1～2d最大，波及纹状体内侧区和额顶叶皮质上部以及梨状区皮质，之后逐渐缩小；再灌注7～14d恢复到再灌流2h的水平。缺血病灶与周围正常脑组织之间有一形态和结构过渡区，该区的着色和细胞形态结构界于病灶和正常脑组织之间，即缺血半影区。缺血中心区神经细胞明显减少，呈现坏死特征；缺血半影区细胞主要呈现核固缩、染色质凝聚等凋亡特征。④结论 脑缺血再灌注缺血中心区位于纹状体外侧区和额顶叶皮质下部，缺血半影区位于纹状体内侧区和额顶叶皮质上部以及梨状区皮质。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后β-淀粉样蛋白的表达

①目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后 β 淀粉样蛋白 (β AP)在梗死区的表达。 ②方法　应用免疫组织化学方法观察大鼠大脑中动脉缺血再灌注后存活 6h、1d、2d、3d、7d、14d不同时间 β AP的表达。 ③结果　缺血再灌注后 1d ,β AP在梗死区及其周围表达开始增强 ,7d时达高峰 (F =92 .6 3,q =5 .2 1～ 2 5 .87,P <0 .0 1)。④结论　β AP在脑缺血再灌注损伤区表达增多 ,提示β AP在脑缺血损伤的病理改变中具有重要作用     

肌苷对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和卡配因基因表达的影响

①目的　研究肌苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和卡配因基因表达的影响 ,探讨肌苷的神经保护作用机制。②方法　取成年健康雌性SD大鼠 6 8只 ,随机分为治疗组和对照组 ,每组再随机分为缺血1.5h再灌注 2h、6h、12h、1d、2d、3d、7d、14d组 (n =4 ) ,另外 4只为假手术组。应用线栓法建立SD大鼠大脑中动脉阻塞 (MCAO)再灌注模型 ,腹腔注射肌苷注射液 (10 0mg/kg) ,原位末端标记 (TUNEL)和原位杂交技术分别观察大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和卡配因mRNA表达。③结果　脑缺血再灌注后 2h皮质区与纹状体区即出现凋亡细胞 ,并逐渐增加 ,皮质区 1d达高峰 ,纹状体区 2d达高峰 ,之后逐渐减少 ,至 14d接近假手术组水平 ;经肌苷治疗后 ,皮质区和纹状体区凋亡神经细胞减少 ,其中再灌注 12h～ 7d较对照组有显著差异 (t=2 .5 2 5～ 8.987,P <0 .0 5 )。脑缺血再灌注后皮质区和纹状体区卡配因mRNA的表达于 2h逐渐增加 ,皮质区 12h、纹状体区1d达高峰 ,3d后逐渐降低 ,至 14d仍明显高于假手术组 ;肌苷治疗组再灌注 12h～ 14d ,其在皮质区和纹状体区表达较对照组显著降低 (t=4 .4 4 3～ 8.876 ,P <0 .0 5 )。④结论　脑缺血再灌注后肌苷使卡配因mRNA表达降低 ,神经细胞凋亡减少 ,提示肌苷具有抑制细胞凋亡和     

肌苷对大鼠脑缺血再灌注后VEGF表达的影响

①目的　研究肌苷对大鼠脑缺血再灌注后血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响 ,探讨其神经保护作用机制。②方法　成年健康雌性SD大鼠 6 8只 ,应用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注动物模型 ,随机分为假手术组 4只 ,肌苷组 32只 ,对照组 32只。肌苷组腹腔注射肌苷 (10 0mg/kg) ,对照组同步注射等量的生理盐水。采用免疫组织化学法检测肌苷对大鼠脑缺血再灌注不同时间内VEGF蛋白表达的影响。③结果　对照组在皮质区和纹状体区于脑缺血再灌注 2hVEGF开始表达 ,12h达高峰 ,持续 2 4h ,随即迅速降低。肌苷治疗组VEGF表达于缺血再灌注 2h～ 2d较对照组显著增高 (t=12 .4 5～ 2 7.78,P <0 .0 1)。④结论　肌苷对脑缺血再灌注后的保护作用可能通过上调脑组织VEGF的表达而实现的。     

大鼠脑缺血再灌注后血管内皮细胞Bcl—2和P53蛋白的表达

（1）目的 探讨了大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血管内皮细胞Bcl-2和p53蛋白表达的变化规律。（2）方法 将40只Wistar大鼠随机分为10组,采用免疫组织化学法检测假手术组和脑缺血再灌注后2h,6h,12h,1d,2d,3d,7d,14d和21d组血管内皮细胞Bcl-2和P53蛋白的表达,（3）结果 脑缺血再灌注后2缺血周围区内皮细胞Bcl-2蛋白开始表达,12h-1d达高峰,之后逐渐下降,至14d接近假手术组水平。脑缺血再灌注后6h缺血周围区P53蛋白开始表达,1-2d达高峰,之后逐渐下降,至7d与假手术组已无显著性差异。（4）结论 Bcl-2和P53蛋白参与缺血再灌注后血管内皮细胞凋亡的调节。     

肌苷对大鼠脑缺血再灌注后勿动蛋白基因表达的影响

①目的　探讨脑缺血再灌注后勿动蛋白 (Nogo A)基因表达的变化规律及肌苷对其表达的影响。②方法　成年健康雌性SD大鼠 6 0只 ,以线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型。随机分为治疗组和对照组 ,每组再随机分为缺血 1.5h再灌注 2h、12h、1d、2d、3d、7d、14d组 (n =4 ) ,另外 4只作假手术组。应用Bederson等神经功能评分法评定脑缺血再灌注后各组大鼠神经功能的恢复情况 ,原位杂交技术检测脑组织Nogo AmRNA的表达。③结果　对照组在缺血侧皮质和纹状体区Nogo AmRNA表达于 12h和 2d呈双峰增高 ,神经功能于 3d开始恢复。肌苷治疗组与对照组比较 ,Nogo AmRNA在皮质区的表达于 12h增高 ,7d下降 ,在纹状体区 12h、2d、3d增高 (t=1.93～ 14 .96 ,P <0 .0 5 ) ;神经功能于 7d恢复 ,差异有显著性 (t =2 .31,P <0 .0 5 )。④结论　肌苷可促进大鼠脑缺血再灌注后神经功能恢复 ,其作用机制可能与Nogo AmRNA表达下调有关。