McAb检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制

本文报道了McAb(4F_2)ELISA检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制。实验对227例脑囊虫病患者脑脊液进行检测,循环抗原阳性率为84.58％,其中活动型脑囊虫病患者171例,循环抗原阳性率为93.57％。56例非活动型脑囊虫病患者,循环抗原阳性率为57.14％,前者的循环抗原强度也明显高于后者。83例患有其它中枢神经系统疾病的患者,1例阳性,阴性符合率为98.80％。本试验方法简便,结果客观,对脑囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高、特异性强。     

IFAT和McAb—LAT诊断囊虫病的诊断

本文采用猪囊尾蚴冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）和抗猪囊尾蚴单克隆抗体乳胶凝集试验（ＭｃＡｂ－ＬＡＴ）对囊虫病患者进行特异性抗体和抗原的检测，囊虫病患者抗体检出率为８３．７１％，分型抗体检测，混合型及脑型检出率明显高于皮肌型（Ｐ〉０．０１）；患者循环抗原的检出率为７３．０５％，脑型患者囊虫活动期的循环抗原的阳性率明显高于囊虫钙化期（Ｐ〈０．０１），药物治疗３个月以上患者循环抗原的阳性率降为     

IFAT和McAb-LAT诊断囊虫病的研究

本文采用猪囊尾蚴冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）和抗猪囊尾蚴单克隆抗体胶乳凝集试验（ＭｃＡｂ－ＬＡＴ）对囊虫病患者进行特异性抗体和抗原的检测，囊虫病患者抗体检出率为８３．７１％，分型抗体检测，混合型及脑型检出率明显高于皮肌型（Ｐ＜０．０１）；患者循环抗原的检出率为７３．０５％，脑型患者囊虫活动期的循环抗原的阳性率明显高于囊虫钙化期（Ｐ＜０．０１），药物治疗３个月以上患者循环抗原的阳性率降为４４．１１％。ＩＦＡＴ和ＭｃＡｂ－ＬＡＴ在囊虫病临床诊断中具有较高价值，循环抗原的检测在脑型囊虫病活动期诊断和疗效考核中具有重要意义     

中枢神经系统疾病中弓形虫感染的检测研究

目的 了解中枢神经系统疾病尤其是脑囊中病患者中弓形虫感染情况,研究弓形虫抗体、抗原检测方法的效果和意义。方法 应用ELISA和IFAT抗体检测方法及单克隆抗体（4C10、1E9）夹心ELISA抗原检测方法对270例脑囊虫病、154例疑似脑囊虫病、88例原发性癫痫患者和144例健康人群血清进行弓形虫抗体、抗原检测和比较。结果 ELISA和IFAT检测各组人群抗弓形虫抗体阳性率分别为15．93％、13．64％、12．50％和6．25％、14．07％、13．64％、14．77％和5．56％。各 组弓形虫抗原阳性率分别为2．22％（6／270）、3．25％（5／154）、2．27％（2／88）、0．00％（0／144）。13例循环的阳性者,其抗体滴度为1：1600者1例,等于或高于1：3200者12例。结论 中枢神经系统疾病在脑囊中病患者中弓形虫感染率明显高于健康人群,提示部分脑囊虫病患者并发或继发了弓形虫感染,或脑弓形虫感染误诊为脑囊虫病或原发性癫痫病;与IFAT相比,ELISA检测抗弓形虫抗体较客观、易于定量;当患者血清中抗弓形虫抗体滴度等于或高于1：1600时,提示有弓形虫现症感染的可能性,应进一步进行弓形虫抗原、DNA或其他病原学检查;单克隆抗体（4C10、1E9）夹心ELISA可应用于弓形虫感染的诊断。     

广西中枢神经系统疾病患者囊虫感染调查及流行病学分析

目的了解广西壮族自治区中枢神经系统（CNS）疾病患者中脑囊虫感染状况,分析其流行特征。方法用ELISA法检测2000-2008年来自治区疾控中心就诊的CNS疾病患者的囊虫特异性抗体,并对抗体阳性患者进行囊虫病流行病学分析。结果2736例CNS疾病患者血清和／或脑脊液中囊虫特异性抗体阳性者403人,阳性率为14．73％。阳性者分布于全自治区55个县（市、区）,大多集中在广西南部的南宁市及周边的贵港、武呜、宾阳、横县等市县,在阳性者的构成比中,农村高于城市,男性多于女性,成人多于青少年,农民多于其他职业者;2000年以后检出的囊虫抗体阳性率整体呈逐渐下降的趋势．但流行的区域却逐渐扩大,尤其在交通、经济落后,环境卫生较差的边远山区。结论脑囊虫感染是引起广西人群CNS疾病的一个重要原因之一,在重点地区特定人群中开展囊虫病防治,是减少CNS疾病发生的重要手段。因此．今后在全自治区,尤其在边远山区仍需加强囊虫病防治工作。     

滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。     

广西中枢神经系统疾病患者囊虫感染调查及流行病学分析

目的了解广西壮族自治区中枢神经系统（CNS）疾病患者中脑囊虫感染状况，分析其流行特征。方法用ELISA法检测2000-2008年来自治区疾控中心就诊的CNS疾病患者的囊虫特异性抗体，并对抗体阳性患者进行囊虫病流行病学分析。结果2736例CNS疾病患者血清和／或脑脊液中囊虫特异性抗体阳性者403人，阳性率为14．73％。阳性者分布于全自治区55个县（市、区），大多集中在广西南部的南宁市及周边的贵港、武呜、宾阳、横县等市县，在阳性者的构成比中，农村高于城市，男性多于女性，成人多于青少年，农民多于其他职业者；2000年以后检出的囊虫抗体阳性率整体呈逐渐下降的趋势．但流行的区域却逐渐扩大，尤其在交通、经济落后，环境卫生较差的边远山区。结论脑囊虫感染是引起广西人群CNS疾病的一个重要原因之一，在重点地区特定人群中开展囊虫病防治，是减少CNS疾病发生的重要手段。因此．今后在全自治区，尤其在边远山区仍需加强囊虫病防治工作。     

检测血清、脑脊液中循环抗原用于脑囊虫病诊断及疗效评估的研究

以猪囊尾蚴囊液抗原免疫家兔制备抗体,用常规ELISA法和斑点ELISA法(Dot-ELISA分别检测脑囊虫病人血清和脑脊液(CSF)中循环抗原(CAg),结果两法用于检测的敏感性与特异性相近。以Dot-ELISA法检测,脑囊虫病人血清和(CSF中CAg检出率分别为72.2％和77.7％,特异性为93.7％。吡喹酮治疗后,CSF中循环抗原消失较血清中明显缓慢,2疗程治疗后CSF中CAg检出率仍达74％,而血清中CAg检出率为40.7％,说明常规吡喹酮治疗后脑囊虫较外周组织中囊虫死亡缓慢,因此治疗后检测CSF中CAg更能判定疗效。     

单克隆抗体胶乳凝集试验检测囊虫病循环抗原

采用抗猪囊虫单克隆抗体化学交联胶乳免疫微球，分别检测了囊虫病患者脑脊液和血甭中的循环抗原，阳性率分别为９０％（２７／３０）和７４．６３％（５０／６７）。同时对比检测了脑脊液和血清中的囊虫抗体，结果表明，脑脊液的抗体检出率明显低于血清，循环抗原的检出率则无显著性划。本实验方法检测循环抗原简便易行，有较高的特异性和敏感性，既可用于早期诊断和现症病人的确定，也可用于疗效考核。     

应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原的研究

为探讨应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原（CAg）诊断囊虫病的价值，应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人及非囊虫病人血清中的CAg，并将该方法与ELISA作了比较。检测78份囊虫病患者血清，56例显示为阳性，阳性率为71．79％。其中52份活动型脑囊虫病人血清的阳性率为80．77％；20份非活动型脑囊虫病人血清的阳性率为55％；6份单纯皮肌型囊虫病血清的阳性率为50％。检测40份健康人血清，阴性符合率为87．5％。检测10份包虫病患者血清、10份吸虫病患者血清的交叉反应率分别为20．00％和10％。10份毕支睾吸虫病人血清均为阴性反应。23例其他脑疾患（脑肿瘤、脑脓肿、脑结核、脑外伤）患者血清的交叉胍应率为11．32％。本方法的敏感性和特异性与ELISA相似。应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人血清CAg具有较高的敏感性和特异性，操作简便快速，无需特殊仪器设备，具有较好的应用前景，值得进一步研究。     

应用免疫酶染色试验检测囊虫病患者血清抗体

应用猪囊尾蚴头节冰冻切片抗原进行免疫酶染色试验(IEST)。检测已确诊囊虫病人血清88份,阳性率为93.2％;正常人血清60份,阴性符合率为95.0％;其它寄生虫病患者血清80份,交叉反应率为5.0％。重现性试验显示其检测结果稳定,重现性好。试验结果表明,IEST是一种非常敏感、特异、稳定和可靠的血清学诊断方法;且该法操作简便,取得结果快速,检测费用低廉,不需要特殊仪器,特别适合于现场应用。     

The significance of immunoblot in serodiagnosis of cysticercosis cellulosae

50, 92 and 30 samples collected respectively from cases with cysticercosis cellulosae, other parasitic diseases and normal controls were examined with SDS-gradient (5-20%) polyacrylamide-gel electrophoresis and immunoblot. The results showed that 26 KD protein band of the cysticercus antigen is highly specific for cysticercosis and no cross reaction could be seen in patients with other parasitic diseases, especially hydatid disease, and healthy controls. As we know that the cysticercus antigen usually has a high cross-reaction rate with hydatidosis by ELISA method, the positive rate of this test for cysticercosis is 70% in comparison with 80% and 76% of ELISA and CFT respectively and the difference in the figures of these three tests has no statistical significance. Our study suggested that this method is valuable in clinical diagnosis and epidemiological surveys for research work on cysticercosis cellulosae.     

猪囊尾蚴液、固相多种抗原对囊虫病免疫诊断效果评价

目的　筛选适合多种寄生虫病流行区使用的特异性较高的囊虫病免疫诊断抗原。　方法　制备猪囊尾蚴各类型液相抗原和固相抗原 ,用ELISA或IEST检测囊虫病流行区患者阳性血清抗体 ,比较各种抗原的敏感性和特异性。　结果　猪囊尾蚴全囊及囊液尿素溶性抗原与水溶性纯化抗原ELISA检测囊虫抗体的特异性差异无显著性 (P >0 .0 5 )。固相抗原IEST有敏感性好、操作简易的特点。　结论　猪囊尾蚴全囊尿素溶性纯化抗原是较理想的囊虫病ELISA诊断抗原 ,有诊断应用价值。固相石腊切片抗原IEST较为适合流行区现场或基层应用。     

检测血清和脑脊液中囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病的研究

目的：用抗血清检测脑囊虫病患者血清和脑脊液（ Ｃ Ｓ Ｆ）中囊尾蚴循环抗原（ Ｃ Ａｇ）诊断脑囊虫病。方法：用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ提纯的蛋白质分子量为 ６４ ｋ Ｄａ、５３ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 的囊尾蚴抗原分别免疫家兔,制备相应的抗血清,以双夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ。结果：抗５３ ｋ Ｄａ 抗原抗血清对 ３２ 例脑囊虫病活动型患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ 的检出率分别为９３．８％ 和９１．７％ ,１６ 例脑囊虫病非活动型患者仅１ 例 Ｃ Ｓ Ｆ Ｃ Ａｇ 阳性。 Ｃ Ａｇ 检出率明显高于用抗６４ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测的结果（ Ｐ＜ ０．０５）。结论：抗５３ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测活动型脑囊虫病患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中的 Ｃ Ａｇ 敏感性较高,特异性较强,可用于活动型脑囊虫病的诊断和疗效考核。     

应用酶联免疫吸附试验检测猪囊虫病特异抗体的研究

用猪囊虫粗抗原、B 抗原、等电聚焦技术分离的抗原组份和特异单克隆抗体亲和层析抗原,以ELSA间接法检测猪囊虫病血清抗体,结果特异性均不理想。应用单克隆抗体分析查明,在某些囊虫抗原分子上既有特异性抗原位点,又有非特异性位点。用特异单克隆抗体以ELISA抑制法检测猪囊虫病血清抗体,结果完全消除了假阳性反应,病猪血清检出率为86.41％(89/103)。     

western blot 法诊断囊虫病的应用研究

目的：探讨四种猪囊尾蚴（Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｕｓｃｅｌｕｌｏｓａｅ）特异性抗原ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１、ｃＨ１（分子量分别为２８ｋＤａ、１８ｋＤａ、１４ｋＤａ、３４ｋＤａ）混合应用诊断人囊虫病的价值。方法：以猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷酶－猪囊虫特异性抗原ｃＤＮＡ编码的融合蛋白（ｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＦＰ）为抗原，作简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ（ｉｍｐｒｏｖｅｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＩＷＢ）分析，检测１０７例囊虫病、４０例华支睾吸虫病、２４例包虫病和３４例健康人血清对融合蛋白的反应。同时应用粗制抗原（ｃｒｕｄｅａｎｔｉ－ｇｅｎ，ＣＡ）进行ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ对比检测。结果：在简化Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测中，ＦＰ被１０７例囊虫病患者血清中９４例（８７．９％）血清所识别，与华支睾吸虫病、包虫病患者及健康人血清无交叉反应，特异性为１００％。以粗制抗原作ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ检测囊虫病人血清中的ＩｇＧ抗体阳性率分别为８４．１％和７４．８％，与华支睾吸虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为２．５％、１２．５％；与包虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为８．３％、１６．７％；与健康人血清也存在交叉反应, 假阳性率分别为8. 8%、11. 8% 。结论: β－半乳糖苷酶2猪囊尾蚴FP 诊断囊虫病具有较高敏感性和高度的特异性。     

以融合蛋白为抗原的简化Western blot法诊断囊虫病

目的：为囊虫的诊断提供简便有效的方法。方法：猪囊尾蚴cDNA表达文库中筛选出的β－半乳糖苷糖－猪囊虫cDNA编码的融合蛋白为抗原，进行简化的Westernblot分析。结果：四个克隆的融合蛋白（cC1、cC2、cP1和cH1）联合使用，检测124例人囊虫病血清中的抗囊尾蚴IgG抗体，阳性率达93．7％，三个克隆的融合蛋白（cC1、cC2、和cP1）联合使用，检测38例猪囊虫病血清中的相应抗体，阳性率达100％，均高于各克隆融合蛋白单独使用的阳性率，且与其他寄生虫病血清无交叉反应。结论：以融合蛋白为抗原所进行的Westernblot分析具有高度灵敏性和特异性，且简便易操作。