聚合酶链反应检测EB病毒亚型对区分鼻咽良恶性病变的价值

以ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）Ａ亚型特异性引物作聚合酶链反应（简称ＰＣＲ－Ａ），同时用Ａ、Ｂ亚型ＤＮＡ片段和Ｂａｍ－Ｗ片段为探针，与鼻咽活检组织ＤＮＡ作打点核酸杂交（简称ＤＢＨ－Ａ、ＤＢＨ－Ｂ和ＤＢＨ－Ｗ）。ＤＢＨ－Ｂ结果全部阴性，ＰＣＲ－Ａ、ＤＢＨ－Ａ和ＤＢＨ－Ｗ检测的阳性率，３１例鼻咽癌分别为８３．９％（２６／３１）、７４．２％（２３／３１）和８０．６％（２５／３１）；３３例非鼻咽癌分别为１５．２％（５／３３）、６９．７％（２３／３３）和４２．２％（１４／３３），其中２５例慢性鼻咽炎分别为１２．０％（３／２５）、９２．０％（２３／２５）和４０．０％（１０／２５）。鼻咽癌组与非癌组和慢性鼻咽炎之间，ＰＣＲ－Ａ阳性率的差异有非常显著的统计学意义（Ｐ＜０．０００１），可作为区别鼻咽良恶性病变的一个有价值的参考指标。这为鼻咽癌的病毒发病学提供了有价值的线索，也使将来用ＰＣＲ早期诊断鼻咽癌成为可能。     

鼻咽癌患者鼻咽组织和血清中EBV检测

目的：比较血清爱泼斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）抗体滴定度测定与癌组织ＥＢＶ基因组检测对鼻咽癌（ＮＰＣ）的诊断价值。方法：１４６例患者采用双盲法测定血清ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ,ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ和活检组织ＥＢＶ－ＤＮＡ（ＰＣＲ）。全组病例按活检病理检查结果分析：ＮＰＣ组,非ＮＰＣ组（对照组）。结果：ＮＰＣ组中ＥＢＶ－ＤＮＡ（ＰＣＲ）,ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ和ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ的阳性率分别为９０．８％     

MDM 2基因在鼻咽癌中的表达及其与p53蛋白表达、EB病毒潜伏感染的关系

目的：探讨ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况及其与ｐ５３蛋白表达、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏感染的关系。方法：运用非同位素原位杂交、免疫组化和多聚酶链反应技术对４６例ＮＰＣ、１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）分别进行ＭＤＭ２ｍＲＮＡ、ＭＤＭ２蛋白、ｐ５３蛋白及ＥＢＶ－ＤＮＡ的检测。结果：４６例ＮＰＣ中,１４例ｍＲＮＡ及ＭＤＭ２蛋白高表达,３８例为ｐ５３蛋白阳性,４３例为ＥＢＶ－ＤＮＡ阳性,１２     

新疆汉族和维吾尔族鼻咽癌组织的PCR和免疫组化检测比较

目的：了解新疆汉族维吾尔族（维）族鼻咽癌（ＮＰＣ）发病因素的差别。方法：用ＰＣＲ与免疫组化技术对７３例ＮＰＣ组织（汉族４１例,维族３２例）分别进行ＥＢ病毒脱氧核糖核酸（ＥＢＶ－ＤＮＡ）、ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ２）、潜伏膜蛋白（ＬＭＰ－１）检测。     

鼻咽癌活检组织中HLA,EBNA及间质中T淋巴细胞亚群的…

本实验对人类白细胞抗原（ＨＬＡ）、爱波斯坦－巴尔病毒核抗原（ＥＢＮＡ）、Ｔ细胞亚群的表达及分布进行综合分析，探讨其在癌变过程中的作用。用单克隆抗体Ｗ６／３２（抗ＨＬＡ－Ａ，Ｂ，Ｃ）、ＣＲ３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ）、和Ｔ４、Ｔ８、Ｔ１１，以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）和用鼻咽癌患者血清以抗补体Ｃ３免疫荧光法，检测鼻咽癌（２５例）及慢性鼻咽炎（１０例）活检组织中ＨＬＡ、Ｔ细胞亚群     

用聚合酶链反应检测鼻咽癌脱落细胞中EB病毒DNA

应用聚合酶连反应（ＰＣＲ）技术检测３５例鼻咽癌患者（２４例刚进行￣（６０）Ｃｏ放疗或未治疗，１１例放疗接近结束或刚结束）的鼻咽部脱落细胞中的ＥＢ病毒ＤＮＡ，１２例急、慢性扁桃体炎或咽炎患者为正常对照组，另有４例鼻咽癌的活检组织。结果：２４例鼻咽癌未治疗或刚治疗组中脱落细胞ＥＢ病毒ＤＮＡ阳性２０例（８３．３％），阴性４例（１６．７％）；１１例鼻咽癌放疗将近结束或刚结束组ＥＢ病毒阳性１例（９．１％），阴性１０例（９０．９％）；１２例对照组ＥＢ病毒ＤＮＡ阳性１例（８．３％），阴性１１例（９１．７％）。４例鼻咽部活检组织ＥＢ病毒ＤＮＡ均阳性。说明应用鼻咽部刮片脱落细胞进行ＰＣＲ反应检测ＥＢ病毒ＤＮＡ是一种方法简单、痛苦少，特异性强、灵敏度高的检测手段，可用于鼻咽癌的诊断、普查、流行病学调查等。     

鼻咽癌活检组织中HLA、EBNA及间质中T淋巴细胞亚群的分布

本实验对人类白细胞抗原（ＨＬＡ）、爱波斯坦－巴尔病毒核抗原（ＥＢＮＡ）、Ｔ细胞亚群的表达及分布进行综合分析，探讨其在癌变过程中的作用。用单克隆抗体Ｗ＿６／３２（抗ＨＬＡ－Ａ，Ｂ，Ｃ）、ＣＲ＿３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ）、和Ｔ＿４、Ｔ＿８、Ｔ＿（１１），以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）和用鼻咽癌患者血清以抗补体Ｃ＿３免疫荧光法，检测鼻咽癌（２５例）及慢性鼻咽炎（１０例）活检组织中ＨＬＡ、Ｔ细胞亚群分型和ＥＢＮＡ的表达。结果显示，鼻咽癌癌细胞多有ＨＬＡ－Ⅰ和Ⅱ型抗原表达，而以ＨＬＡ－Ⅱ型抗原表达为明显；慢性鼻咽炎上皮细胞表达ＨＬＡ－Ⅰ和Ⅱ型抗原较弱，与癌细胞比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。提示在癌变过程中，存在着ＨＬＡ表达的异常，体内ＥＢ病毒特异性Ｔ细胞可能不能识别带ＨＬＡ－Ⅱ型抗原的癌细胞，因而使其逃脱了机体的免疫监视。鼻咽癌组织中，癌细胞ＥＢＮＡ呈阳性和强阳性；癌间质中Ｔ细胞总数、Ｔ辅助、Ｔ杀伤细胞数量均减少，证明鼻咽癌局部细胞免疫功能降低。     

聚合酶链反应对颈部肿块的EBV检测

目的：探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）对隐匿性鼻咽癌的诊断意义。方法：采用ＰＣＲ检测５８例颈部肿块的细针抽吸标本中的ＥＢ病毒（ＥＢＶ）。结果：３５例颈中、上淋巴结转移癌２８例ＥＢＶ阳性,３例淋巴瘤阴性,４例锁骨上淋巴结转移癌阴性;１６例淋巴结炎性病变１例为弱阳性,１５例均为阴性;该法诊断鼻咽癌的灵敏度为８９．３％,特异性为８６．７％。结论：用ＰＣＲ检测颈部转移癌中的ＥＢＶ－ＤＮＡ,对隐匿性鼻咽癌的诊断具     

原位免位PCR检测喉癌中人类乳头状瘤病毒E6蛋白

针对常规免疫组化检测石蜡包埋的喉癌组织中人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型Ｅ６蛋白阳性率低、信号模糊等缺点，我们探索出一种敏感而有效的检测方法———原位免疫ＰＣＲ（ＩｎＳｉｔｕＩｍｍｕｎｏ－ＰＣＲ，ＩＳＩ－ＰＣＲ），报告如下：１　材料与方法１．１　材料：９例１６／１８型ＨＰＶＤＮＡ阳性的喉癌高分化鳞癌石蜡包埋组织。生物素标记ＰａＴＥＬ１４／ＥｃｏＲＩＤＮＡ片断。ＰＣＲ引物：５’－ＡＴＡＣＣＴＡＴＴＧＣＣＴＡＣＧＧＣＡＧ－３’；５’－ＣＧＴＴＡＧＴＡＡＡＴＧＡＡＴＴＴＴＣＴ－３’。１．２　方法…     

人听觉器官线粒体DNA^4977缺失与老年聋的关系

目的 探讨ｍｔＤＮＡ＾４９７７缺失与老年聋的关系。方法 采用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）及套式ＰＣＲ技术，扩增正常及缺失区ｍｔＤＮＡ片段，ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ载体连接扩增产物，重组、克隆目的ＤＮＡ进行序列分析。检测６７耳（４１例）颞骨切片、２１例蜗核（双侧）、２０例颞叶脑组织、２０例心肌和２２例肝脏组织中ｍｔＤＮＡ＾４９７７缺失的发生率，根据患者生前的临床资料分为老年组与非老年组、老年聋组与老年听力正常组进行比较分析。结果 被检所有标本均成功扩增到正常ｍｔＤＮＡ编码ｔＲＮＡ和ＮＤ１片段的ＮＡＤＨ基因。在老年人多种组织中检测到了ｍｔＤＮＡ＾４９７７缺失，老年组不同器官组织中ｍｔＤＮＡ＾４９７７缺失发生率均明显高于非老年组，两组之间的差异具有显著性意义（χ＾２检验，Ｐ     

Nd-YAG激光汽化结合光动力学治疗对鼻咽癌患者SIL-2R、IL-2水平及NK活性的影响

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法、３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和１２５Ｉ－ＵｄＲ释放法对２４例鼻咽癌（ＮＰＣ）患者ＹＡＧ激光汽化结合光动力学治疗前后外周血可溶性ＩＬ－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）、白细胞介素２（ＩＬ－２）水平和自然杀伤细胞（ＮＫ）活性分别进行测定。结果表明鼻咽癌患者在接受激光光动力学治疗后ＳＩＬ－２Ｒ水平呈明显下降（Ｐ＜０．０００５），而ＩＬ－２水平和ＮＫ活性显著上升（Ｐ＜０．０００５）。结果提示激光光动力学治疗对恢复鼻咽癌患者免疫功能起促进作用。     

鼻咽癌活检组织及外周血白细胞EB病毒DNA的检测及其意义

目的：探讨鼻咽组织、外周血血白细胞ＥＢＶ基因组分布及与ＮＰＣ的关系。方法：采用ＰＣＲ法检测２６例ＮＰＣ,４例癌旁及１４例慢性鼻咽炎鼻 组织吸外周血白细胞中ＥＢＶ ＤＮＡ。同时采用酶免疫法测定血清ＶＣＡ－ＬｇＡ。结果：１．ＮＰＣ、癌旁及鼻咽炎组织ＥＢＶ ＤＮＡ无明显差异。２．ＮＰＣ与鼻咽炎组外周血白细胞ＥＢＶ ＤＮＡ有明显差异,Ｐ〈０．０５。３．ＮＰＣ与鼻咽炎组血清ＶＣＡ－ＩｇＡ之间存在明显差异。Ｐ     

鼻咽癌细胞中蛋白酶ICH—1和增殖细胞核抗原表达的研究

目的：探讨蛋白酶ＩＣＨ－１与鼻咽癌发生的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法研究４６例鼻咽癌组织中ＩＣＨ－１和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果：４６例鼻咽癌中１６例ＩＣＨ－１Ｌ阳性，２２例ＩＣＨ－１Ｓ阳性，阳性率分别为３４８％和４７８％，ＩＣＨ－１Ｌ阳性细胞百分率为５４２％，ＩＣＨ－１Ｓ阳性细胞百分率为６８４％，较良性鼻咽上皮增加。４６例鼻咽癌细胞ＰＣＮＡ增殖指数为４９８±７２％，较良性鼻咽上皮增加，ＰＣＮＡ表达与癌细胞分化有关。结论：蛋白酶ＩＣＨ－１异常表达可能与鼻咽上皮癌变有关。ＰＣＮＡ可作为反映鼻咽癌细胞分化的一项指标。     

鼻咽脱落细胞的AgNOR定量观察对鼻咽癌的诊断意义

本文对临床诊断为鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）者２０８例分别行鼻咽脱落细胞、病理活检、组织印片及血清免疫酶测定ＶＣＡ－ＩｇＡ，结果发现活检（第１次）准确率为８５．７％，组织印片为８８．９％，涂片ＨＥ染色为６３．４％，涂片ＡｇＮＯＲ为９０．５％，ＶＣＡ－ＩｇＡ为７８．６％。以脱落细胞涂片ＡｇＮＯＲ染色准确率最高。认为该方法简便，快速，不失为ＮＰＣ诊断的一种有意义的辅助方法。     

豚鼠畸变产物微音器电位与畸变产物耳声的发射的相关？…

为探讨畸变产物微间电位（ＤＰＣＭ）是否畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）引发，将豚鼠的ＤＰＯＡＥ和ＤＰＣＭ同时叠加，发现在较高强度的声刺激下（ｆ０＝１００６Ｈｚ，ｆ０＝２０１１Ｈｚ，ｆ０＝４０３３Ｈｚ），ＤＰＣＭ叠加结果与ＤＰＯＡＥ各峰有一一对应的关系，ＣＭ的２ｆ１－ｆ２峰相对值（与ｆ１峰比值）比ＤＰＯＡＥ的２ｆ－ｆ２要小得多。较低声强刺激时（ｆ０＝１００６Ｈｚ〈５０ｄＢ，ｆ０＝２０１１Ｈｚ〈６０ｄＢ     

分泌性中耳炎患儿腺样体免疫状态的探讨

本文通过体外细胞培养的方法，研究了１０例分泌性中耳炎（ＯＭＥ）患儿腺样体的免疫状态，测定体外腺样体淋巴细胞自发性ＤＮＡ合成（ＳＤＳ）及在植物血凝素（ＰＨＡ）刺激下可溶性白细胞介素－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）释放，并以阻塞性睡眠性呼吸暂停综合征患儿作对照。结果，ＯＭＥ患儿腺样体淋巴细胞ＳＤＳ（１７３３５±７０１２ｃｐｍ）较对照组（９３８２±４５５４ｃｐｍ）明显增高（Ｐ＜０．０５），ｓＩＬ－２Ｒ的释放（８６４±２４１ｕ／ｍｌ）也较对照组（４３８±１４５ｕ／ｍｌ）增高（Ｐ＜０．０５），说明ＯＭＥ患儿腺样体淋巴细胞活性较高，可能导致局部免疫异常而引起ＯＭＥ。     

EB病毒特异性DNA酶的纯化制备

目的 纯化ＥＢ病毒特异性ＤＮＡ酶（ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ）为鼻咽癌血清学诊断方法－血清ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ抗体的检测奠定基础。方法 采用多重纤维素柱层析对用联合化学诱导的方法制备的ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ粗提物进行纯化。 结果 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测中,从粗提物到纯化终产物,蛋白质带逐渐减少直至单一条带。其分子量为５２ｋＤ,其对应的每豪克蛋白质酶单位分别为５．４６,４９．１９,１３４．８６,３９１,２５,９６     

鼻咽脱落细胞的AgNOR定量观察对鼻咽癌的诊断意义

本文对临床诊断为鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）者２０８例分别行鼻咽脱落细胞、病理活检、组织印片及血清免疫酶测定ＶＣＡ－ＩｇＡ，结果发现活检（第１次）准确率为８５．７％，组织印片为８８．９％，涂片ＨＥ染色为６３．４％，涂片ＡｇＮＯＲ为９０．５％，ＶＣＡＩｇＡ为７８．６％。以脱落细胞涂片ＡｇＮＯＲ染色准确率最高。认为该方法简便，快速，不失为ＮＰＣ诊断的一种有意义的辅助     

正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射特性

目的 研究正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）的特性。方法 采用ＣＥＬＥＳＴＡ ５０３型耳声发射分析仪对２６只正常清醒豚鼠（３５耳）进行ＤＰ图及ＤＰ输入／输出曲线（ＤＰ－Ｉ／Ｏ）的测试，随机选择１１只正常清醒豚鼠（２０耳）进行ＤＰＯＡＥ的重复测试，用ＳＰＳＳ１０．０对数据进行统计分析。结果 在ＤＰ图中，当初始音强度Ｌ１／Ｌ２为 ７０／６５ ｄＢ ＳＰＬ时，正常清醒豚鼠的 ＤＰＯＡＥ幅值随测试频率ｆ０从０．７５－８ｋＨｚ的增加而逐渐升高（２７．９０±１．９６－5０．６５±０．７１）。在 ＤＰ－Ｉ／Ｏ中，当ｆ０分别为４、６、８ ｋＨｚ时，正常清醒豚鼠的ＤＰＯＡＥ幅值随Ｌ１／Ｌ２从７０／６５以５ｄＢ－挡降至１５／１０ ｄＢ ＳＰＬ而呈线性下降（Ｐ＜０．０１），在Ｌ１／Ｌ２为５５／５０或６０／５５ ｄＢ ＳＰＬ处出现饱和或低谷，同一Ｉ／Ｏ曲线上Ｌ１／Ｌ２分别从７０／６５及５５／５０ ｄＢ ＳＰＬ递减至阈值的Ｉ／Ｏ斜率（分别记为ＫＴ及ＫＬ）均接近于１，且ＫＬ大于ＫＴ（Ｐ＜０．０１）。重复测试的ＤＰＯＡＥ幅值差异小（＜ １ｄＢ ＳＰＬ）且无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论 正常清醒豚鼠ＤＰＯＡＥ测试充分表现了其捡出率高、反应幅值大     

鼻咽癌患者单个核细胞mIL-2R表达和血清sIL-2R水平的检测及意义

目的：探讨ＩＬ－２Ｒ与鼻咽癌发生、发展的关系。方法：应用间接免疫荧光法和ＥＬＩＳＡ法对６２例鼻咽癌、２１例鼻咽良性病变和２６例健康对照者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）经植物血凝素（ＰＨＡ）刺激后的ｍＩＬ－２Ｒ和血清ｓＩＬ－２Ｒ水平进行检测。结果：１）鼻咽癌患者ｍＩＬ－２Ｒ表达显著低于鼻咽良性病变和健康对照组（Ｐ＜０．０５）;２）鼻咽癌患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平显著高于鼻咽良性病变和健康对照组（Ｐ＜０．０１）;３）与无远处转移的鼻咽癌患者相比,有远处转移的鼻咽癌患者血清ｓＩＬ－２Ｒ显著升高（Ｐ＜０．０１）;４）鼻咽良性病变与健康对照组之间ｍＩＬ－２Ｒ表达和ｓＩＬ－２Ｒ水平无显著差异。结论：结果提示ｍＩＬ－２Ｒ表达低下和ｓＩＬ－２Ｒ异常升高在鼻咽癌患者机体免疫抑制中可能起重要作用。