PTC-209靶向抑制Bmi1对人舌鳞癌细胞的体外抗癌作用

目的：检测Bmi1（B lymphoma Mo-MLV insertion region 1）小分子化学抑制剂PTC-209对人舌鳞癌细胞中Bmi1表达的抑制作用,并探讨其对体外人舌鳞癌细胞生物表型的影响。方法：对人舌鳞癌细胞系Cal27予以PTC-209处理,通过蛋白质免疫印迹、实时定量逆转录聚合酶链反应检测PTC-209干预后细胞内Bmi1的表达变化;通过MTT、Transwell、划痕试验等分析PTC-209处理对人舌鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;应用克隆形成、肿瘤球培养、流式分选等实验分析PTC-209对人舌鳞癌细胞系中肿瘤干细胞亚群的影响。结果：PTC-209能显著下调人舌鳞癌细胞中Bmi1的表达,并具有浓度和时间依赖效应（P＜0.05）;PTC-209体外干预可明显抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力,增强细胞对顺铂和5-FU的药物敏感性;PTC-209能显著降低细胞克隆形成率、肿瘤球形成以及ALDH+亚群细胞比例。结论：PTC-209能在体外抑制人舌鳞癌细胞中Bmi1的表达,具有抑制细胞增殖、侵袭迁移和降低肿瘤干细胞亚群比例等抗肿瘤效应。     

PTC-209靶向抑制Bmi1对头颈鳞癌细胞的体外抗癌作用研究

【】目的：检测Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1)小分子化学抑制剂PTC-209对头颈鳞癌细胞中Bmi1的表达抑制作用,并探讨其对体外头颈鳞癌细胞生物表型的影响。方法：对头颈鳞癌细胞系Cal27和FaDu予以PTC-209处理,通过蛋白质免疫印迹、实时定量逆转录聚合酶链反应检测PTC-209干预后细胞内Bmip1的表达变化;通过MTT、Transwell、划痕试验等分析PTC-209处理对头颈鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;应用克隆形成、肿瘤球培养、流式分选等实验分析PTC-209对头颈鳞癌细胞系中肿瘤干细胞亚群的影响。结果：PTC-209能显著下调头颈鳞癌细胞中Bmi1的表达,并具有浓度和时间依赖效应(P＜0.05); PTC-209体外干预可明显抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力,增强细胞对顺铂和5-FU的药物敏感性;PTC-209能显著降低细胞克隆形成率、肿瘤球形成以及ALDH₊亚群细胞比例。结论：PTC-209能在体外抑制头颈鳞癌细胞中Bmi1的表达,具有抑制细胞增殖,侵袭迁移和降低肿瘤干细胞亚群比例等抗肿瘤效应。     

人喉癌细胞异质性的研究

目的通过原代培养人喉癌实体瘤细胞,克隆分离异质性细胞亚群,初步研究喉癌细胞肿瘤异质性。方法原代培养人喉癌细胞,应用有限稀释法对体外培养的喉癌细胞进行单细胞克隆分离异质性亚群,比较其在形态、分化能力、细胞周期、增殖能力及裸鼠异体移植成瘤能力等方面的差异。结果分离到1型和2型细胞形态差异最大的两个亚群。1型细胞成长梭形,突起少,亚克隆培养未产生子代细胞,裸鼠异体移植不成瘤（0/5）;2型细胞成多角形,多突起,继续培养产生的子代克隆出现异质性细胞,裸鼠异体移植可成瘤（5/5）,体外增值能力强,处于细胞周期G0/G1的比例明显高于1型细胞。结论原发性人喉癌实体瘤细胞具有异质性,2型细胞具有肿瘤干细胞的特性。     

不同化疗耐药性卵巢癌细胞侵袭转移特性的比较

目的观察不同化疗耐药性卵巢癌细胞的侵袭转移特性,并探讨其可能机制。方法体外建立卵巢癌不同梯度顺铂(DDP)耐药细胞系模型(OVCAR-3/DDP-1、OVCAR-3/DDP-2、OVCAR-3/DDP-3);MTT法、流式细胞仪、Transwell小室观察亲本细胞和耐药细胞的增殖、细胞周期分布、细胞侵袭和迁移等生物学特性的变化;ELISA法测定细胞培养上清液中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的浓度。结果成功建立不同梯度顺铂耐药细胞系模型,OVCAR-3/DDP-1、DDP-2、DDP-3细胞的耐药指数依次为3.87、8.39、13.42。耐药细胞均较亲本细胞增殖缓慢,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,其中OVCAR-3/DDP-2、DDP-3与亲本细胞比较差异有统计学意义(P<0.05)。与亲本细胞相比,耐药细胞伴随其耐药性的增加,侵袭转移能力逐渐增强,其中OVCAR-3/DDP-2、DDP-3与亲本细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。细胞上清液中MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1的比值随顺铂耐药性的增加而逐渐上升,耐药细胞与亲本细胞相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论对顺铂耐药性的产生和增加可促进卵巢癌细胞的侵袭和转移,可能部分与耐药细胞MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值上调有关。     

肉桂醛对恶性黑素瘤A375细胞增殖和分泌VEGF的影响

目的研究肉桂醛对体外培养的人恶性黑素瘤细胞株A375增殖和分泌血管内皮细胞生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)的影响。方法 A375细胞在体外培养扩增后,在培养基中分别加入10、20、40μmol/L肉桂醛,分别在培养24、48、72 h MTT法检测细胞活性。同时收集各个浓度肉桂醛处理不同时相的培养液样本,双抗体夹心ELISA法测定其中VEGF分泌量。结果 10μmol/L肉桂醛作用24 h即能抑制A375细胞增殖,10、20、40μmol/L肉桂醛间的抑制强度具有统计学意义(P<0.01)。40μmol/L的肉桂醛作用72 h后细胞增殖抑制率最高,达(88.91±4.5)%。随肉桂醛作用时间延长,A375细胞分泌VEGF的量逐渐减少,72 h后各浓度间的抑制作用具有统计学意义(P<0.01)。40μmol/L肉桂醛作用72 h后A375细胞分泌的VEGF含量最低,为9.55 pg/ml。结论肉桂醛能抑制人黑素瘤细胞增殖和VEGF的分泌,其抑制强度与药物浓度和作用时间成正比。     

长链非编码RNA linc00152促进人口腔鳞状细胞癌的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA-linc00152对口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响.方法采用RT-qPCR方法检测linc00152在口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织以及口腔鳞癌细胞系中的表达.CAL27和SCC9细胞转染linc00152-siRNA后,采用CCK8、划痕以及Transwell实验检测CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭转移情况.结果Linc00152在口腔鳞癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,在人口腔鳞状细胞癌细胞系TSCCA、SCCl5、CAL27和SCC9中的表达显著高于人正常黏膜HOK细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);经相关性分析,Linc00152的高表达与淋巴结转移有关(P<0.05);CAL27和SCC9细胞系敲低Linc00152后,CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭和转移明显受到抑制(P<0.05).结论linc00152在口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞系中呈高表达,下调linc00152表达可抑制口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和转移,linc00152可成为口腔鳞癌潜在治疗靶点.     

下咽癌FADU细胞系中CD133阳性细胞的侵袭能力

目的研究下咽癌人咽鳞癌细胞(FADU)细胞系中CD133阳性细胞侵袭能力。方法用免疫磁珠分选技术,分选CD133阳性细胞及阴性细胞,Transwell小室方法研究阳性、阴性二个细胞亚群的体外侵袭能力。结果阳性、阴性细胞在Transwell小室侵袭实验中穿过人工基底膜的数量分别为54.0±2.3,17.0±1.1,其差异有统计学意义。结论下咽癌FADU细胞系中,CD133阳性细胞具有更强的侵袭能力。     

miR-127对皮肤鳞状细胞癌细胞生物学行为调控作用研究

目的探讨miR-127对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞的生物学行为调控作用。方法收集皮肤鳞癌组织、癌旁正常组织标本,采用实时定量PCR检测miR-127在2组标本中的表达水平。调控鳞癌细胞株A431中miR-127表达水平,检测鳞癌细胞增殖、侵袭能力的变化。通过生物信息学预测网站及分子生物学方法验证miR-127的作用靶点。结果miR-127在皮肤鳞癌组织中表达明显高于癌旁组织(P < 0.01)。相较于HaCaT细胞,miR-127表达水平在A431细胞以及HSC-5细胞中显著升高,差异有统计学意义(P < 0.05)。上调miR-127表达后,A431细胞的增殖及侵袭能力显著增强;下调miR-127的表达后,A431细胞的增殖及侵袭能力受到抑制(P < 0.05)。通过双荧光素酶报告基因实验发现miR-127可以与PTEN直接结合,调控miR-127后PTEN在蛋白水平的表达发生改变(P < 0.05)。结论miR-127参与调控鳞癌细胞的生物学行为,miR-127可能作为治疗皮肤鳞癌的一个潜在的靶点。     

甲状腺癌中类干细胞的侧群细胞的分离及鉴定

目的:研究不同甲状腺肿瘤细胞中是否存在具备干细胞特性的侧群(side population,SP)细胞,同时比较侧群细胞和非侧群(non-SP)细胞生长?成瘤及侵袭性的差异?方法:以多种人甲状腺未分化癌细胞株为对象,利用干细胞高表达ABCG2转运体,可将荧光染料Hoechst泵出胞外的特性,运用双波长流式细胞仪从不同的甲状腺肿瘤细胞株中分选出具有干细胞特性的侧群细胞,进而通过半定量PCR及免疫荧光染色比较侧群和非侧群细胞的干细胞标志OCT4及肿瘤耐药基因ABCG2?MDR1表达的情况,采用克隆形成率及细胞侵袭迁移实验比较两组细胞群的克隆形成能力和侵袭转移能力?结果:人甲状腺未分化癌细胞株中存在具有干细胞特性的侧群细胞,该群细胞高表达干细胞标志OCT4及肿瘤耐药基因ABCG2和MDR1;同时在体外培养中,此侧群细胞可产生侧群细胞和非侧群细胞;侧群细胞比非侧群细胞具有更强的体外克隆形成能力和侵袭转移能力?结论:甲状腺肿瘤细胞中存在具有干细胞特性的侧群细胞,此群细胞可生成普通的瘤体细胞,提示该群细胞可能是肿瘤耐药和复发的根源?     

Wnt1诱导分泌蛋白-1通过NF-κB通路促进食管鳞癌细胞的增殖和侵袭转移

目的: 探讨Wnt1诱导分泌蛋白 1(Wnt1 induced secreted protein 1, WISP 1)在食管鳞癌细胞侵袭转移的作用机制。方法: 体外培养人食管鳞癌细胞株Eca109、TE 8和正常食管上皮细胞Het 1a,荧光定量PCR和蛋白质印迹检测WISP 1表达。将食管鳞癌细胞株Eca109和TE 8分为空白对照组、阴性对照组和WISP 1 siRNA组,利用CCK8法检测各组细胞增殖改变;流式细胞术分析不同处理组细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力变化;蛋白质印迹法检测细胞中VEGF A,VEGF C,MMP2,MMP9以及NF κB通路相关蛋白的表达量;酶联免疫吸附法测定培养上清液中VEGF C和MMP9分泌量。结果： 荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中WISP 1表达量高于正常食管上皮细胞(P<0.01);CCK8和流式细胞术结果显示,下调WISP 1后,食管鳞癌细胞株增殖明显抑制（P<0.05）,凋亡率无明显影响;蛋白质印迹结果显示,下调WISP 1对VEGF A和MMP2 表达无明显影响,而VEGF C和MMP9表达明显得到抑制;酶联免疫吸附结果显示,VEGF C和MMP9分泌量随WISP 1下调也出现明显下降（P<0.05）;下调WISP 1后,食管鳞癌细胞株侵袭能力明显降低（P<0.01）;下调WISP 1表达显著抑制NF κB磷酸化并促进IκBα的磷酸化,抑制NF κB信号活化水平。 结论： WISP 1可通过NF κB通路,增加MMP9,VEGF C的表达和分泌,促进食管鳞癌细胞增殖及侵袭转移的能力。     

MR staging in carcinoma of the endometrium and carcinoma of the cervix

This study aimed to evaluate MR as an imaging modality for the assessment of myometrial and cervical invasion in endometrial carcinoma and for the assessment of parametrial and lymph node involvement in cervical carcinoma. Twenty-eight patients with a preoperative histological diagnosis of endometrial carcinoma/cervical carcinoma were included in the study. The findings were compared with the surgical staging and the histopathological report of the hysterectomy specimen. Accuracy in detecting myometrial and cervical involvement in patients with endometrial carcinoma was 78% for both. Accuracy in detecting parametrial and lymph node involvement in patients with cervical carcinoma was 71% and 86% respectively. MR is a reliable method for preoperative assessment of endometrial and cervical carcinoma. It helps decide operability, the type of operation and aids in the selection of patients who need to be considered for specialist referral to a gynaecologist oncologist.     

Study on the pathological characteristics of latent carcinoma and incidental carcinoma of the prostate

Objective To study the differential characteristics of morphology,proliferating degree and expression of MMP-2,MMP-9 between latent carcinoma,incidental carcinoma and clinical carcinoma of the prostate.Methods The morphological features were observed by HE staining and the expressions of Ki-67.PCNA,MMP-2,MMP-9 were studied by immunohistochemistry （SP method） in 24 cases of latent carcinomas,5 cases of incidental carcinomas and 38 cases of clinical carcinomas.     

Neuroendocrine carcinoma of the larynx

A rare case of moderately differentiated neuroendocrine carcinoma (atypical carcinoid) of the larynx is presented. The role of immunohistochemistry in the diagnosis of the lesion is described. The importance of considering the diagnosis in a patient with prolonged cervical pain with features of glossopharyngeal neuralgia, is discussed.