单克隆与多克隆双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体？…

采用抗白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）的单克隆与多克隆抗体以及辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的羊抗兔ＩｇＧ，建立了高特异性及高灵敏度的双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素２受体。结果：酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测得兔抗人ＩＬ－２Ｒ多克隆抗体效价达１：１０＾４，免疫双向扩散法测得羊抗兔抗体效价高达１：２５６。本试剂盒检测ｓＩＬ－２Ｒ的特异性强，灵敏度为１００Ｕ／ｍｌ，在２￣８℃存放一年，稳定性不变，此方     

大鼠脾内微量免疫法制备sIL-2R抗血清

将少量可溶性白细胞介素-2受体(Soluble interleukin 2 receptor,sIL-2R)吸附于葡聚糖Sephadex G-75和硝酸纤维薄膜,分别对两只大鼠进行脾内免疫,由此获得大鼠抗SIL-2R的多克隆抗体,此抗体对激活正常人外周血淋巴细胞的增殖、淋巴细胞转化具有抑制作用。     

SIL-2R检测在肿瘤患者临床应用进展

白细胞介素2(IL-2)是人体抗肿瘤的一种重要的细胞因子,它的一系列生物效应的产生均依赖于白细胞介素2受体(IL-2R)。IL-2R主要以mIL-2R(膜受体)和sIL-2R(可溶性受体)两种方式存在。sIl-2R作为IL-2R的一种特殊形式参与机体免疫应答和免疫调节,在介导与调节IL-2生物活性过程中与mIL-2R不同,具有独特的生物学意义,并且sIL-2R在血清中水平变化与肿瘤的发生、发展密切相关。本文就sIL-2R检测在肿瘤患者临床应用中的进展加以综述。1　sIL-2R的产生及生物学活性Rubin及Nelson等[1]相继发现人血清中存在少量的sIL-2R。并且证明,sIL-2…     

可溶性IL-2R检测法比较及其在肺结核患者测定中的临床意义

<正>可溶性白细胞介素-2受体(Soluble interleukin-2receptor,slL-2R)是活化淋巴细胞膜白细胞介素2受体(1L-2R)α如链成份P55,即Tac抗原,可由细胞膜释放入循环或培养上清,血清中sIL-2R浓度高低,与某些疾病如白血病、艾滋病、肿瘤、肾移植等的病情、分期和程度有关,可以反映 T淋巴细胞激活程度.本文应用四种单克隆抗体和多克隆抗体建立了sIL-2R ELISA,并检测了正常人和肺结核患者血清sIL-2R.     

肾移植术后细胞因子及受体的动态监测

目的:探讨肾移植术后急性排斥反应、感染、环孢素A(CsA)中毒时血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化及在急性排斥反应的早期诊断、鉴别诊断中的意义.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法,对106例肾移植患者于肾移植手术前后进行动态监测.结果:肾移植术前sIL-2R与对照组相比差异有显著性,术后1周内下降明显,2～3周趋于稳定.肾移植术前IL-6、TNF-α与对照组相比差异无显著性,术后第1天明显升高,1周左右降至术前水平.发生急性排斥反应前1～3 d血清sIL-2R、IL-6、TNF-α即有升高,峰值出现在抗排斥反应治疗的当日,经MP、OKT3冲击有效后迅速下降,治疗无效者,持续在高水平.并发感染时sIL-2R、IL-6、TNF-α显著升高,与急性排斥反应组相比差异无显著性,CsA中毒时sIL-2R、IL-6、TNF-α变化不明显.结论:动态监测sIL-2R、IL-6、TNF-α可以作为急性排斥反应的早期诊断、鉴别诊断的免疫生物学指标.     

脑膜炎患儿脑脊液中IL-8与sIL-2R的变化

目的:探讨白细胞介素8(IL-8)和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)在脑膜炎患儿中的检测的意义.方法:收集我院住院患儿化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及病毒性脑膜脑炎患儿脑脊液,采用双抗体夹心ELISA法测定IL-8及sIL-2R水平.结果:3种脑疾患儿CSF中sIL-2R和IL-8水平较对照组显著增高(P＜0.001).化脑组IL-8水平最高,明显高于病脑组(P＜0.001)和结脑组(P＜0.01);而结脑CSF中sIL-2R最高,明显高于病脑组(P＜0.001)和化脑组(P＜0.01).结论:脑脊液IL-8和sIL-2R水平的测定可作为临床诊断化脑、结脑、病脑的重要指标之一.     

丙型肝炎患者血清sIL-2R的检测及意义

白细胞介素2受体(IL-2R)是由两条多肽链(α、β)组成的糖蛋白.有报道[1]在恶性肿瘤、自身免疫病以及乙型病毒性肝炎患者血清中异常升高,本文检测丙型肝炎患者血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R),以探讨sIL-2R对判断HCV感染病情演变及预后的意义.     

兔抗人TGF-β_1多克隆抗体的制备

目的以人重组TGF-β1蛋白作为抗原,制备兔抗人TGF-β1多克隆抗体。方法重组蛋白与弗氏佐剂等体积混匀,免疫新西兰白兔,获得兔抗人TGF-β1多克隆抗血清。饱和硫酸铵盐析法纯化多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验检测多克隆抗体效价,Western-blot技术进行抗体特异性检测。结果成功获得兔抗人TGF-β1多克隆抗体,纯化后抗体效价达1∶110 000。结论获得的兔抗人TGF-β1多克隆抗体具有良好的特异性,能满足进一步实验的需要。     

高血压脑出血患者外周血中白细胞介素2与可溶性白细胞介素2受体表达意义的研究

目的:研究高血压脑出血患者外周血中白细胞介素2(IL-2)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)表达的变化规律,探讨其间相互关系及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定患者IL-2、sIL-2R的含量。结果:高血压脑出血组IL-2含量为(67.76±32.62)pg/ml,与健康对照组(127.15±57.05)pg/ml,相比明显降低(P<0.01),sIL-2R含量为(96.91±50.14)pg/ml,与健康对照组(92.11±34.1)pg/ml相比则明显升高(P<0.05)。结论:高血压脑出血患出现免疫功能低下,临床检测患者IL-2、sIL-2R含量在高血压脑出血的发生、发展、治疗、转归及预后方面具有重要的临床指导意义。     

甲、乙型肝炎患者血清IL-2和sIL-2R水平

血清白细胞介素-2(IL-2)及其可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)的水平可反映机体细胞免疫状态。由于其取材方便和易于检测,已用于临床疾病的研究,但甲、乙型肝炎IL-2和sIL-2R血清水平的变化与疾病的关系尚少有报道。为了解不同病期肝炎患者的免疫状况,我们于2000年1月用双抗体夹心ELISA法检测了67例甲、乙型肝炎患者血清中IL-2和SIL-2R水平,并探讨其临床意义。     

MLCK定量检测的双抗体夹心ELISA方法建立

目的:建立定量检测人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的双抗夹心ELISA法.方法:用抗MLCK兔多克隆抗体包被酶标板,1％小牛血清白蛋白(1％BSA)作为封闭液,抗MLCK羊多克隆抗体和HRP-兔抗羊抗体分别为包被抗体和检测抗体,建立双抗体夹心ELISA法,并进行了实验条件的优化;同时对新建立方法的灵敏度、精密度进行了评价...     

抗独特型抑制法测定可溶性IL一2受体的实验研究

本研究用抗独特型抑制法测定可溶性ＩＬ一２受体（ｓＩＬ一２Ｒ）。主要步骤为：以抗ＩＬ一２Ｒａ单抗５Ｇ１包被，加入ｓＩＬ一２Ｒ及针对包被单抗的抗独特型酶标抗体ＨＲＰ一２Ｇ３。ｓＩＬ一２Ｒ与ＨＲＰ一２Ｇ３竞争结合包被单抗，其含量与显色ＯＤ值成反比。本法简便，灵敏，特异性好，可望用于基础及临床研究。     

登革热患者血清白细胞介素-8和可溶性白细胞介素-2受体的变化及其临床意义

本文采用双单克隆抗体夹心ELISA法检测登革热患者血清白细胞介素-8（IL－8）和可溶液白细胞介素-2受体（sIL－2R）的水平，结果发现登革热患者血清IL-8和sIL－2R水平明显升高血清IL-8和SIL－2R的水平与患者发热时间的长短（超过5天和5天以内）、皮疹的性质（充血性皮疹和出血性皮疹）及肝脏损害密切相关，且随患者尿蛋白含量的增加而升高．表明血清IL-8和sIL－2R对判断登革热患者的病情有一定的临床参考价值．     

HIV早期检测的应用研究

目的采用抗HIV-1 p24单克隆抗体和多克隆抗体构建的间接ELISA试剂，检测HIV-1抗体阳性及其他样品，以探讨HIV早期检测的可行性。方法采用单克隆抗体固相、兔抗HIV-1 p24抗体夹心，羊抗兔HRP结合物的间接ELISA法。结果显示试剂盒HIV-1 p24抗原检出灵敏度为50pg／mL（基因工程抗原）；特异性97．13％；HIV抗体阳性血样阳性率4．1％；抗体阴性的特殊人群血样阳性率5．2％；抗体不确定血样阳性率为16．3％，明显高于抗体阳性和阴性组血样。病毒培养1d，抗原效价1：80，第3天可达1：5360。结论该间接夹心HIV-1 p24抗原检测试剂，可应用于HIV感染的辅助检测及病毒的基础研究，具有灵敏度高、特异性好的特点。     

首发精神分裂症患者血浆细胞因子水平及氯氮平治疗的影响

目的探讨首发精神分裂症患者细胞因子血浆水平及氯氮平治疗的影响。方法采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 2 8例对照组和 3 0例首发精神分裂症研究组氯氮平治疗 6周前后的IL 2、IL 6及sIL 2R、sIL 6R血浆水平并做组间及治疗前后比较。结果与对照组比较 ,研究组治疗前血浆IL 2、6及sIL 2R、sIL 6R水平 (分别为 :2 3 .94± 10 .0 5 ,60 .5 1± 3 2 .12 ,18.0 8± 3 .63 ,2 5 .2 1± 2 .0 2 )显著升高 ( P <0 .0 5 ) ,治疗后sIL 2R及IL 6水平仍显著升高 (P <0 .0 5 ) ,而IL 2及sIL 6R水平差异无显著性 (P <0 .0 5 ) ;研究组治疗前后比较 ,血浆IL 2及sIL 6R水平显著下降 (P <0 .0 5 ) ,IL 6水平显著升高 (P <0 .0 5 ) ,sIL 2R治疗前后差异无显著性 (P <0 .0 5 )。结论精神分裂症患者存在IL 2、IL 6及sIL 2R、sIL 6R介导的免疫功能紊乱 ,氯氮平可能对该功能紊乱有抑制性调节作用.     

干扰素治疗婴幼儿轮状病毒肠炎临床疗效及免疫功能变化

目的探讨轮状病毒肠炎的免疫学发病机制,并观察IFN治疗婴幼儿轮状病毒肠炎后临床疗效及免疫功能变化。方法 140例轮状病毒(HRV)肠炎患儿随机分为治疗组常规治疗,观察组加用干扰素(IFN),观察两组患儿治疗后临床疗效及免疫功能变化。血清免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群、IL-2、sIL-2R、IL-10测定分别采用单向免疫扩散法、APAAP法、ELISA法和双抗夹心ELISA法。结果治疗前本组患儿与对照组比较IgA、IgG、lgM、CD4、CD4/CD8、IL-2和IL-10活性显著下降(P均<0.01),CD8和sIL-2R显著升高(P均<0.01)。干扰素治疗后观察组总有效率85.7%明显高于治疗组57.1%(P<0.01),且观察组免疫功能较治疗前明显改善,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论提示轮状病毒肠炎患儿免疫功能低下且紊乱,IFN有助于提高疗效以及恢复其机体免疫功能。     

肺炎支原体感染血清细胞因子水平的研究

目的 :本研究对 2 5例肺炎支原体研究急性期 (经血明胶凝集法检测抗体效价 >1∶80确诊 )血清中的IL -2 /sIL - 2R以及IL - 6的检测 ,并通过直线相关性检验初步探两者的关系及在MP感染的发病机理的作用。方法 :均采用双抗体夹心法 (酶联免疫吸附法 )。结果 :急性期MP感染血清中IL - 2的表达低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;sIL - 2的表达明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;而IL - 6的表达高于对照组 ,且IL - 6及sIL - 2R在感染初期呈正相关 (r=0 .74 7P <0 .0 5 )。结论 :细胞因子在MP感染的免疫发病机制以及其肺外并发症的发生起重要的作用     

原发性肝癌患者外周血IL-2,sIL-2R,TNFa水平及NK细胞活性检测

目的 :检测原发性肝癌患者外周血IL -2,sIL -2R,TNFa水平及NK细胞活性 ,并探讨患者细胞免疫功能低下的原因。方法 :采用MTT法检测30例原发性肝癌患者外周血单个核细胞白细胞介素2(IL -2)的诱生水平 ;采用ELISA法检测血清可溶性白细胞介素2受体 (sIL -2R) ,肿瘤坏死因子a(TNFa)水平 ;自然杀伤细胞活性 (NK -A)检测采用MTT法。结果 :原发性肝癌患者外周血TNFa水平降低 (P<0.01) ;IL -2、NK -A活性水平低于对照组 (P<0.05) ;sIL -2R水平高于对照组 (P<0.01)。结论 :原发性肝癌患者Th1细胞因子及NK -A活性有所降低 ,检测该指标有助于了解患者机体细胞免疫功能及预后评估。     

特发性血小板减少性紫癜患者IL—2受体的变化

应用ＥＬＩＳＡ法检测ＩＴＰ患者血清可溶性白细胞介素－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ），用间接免疫荧光法检测ＰＨＡ活化的淋巴细胞白细胞介素－２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）。结果表明，ＩＴＰ患者糖皮质激素治疗前ＳＩＬ－２Ｒ水平升高，治疗后降低；ＰＨＡ活化的ｍＩＬ－２Ｒ数较对照组降低（Ｐ〈０．０１），且与血清ＳＩＬ－２Ｒ水平无相关性。提示ＳＩＬ－２Ｒ水平升高可能是ＩＴＰ细胞免疫功能下降的原因之一。检测血清ＳＩＬ－２Ｒ水平     

特应性皮炎白介素2及可溶性受体检测和意义

目的：探讨白介素2（IL-2）及其可溶性受体（sIL-2R）在特应性皮炎(AD)患者血清中的水平以及与病情的相关性。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例AD患者及20例正常人血清中IL-2、sIL-2R水平。采用特应性皮炎积分（SCORAD）指数评价患者病情严重程度,分析其与血清IL-2及sIL-2R水平的相关性。结果：与正常人对照组相比,AD患者血清IL-2水平下降,但差异无显著性(P>0.05),患者血清sIL-2R水平升高,差异有显著性(P<0.05)。患者血清sIL-2R水平的变化分别与皮损面积呈显著正相关(r=0.37,P<0.05),与患病时间呈显著负相关 (r=-0.398,P<0.05)。结论：AD患者血清低水平的IL-2,可能降低调节性T细胞表达免疫抑制功能,在AD病情活动或迁延过程中发挥作用。AD患者sIL-2R升高与AD的皮损面积和患病时间有关。