非诺贝特和吡格列酮对血管紧张素Ⅱ介导的心肌细胞肥大和凋亡的干预作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体α和γ(PPARα和PPARγ)的配体非诺贝特、吡格列酮对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌细胞肥大、凋亡的干预作用,并观察其对凋亡相关基因Bcl-2/Bax表达变化的影响 .方法 分别以非诺贝特和/或吡格列酮预处理体外原代培养的新生大鼠心肌细胞24 h后,再加用Ang Ⅱ作用24 h.采用软件分析细胞表面积,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用Western-blot法观察凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达变化,逆转录聚合酶链反应检测PPARα和PPARγ的mRNA水平.结果 与Ang Ⅱ组比较,非诺贝特组、吡格列酮组及非诺贝特和吡格列酮组的心肌细胞表面积、细胞凋亡率及Bax蛋白的表达明显降低(P＜0.05),而 Bax蛋白的表达和Bcl-2/Bax蛋白水平比值显著增加(P＜0.05),非诺贝特组、吡格列酮组及非诺贝特和吡格列酮组间的上述指标差异无显著性(P＞0.05),非诺贝特组的PPARα mRNA和吡格列酮组的PPARγ mRNA表达增高.结论 PPARα和γ激活可逆转心肌细胞肥大,抑制心肌细胞凋亡,并能改变凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达,但PPARα、γ配体合用无叠加效应.     

非诺贝特和吡格列酮对血管紧张素Ⅱ介导的心肌细胞肥大和凋亡的干预作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体α和γ(PPARα和PPARγ)的配体非诺贝特、吡格列酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大、凋亡的干预作用,并观察其对凋亡相关基因Bcl-2/Bax表达变化的影响。方法分别以非诺贝特和/或吡格列酮预处理体外原代培养的新生大鼠心肌细胞24h后,再加用AngⅡ作用24h。采用软件分析细胞表面积,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用Western-blot法观察凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达变化,逆转录聚合酶链反应检测PPARα和PPARγ的mRNA水平。结果与AngⅡ组比较,非诺贝特组、吡格列酮组及非诺贝特和吡格列酮组的心肌细胞表面积、细胞凋亡率及Bax蛋白的表达明显降低(P<0.05),而Bax蛋白的表达和Bcl-2/Bax蛋白水平比值显著增加(P<0.05),非诺贝特组、吡格列酮组及非诺贝特和吡格列酮组间的上述指标差异无显著性(P>0.05),非诺贝特组的PPARαmRNA和吡格列酮组的PPARγmRNA表达增高。结论PPARα和γ激活可逆转心肌细胞肥大,抑制心肌细胞凋亡,并能改变凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达,但PPARα、γ配体合用无叠加效应。     

过氧化物酶体增殖物激活型受体α、γ配体对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞增殖的抑制作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体(PPARs)配体对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响及其机制.方法体外传代培养乳鼠CFs,分别以非诺贝特(PPARα配体)和(或)吡格列酮(PPARγ配体)预处理24 h后,加用AngⅡ刺激诱导CFs增殖.应用流式细胞仪分析细胞周期,以MTT比色法测定心肌细胞活力,反映细胞增殖及胶原合成.结果与对照组比较,非诺贝特、吡格列酮均降低AngⅡ诱导的CFs的S期细胞比率和增殖指数,抑制AngⅡ引起细胞活力改变和增殖(P＜0.01).相对单独用药组,2药合用组的上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论PPARs信号通路激活能有效抑制AngⅡ诱导的CFs增殖,预防心肌纤维化.PPARα、γ配体合用未见明显叠加效应.     

非诺贝特对过氧化物酶体增殖物激活受体α和单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的观察非诺贝特对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、单核细胞过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法体外培养HUVEC株,第3~5代用于实验。实验分3组:1空白对照组;2ox-LDL组(100 mg/L);3非诺贝特组:先将非诺贝特10、50、100μmol/L分别作用于内皮细胞24 h,然后加ox-LDL(100 mg/L)作用于细胞24 h。采用细胞酶联免疫吸附法分析检测细胞培养上清液PPARα、MCP-1含量;采用四唑盐比色法检测各孔的吸收度(OD),以评价增殖效果。结果与空白对照组比较,100 mg/L ox-LDL促进内皮细胞增殖(PO.01),非诺贝特呈剂量依赖性地抑制ox-LDL诱导的内皮细胞增殖(P0.01)。100 mg/L ox-LDL促进MCP-1分泌。10、50、100μmol/L非诺贝特能明显促进ox-LDL诱导的HUVEC分泌PPARα(P0.01),促进效应呈浓度依赖性。10、50、100μmol/L非诺贝特能明显抑制ox-LDL诱导的HUVEC分泌MCP-1(P0.01),抑制效应呈浓度依赖性。结论非诺贝特呈剂量依赖性促进ox-LDL诱导的人HUVEC分泌PPARα,抑制人HUVEC分泌MCP-1,抑制内皮细胞增殖,保护内皮功能,从而发挥贝特类调脂外抗动脉粥样硬化作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂干预大鼠血管外膜成纤维细胞迁移

目的 检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂及吡格列酮对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导血管外膜成纤维细胞(AF)迁移的调节作用及机制.方法 采用贴壁法培养SD大鼠胸主动脉AF.Transwell观察Ang Ⅱ诱导AF迁移作用,RT-PCR检测Ang Ⅱ 1型受体(AT1R)mRNA水平.结果 (1)Ang Ⅱ刺激AF迁移呈浓度依赖性,当Ang Ⅱ的浓度为10-7mol/L时,AF迁移数目最大(P＜0.01);(2)PPARγ激动剂15D-PJG2和吡格列酮可抑制Ang Ⅱ诱导AF迁移,并且呈剂量依赖性,浓度为10×10-6mol/L时作用最明显(P＜0.01);(3)AT1R阻滞剂(氯沙坦)可完全抑制Ang Ⅱ诱导的AF迁移(P＜0.01),而AT2R阻滞剂(PD123319)对AF迁移无明显抑制作用(P＞0.05);(4)与对照组相比,15D-PJG2和吡格列酮干预组AT1R mRNA表达水平呈剂量依赖性下降,浓度为10×10-6mol/L时抑制作用最明显(P＜0.01).结论 PPARγ激动剂可抑制Ang Ⅱ诱导的AF迁移,这可能是通过下调AF AT1R mRNA表达发挥作用.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂干预大鼠血管外膜成纤维细胞迁移

目的检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂及吡格列酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管外膜成纤维细胞(AF)迁移的调节作用及机制。方法采用贴壁法培养SD大鼠胸主动脉AF。Tran-swell观察AngⅡ诱导AF迁移作用,RT-PCR检测AngⅡ1型受体(AT1R)mRNA水平。结果(1)AngⅡ刺激AF迁移呈浓度依赖性,当AngⅡ的浓度为10-7mol/L时,AF迁移数目最大(P<0·01);(2)PPARγ激动剂15D-PJG2和吡格列酮可抑制AngⅡ诱导AF迁移,并且呈剂量依赖性,浓度为10×10-6mol/L时作用最明显(P<0·01);(3)AT1R阻滞剂(氯沙坦)可完全抑制AngⅡ诱导的AF迁移(P<0·01),而AT2R阻滞剂(PD123319)对AF迁移无明显抑制作用(P>0·05);(4)与对照组相比,15D-PJG2和吡格列酮干预组AT1R mRNA表达水平呈剂量依赖性下降,浓度为10×10-6mol/L时抑制作用最明显(P<0·01)。结论PPARγ激动剂可抑制AngⅡ诱导的AF迁移,这可能是通过下调AFAT1R mRNA表达发挥作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体调节大鼠肺纤维化的作用机制

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及其配体在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化中的作用及参与机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为4组,即生理盐水对照组、罗格列酮对照组、博莱霉素组、罗格列酮干预组,经气管内注射博莱霉素建立肺纤维化模型。采用Masson染色观察肺组织形态学变化;碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸含量;免疫组化及荧光定量RT-PCR检测PPARγ、MMP-9和TGF-β1的表达。结果气管内注入博莱霉素后,肺组织中羟脯氨酸含量、胶原沉积、MMP-9、TGF-β1及PPARγ表达较生理盐水对照组增加（P均〈0.05）;给予罗格列酮干预后,除PPARγ表达进一步增加,上述指标均下降（P均〈0.05）。相关性分析显示,博莱霉素组PPARγ蛋白水平与MMP-9和TGF-β1mRNA表达分别呈负相关（P均〈0.05）。结论 PPARγ参与了肺纤维化的发生;PPARγ及其配体罗格列酮可能通过抑制TGF-β1、MMP-9转录,从而减少胶原沉积,延缓博莱霉素诱导的肺纤维化进程。     

PPARoL／Υ激动剂对糖尿病伴冠心病患者血浆炎症因子的影响△

目的探讨联合应用过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisomeproliferator-activatedreceptor,PPAR）α／Υ激动剂对糖尿病伴冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者血浆炎症因子的影响。方法将80例伴有糖尿病的冠心病患者分为马来酸罗格列酮组（n=20）、苯扎贝特组（n=20）、马来酸罗格列酮和苯扎贝特联合组（n=20）、常规治疗组（n=20）。治疗后,对所有患者随访12周。治疗前后均对所有患者采血,并用酶联免疫吸附法测定患者血浆C反应蛋白、单核细胞趋化蛋白-1（monocytechemotacticprotein-1,MCP-1）,观察患者空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白-Alc（HbAlc）、血脂、体质量指数的改变。结果联合组、马来酸罗格列酮组、苯扎贝特组血浆C反应蛋白、MCP-1、空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇浓度和胰岛素抵抗指数治疗12周后比治疗前明显降低,高密度脂蛋白胆固醇明显升高．差异有统计学意义（P〈0．05）,且联合组上述指标改善最显著。马来酸罗格列酮组、苯扎贝特组、联合组的单核细胞在脂多糖诱导下分泌MCP-1浓度较治疗前降低,以联合组降低最为显著。C反应蛋白的降低与空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数的降低呈正相关（r=0．498,P〈0．001和r=O．496,P〈0．001）,与其他因素的变化无相关性（P〉0．05）;而MCP-1的变化与糖、脂代谢无相关性（P〉0．05）;C反应蛋白与MCP-1之间也无明显相关性（P〉0．05）。结论联合应用马来酸罗格列酮、苯扎贝特能够降低血浆C反应蛋白和MCP-1浓度,降低血糖和血浆胰岛素浓度,减轻胰岛素抵抗,改善辛伐他汀治疗后残存的高三酰甘油和低高密度脂蛋白胆固醇,效果优于单用马来酸罗格列酮或苯扎贝特。     

曲格列酮对血管内皮细胞凋亡的影响

目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisome proliferators-activated receptor γ,PPARγ)配体曲格列酮(Troglitazone,TGZ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的内皮细胞凋亡的作用。方法观察AngⅡ和(或)TGZ处理后,内皮细胞的形态学改变、Annexin Ⅴ/PI法检测内皮细胞凋亡及流式细胞仪检测凋亡相关蛋白Bax的表达。结果TGZ可引起内皮细胞发生凋亡性形态改变;不同浓度1×10-6~1×10-5mol/L的TGZ均可以引起内皮细胞凋亡率明显增加,且呈浓度依赖性。TGZ和AngⅡ合用,内皮细胞凋亡率明显增加,二者有一定协同作用。TGZ、TGZ和AngⅡ合用均能引起Bax表达水平提高。结论TGZ在1×10-6~1×10-5mol/L浓度时可以引起内皮细胞凋亡并有Bax表达升高,TGZ可以加强由AngⅡ引起的凋亡。     

溶血磷脂酰胆碱对人脐静脉内皮细胞血管紧张素系统的影响

目的 观察溶血磷脂酰胆碱（Lysophosphatidyl choline,LPC）对人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）血管紧张素系统的影响。方法 体外培养HUVECs,分为正常对照组、低浓度（10μg/L）LPC 组、中浓度（20μg/L）LPC 组和高浓度（40 μg/L）LPC 组。采用放射免疫法和RT-PCR 法检测LPC 对HUVECs 血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ）蛋白及AngⅡ 1 型受体（AngiotensinⅡ type1 receptor,AT1R）、AngⅡ 2 型受体（AngⅡ type2 receptor,AT2R）mRNA 表达的影响。结果 与正常对照组相比,LPC 可显著上调HUVECs AngⅡ蛋白及AT1R mRNA 的表达。结论 LPC 能够上调人脐静脉内皮细胞血管紧张素系统部分组分的表达。     

过氧化体增殖物激活受体与胰岛素抵抗

过氧化体增殖物激活受体(peroxisome proliferator activated receptors,PPAR)属于核内受体大家族,分为PPARa、PPARβ及PPARγ3种亚型、PPAR的主要功能是调节基因的转录贝特类降血脂药作为PPARα的配体,特异性地激活PPARα,降低高胰岛素血症和高甘油三酯血症,明显改善胰岛素促进葡萄糖代谢利用的作用、抗糖尿病新药TZD是PPARγ的高亲和力配体,通过激活PPARγ可明显减轻胰岛素抵抗动物的高胰岛素血症,减少糖尿病患高糖血症的发生.     

过氧化物酶增殖物激活受体α激动剂对心脏成纤维细胞增殖的抑制作用

目的: 探讨过氧化物酶增殖物激活受体α（PPARα）激动剂非诺贝特(fenofibrate)对糜酶介导的大鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响及作用机制。方法: 用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠的CFs。采用3H-脱氧胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法测定CFs的DNA合成,用流式细胞术分析细胞周期,用RT-PCR检测PPARα 及转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA的表达。结果: ①以不同浓度的非诺贝特预处理后,CFs的3H-TdR掺入量呈浓度依赖性减少,其中50和100 μmol/L组均较糜酶组明显减少（分别为P<0.05和P<0.01）。②随着非诺贝特浓度的增加,CFs在G0/G1期的百分率逐渐增加,S期的百分率和增殖指数逐渐减少,其中50和100 μmol/L组与糜酶组比较,上述各项指标均有显著性差异（分别为P<0.05和P<0.01）。③以25、50和100 μmol/L非诺贝特预处理后,PPARα mRNA表达的水平呈浓度依赖性增加,其中50和100 μmol/L组均较糜酶组显著增加（分别为P<0.05和P<0.01）。④随着非诺贝特浓度的增加,TGF-β1 mRNA表达水平呈递减趋势,其中50和100 μmol/L组均较糜酶组明显减少（P<0.01）。结论: PPARα 激动剂非诺贝特以浓度依赖的方式抑制糜酶诱导的大鼠CFs增殖的作用,其机制与PPARα基因表达的上调和TGF-β1基因表达的下调有关,提示PPARα 和TGF-β1这两条信号通路可能存在信息交流。     

不同PPAR配体对LPS诱导的人单核细胞组织因子表达的影响

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferater-activated receptors,PPAR)α的配体——非诺贝特、WY14643,PPARγ配体——匹格列酮对脂多糖(LPS)诱导的人单核细胞株-THP-1细胞表达组织因子(TF)的影响。方法:采用RT-PCR法检测单核细胞THP-1的TF mRNA表达水平,用免疫细胞化学法检测细胞TF蛋白表达量。结果:PPAR配体处理组中THP-1细胞TF mRNA水平以及蛋白表达量均较单纯LPS刺激组明显降低。结论:3种PPAR配体均可抑制单核细胞TF mRNA以及蛋白表达,可能经此机制减轻动脉粥样硬化病变的发生。     

鼠双微基因2在血管紧张素Ⅱ和神经酰胺致内皮细胞凋亡中作用的实验研究

目的探讨神经酰胺和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）致内皮细胞凋亡过程中鼠双微基因2（mdm2）的变化及其作用。方法体外培养脐静脉内皮细胞,分别用AngⅡ1型受体拮抗剂氯沙坦、AngⅡ2型受体拮抗剂PDl23319、神经酰胺合成酶抑制剂烟曲霉素B1（FB1）预处理细胞,再加入AngⅡ与双蒸水对照组比较观察细胞凋亡情况及mdm2 mRNA和蛋白的表达,并用不同浓度的c2-神经酰胺进行处理,RT—PCR和Western blot检测mdm2的mRNA和蛋白表达及细胞凋亡的情况。结果PD123319组和FB1组抑制了AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,其凋亡指数明显下降（P〈0．05）,而与对照组相比差异无统计学意义,相反氯沙坦组凋亡指数较对照组显著增加（P〈0．05）,FB1组抑制了mdm2的表达。c2．神经酰胺呈剂量依赖性诱导内皮细胞凋亡,mdm2的表达随着C2-神经酰胺浓度的增加呈现降低的趋势。结论AngⅡ诱导内皮细胞凋亡通过AT2受体和神经酰胺起作用,AngⅡ和神经酰胺可能是通过抑制mdm2来诱导凋亡的。     

伊贝沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞NF-κB激活与ICAM-1表达的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）拮抗剂伊贝沙坦（irbesartan,Irb）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的体外培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）核因子-κB（NF-κB）激活与细胞问粘附分子-1（ICAM-1）表达的影响。方法体外培养的第3～5代HUVEC用于实验。采用免疫组织化学分析检测细胞NF—κB弧单位p65、ICAM—1的表达程度。结果AngⅡ有效激活NF—κB并诱导HUVEC表达ICAM-1增加Irb预先孵胄2h能抑制NF—κB并减轻AngⅡ诱导的HUVEC ICAM-1表达。结论AngⅡ通过激活NF-κB使ICAM-1表达增加损伤血管内皮功能Irb能抑制NF-κB激活降低HUVEC ICAM-1表达,从而保护血管内皮功能,这有可能减轻心血管疾病损伤的进展。     

高糖通过激活人脐静脉内皮细胞ⅠκB-α/NF-κB途径诱导MCP-1的表达

目的观察高糖诱导人脐静脉内皮细胞NF-κB的活性和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达,探讨糖尿病并发动脉粥样硬化的发病机制。方法在培养的人脐静脉内皮细胞中加入不同浓度葡萄糖,检测内皮细胞中MCP-1mRNA、MCP-1蛋白的表达,NF-κB的活性及IκB-α的磷酸化水平。结果高糖明显地诱导了血管内皮细胞NF-κB的活性、MCP-1的表达及IκB-α的磷酸化;NF-κB活性抑制剂明显地降低了高糖所诱导的MCP-1的表达。结论高糖通过诱导血管内皮细胞IκB-α的磷酸化激活NF-κB,从而诱导了MCP-1的表达。提示在糖尿病并发动脉粥样硬化的发病过程中,高血糖通过激活血管内皮细胞IκB-α/NF-κB途径诱导MCP-1的表达,进而发挥了重要的作用。     

血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮和超氧阴离子的影响

目的 研究不同途径生成的血管紧张素(Ang)Ⅱ对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮(NO)和超氧阴离子(O2^-)的影响。方法 应用卡托普利(商品名：开博通)、chymostafin(一种胃促胰酶抑制剂)、抑肽酶(广泛的蛋白酶抑制剂)、氯沙坦[AngⅡ1型受体(AT1受体)拮抗剂]分别阻断体外培养的人脐静脉内皮细胞AngⅡ的生成或阻断其与受体结合，观察细胞培养液中NO和O2^-的变化。结果 高浓度AngⅡ使内皮细胞NOS活性下降，NO产生减少，SOD活性下降，O2^-产生增加；100、1000μmol／L卡托普利使。AngⅡ的生成分别降低了11．15％和17．06％；100、1000μmol／L chymostatin使AngⅡ的生成分别降低了60．23％和68．48％；1μmol／L抑肽酶使AngⅡ的生成降低了13．96％；卡托普利 chymostatin使人脐静脉内皮细胞产生AngⅡ减少85．81％；卡托普利 抑肽酶抑制29．57％。AngⅡ的生成；卡托普利 chymostatin 抑肽酶几乎完全抑制人脐静脉内皮细胞将AngⅠ转变成AngⅡ，与AngⅠ组相比降低97．71％；氯沙坦不能阻断内皮细胞使AngⅠ转变成AngⅡ。阻断AngⅡ的生成或阻断其与受体结合均可以使内皮细胞NOS活性升高，NO产生增加，SOD活性升高，O2^-产生减少。结论 内皮细胞AngⅡ的生成主要是胃促胰酶途径，阻断胃促胰酶途径AngⅡ的生成可以使NO产生增加，O2^-生成减少。AngⅡ引起内皮细胞NO和O2^-的改变是AT1受体介导的。     

血管紧张素Ⅱ／1型受体拮抗剂对心肌细胞凋亡影响及机制

目的探讨血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）／1型受体拮抗剂（AT1 R Irbeartan）对心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法采用TUNEL方法检测凋亡细胞数，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Caspase-9mRNA表达改变。结果随着时间延长10^-7mol／L AngⅡ显著增加凋亡心肌细胞数量；同时心肌细胞Caspase-9mRNA表达增加。10^7mol／L AngⅡ＋10^-5mol／L Irbesartan干预组凋亡心肌细胞数及Caspase-9mRNA表达受到抑制。结论血管紧张素Ⅱ可以诱导乳鼠心肌细胞凋亡。其作用可能通过1型受体介导，Irbesartan能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡。AngⅡ诱导心肌细胞凋亡与Caspase-9激活相关。     

非诺贝特对血管钙化的影响及机制研究

目的在大鼠血管钙化模型上,探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated re-ceptorα,PPARα)激动剂非诺贝特对血管钙化的影响及其可能的作用机制。方法实验动物按随机数字表法分正常组、钙化组及钙化+非诺贝特组,每组10只。钙化组采用维生素D3和尼古丁诱导大鼠血管钙化模型,钙化+非诺贝特组于造模后第2天开始,非诺贝特灌胃[30 mg/(kg·d)]。采用Von Kossa染色检测血管钙化程度,采用钙离子测试盒、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒测定大鼠主动脉钙浓度和ALP活性,采用Beckman Coulter AU5800仪器检测血清三酰甘油(triacylglycerol,TG)浓度,采用放射免疫法检测大鼠血清单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)浓度,采用免疫组织化学法检测主动脉MCP-1受体表达。结果 Von Kossa染色可见血管钙化模型大鼠主动脉有大量黑色颗粒沉淀,钙化组血管钙浓度、ALP活性高于正常组,差异有统计学意义(P0.01);同时,与正常组比较,钙化组血清MCP-1浓度和主动脉组织MCP-1受体表达明显上调(P0.01)。用非诺贝特干预后,血管钙化程度减轻(P0.01),同时血清MCP-1及其受体的表达下调,与钙化组比较差异有统计学意义(P0.01)。3组动物血清TG浓度比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 PPARα激动剂非诺贝特可抑制血管钙化,可能通过下调MCP-1表达和ALP活性抑制血管钙化的发生、发展过程。     

罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ受体表达的影响

目的探讨罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ受体表达的影响及抗动脉粥样硬化可能的分子机制。方法体外培养SD大鼠血管平滑肌细胞，应用半定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术，测定罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体mRNA和蛋白表达的剂量、时间依赖的影响。结果基础状态下，血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体均有少量的表达。血管紧张素Ⅱ显著上调血管紧张素Ⅱ1型受体（P〈0.01）和下调2型受体的表达（P〈0．05）。浓度依赖实验表明，不同浓度罗格列酮（20、30和50μmol／L）干预12h均显著下调血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白的表达（P〈0．01），上调2型受体mRNA和蛋白的表达（P〈0．01和0．05）。时间依赖实验表明，30μmol／L的罗格列酮干预后，6h即出现明显的干预效应，24h时下调血管紧张素Ⅱ1型受体和上调2型受体mRNA和蛋白的作用最大，与血管紧张素Ⅱ组比差异有显著性（P〈0．01）。结论罗格列酮可呈浓度依赖和时间依赖性地下调血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白的表达，上调血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA和蛋白的表达，这可能是过氧化体增殖物激活型受体7激动剂罗格列酮发挥抗炎、抗动脉粥样硬化作用的重要机制。