基于ITS2序列蒙药甘草DNA分子鉴定研究

目的应用DNA条形码技术准确、快速鉴定蒙药材甘草。方法采用试剂盒法提取药材的基因组DNA,PCR扩增其核糖体DNA的内转录间隔区(internal transcribed spacer 2,ITS2)并进行双向测序,应用CodonCode Aligner17.0对测序峰图进行校对拼接,比较ITS2序列的GC含量,采用MEGA 5.0计算种内遗传距离,并得到峰图和二级结构。结果甘草药材的ITS2序列长度为223 bp,种内无变异,平均K2P遗传距离为0,GC含量53%,建立其二级结构和峰图。结论 ITS2基因序列可以鉴定蒙药材甘草,为该蒙药的分子鉴定提供方法。     

蒙药香青兰DNA条形码分子鉴定研究

目的建立蒙药香青兰的ITS2基因序列的DNA条形码分子鉴定方法。方法取样品10份应用ITS2基因序列DNA条形码分子鉴定方法进行PCR扩增以及测定相关序列,在此基础上运用DNAMEAN和CodonCode Aligner17.0等软件进行相关分析。结果 ITS2序列长度168bp,遗传距离(K2P)为0、G+C含量66.51%以及相应的二级结构和峰图。结论 ITS2基因序列分析为香青兰DNA条形码研究奠定基础。     

蒙药山沉香的化学成分和药理活性研究

山沉香为蒙药特色药材,局限分布于内蒙与宁夏的贺兰山地区,临床上多用于治疗冠心病心绞痛等心肺疾病。现代研究显示,山沉香主要含木脂素、倍半萜和挥发油类,显示出抗心肌缺血等功效。目前在我国对于山沉香的研究还不是很详细,所建立的研究范围与研究实验还是很有局限性的,对于山沉香的研究还要更加开阔领域,将山沉香没有发现的潜在资源优势发掘出来,将这种药物的更多药用价值开发出来,为更多的患者造福。该文从山沉香的原植物分类、药用资源、化学成分及药理活性等方面对其进行归纳总结,以期为相关的药用资源利用、药效物质阐明及开发应用等奠定基础。     

蒙药山沉香抗心肌缺血及其作用机制研究

目的:探讨蒙药山沉香抗心肌缺血的作用及可能机制,从而为该药后续的开发研究提供科学依据,也为其临床应用奠定部分基础.方法:Wistar大鼠分别给予山沉香原粉、醇提物、挥发油、醇提物+挥发油,采用皮下注射异丙肾上腺素(ISO)造成急性心肌缺血模型,末次给药后观察心电图变化,HE染色观察大鼠心肌组织病理变化,RT-PCR法检...     

基于ITS序列的紫芝分子鉴定

目的 建立基于ITS序列的紫芝分子鉴定方法.方法 分析20株灵芝属菌株ITS序列,设计紫芝的特异性引物.结果 用此引物对20株灵芝属菌株的DNA进行扩增,只有2株紫芝菌株有目的扩增条带.结论 设计的特异性引物有很高的专属性,能高度特异地鉴定紫芝菌株.     

中药DNA分子标识鉴定研究进展

分子生物学技术在生药学中应用研究方兴未艾。综述了ＤＮＡ分子遗传标记技术在近缘易混淆生药鉴定、药材道地性研究、中药质量标准化、中医药古迹考证、药材种子种苗检测等方面的研究进展，并提出一些值得注意的问题以及偏隍可能的发展方向。     

基于ITS序列对独活17个种的分子鉴定

目的 通过对17个种共26个独活样本的ITS序列分析,为国内中药市场上的常见独活的分子鉴定提供依据,并探索其科学分类标准。方法 对26个样本的ITS进行PCR扩增和测序。通过MEGA 5.0软件比较各序列间的差异性,计算K2P遗传距离;采用邻接法构建NJ系统树并应用Network 4.2.0.1软件进行中间连接网法分析构建单倍型网状图。结果 NJ系统树和单倍型网状图显示,26个样本聚集为5大类群,综合分析后将17种独活归为4大类;重齿毛当归Angelica pubescens的ITS序列具有特征碱基片段,可明显区别于其他样本;除牛尾独活类中3个样本不能通过ITS序列鉴定到种以外,其他样本均可以通过ITS序列鉴定到种。结论 ITS序列可为药用独活的鉴定和分类提供有力证据,四带芹类可以作为独活的首选替补品,牛尾独活类其次,九眼独活为最后之选。     

天山棱子芹的DNA条形码分子鉴定

目的 应用DNA条形码技术对采集的天山棱子芹样本基原进行分子鉴定.方法 提取样品总DNA并以ITS2扩增序列为主,psbA-trnH扩增序列为参考,对天山棱子芹样本DNA进行扩增,通过琼脂糖凝胶电泳检测总DNA及引物扩增结果,并进行测序.将两引物扩增成功并测序后的序列导入美国国立生物技术信息中心(national ce...     

叶绿体DNA序列分析在药用植物鉴定中的应用

随着DNA测序技术的发展,叶绿体DNA序列分析被广泛应用于药用植物鉴定和品质研究等方面。本文介绍了近年来叶绿体DNA序列分析在植物系统学和药用植物研究中的应用,认为其在药用植物品种鉴定和伪品鉴别、保护种质资源以及扩大新药源等领域有广阔的应用前景。     

基于ITS2序列的羌活及其混伪品的DNA条形码鉴定

目的 对羌活及其混伪品进行分子鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法 利用PCR测序法,对样品进行核基因ITS2片段扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA 4.0进行相关数据分析,并构建邻接（NJ）树。利用已建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果 羌活与宽叶羌活ITS2序列长度均为228 bp,二者种内平均K2P（Kimura-2-parameter）遗传距离均远远小于其与混伪品的种间平均K2P遗传距离;由所构建的系统聚类树图可以看出,羌活与宽叶羌活均表现出了单系性,而同时又与其他混伪品明显分开;比较ITS2二级结构发现,羌活基原植物与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以方便快捷地鉴别羌活及其混伪品,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据。     

DNA分子诊断技术在中药鉴定中应用

综述DNA分子诊断技术在中药鉴定中的应用研究 ,重点论述分子诊断技术的分类及常用RAPD技术 ,AFLP技术及基因片段序列研究状况。     

红花种质的随机扩增多态性DNA分子鉴定

目的:从分子水平探讨红花(Carthamus tinctorius L.)的种内变异,为红花种质的分子鉴定提供依据.方法:用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA, RAPD)技术和统计学分析方法,对从我国新疆、甘肃、宁夏、河南、山东、山西、河北、安徽、浙江等9省采集的红花22个品种的遗传多样性进行分析.结果:根据RAPD特征图谱,通过在DNA分子水平上的聚类分析,将红花22个品种分为7个类型.RAPD聚类分析表明了品种间的亲缘关系:北方,特别是新疆地区的品种亲缘关系较近,PCR结果极为相似,而南方品种间遗传差异性较大.结论:红花种内存在一定的遗传变异,本研究结果为红花品种鉴定及亲缘关系的探讨提供一定依据.     

DNA分子标记在中药鉴定中的应用进展

DNA分子标记包括以分子杂交(southern杂交)为基础的DNA分子标记技术、以PCR为基础的DNA分子标记技术和以DNA序列为基础的分子标记技术和DNA序列测定技术.本文概述了常用DNA分子标记技术的特点,对近年来DNA分子标记在中药鉴定中的应用进行了综述.     

基于psbA-trnH序列对广藿香与藿香、广防风的分子鉴定

目的：采用叶绿体基因psbA-trnH间隔区序列探讨广藿香及其常见伪品的分子鉴定方法。方法分别提取广藿香及藿香、广防风植物的总DNA,经PCR扩增psbA-trnH间隔区序列,产物纯化后测序,采用Clustal_X 1.8和MEGA 5.05软件对序列进行分析。结果广藿香与藿香、广防风的最小种间K2P 距离(0.1592)大于最大种内K2P距离(0.0043),邻接树中广藿香9个不同产地来源样品聚为一支。广藿香与藿香、广防风之间存在多个特异性信息位点。结论 psbA-trnH序列可作为广藿香及藿香、广防风分子鉴定的依据。     

基于rbcL序列对猫人参及其近缘种的分子鉴定研究

目的：分析猫人参及其近缘种的核酮糖-1,5-二磷酸酯羧化酶基因（ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase,rbcL）序列,探讨rbcL序列在猫人参基源鉴定中的应用。方法：采用试剂盒提取所有样品的脱氧核糖核酸,基于rbcL序列并采用DNAman、Editseq、MEGA-X等软件进行序列比对与分析,构建ML系统聚类树。结果：猫人参rbcL序列长度为507 bp,其中鸟嘧啶+胞嘧啶含量为43.59%和43.39%,猫人参及其近缘种共产生变异位点10个,聚类分析表明猫人参基源种对萼猕猴桃与大籽猕猴桃聚为一类,此二者又与葛枣猕猴桃聚为一类,其余近缘种聚为一类。结论：根据rbcL序列变异位点和系统聚类树可区分猫人参及其近缘种,rbcL序列可用于猫人参及其近缘种的分子鉴定。     

DNA条形码序列对9种蒿属药用植物的鉴定

目的 采用DNA条形码序列对9种常见的蒿属药用植物进行鉴定,为常见蒿属药用植物的鉴定提供分子依据。方法 对9种常见蒿属药用植物的4条候选DNA条形码序列（ITS2、rbcL、matK、psbA-trnH）进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增和测序效率,应用BLAST1、Distance方法来评估各序列的鉴定效率。此外,基于MEGA5分析9种常见蒿属药用植物ITS2序列种间K2P遗传距离并构建NJ树。结果 除matK外,其余3条片段的PCR扩增和测序效率均为100%,ITS2序列对9种蒿属药用植物的物种水平鉴定成功率最高,为100%,而psbA-trnH、rbcL、matK、matK＋rbcL的鉴定成功率（BLAST1法）分别为83.3%、66.7%、54.5%、75%。通过ITS2序列的种间K2P遗传距离及NJ树均能将不同物种全部区分。结论 ITS2序列可以作为鉴定蒿属药用植物的潜在条形码。     

蒙药珍宝丸结合沉香十七味丸治疗颈椎病体会

蒙药珍宝丸(额尔敦乌日勒)是治疗黑、白脉性疾病的主要方剂,而沉香十七味丸(阿嘎日-17)能止痛、消炎、消肿,激活筋健、韧带、骨细胞正常代谢,溶解骨赘骨刺,持续活血化瘀,除痹通络,因此,蒙药珍宝丸结合沉香十七味丸治疗颈椎病疗效确切,加之服用方便,安全性高,经济实惠等独特优越性,值得临床借鉴。