探讨透明质酸与兔滑膜间充质干细胞联合对膝关节软骨损伤的修复作用及机制

目的对透明质酸与兔滑膜间充质干细胞联合对膝关节软骨损伤的修复作用及机制进行研究分析。方法制备兔滑膜间充质干细胞,建立兔膝关节软骨损伤模型,采用随机数字表法分成4组,干预时对照组给予关节腔0.5 m L生理盐水注射,透明质酸组给予0.5 m L透明质酸溶液注射,兔滑膜间充质干细胞组给予0.5 m L 2×107个兔滑膜间充质干细胞注射,联合组给予0.5 m L 2×107个兔滑膜间充质干细胞透明质酸溶液注射。在术后8周,展开苏木素-伊红染色组织学观察,并进行评分。同时进行细胞凋亡检测、黏多糖、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、Ⅱ型胶原检测。结果组织学检查结果显示,联合组对软骨损伤修复效果显著优于单独治疗组(P0.05),并且联合组对软骨损伤修复组织学总评分高于单独治疗组(P0.05)。结论透明质酸联合兔滑膜间充质干细胞对修复软骨损伤具有显著有效,其作用机制可能是利用对软骨细胞凋亡、炎性反应的发生进行抑制而发挥促进软骨损伤修复的作用。     

纳米HA/CS支架穿“靴”复合软骨样细胞修复兔关节软骨和软骨下骨缺损

【目的】观察把骨髓间质干细胞(BMSCs)诱导成的软骨细胞与纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架(nano-HA/CSscaffold)通过特殊的穿"靴"结构复合构建而成组织工程软骨复合体的可行性,并观察此复合体修复兔膝关节软骨及软骨下骨缺损的能力。【方法】原位复合和冷冻干燥相结合的方法制备nano-HA/CS支架,用聚四氟乙烯制作成圆柱形"靴"结构。把BMSCs经软骨诱导液诱导成软骨细胞后,接种于穿"靴"的nano-HA/CS支架底部,把细胞-支架复合物置入成软骨条件培养液中培养2周。扫描电镜观察nano-HA/CS支架结构及细胞-支架复合体结构。30只新西兰大白兔的股骨髁制造直径4 mm、深8 mm的骨软骨缺损,随机分为实验组、对照组、空白组,于缺损处分别植入经穿"靴"结构复合的软骨支架复合体、不经穿"靴"结构复合的软骨支架复合体,空白组仅造缺损,4、12周后取材初步观察修复情况。【结果】BMSCs经软骨诱导液诱导后转化成软骨细胞;制备的nano-HA/CS支架支架孔隙率为92%,平均孔径为125μm,与软骨细胞有较好的粘附性。大体观察实验组和对照组缺损均有类软骨样组织生长,空白组缺损明显,见纤维组织生长。苏木精-伊红染色切片观察实验组软骨缺损部分软骨细胞修复,成骨区部分骨样细胞修复,两者耦合处部分交叉,修复缺损程度及成骨区和成软骨区界面耦合情况明显优于对照组和空白组。3组的大体评分和软骨组织学评分统计分析,实验组优于对照组和空白组。【结论】BMSCs具有成软骨潜能,nano-HA/CS支架具有较好的细胞相容性;软骨细胞与nano-HA/CS支架经过穿"靴"结构可成为组织工程软骨复合体,并初步证实有修复兔软骨及软骨下骨缺损的能力。     

自体骨髓基质干细胞修复股骨头关节软骨缺损的实验研究

目的 探讨自体骨髓基质干细胞修复兔股骨头软骨缺损的可行性.方法 1、建立兔髋关节软骨缺损动物模型16只,对照组8只,实验组8只;2、取兔髂骨骨髓,体外分离、培养、扩增、骨髓基质干细胞,诱导分化为软骨样细胞并进行细父胞标记;3、与生物材料混合后植入体内修复兔股骨头关节软骨缺损,8周后观察修复效果;结果 8周后大体标本显示关节软骨缺损为白色软骨样组织填充,组织切片显示缺损处有新生软骨形成,阿新兰染色和Ⅱ型胶原免疫组化检测有GAG和Ⅱ型胶原强阳性表达;结论经诱导分化后的自体骨髓基质干细胞复合生物材料移植可用于修复兔股骨头关节软骨缺损.     

兔半月板软骨损伤修复的实验研究

目的 探讨兔半月板软骨损伤修复的条件。方法 选用健康青紫兰兔48只，首先在兔半月板上造成统一的无血运区损伤模型。随机将兔分成四组，分别为空白对照组、FGF治疗组、FS治疗组和FGF／FS治疗组。术后2周、6周、12周分批处死动物，进行大体形态观察和组织学检查。结果 FS治疗组能形成疤痕组织愈合；FGF治疗组对无血运区裂伤愈合无明显影响，而对半月板边缘滑膜中成纤维细胞有促增殖作用；FGF／FS治疗组为纤维软骨样组织愈合，但其愈合组织与正常半月板组织仍有差异。结论 应用FGF与FS复合物治疗半月板无血运区的损伤是一条有效的治疗途径。     

兔膝骨关节炎动物模型的构建

目的:建立一种符合临床症状的兔膝骨关节炎动物模型。方法:家兔随机分为对照组与实验组,实验组麻醉剪断前后交叉韧带,同时去除内侧半月板建立兔膝骨关节炎动物模型,对照组不做处理,取造模部位股骨端进行HE染色,统计分析。结果:实验组兔膝关节滑膜细胞轻度增生,下层疏松纤维姐织增生,胶原化,可见少量散在淋巴浆细胞浸润,部分区域软骨细胞核固缩、裂解、坏死,偏于一侧,钙化层软骨细胞呈簇状堆积,排列紊乱,潮线多不规整或完全消失,甚至软骨下骨质外露、软骨下骨囊性变。结论:剪断前后交叉韧带合并去除内侧半月板可成功建立符合临床变化的兔膝骨关节炎动物模型。     

脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合体在兔骨关节软骨损伤修复中的作用

目的 探讨脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合体在新西兰大白兔骨关节软骨损伤修复中的意义。方法 12只兔随机分为两组,每组6只,观察组兔膝关节内植入复合支架材料,另对照组6只体内注射等量生理盐水。结果 实验组兔软骨缺损区充填充分,修复后的软骨组织呈现半透明、乳白色,色泽圆润、表面光滑,且Wa-kitani评分显著优于对照组（P〈0．05）。结论 脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合支架可用于关节软骨缺损的修复。     

复合雪旺细胞的小肠黏膜下层修复急性脊髓损伤的研究

目的应用复合雪旺细胞(SC)的小肠黏膜下层(SIS)修复大鼠急性脊髓损伤。方法选取健康的SD大鼠36只,随机分成实验组和对照组,每组各18只。实验组用复合SC的SIS移植修复损伤区,对照组原位植入原先切除的脊髓组织。术后4、8、12周进行一般情况观察、组织形态学检查、体感诱发电位检查和计算机图像分析。结果实验组移植区炎性细胞浸润不明显,有大量再生的有髓神经轴突,无明显变性坏死和胶质瘢痕增生现象,明显优于对照组。计算机图像分析示实验组与对照组相比,轴突的平均直径较大,单位面积的轴突数量较多,且有显著性差异(P<0.05)。结论复合SC的SIS具有促进急性脊髓损伤修复的作用。     

膝骨关节炎大鼠滑膜组织中半乳糖凝集素-3变化趋势研究

目的目前的研究关于膝骨关节炎(KOA)中半乳糖凝集素-3(Galectin-3)的较少。旨在研究膝骨关节炎大鼠滑膜组织中Galectin-3的变化趋势及就近年关于Galectin-3在骨性关节炎中作用的相关研究进行归纳分析。方法 20只3～8周龄成年雄性Wistar大鼠,随机分成对照组、实验组,经统计学分析结果差异无显著性意义(P0.05),证明分组情况合理。实验组1周内3次注射4%木瓜蛋白酶诱导膝骨关节炎;对照组:处理方法及注射部位与实验组大鼠相同,利用注射器将同等量生理盐水注射入关节腔。实验开始第10天采用多种方式验证造模成功。取大鼠右膝关节滑膜采取免疫组化法进行结果分析观察。结果①与对照组相比,实验组大鼠软骨呈淡黄白色,色泽暗淡,软骨表面粗糙出现剥脱,有软骨缺损出现软骨下骨质暴露,有增生出现。②三维 CT 关节间隙值变小[对照组(0.6800±0.0163) mm,实验组(0.5580±0.0339)mm,P0.05]。③Mankins 评分验证了大鼠膝关节骨性关节炎的早期阶段(10 d 内)组间差异有显著性意义[对照组(1.50±0.707),实验组(8.20±2.150),P0.01]。④免疫组化法观察滑膜组织中半乳糖凝集素 3 的变化。与对照组相比,实验组大鼠关节滑膜组织细胞质或细胞核中棕褐色颗粒明显增多[对照组(8.75±6.50),实验组(52.94±2.24),P0.01]。结论 Galectin-3是诱导炎症因子分泌的有效调节剂,参与了膝骨关节炎早期滑膜炎症的形成及进展过程。     

复合雪旺细胞的小肠黏膜下层修复急性脊髓损伤的研究

目的 应用复合雪旺细胞(SC)的小肠黏膜下层(SIS)修复大鼠急性脊髓损伤.方法 选取健康的SD大鼠36只,随机分成实验组和对照组,每组各18只.实验组用复合SC的SIS移植修复损伤区,对照组原位植入原先切除的脊髓组织.术后4、8、12周进行一般情况观察、组织形态学检查、体感诱发电位检查和计算机图像分析.结果 实验组移植区炎性细胞浸润不明显,有大量再生的有髓神经轴突,无明显变性坏死和胶质瘢痕增生现象,明显优于对照组.计算机图像分析示实验组与对照组相比,轴突的平均直径较大,单位面积的轴突数量较多,且有显著性差异(P<0.05).结论 复合SC的SIS具有促进急性脊髓损伤修复的作用.     

兔膝骨性关节炎治疗中透明质酸钠与曲安奈德对滑膜和软骨的影响

目的：评估透明质酸钠与曲安奈德对兔膝骨性关节炎中关节滑膜及软骨的影响。方法24只新西兰兔制造骨关节炎模型后按数表法随机分为对照组、透明质酸钠(SH)组、曲安奈德(TA)组,每组各8只,分别进行关节腔注射生理盐水0.4 mL、SH 0.4 mL、TA 0.4 mL,每周一次,每组6次。6周后观察每组兔膝关节滑膜组织病理切片、血管滑膜SP法染色、软骨AB-PAS染色及MMP-1免疫组化。结果滑膜病理切片显示,SH组滑膜增生最少, TA组滑膜增生较少,对照组滑膜增生明显;滑膜SP法染色显示SH组、TA组VEGF阳性细胞百分数较对照组减少[(42.50±5.29)%、(50.80±5.24)%vs (53.38±4.75)%,P<0.05],SH组、TA组平均光密度值较对照组减少[(0.32±0.02)、(0.43±0.04) vs (0.48±0.05),P<0.05],TA组较SH组和对照组内软骨细胞减少,软骨基质成分减少,SH组、TA组较对照组软骨表层破坏减少。SH组、TA组软骨MMP-1细胞百分数评分优于对照组[(61.25±4.06)%、(76.27±4.68)%vs (87.13±3.64)%,P<0.05];SH组、TA组软骨Mankins评分优于对照组[(6.88±1.25)分、(7.27±0.68)分vs (8.13±0.83)分, P<0.05]。结论透明质酸钠和曲安奈德均能抑制滑膜炎增生,减少兔膝关节腔内的炎性细胞因子,减少了软骨基质的破坏,且透明质酸钠要优于曲安奈德。     

COA:细胞外基质来源的双层支架的研制及其修复犬膝关节负重区骨软骨缺损的实验研究

背景与目的 骨软骨损伤常见且修复困难,本研究探讨采用软骨细胞外基质（CECM)与脱细胞骨基质（ACBM)为材料制作新型组织工程骨软骨双层支架的可行性,并检测其联合骨髓基质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）修复犬膝关节负重区骨软骨联合缺损的疗效。 方法 ⑴新型组织工程骨软骨双层支架的骨部分以犬松质骨制备的ACBM为原料,软骨部分以人CECM为材料：将天然软骨粉碎成微丝并脱细胞处理后配成30 g/L的乳状悬液,将ACBM浸于盛CECM悬液的模具中,采用冷冻冻干法制备CECM/ACBM双层支架并交联。进行组织学、扫描电镜、Micro-CT观察,测定支架孔隙率,采用MTT法分析支架浸提液毒性。⑵ 将成软骨诱导的BMSCs种植到双相支架上体外构建组织工程骨软骨复合体,并以此复合体修复犬膝关节股骨髁负重区骨软骨缺损,分为细胞-双相支架组(实验组)和单纯支架组（对照组）,分别在3和6个月时取材,根据大体、组织学、生物力学、生物化学、Micro-CT等检测结果进行半定量或定量评估。 结果 支架评估：组织学显示双层支架去细胞彻底,无细胞碎片残留;CECM部分番红O及Ⅱ型胶原免疫荧光染色呈阳性。扫描电镜及Micro-CT观察显示支架内孔洞相互贯通呈海绵状,CECM部分孔径(155±34）μm,孔隙率为91.3%±2%;ACBM部分具有天然骨的孔径和空隙率,骨软骨部分结合良好。MTT法显示,不同浓度支架浸提液与对照培养液吸光度值比较,差异无统计学意义（P>0.05）。在修复犬膝关节骨软骨缺损的实验中,结果显示两组以纤维软骨或透明软骨对缺损有不同的修复,大体以及组织学评分表明实验组明显优于对照组,生物力学测试表明6月实验组修复软骨的刚度为正常膝关节软骨的70.1%,与生物化学分析结果一致;软骨下骨的刚度达到正常膝关节的74.96%。Micro-CT结果表明实验组与对照组软骨下骨重建不具备明显差异。结论 CECM /ACBM骨软骨双层支架保留了骨、软骨的细胞外基质成分,具备良好的孔径和孔隙率,骨-软骨两层间结合良好,无毒,生物相容性良好,可作为支架载体用于组织工程骨软骨复合体的构建。骨软骨双相支架复合成软骨诱导的BMSCs能成功修复犬膝关节负重区的骨软骨缺损,     

自体骨髓基质干细胞修复股骨头关节软骨缺损的实验研究

目的 探讨自体骨髓基质干细胞修复兔股骨头软骨缺损的可行性.方法 1、建立兔髋关节软骨缺损动物模型16只,对照组8只,实验组8只;2、取兔髂骨骨髓,体外分离、培养、扩增、骨髓基质干细胞,诱导分化为软骨样细胞并进行细父胞标记;3、与生物材料混合后植入体内修复兔股骨头关节软骨缺损,8周后观察修复效果;结果 8周后大体标本显示关节软骨缺损为白色软骨样组织填充,组织切片显示缺损处有新生软骨形成,阿新兰染色和Ⅱ型胶原免疫组化检测有GAG和Ⅱ型胶原强阳性表达;结论经诱导分化后的自体骨髓基质干细胞复合生物材料移植可用于修复兔股骨头关节软骨缺损.     

脱氢表雄酮对兔骨关节炎软骨和滑膜中MMP-3、TIMP-1和IL-1βmRNA表达的影响

目的观察关节腔内注射脱氢表雄酮(DHEA)对兔骨关节炎软骨和滑膜中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达的影响。方法20只新西兰大白兔行单侧前交叉韧带切除术,术后4周后分为实验组和对照组。实验组关节腔内注射100μmolLDHEA(溶于二甲基亚砜),每周1次,连续5周,对照组注射同剂量的二甲基亚砜。术后9周处死兔子,取膝关节行大体观察,用逆转录聚合酶链反应方法检测关节软骨和滑膜中MMP-3、TIMP-1和IL-1βmRNA的表达。结果大体观察显示实验组软骨和滑膜病变程度轻于对照组。实验组软骨和滑膜中MMP-3mRNA的表达水平显著低于对照组(均P<0.05),而TIMP-1mRNA的表达显著高于对照组(均P<0.05)。实验组软骨中IL-1βmRNA的表达与对照组的差异无统计学意义(P>0.05),而滑膜中IL-1βmRNA的表达显著低于对照组(P<0.01)。结论DHEA能有效延缓兔骨关节炎的进展。下调软骨、滑膜中MMP-3和上调软骨、滑膜中TIMP-1的表达及下调滑膜中IL-1β的表达可能是DHEA对骨关节炎的作用机制。     

不同方法诱导的兔骨髓间质干细胞对关节软骨缺损修复效果及退化的影响

目的：以兔骨髓间质干细胞为种子细胞, 探讨不同诱导方法对组织工程移植物修复关节软骨缺损的效果及退化的影响。方法：将兔骨髓间质干细胞分为地塞米松诱导组和TGF-β₁加地塞米松联合诱导组进行体外诱导,采用自体组织工程移植物修复关节软骨缺损;对照组缺损填充无细胞单纯载体。于术后6和12周对修复组织进行组织学观察、评分及TUNEL原 位凋亡检测。结果：联合诱导组,修复组织形成理想的柱状结构,术后12周组织学评分(20.26±1.35)优于对照组(4.12±1.13)及地塞米松组(14.521.46),但修复组织未形成潮线。在骨软骨交界处软骨细胞TUNEL染色阳性,地塞米松组术后6周修复组织TUNEL染色阳性细胞记数为21.4±4.5,术后12周为7.3±2.2;联合诱导组术后6周为19.8±4.7,术后12 周为6.9±2.0,术后12周与术后6周比较差异有显著性(P<0.05)。结论：组织工程移植物的修复效果 以联合诱导组为佳,且退化发生较晚;组织工程移植物的退化与移植前诱导条件、细胞凋亡及软骨下骨板内血管系统有关。     

补肾活血汤结合组织工程软骨修复兔膝关节软骨缺损

目的进一步验证补肾活血汤对骨髓基质干细胞(BMSCs)复合体修复兔关节软骨缺损的影响,评价修复效果。方法取兔骨髓基质干细胞进行密度离心法结合贴壁培养法体外增殖后,复合于改建后的脱细胞真皮基质(acellular dermal ma-trix,ADM)载体上,植入到兔膝关节软骨缺损,并以中药补肾活血汤灌胃为复合组,并设立单纯中药组、单纯干细胞复合体组、空白组为对照组。4、8、12周后分别对修复组织进行形态学观察及组织学检查。进行Wakitani评分,观察其体内修复关节缺损效果。结果术后12周,复合组的缺损由透明软骨样组织充填,软骨及软骨下骨组织基本修复,修复的软骨组织在组织形态学上优于其他各组。结论骨髓基质干细胞复合体能修复家兔膝关节软骨缺损,中药补肾活血汤能促进软骨的修复,且提高了修复质量。     

miR-146 a/27 a在SD大鼠OA软骨、滑膜组织中的表达及意义

目的：观察切断前交叉韧带( ACLT)构建SD大鼠骨性关节炎( OA)模型的病理特点,并检测 miR-146a和 miR-27a在OA动物模型软骨、滑膜组织中的表达情况。方法120只SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行左膝前交叉韧带切断术,对照组只打开关节腔不切断前交叉韧带,分别于术后2、4、8周获取关节软骨、滑膜组织,对软骨情况进行大体及组织学评分,应用RT-PCR检测软骨和滑膜组织中miR-146a、miR-27a的表达情况。结果实验组术后2周软骨表面粗糙,色泽灰暗,4周和8周病变程度加重,对照组关节软骨无明显退变;实验组不同时间段Mankin评分与对照组比较差异有统计学意义( P<0．01)。实验组和对照组2、4、8周时软骨组织中miR-146a的相对表达量分别为(0．58±0．13)vs(0．66±0．14)、(0．43±0．08) vs (0．68±0．12)、(0．18±0．06)vs(0．61±0．07),各个时间点差异均有统计学意义(P<0．01);同期检测到软骨组织中miR-27a、滑膜组织中miR-146a和miR-27a在实验组和对照组各时间点的表达量差异有统计学意义( P<0．01)。应用Pearson相关分析显示,miR-146a、miR-27a在软骨组织中的表达情况与 Mankin评分呈显著负相关(r=-0．92、-0．89,P<0．05),而滑膜、软骨中miR-146a和miR-27a的表达呈线性正相关(r=0．78、0．80,P<0．05)。结论 miR-146a 和 miR-27a 在 SD 大鼠OA模型软骨组织、滑膜组织中呈低表达,且与OA软骨病变程度呈负相关。     

白细胞介素1受体拮抗蛋白间接体内转基因抑制骨关节炎软骨破坏

目的通过白细胞介素1受体拮抗蛋白(IL-1Ra)间接体内转基因治疗实验性兔骨关节炎,探讨IL-1Ra对关节软骨病理改变及软骨基质降解的抑制作用.方法将30只新西兰大白兔随机分成3组,每组10只.对3组兔的左膝关节行部分滑膜切除,从中分离并培养滑膜成纤维细胞;3组兔的右膝关节行前交叉韧带横断术(ACLT)建立骨关节炎模型.把自体滑膜细胞回输第1组兔右膝关节腔内;把转染标记基因的自体滑膜细胞回输到第2组兔右膝关节腔内;把转染IL-1Ra基因的自体滑膜细胞回输到第3组兔右膝关节腔内.在各组滑膜细胞回输后的第2、4周,用ELISA方法分别检测关节液中IL-1Ra水平,用二甲基亚甲蓝法测定关节液及软骨中硫酸葡糖氨基聚糖(GAG)水平,各组软骨行组织染色、病理分级.结果在基因转入关节腔后,第3组兔右膝关节液中IL-1Ra水平在第2周时为(20.6±1.8) ng/ml,第4周时为(4.8±0.5) ng/ml;而第1、2组 IL-1Ra水平2、4周时均较低.第3组关节软骨降解明显被抑制,关节液中GAG含量为40.1 μg/ml,抑制率为56.2%,第2组关节液中GAG含量为84.5 μg/ml.然而第3组软骨中GAG含量比第2组高2倍,分别为30.2 μg/mg和10.8 μg/mg.第3组骨关节炎病理改变明显受到抑制.结论关节腔内注入体外转染IL-1Ra基因的自体滑膜细胞,能使关节腔局部IL-1Ra水平明显升高,使关节软骨病理改变及软骨基质降解受到抑制.     

组织工程化骨修复兔桡骨缺损的实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质和骨形成蛋白修复兔桡骨缺损的效果。方法:体外分离、培养骨髓间充质干细胞,复合于脱钙骨基质,以骨形成蛋白进行成骨化诱导。日本大耳白兔45只,随机分为3组,A组:骨髓间充质干细胞+脱钙骨基质+骨形成蛋白;B组:脱钙骨基质+骨形成蛋白;C组:空白组。行兔15 mm桡骨缺损修复。术后12周取桡骨标本,大体观察并手法评估3组桡骨缺损修复情况,组织学及生物力学测定植入材料融合情况。结果:术后12周,大体可见A组基本骨性愈合,融合组织质地硬,形态不规整;B组见少量骨痂形成,尚有部分缺损未愈合。C组骨缺损处见肉芽组织充填,未见骨痂形成。组织学观察Masson染色示A组大量软骨形成,靠近连接处可见新生骨小梁形成且处于成骨活跃期,软骨与骨组织之间过渡自然。B组可见部分新生骨小梁形成,材料骨小梁变细较少,断裂明显。C组未见新生骨小梁形成。生物力学测定A组的最大载荷、抗压强度和弹性模量分别为(87.8±9.8)N、(8.4±0.9)MPa及(187.5±8.2)GPa,均低于健侧组([112.3±11.2)N、(9.5±0.2)MPa及(210.5±15.9)GPa],且组间比较有统计学差异(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质和骨形成蛋白修复兔桡骨缺损,优于应用脱钙骨基质和骨形成蛋白,早期生物力学强度低于正常骨组织。     

骨关节炎关节液促进滑膜间充质干细胞软骨分化

目的 观察骨关节炎(OA)关节液对滑膜间充质干细胞(SDSCs)软骨分化能力的影响.方法 用OA患者手术切除的滑膜组织标本分离培养SDSCs并诱导成软骨分化.将OA患者的关节液加入诱导后的SDSCs培养液中,模拟体内的OA关节环境继续培养(实验组),以不加OA关节液的SDSCs作为对照组.测量两组SDSCs形成的软骨小球的直径,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测成软骨相关标志物COLⅡ、Aggrecan、SOX9的mRNA及蛋白表达.结果 OA关节液处理16 d后,实验组软骨小球直径大干对照组(P＜0.05),COLⅡ、Aggrecan、SOX9 mRNA和蛋白的表达均高于对照组(P＜0.05).结论 OA关节液能够促进SDSCs软骨分化.     

壳寡糖对兔骨关节炎的治疗效果

目的 探讨关节腔内注射壳寡糖对兔骨关节炎的治疗效果及其作用机制.方法 新西兰兔12只,于右膝关节腔内各注射4 g/L的木瓜酶溶液0.3 mL,随机分为生理盐水对照组及20 g/L的壳寡糖实验组.自造模7 d后右膝关节开始给药,每周1次,共5周.于末次给药后7 d以空气栓塞法处死动物,关节软骨及滑膜组织以苏木精-伊红(HE)染色,光镜下观察其病理变化,免疫组织化学染色法检测膝关节软骨及滑膜组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达.结果 HE染色表明,实验组退变软骨及滑膜的病理变化轻于对照组,免疫组织化学染色法显示,实验组TNF-α的表达明显低于对照组.结论 壳寡糖能够明显降低骨关节炎滑膜、软骨组织中TNF-α的表达水平,延缓软骨的退变程度,可能成为一种新的骨关节炎治疗药物,值得进一步研究、开发和利用.