不同转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973的比较蛋白质组学研究

目的寻找高低转移能力肺癌细胞中潜在的蛋白标记以更好的解释肺腺癌转移机制。方法用双向电泳的方法对高低转移能力肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973进行了比较蛋白质组学分析。选取差异较大的候选差异表达蛋白进行基质辅助激光解析／电离飞行时间质谱仪（MALDI—TOF—MS）分析并鉴定。结果双向电泳胶图分析结果说明两细胞系的蛋白表达差异具有统计学意义。MALDI—TOF—MS鉴定证实这3个蛋白分别为Stathmin 1蛋白、磷酸甘油酸变位酶1（PGAM1）和热休克蛋白27（HSP27）。结论在高转移细胞系Anip973中,HSP表达显著升高,Stathmin 1和HSP27表达显著下降,这3种蛋白与肿瘤的发生和恶性程度密切相关。     

Ezrin的原核表达及与其相互作用蛋白的研究

目的体外筛选人胰腺癌细胞中与Ezrin蛋白相互作用的蛋白。方法提取人胰腺癌Panc-1细胞总RNA,RT-PCR法扩增Ezrin基因。将扩增得到的Ezrin基因片段和pET15b质粒转化E．coli DH5α,获得pET15b-Ezrin重组质粒,双酶切后测序鉴定。将测序正确的重组质粒转化至E．coliB L21-CodonPlus（DE3）-RIL,以异丙基硫代-B-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达,对表达产物进行Ni^2＋-NTA亲和层析和分子筛纯化后,行SDS-PAGE、MALDI—TOF—MS／MS质谱分析和蛋白质印迹鉴定。裂解Panc-1细胞,获得总蛋白提取液,采用Pull—down方法体外筛选与Ezrin重组蛋白相互作用的蛋白,并对筛选出的目的蛋白进行双向凝胶电泳和MALDI—TOF—MS／MS质谱鉴定。结果RT-PCR扩增出的Ezrin基因片段（1761bp）与理论DNA表达片段大小一致,测序鉴定显示克隆的Ezrin基因序列与GenBank报道序列相符。SDS—PAGE、质谱分析和蛋白质印迹分析显示纯化后Ezrin重组蛋白相对分子质量为69400,与质谱分析的相对分子质量结果相符,为带有His-6标签的特异蛋白。双向凝胶电泳和质谱鉴定结果共筛选出可与Ezrin重组蛋白相互作用的7种蛋白,其分别为RNA—binding motif protein39（RBM39）、Transgelin（TAGLN）、Albumin（ALBU）、Formin—1（FMN1）、Rho GTPases（RHGBA）、Tetratricopeptide repeat protein 16（TTC16）、Syntaxin—binding protein 1（STXBPI）。结论在大肠杆菌中成功表达、纯化了Ezrin蛋白,并在体外成功筛选出可信的与Ezrin蛋白相互作用的蛋白。     

SV40转化的人胃黏膜上皮细胞与胃癌细胞间的比较蛋白质组学研究

目的　研究猴病毒 4 0 (SV4 0 )转化的人胃黏膜上皮细胞GES 1与人胃癌细胞MGC 80 3的差异蛋白质组。方法　运用固相pH梯度双向凝胶电泳技术比较两者差异蛋白 ,差异蛋白用胰酶进行胶内酶切 ,肽混合物使用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱仪 (MALDI TOF MS)进行质谱分析 ,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果　获得 17个GES 1和MGC 80 3细胞间表达差异蛋白质的明确信息 ,涉及细胞骨架、细胞调控、细胞凋亡和生物氧化等种类蛋白质。结论　SV4 0转化的人胃黏膜上皮细胞GES 1与人胃癌细胞MGC 80 3间的表达蛋白具有差异 ,这些差异蛋白分析有助于深入研究胃癌发生发展机制 ,进而为胃癌的早期诊断和防治提供依据     

鸟结核分枝杆菌感染巨噬细胞后的外泌体刺激巨噬细胞产生的细胞因子及其蛋白质表达改变

目的 探讨鸟结核分枝杆菌(M.avium)感染巨噬细胞后分泌的外泌体[(+)外泌体]刺激巨噬细胞后产生的分子免疫机制及其差异蛋白质成分研究.方法 冷冻高速离心法收集经鸟分枝结核杆菌感染及未感染的巨噬细胞上清中的外泌体,然后利用外泌体刺激巨噬细胞;ELISA方法检测经外泌体刺激巨噬细胞后细胞上清中IFN-γ、TNF-α的含量;流式细胞术从蛋白水平检测巨噬细胞受外泌体刺激后CD80、CD86蛋白表达情况;2-DE MALDI-TOF/TOF MS技术分析鉴定巨噬细胞受M.avium感染后分泌的外泌体中的差异蛋白.结果 IFN-γ、TNF-α在(+)外泌体刺激巨噬细胞后培养上清中含量增加;CD80、CD86蛋白在巨噬细胞受(+)外泌体刺激后表达上调.外泌体经2-DE MALDI TOF/TOF MS分析获得18个差异蛋白,且质谱成功鉴定12个.结论 (+)外泌体促进巨噬细胞TNF-α、IFN-γ的分泌从而增强巨噬细胞的炎症反应,并且可促进巨噬细胞CD80、CD86蛋白表达增强;筛选出差异蛋白的功能与细胞骨架结构、蛋白质合成与加工,炎症反应密切相关.     

人肺腺癌细胞系与支气管上皮细胞系差异蛋白质组学研究

目的:通过对肺腺癌细胞系A549细胞和正常上皮细胞系HBE蛋白组成差异的分析,寻找与肺癌发生、发展相关的差异蛋白,为进一步阐明肺癌发病机制提供更多有价值的信息;为诊断或者预后提供候选分子标记物。方法:运用固相pH梯度双向电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI/TOF/TOF/MS)分析技术筛选出A549细胞和支气管上皮细胞系HBE间表达水平显著差异的蛋白,并且利用免疫印迹方法对筛选的标记物蛋白进行验证。结果:筛选出21个差异蛋白,涉及到细胞的代谢、蛋白质修饰、细胞运动,通道蛋白和信号转导调控等方面。鉴定并且验证在A549细胞中显著高表达热休克蛋白27(HSPB1)。结论:肺腺癌细胞系与正常支气管上皮细胞系蛋白质表达存在显著差异,其中肺腺癌中高表达HSPB1可能在肺腺癌癌变过程中发挥重要作用,本结果为进一步寻找肺腺癌癌变蛋白标志物奠定了基础。     

鼻咽癌转移相关的分泌蛋白质的筛选

目的：筛选鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）转移相关的分泌蛋白质,为阐明NPC转移机制以及筛选NPC转移分子标志物提供实验依据。方法：应用二维凝胶电泳（two-dimensional electrophoresis,2-DE）技术分离一对来自同一亲本,具有不同转移潜能的NPC细胞系5-8F和6-10B细胞的分泌蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾-四极杆-串联质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)对差异表达的蛋白质点进行鉴定。Western印迹法检测差异分泌蛋白质nm23-H1在两株细胞中的表达水平。结果：建立了5-8F和6-10B分泌蛋白质的2-DE图谱,质谱分析鉴定出14个非冗余的分泌蛋白质,其中Oncoprotein18等蛋白质在高转移潜能NPC细胞系5-8F中的表达水平高于无转移潜能的NPC细胞系,而nm23-H1等蛋白质在5-8F细胞系中的表达水平低于6-10B细胞系。Western印迹分析证实了nm23-H1在5-8F和6-10B细胞分泌蛋白质中的差异表达水平。结论：所鉴定的14个非冗余的差异分泌蛋白质为研究NPC转移机制以及筛选NPC转移分子标志物提供了实验依据。     

罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的体外实验研究

目的： 探讨罗勒多糖抗卵巢癌侵袭转移的作用机制及其肿瘤乏氧微环境对其效应的影响,为临床应用研究提供依据。方法：罗勒多糖分别在常氧（21%O2、5%CO2）和乏氧（1%O2、5%CO2和94%N2）环境中作用于人卵巢癌SKOV3细胞,形态学观察不同氧环境下各组细胞形态差异;Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭运动能力;明胶酶谱法分析各组细胞分泌的基质金属蛋白酶-2（MMP-2）活性差异;RT-PCR技术检测骨桥蛋白（OPN）mRNA表达水平;免疫细胞化学法观察各组细胞胞内OPN表达情况。结果：与对照组相比,罗勒多糖在常氧和乏氧环境下都能够降低SKOV3细胞的侵袭运动能力,抑制细胞中MMP-2的分泌,抑制人卵巢癌SKOV3细胞中OPN的表达（转录水平、蛋白水平）,且乏氧环境下罗勒多糖的上述作用更为显著。结论：低氧显著增强人卵巢癌SKOV3细胞的迁移能力,罗勒多糖可能通过下调骨桥蛋白表达及基质金属蛋白酶-2的分泌,抑制其侵袭运动能力。     

结核分枝杆菌耐药株和敏感株菌体碱性蛋白的比较蛋白质组学研究

目的研究结核分枝杆菌耐多药菌株与敏感菌株菌体碱性蛋白的蛋白质表达差异。方法运用双向电泳技术（2-DE）比较8株耐多药菌株与9株敏感菌株的菌体碱性蛋白表达图谱差异，差异蛋白进行胶内酶切，肽混合物使用基质辅助激光解吸一电离飞行时间质谱仪（MALDI—TOF-MS）进行质谱分析，将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果比较发现重复性较好的差异蛋白质斑点10个，获得5个明确的肽质量指纹谱，鉴定5个蛋白分别为：NADH-CoQ氧化还原酶B链（NuoB，Rv3146）、乙酰羟酸合成酶小亚基（HvN，Rv3002c）以及3个假定蛋白，分别由Rv2159c、Rv0068、Rv0992编码。结论上述蛋白的鉴定在深入研究结核分枝杆菌耐药形成机制，筛选具有潜在价值的结核药物靶位和耐多药结核病诊断的分子标志物方面具有参考价值。     

体外培养的不同亚型上皮性卵巢癌细胞系差异蛋白的分析

目的分析体外培养的不同亚型上皮性卵巢癌细胞系蛋白质表达差异,筛选卵巢癌的肿瘤标志物.方法提取体外培养的不同亚型上皮性卵巢癌细胞系（OVCAR-3、SKOV-3、3AO和TOV-112D）与原代培养的正常卵巢生发上皮细胞（OGE）的总蛋白,采用表面增强激光解吸离子化（SELDI）蛋白质芯片技术的H4和SAX2两种蛋白芯片检测其蛋白质谱,最后利用蛋白芯片阅读机（PBS-Ⅱ型）读取数据,获得的数据采用Ciphergen Proteinchip 3.0.2版本的软件分析.结果4种亚型的上皮性卵巢癌细胞系与正常卵巢生发上皮细胞比较,有16个蛋白发生明显改变,其中7个蛋白表达降低,9个蛋白表达升高.此外,不同亚型的上皮性卵巢癌细胞之间也有很多差异蛋白,尤其是OVCAR-3、SKOV-3和3AO三者与TOV-112D之间有18个蛋白仅在前3种癌细胞中表达,16个蛋白仅在后者表达.结论不同亚型上皮性卵巢癌细胞与正常卵巢生发上皮细胞的蛋白质谱相比较有共同的差异蛋白,同时不同亚型的上皮性卵巢癌细胞之间的蛋白质谱表达也有差别.     

幽门螺杆菌球形休眠体形成的比较蛋白质组学研究

目的　研究幽门螺杆菌由螺杆状转变成球形休眠体的相关蛋白。方法　运用双向电泳技术比较螺杆状幽门螺杆菌及其球形休眠体全菌蛋白表达谱 ,差异蛋白进行胶内酶切 ,肽混合物使用基质辅助激光解吸 电离飞行时间质谱仪 (MALDI TOF MS)进行质谱分析 ,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果　获得 9个与幽门螺杆菌球形休眠体形成相关蛋白 ,即相对分子质量 (Mr)为 2 6× 10 3的过氧化物酶、硫氧还蛋白、烯醇酶、黄素氧化还原蛋白、单链DNA结合蛋白、翻译起始因子 1、延长因子P、中性粒细胞激活蛋白和Mr 为 10× 10 3的热休克蛋白。结论　上述蛋白的鉴定为深入研究幽门螺杆菌球形休眠体形成机制 ,筛选具有潜在价值的抗幽门螺杆菌药物靶位和疫苗候选靶位具有参考价值。     

MiR-610通过下调双微体基因2的表达抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移

目的：探讨miR-610 对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的作用及机制。方法：通过RT-PCR 检测卵巢癌组织及细 胞、正常组织及细胞中miR-610 与鼠双微体基因2（MDM2）mRNA的表达;通过Lipofectamine 2000 将miR-NC、 miR-610 mimic、miR-6101 inhibitor、pc-MDM2质粒分别或联合转染进入HO8910细胞;划痕实验检测细胞迁移 能力,Transwell 法检测细胞侵袭能力,免疫印迹检测E- 钙黏着蛋白（E-cadherin）、N- 钙黏着蛋白（N-cadherin） 和MDM2蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因检测miR-610 与MDM2靶向关系。 结果：与正常卵巢组织和上皮 细胞系HOSEpiC相比,人宫颈癌组织和细胞系中miR-610 表达明显下调,选择下调效果较明显的HO8910细胞系 进行后续实验。与Control 组相比,miR-610 mimic 组卵巢癌HO8910细胞划痕闭合率明显降低、侵袭细胞数目明 显减少、E-cadherin 明显上调、N-cadherin 表达明显下调,miR-610 inhibitor 组卵巢癌HO8910细胞划痕闭合率明显 升高、侵袭细胞数目明显增多、E-cadherin 明显下调、N-cadherin 表达明显上调。MiR-610 与MDM2 3'UTR 区存在 结合位点,且miR-610 靶向下调MDM2 表达。共转染pc-MDM2逆转了miR-610 mimic 对卵巢癌HO8910细胞迁移 和侵袭能力抑制作用。 结论：MiR-610 通过靶向下调MDM2抑制卵巢癌HO8910细胞迁移和侵袭能力。     

HE4基因表达载体的构建及对卵巢癌细胞HO8910生长侵袭的影响

目的探讨卵巢癌基因HE4对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响。方法构建针对HE4基因的PcDNA3．1／HE4载体．脂质体法介导PcDNA3．1／HE4载体转染人浆液性卵巢癌细胞系HO8910,WESTERN—BLOT检测转染前后细胞内HE4蛋白的表达效果。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、平板克隆形成实验观察HE4基因对细胞增殖能力的影响,经细胞粘附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化。结果Western-blot结果显示PcDNA3．1／HE4载体成功转染HO8910细胞并显著提高该细胞HE4基因的表达,细胞增殖能力较前无明显变化,侵袭能力明显下降。结论通过增强HE4基因表达,可降低其侵袭能力,有望成为卵巢癌基因治疗的新的候选基因。     

特异siRNA下调卵巢癌H08910细胞NAC-1基因表达并抑制生长

 目的：研究小RNA干扰NAC-1 (Nucleus accumbens-1,Nac1 or NAC-1)基因表达对卵巢癌HO8910细胞增殖的影响。方法：设计、合成针对NAC-1基因的特异性小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）及阴性siRNA,并同时设立空白对照,然后用脂质体转染HO8910细胞。通过实时荧光定量RT-PCR 和Western印迹法分别检测转染前后HO8910细胞中NAC-1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖率,FCM法检测细胞周期分布。结果：针对NAC-1基因的特异性siRNA均能抑制NAC-1 mRNA和蛋白的表达,其中NAC-1-siRNA-1的沉默效率最高。转染NAC-1-siRNA-1 48h后,HO8910细胞中NAC-1 mRNA和蛋白表达水平分别下调74%和81%,而且细胞增殖明显受到抑制,细胞周期被阻滞于G1期,与转染阴性siRNA 及未转染组比较,有显著性差异(P?0.05)。结论：NAC-1特异性siRNA能够有效沉默NAC-1基因表达,并显著抑制卵巢癌HO8910细胞增殖。     

筛选KIAA1456抑制卵巢癌细胞增殖的靶向lncRNAs

目的筛选KIAA1456抑制卵巢癌细胞增殖的靶向lncRNAs。方法细胞免疫荧光检测KIAA1456在卵巢癌细胞HO8910PM中的表达。用基因芯片技术检测过表达KIAA1456后的卵巢癌细胞HO8910PM,与对照HO8910PM卵巢癌细胞之间差异lncRNA基因表达谱,筛选出有明显差异的lncRNAs,并验证。构建KIAA1456-RNAi慢病毒载体,干扰卵巢癌细胞HO8910/PM中KIAA1456的表达,RT-q PCR和Western blot检测KIAA1456干扰效率。用RT-q PCR再次检测KIAA1456沉默后相关lncRNAs的表达变化。结果KIAA1456主要表达于HO8910PM细胞的细胞核。过表达KIAA1456后,表达相差1.2倍以上的lncRNA有654条,表现最显著的有下调的SSX8,上调的SNORD14D,SNORA26,lncRNA-ENST00000384488,PCR验证结果与芯片趋势一致。KIAA1456-RNAi慢病毒载体成功干扰了卵巢癌细胞HO8910PM中KIAA1456的表达,KIAA1456下调后,SSX8上调,SNORD14D,SNORA26,lncRNA-ENST00000384488下调。结论 KIAA1456可通过调节SSX8,SNORD14D,SNORA26,lncRNA-ENST00000384488等相关lncRNAs的表达,从而抑制卵巢癌细胞的增殖,为提高卵巢癌的诊断和治疗提供了一个新的靶点。     

miR-502-3p 通过靶向结合 CBL 抑制卵巢癌增殖并诱导凋亡

目的 探究微小 RNA 502-3p (micro RNA 502-3p, miR-502-3p) 通过靶向结合 Casitas B 细胞淋巴 瘤 (Casitas B-cell lymphoma, CBL) 参与卵巢癌增殖和凋亡的机制。 方法 下载 GSE66957、 GSE119056、 TCGA_ OV 卵巢癌相关数据矩阵, 分析 miR-502-3p、 CBL 与卵巢癌的关系; 构建过表达 miR-502-3p、 CBL 的 SKOV3 和 HO8910 细胞系, 分别采用细胞计数试剂盒 ( cell counting kit 8, CCK-8)、 克隆形成实验、 流 式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况; 通过荷瘤裸鼠实验, 观察过表达 CBL 对肿瘤生长的影响; 验证 miR502-3p 与 CBL 的靶向关系。 结果 生物信息学分析显示, 卵巢癌组织中 CBL 水平高于癌旁组织, miR-502- 3p 水平低于癌旁组织, CBL 水平与患者预后、 细胞增殖基因表达有关 (P< 0. 05)。 miR-502-3p 与 CBL 存在 靶向关系, 与 Vector 组比较, CBL 组肿瘤的体积及重量增加 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-502-3p 组 SKOV3、 HO8910 细胞中 CBL 蛋白表达、 细胞活力、 克隆数降低, 细胞凋亡率升高 (P< 0. 05), 但 CBL 可逆转上述细胞变化。 结论 miR-502-3p 可通过靶向下调 CBL 抑制卵巢癌细胞的增殖, 并诱导其凋亡。     

RNA干扰阻抑Bax inhibitor-1(bi-1)基因表达对卵巢癌细胞凋亡的影响

目的： 研究RNA干扰(RNAi)效应对人卵巢癌细胞株HO8910PM和HO8910中bi-1基因表达的抑制作用和凋亡诱导作用。 方法： 把表达bi-1 shRNA的各重组干扰质粒转染到HO8910PM和HO8910细胞中,RT-PCR和Western blotting法检测bi-1基因mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术和Hoechst 33258/PI荧光染色检测siRNA诱导细胞凋亡作用。结果：与对照组细胞相比较,转染4种候选干扰质粒组细胞中bi-1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降（P<0.05）,以转染pmU6-b4组细胞的表达抑制率最高,在HO8910PM细胞中的抑制率分别为 (45.50±3.04）%和(51.08±4.96）%,在HO8910细胞中的抑制率分别为 (37.29±3.69）%和(44.96±4.28）%;流式细胞术结果表明,与对照组细胞相比较,转染pmU6-b4质粒24 h、48 h、72 h、96 h的HO8910PM细胞中亚二倍体峰比值明显升高 (P<0.05),以转染72 h组细胞的比值最高,达到 (25.89±5.63）%,而HO8910细胞中无亚二倍体峰出现;荧光显微镜下可见转染pmU6-b4质粒72h的HO8910PM细胞出现细胞核缩小、染色质固缩和核断裂,而HO8910细胞核无明显变化。 结论： 针对bi-1的siRNA能特异有效地下调HO8910PM和HO8910细胞中bi-1基因的表达,不同序列特异性的siRNA下调bi-1基因表达的能力不同;瞬时转染质粒pmU6-b4能有效诱导HO8910PM细胞凋亡,但不能诱导HO8910细胞凋亡。     

miR-211 对上皮性卵巢癌细胞HO8910 增殖及细胞周期相关蛋白的影响

目的:探讨miR-211 与上皮性卵巢癌发生的关系,及其对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:对30 例上皮性卵巢癌组织标本及卵巢癌细胞系HO8910 中miR-211、Cyclin D1 和CDK6 表达情况进行研究,同时选取30 例非卵巢癌患者组织标本及正常卵巢上皮细胞株IOSE80 作为对照,并分析上皮性卵巢癌组织及卵巢癌细胞系中miR-211、Cyclin D1、CDK6 表达情况及表达相关性;miR-211 对卵巢癌细胞增殖,以及对Cyclin D1 和CDK6 表达的影响。结果:卵巢癌组织miR-211 相对表达水平显著低于正常组织(P<0.05),卵巢癌细胞中miR-211 相对表达水平显著低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05);在上皮性卵巢癌细胞系HO8910 中,第3 天和第4 天miR-211 组细胞数显著低于miR-Ctrl (P<0.05);上皮性卵巢癌组织中Cyclin D1、CDK6相对表达水平显著高于正常卵巢上皮组织(P<0.05);上皮性卵巢癌细胞系中miR-211 显著抑制Cyclin D1 和CDK6 的表达;在卵巢癌组织中,Spearman 相关性分析结果显示miR-211 和Cyclin D1 和CDK6 相对表达水平呈负相关(r =-0.583,P =0.010)。结论:miR-211 可抑制卵巢癌细胞增殖,并抑制周期相关蛋白Cyclin D1 和CDK6 的表达,miR-211 与周期相关蛋白Cyclin D1 和CDK6 在卵巢癌发生中可能存在调控关系。     

AM激活mTOR信号通路对人卵巢癌细胞增殖的影响

目的探讨肾上腺髓质素(Adrenomedullin,AM)通过激活mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)信号途径对人卵巢癌细胞HO8910增殖的影响。方法应用AM及mTOR拮抗剂(雷帕霉素)诱导卵巢癌细胞,CCK8法检测AM及雷帕霉素对卵巢癌细胞增殖的影响,进一步采用Western印迹法,测定AM对mTOR磷酸化的激活作用结果 AM可促进卵巢癌细胞的增殖,并呈剂量依赖关系及受体依赖关系,而这种促增殖作用可被mTOR信号通路的拮抗剂雷帕霉素所抑制;随着AM浓度的增加,卵巢癌细胞mTOR磷酸化水平随之升高。结论AM介导的mTOR信号通路促进卵巢癌细胞增殖,为卵巢癌的分子靶向治疗提供新的思路。     

Desmocollin 3 mediates follicle stimulating hormone-induced ovarian epithelial cancer cell proliferation by activating the EGFR/Akt signaling pathway

Follicle-stimulating hormone (FSH) is associated with the pathogenesis of ovarian cancer. We sought to explore whether desmocollin 3 (Dsc3) mediates FSH-induced ovarian epithelial cancer cell proliferation and whether the EGFR/Akt signaling pathway may be involved in this process. Dsc3 positivity in ovarian tissue specimens from 72 patients was assessed by immunohistochemistry. The positive expression rates of Dsc3 were similar in ovarian cancer tissues (24/31:77.4%) and borderline ovarian tumor tissues (18/22:81.8%) (P>0.05), but were significantly higher in these cancerous tissues than in benign ovarian cyst tissues (3/19:15.8%) (P<0.05). Consistently, the expression of Dsc3 in four out of five ovarian cancer cells (HO8910, Skov3ip, Skov and Hey cells, but not ES-2 and in borderline ovarian MCV152 tumor cells was higher than in the immortalized ovarian epithelial cell line, Moody. FSH up-regulated the expression of Dsc3 and EGFR in a dose- and time-dependent manner. Furthermore, a converse relationship between the expression of Dsc3, EFGR and PI3K/Akt signaling was elucidated using RNA interference and PI3K/Akt inhibitor in the absence and presence of FSH. A role for these proteins in FSH-induced cell proliferation was verified, highlighting their interdependence in mediating ovarian cancer cell function. These results suggest that Dsc3 can mediate FSH-induced ovarian cancer cell proliferation by activating the EGFR/Akt signaling pathway.     

β-连环蛋白与卵巢癌转移的相关性及调节机制

目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)与卵巢癌转移的相关性及其可能的调节机制. 方法 采用免疫荧光法、免疫印迹法及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测人卵巢浆液性囊腺癌高、低转移细胞系(HO-8910PM及HO-8910)中β-catenin基因的表达差异.为进一步探讨β-catenin调节卵巢癌转移的可能机制,将低转移卵巢癌HO-8910细胞经肝细胞生长因子(HGF)处理,应用上述方法检测β-catenin基因表达的改变;同时经Transwell小室法和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变. 结果 β-catenin在HO-8910细胞中为高表达,在HO-8910PM细胞中为低表达,差异具有显著性(P<0.05).HGF可明显降低HO-8910细胞中β-catenin基因的表达(P<0.05)并促进细胞侵袭(P<0.05)和迁移. 结论 卵巢癌细胞的侵袭、迁移等恶性行为可能与β-catenin基因表达下降有关.经由HGF/c-Met的信号很可能是β-catenin介导的黏附功能的重要调节者.