聚合酶链反应检测HBV DNA的应用价值研究

１６１例乙型肝炎患者的血清、唾液、尿液标本分别进行了聚合酶链反应扩增检测，对照分析血清学指标，结果显示，乙肝患者血清、唾液和尿液中ＨＢＶＤＮＡ的ＰＣＲ阳性率与ＨＢｓＡｇ滴度具有正相关性，反向被动血凝（ＲＰＨＡ）ＨＢｓＡｇ滴度在１．８，ＰＣＲ技术就可检到血清中ＨＢＶＤＮＡ存在，在１：３２以上，ＨＢＶＤＮＡＢ也可在唾液和尿液中检出。尤其是ＨＢｅＡｇ阳性者，血清、唾液和尿液ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别达到１９     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV－DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传染科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果表明：在９２和ＪＨＢｓＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者５０例，占５４．３４％；在２８例ＨＢｅＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者２６例，占９２．８６％；在２０例ＨＢＶＭ均为阴性的病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者有６例，占３０．００％。证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原一抗体更加灵敏、可靠。     

聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA与ELISA检测e系统间的关系

作应用聚合酶链反应检测了８９例慢性乙型肝炎ｅ系统阳性患血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ，其中４４例ＥＬＩＳＡ法ＨＢｅＡｇ阳性，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为８８．１０％；４７例抗－ＨＢｅ阳性，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为６５．９６％，应用高特异，高录敏的ＰＣＲ法检测ｅ系统阳性患血清ＨＢＶＤＮＡ提示既往认为ＨＢｅＡｇ阳性转为抗－ＨＢｅ阳性做为病毒复制减弱或消失，病情缓解的指标是不确切的，而情缓解的指标     

血清HBcAg检测与e系统意义的再研究

用商品试剂ＲＩＡ法检测５２１份乙肝患者血清ＨＢｃＡｇ，并与ＨＢｅＡｇ，抗ＨＢｅ及ＰＣＲＨＢＶＤＮＡ比较。结果表明ＨＢｃＡｇ的检出率：ＨＢｃＡｇ阳性组为８５．１２％；抗ＨＢｅ阳性组为８１．３６％，二者经统计学处理无显著差异。而ＰＣＲ检测两组ＨＢＶＤＮＡ阳性率依次为８８．８９％，４０．００％。提示：用ｅ系统衡量ＨＢＶ复制与否已不完全，应将ＨＢｃＡｇ与其它免疫学指标同时作常规测定。     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的意义探讨

对肝功能试验正常的１４９例ＨＢＶ感染者用ＰＣＲ技术检测血清ＨＢＶ─ＤＮＡ，结果ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｃ均阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ全部阳性，ＨＢｓＡｓ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ或抗ＨＢｓ单项或合并其它项阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ阳性率分别为７９．４％、９４．６％、５０％、８１％和８．７％。这些结果与文献报告的相类似。     

乙肝患者e系统转换对HBV DNA的影响

采用ＥＬＩＳＡ法和聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了９４例乙肝患者及４０例乙肝病毒血清标志物（ＨＢＶＭ）阴性的肝炎患者，结果发现ＨＢｅＡｇ阳性者，有８６．０％ＨＢＶＤＮＡ阳性，二者具有明显一的相关性，而抗ＨＢｅ阳性的病人，约４０．５％ＨＢＶＤＮＡ阳性，说明抗一ＨＢｅ的转换，不完全是病毒复制的终止，尤其是在慢性肝病患者中，抗－ＨＢｅ出现部分患者全内仍不检出ＨＢＶＤＮＡ病为仍处于活动中。     

乙型肝炎血清学指标阳性母亲母乳HBV—DNA检测

随机取５０例乙肝血清学指标阳性母亲产后２－３ｄ人的初乳，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：抗原阳性组乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的检出率为５０％，抗体阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为７．７％。抗原阳性组中，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ３项阳性乾和ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ２基阳性者乳汁中ＨＢＶ－－ＤＮＡ检出率为１００％，说明该类乳汁具有极强传染性，抗体阳性组中单纯抗－ＨＢｓ     

乙肝病毒血清标志物与PCR检测HBV—DNA的关系

为了探讨ＰＣＲ技术在乙肝病毒感染诊断中的应用及ＨＢＶ－ＤＮＡ与ＨＢＶＭ间的关系，对５２４例乙肝病毒感染者的血清采用ＰＣＲ与ＥＬＩＡＳ进行检测。结果：ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ三项阳性组，ＨＢＶＭ全阴组，单项抗－ＨＢｓ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为８０．１４％、４７．６２％、２６．４７％，提示三项阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率是８组形式中的最高组，标志病毒复制活跃、传染性强、ＨＢＶＭ全阴组也     

应用聚合酶链反应检测112例乙型肝炎患者血液、尿液、唾液中HBV-DNA结果分析

本文以聚合酶链反应法检测乙型肝炎病人血液ＨＢＶ—ＤＮＡ１１２例，其中同时检测唾液ＨＢＶ—ＤＮＡ５３例，尿液ＨＢＶ—ＤＮＡ５９例，结果表明血液、唾液、尿液检出率分别为７５．８９％、４７．１７％、２３．７３％，三者之间均有显著性差异（Ｐ＜０．０５），同时发现血ＨＢＶ—ＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ阳性组的唾液、尿液ＨＢＶ—ＤＮＡ检出率明显高于阴性组（Ｐ＜０．０１）。提示以血源性传染为主，其次为唾液与尿液，而且唾液、尿液ＨＢＶ—ＤＮＡ与血液ＨＢＶ—ＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ之间具有密切相关性，为乙肝病毒多途径传播提供了依据。     

慢性乙型肝炎患者体液病毒含量观察

目的 :观察慢性乙型肝炎患者血液、唾液、男性精液、女性阴道分泌物中乙型肝炎病毒含量。方法 :使用荧光免疫PCR法对乙肝患者血清、唾液、男性精液、女性阴道分泌物进行HBVDNA定量测定 ,同时用ELISA法测定患者血清HBeAg。结果 :乙肝患者HBVDNA的含量在血液中最高 ,其次是唾液。男性精液、女性阴道分泌物HBVDNA均为阴性。血清HBeAg阳性者和阴性者血清HBVDNA阳性率分别为 96 .4 %和2 3.7% (p <0 .0 1) ,血清HBeAg阳性者唾液可检出HBVDNA ,阴性者未检出。结论 :乙肝患者HBeAg阳性者血清和唾液HBVDNA阳性率高 ,传染力强     

慢性乙型肝炎肝损伤患者临床特征与e抗原的关系

目的：对轻度及中度肝损伤的e抗原（Hepatitis Be antigen,HBeAg）阳性慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）和e抗原阴性CHB患者的临床特征进行比较。方法：对44例HBeAg阳性CHB和36例HBeAg阴性CHB进行病史询问,检测肝功能、血常规、血清乙型肝炎病毒（HBV）免疫学标志和HBVDNA,并进行腹部B超检查。结果：HBeAg阳性CHB组和HBeAg阴性CHB组在性别构成比例、HBV感染阳性家族史和肝脾肿大方而差异尤显著意义（P〉0．05）。HBeAg阳性CHB组和HBeAg阴性CHB组平均年龄分别为（29．23±8．246）岁和（41．53±13．146）岁（P〈0．001）;HBV感染年限≥5年者分别占36．36％和63．89％（P〈0．05）：HBVDNA滴度对数值平均为8．27±1．328和6．02±1．536（P〈0．01）。结论：在2组患者肝功能、血常规等临床特征一致的情况下,HBeAg阴性CHB患者有年龄偏大、感染年限较长和HBVDNA滴度较低的特点。     

乙型肝炎患者治疗后血清中e抗原与病毒DNA水平的关系

目的 通过对乙型肝炎病毒血清学标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBcIgG)的检测及内标、外标两种聚合酶链反应(PCR)方法 检测乙型肝炎病毒载量的比对,更好地了解人体内乙型肝炎病毒携带情况,指导临床诊治.方法对经治疗后丙氨酸氨基转移酶(ALT)/天冬氨酸氨基转移酶(AST)正常、COBAS AMPLICOR定量PCR(内标法)检测不到乙肝病毒DNA(HBV-DNA)、用Abbott AxSYM微粒子酶免分析法(MEIA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性、表面抗体(抗-HBs)阴性、e抗原(HBeAg)阳性(HBeAg＞4 S/CO)、抗-HBe阴性、抗-HBcIgG阳性的42例血清,再用上海复星长征医学科学有限公司提供的HBV-PCR外标法荧光定量检测试剂盒,Light Cycler实时荧光定量PCR仪检测.结果 42例ALT/AST正常,HBeAg阳性(HBeAg＞4 S/CO以上),HBeAg的平均值42.26 S/CO.COBAS AMPLICOR定量PCR(内标法)未检测到HBV-DNA(＜300拷贝/ml)的血清;用Light Cycler定量PCR仪(外标法)检测HBV-DNA,有7例为阳性,7例HBV-DNA的平均含量3.1×105拷贝/ml,,阳性率17%.结论 乙型肝炎病毒e抗原阳性并不说明体内病毒复制一定活跃.经治疗后,病毒复制下降,部分患者e抗原仍阳性,e抗原何时消失有待进一步研究.血清学标志与HBV复制状态存在不一致性,兼顾内、外标两种PCR方法检测HBV-DNA更客观.     

慢性HBV感染者血清HBeAg、抗-HBe与HBV DNA含量的关系及临床意义

目的：探讨慢性HBV感染者血清HBeAg、抗－HBe与HBV DNA检测结果的关系及其临床意义。方法：对41例慢性乙肝与36例乙肝后肝硬化患者进行定量测定HBeAg、抗－HBe及HBV DNA量。结果：慢性乙肝与乙肝后肝硬化患者HBV DNA量无显著性差异（P＞0．05），而它们间的HBeAg及抗－HBe阳性率，抗－HBe量存在明显的差异（P＜0．05），肝硬化患者的抗－HBe较高；77例患者中HBeAg阳性组与抗－HBe阳性组间HBV DNA量无显著性差异（P＞0．05）。结论：HBV复制是否活跃不同类型慢性HBV感染病期无明显关系，慢性乙肝患者发生HBeAg向抗－HBe转化并非均提示病情好转，反而有可能是预示向肝硬化发展的一个前期的危险信号。     

HBsAg水平评估聚乙二醇干扰素α-2a序贯联合阿德福韦酯治疗e抗原阳性慢性乙肝的疗效

目的探讨HBsAg水平在评估聚乙二醇干扰素α-2a序贯联合阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙肝远期疗效的价值。方法 2010年3月—2011年3月确诊收治的HBeAg阳性慢性乙肝患者87例,给予聚乙二醇干扰索α-2a治疗24周后,测定并根据其HBV DNA水平分组,HBV DNA<2×10~4 cps/ml者28例纳入A组,HBV DNA≥2×10~4 cps/ml者59例随机分成B组(30例)和C组(29例),A和B组继续给予聚乙二醇干扰素α-2a治疗,C组联合使用阿德福韦酯治疗。疗程均48周。结果 3组在治疗36周和48周后HBeAg转阴率、HBeAg血清转换率等方面差异不显著(P>0.05),但C组HBeAg血清转换率升高幅度显著高于其他2组(P<0.05)。治疗后36周A组HBVDNA转阴率和HBV DNA下降量分别为96.4%和(5.8±1.7)log_(10) cps/ml,B组最低(P<0.05);治疗48周后3组HBV DNA转阴率分别为100%、36.7%和69.0%(P<0.05);HBV DNA转阴率仅与治疗36周后的HBV DNA下降量有关,当HBV DNA下降约3.7 log_(10)cps/ml时,HBV DNA转阴率阳性预测值为91.2%,AUC为0.834。结论聚乙二醇干扰素α-2a序贯联合阿德福韦酯可提高单独使用聚乙二醇干扰素α-2a治疗24周后仍应答不佳者的血清和病毒应答率,且治疗36周后的HBV DNA水平可作为预测联用阿德福韦酯治疗至48周时疗效的指标。     

乙型肝炎病毒核酸相关抗原在评价病毒复制中的应用价值

目的 通过对乙型肝炎病毒核酸相关抗原(hepatitis Bvirus nucleic acid related antigen,HBV NRAg)与HBeAg和乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virus DNA,HBV DNA)之间的比较,探讨HBV NRAg在评价病毒复制中的应用价值.方法收集157例...     

拉米夫定联合抗乙肝胎盘转移因子治疗活动性肝硬化临床观察

目的比较拉米夫定联合抗乙肝胎盘转移因子和单用抗米拉定治疗乙肝病毒复制活跃的活动性肝硬化长期临床疗效。方法 62例HBeAg和HBV-DNA阳性活动性肝硬化患者分为拉米夫定联合抗乙肝胎盘转移因子联合治疗组(30例)和单用拉米夫定对照组(32例),治疗24个月后随访6个月。结果治疗24个月后,联合治疗组46.4％病人获得HBeAg血清转换,对照组21.4％发生HBeAg血清转换(P<0.05)。同时联合组14.3％发生YMDD变异,而对照组46.4％发生变异(P<0.01)。两组病人HBV-DNA载量都明显下降,肝组织学获得进步。随访6个月,联合治疗组HBeAg血清转换率(64.3％)仍显著高于对照组(28.6％)。结论拉米夫定联合抗乙肝胎盘转移因子治疗病毒复制活跃的活动性肝硬化在HBeAg血清转换和YMDD变异上比单用拉米夫定有更好的临床作用。     

Relationship between HBeAg and HBV DNA in patients with acute and persistent hepatitis B infection

The correlation between hepatitis B e antigen (HBeAg) and hepatitis B virus (HBV) DNA was studied in a number of hepatitis B surface antigen (HBsAg)-positive serum samples which had been submitted for routine hepatitis screening. In patients with either acute or persistent HBV infection, a good overall correlation between HBeAg and HBV DNA was noted, although in persistently infected patients with chronic liver disease, 28% of samples with hepatitis B e antibody (anti-HBe) were also positive for HBV DNA. Around 3% of the samples that were positive for HBV DNA were negative for HBeAg and anti-HBe while, conversely, 19% of HBeAg-positive sera were negative for HBV DNA. These results indicate that the presence or absence of HBeAg/anti-HBe may not necessarily reflect that of serum HBV DNA, particularly in persistent infection; this provides further support for the replacement of HBeAg/anti-HBe assays by detection of HBV DNA in the routine assessment of possible infectivity and chronic liver disease in HBsAg-positive patients.     

HBV-DNA与其病毒免疫标志物的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV-DNA与病毒免疫标志物的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对568份HBV感染者血清中HBV-DNA含量进行检测,同时用ELISA法检测其HBV免疫标志物。结果:HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率约为98.9%;HBsAg、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为65.4%;HBsAb、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为13.9%;三组间HBV-DNA阳性率有明显差异(P<0.01)。HBeAg阳性标本中HBV-DNA阳性率最高,达92.0%;HBsAg与HBV-DNA的符合率最高,为77.6%。结论:检测HBV-DNA含量结合血清病毒标志物对乙型肝炎的临床诊断治疗以及病情判断有重要意义。