雌激素诱导子宫内膜癌细胞血管因子生成的作用

目的探讨雌激素诱导子宫内膜癌细胞HEC-1A血管因子生成的机制,阐述雌激素在子宫内膜癌发生中的作用。方法以雌激素（E2组）作用于HEC-1A细胞30min,雌激素受体抑制剂（ER组）、AKT抑制剂（AKT组）、NF-κB抑制剂（NF-κB组）分别预处理HEC-1A细胞1h,各加入雌激素作用30min后;采用qRT-PCR检测各组细胞内血管因子mRNA表达,Westernblot检测血管因子蛋白的表达情况。结果 E2组的血管因子mRNA及蛋白的表达均明显高于对照组（P〈0.05）;ER组、AKT组及NF-κB组的血管因子mRNA和蛋白的表达均明显低于E2组（P〈0.05）。结论雌激素在子宫内膜癌HEC-1A细胞中起到信号传导的作用,可调节血管生成因子的表达,参与子宫内膜癌发生、发展的过程。     

苏拉明对人子宫内膜癌细胞增殖和乙酰肝素酶表达的影响

目的 通过用苏拉明（suramin）处理体外培养的人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1-B，观察其对子宫内膜癌细胞增殖和乙酰肝素酶（heparanase，HPSE）表达的影响，探讨苏拉明治疗子宫内膜癌的可能性。方法 用不同浓度的苏拉明处理体外培养的人子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B，分别在处理后的不同时间点，以MTT法检测HEC-1-B细胞增殖的情况，倒置相差显微镜观察细胞形态改变，免疫细胞化学染色法检测HPSE表达水平的改变。结果 苏拉明处理HEC-1-B细胞5d后HEC-1-B的增殖活性与时间剂量呈负相关（P〈0．01）。免疫细胞化学染色法结果表明不同浓度的苏拉明处理细胞96h后HPSE的表达无明显变化。结论 苏拉明能够抑制人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1-B的增殖。苏拉明对HEC-1-B细胞HPSE的蛋白表达无影响。苏拉明能否用于人子宫内膜癌的治疗，有待于进一步的研究。     

SERPINA3在子宫内膜癌中表达上调的临床意义及功能研究

背景与目的：SERPINA3是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的一员,已有研究证实其在多种肿瘤细胞中异常表达。然而,它在子宫内膜癌中生物学功能及临床意义尚不清楚。本研究旨在探讨SERPINA3在子宫内膜癌细胞中的功能和子宫内膜癌预后评估中的价值。方法：①收集20对子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织,用实时定量PCR(quantitative real-time PCR)检测SERPINA3 mRNA在内膜组织中表达情况;②使用免疫组化方法,检测组织芯片(子宫内膜癌81例和正常对照37例)的SERPINA3表达情况,依据染色结果,用SPSS软件分析SERPINA3与子宫内膜癌临床病理特征之间的关系;③检测5株子宫内膜癌细胞系中SERPINA3的表达情况,选取表达量最高的HEC-1A细胞,利用小片段干扰RNA(small interfering RNA)干扰SERPINA3基因在HEC-1A细胞中的表达;④蛋白质印迹法(Western blot)和qPCR检测干扰后HEC-1A中SERPINA3基因在mRNA和蛋白水平表达情况,细胞迁移实验检测细胞运动能力的变化。结果：①SERPINA3 mRNA在内膜癌中表达明显高于对照内膜组织(n=20,P<0.05);②免疫组化结果显示SERPINA3在子宫内膜癌中的表达水平高于正常子宫内膜组织(P<0.001)。SERPINA3的表达水平与子宫内膜癌的临床分期、肿瘤细胞级别、脉管浸润、淋巴结转移之间比较差异有统计学意义(P<0.05);③干扰SERPINA3组细胞迁移能力显著减弱。结论：SERPINA3基因在子宫内膜癌中表达显著上调,可能与子宫内膜癌的侵袭和转移等相关。SERPINA3有望成为评估子宫内膜癌预后的生物学标志物,并可能作为子宫内膜癌生物靶向治疗的靶标之一。     

HOXA10 基因在子宫内膜癌组织中的表达及其生物学作用

目的:探讨同源框A10（HOXA10）基因在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌Ishikawa 细胞株凋亡、迁移及侵袭的影响。方法：收集2012 年至2013 年在鼓楼医院妇产科子宫内膜癌组织标本21 例、正常增殖期子宫内膜组织标本25 例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blotting 方法检测HOXA10 在子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中的表达。将感染复数为5、10、20 MOI的ad-flag-HOXA10 腺病毒质粒及20 MOI的ad-flag-lacz 腺病毒质粒(对照组)感染人子宫内膜癌Ishikawa 细胞株,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。将50 nmol/L的si-HOXA10 及si-NC质粒转染Ishikawa 细胞株,分别为下调组及下调对照组;将20 MOI的ad-flag-HOXA10 及20 MOI的ad-flag-lacz 腺病毒质粒感染Ishikawa 细胞株,分别为上调组及上调对照组;Transwell 小室检测各组细胞迁移及侵袭能力。结果：在子宫内膜癌组织中HOXA10 mRNA 表达量比正常子宫内膜组织中显著降低[ （0.56±0.14）vs (1.36±0.33),P<0.01],其蛋白表达量同样显著降低[ （1.01±0.25）vs (2.10±0.71),P<0.01]。上调HOXA10后5、10、20 MOI 组细胞的凋亡率明显升高,且大多数处于早期凋亡[ （50.92±8.79）%、(55.17±4.07)%、(76.10±3.65)% vs (7.74±0.15)%,均P<0.01]。下调HOXA10 表达后迁移细胞数显著增加[ （248±25）vs (135±15)个,P<0.01],上调HOXA10 表达后迁移细胞数显著减少[（50±6）vs (100±13) 个,P<0.01];下调HOXA10 表达后侵袭细胞数显著增多[ （131±18）vs (66±9)个,P<0.01],上调HOXA10 表达后侵袭细胞数显著减少[ （34±8）vs（60±4）个,P<0.01]。结论：HOXA10 基因在子宫内膜癌内膜中表达低于正常内膜,子宫内膜癌Ishikawa细胞株中上调HOXA10 基因表达能促进细胞凋亡并抑制其迁移和侵袭能力。     

lncRNA TFAP2A-AS1/miR-9-5p通过ERK通路对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA TFAP2A-AS1对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制。方法:选择50例子宫内膜癌组织和对应的癌旁组织。选取子宫内膜癌细胞株(RL95-2、HEC-1A、HHUA、HEC-1B及Ishikawa),子宫内膜上皮细胞hEEC。子宫内膜癌细胞株Ishikawa转染si-TFAP2A-AS1(si-TFAP2A-AS1组)、si-NC(si-NC组)、miR-9-5p mimics(miR-9-5p组)及miR-NC(miR-NC组);RL95-2细胞转染OE-TFAP2A-AS1(TFAP2A-AS1组)、Vector(Vector组)、sh-miR-9-5p(sh-miR-9-5p组)及sh-NC(sh-NC组)。CCK-8检测细胞增殖能力，Transwell检测细胞侵袭、迁移能力，双荧光素酶实验、pull down实验分析TFAP2A-AS1与miR-9-5p的靶向关系；miR-9-5p与ERK的靶向关系，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测子宫内膜癌组织、癌旁组织、子宫内膜癌细胞及hEEC细胞TFAP2AAS1、miR-9-5p表达水平，We...     

NF-κB、COX-2、LKB1在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨核转录因子κB(NF-κB)、环氧化酶2(COX-2)、肝激酶基因B1(LKB1)在不同子宫内膜组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测60例正常子宫内膜、31例非典型增生子宫内膜和60例子宫内膜癌组织中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的表达,并分析其与子宫内膜癌临床病理特征的关系.结果 NF-κB、COX-2、LKB1在子宫内膜癌组织、非典型增生子宫内膜组织和正常子宫内膜组织中的阳性表达率分别为63.3％、70.0％、35.0％,41.9％、64.5％、61.3％和35.0％、51.7％、93.3％,NF-κB、LKB1在3组间的表达差异有统计学意义(P＜0.05),而COX-2的表达差异无统计学意义(P＞0.05).子宫内膜癌中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的阳性表达与病理类型、FIGO分期、淋巴结转移均无关(P＞0.05).LKB1蛋白表达与肌层浸润深度和组织学分级相关(P＜0.05),NF-κB蛋白表达与组织学分级亦相关(P＜0.05).结论 NF-κB在子宫内膜癌组织中高表达、LKB1低表达,其表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关.     

二甲双胍对LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞的影响

目的 研究二甲双胍对LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞的增殖与细胞周期的影响。方法 以不同浓度的二甲双胍作用于LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞（LKB组）与缺失LKB1基因表达的HEC-1A细胞（CON组）。用流式细胞术仪检测各组HEC-1A细胞的细胞周期;RT-PCR法和Western blot技术检测各组HEC-1A细胞的LKB1、mTOR基因与蛋白的表达;以平板克隆法与细胞迁移实验检测各组细胞的细胞增殖水平。结果 与缺失LKB1基因表达的HEC-1A细胞比较,LKB1基因过表达的HEC-1A细胞随着二甲双胍浓度的升高明显降低细胞克隆形成率、细胞迁移率、S 期细胞比例及mTOR基因与蛋白的表达,而增加G₀ /G₁期细胞比例及LKB1基因与蛋白的表达,差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 二甲双胍抑制LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞的生长和侵袭,其机制可能为介导LKB1/mTOR信号传导通路而抑制子宫内膜癌细胞的增殖。     

肌酸激酶线粒体1A在子宫内膜样腺癌组织中的表达及对Ishikawa细胞增殖和迁移能力的影响

[目的]探讨肌酸激酶线粒体1A(creatine kinase mitochondrial 1A,CKMT1A)在子宫内膜样腺癌（endometrioid adenocarcinoma,ECa）组织和癌旁组织中的表达情况及其对子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖和迁移能力的影响。[方法]选择2017年1月至2020年12月在郑州大学第三附属医院就诊,具有完整临床信息资料的ECa组织及癌旁组织各39例,采用qRTPCR检测组织中CKMT1A mRNA表达,采用免疫组化SP法检测CKMT1A蛋白表达情况。体外细胞实验使用siRNA干扰Ishikawa细胞中的CKMT1A基因表达,通过CCK8和划痕实验检测敲减CKMT1A后对Ishikawa细胞增殖和迁移能力的影响。[结果]与癌旁组织相比,ECa组织中CKMT1A mRNA表达量（t=4.006,P<0.05）和CKMT1A的阳性表达率均较高（P<0.001）。CKMT1A mRNA在不同ECa分期的患者组织中表达量不同,差异具有统计学意义（F=11.780,P<0.001）。在敲减CKMT1A组中,细胞增殖（P<0....     

过表达miR-125b对子宫内膜癌HEC-1B细胞周期、增殖和凋亡的影响及其可能的机制

探讨miR-125b过表达对子宫内膜癌（endometrial carcinoma, EC）HEC-1B细胞增殖及凋亡的影响及其可能的机制。方法：收集2012年11月至2013年11月间四川省妇幼保健医院收治的30例子宫内膜样腺癌患者肿瘤及其癌旁组织标本,Real-time PCR检测肿瘤组织及培养细胞中miR-125b的表达水平。脂质体转染法分别将miR-125b模拟片段（mimic）与无关序列（scramble mimic）转染入HEC-1B细胞作为miR-125b组和对照组,以野生型HEC-1B细胞为未处理组。流式细胞术和CCK-8法分别检测过表达miR-125b对HEC-1B细胞周期、凋亡和增殖的影响,Western blotting检测过表达miR-125b对HEC-1B细胞中PIK3CD、p-AKT以及总AKT表达的影响。结果：人EC组织中miR-125b表达量较癌旁组织显著下调（P<005）。HEC-1B细胞转染mimic片段后,其miR-125b的表达上调820倍以上。转染48 h后,miR-125b组细胞的增殖能力显著低于对照组和未处理组（0.53±0.06 vs 0.82±0.07、0.89±0.08,P<0.01）、细胞凋亡率显著升高[（21.5±3.2）% vs （142±2.3）%、（13.5±2.1）%,均P＜0.01],并且miR-125b组细胞周期阻滞于G1期;miR-125b组HEC-1B细胞中PIK3CD及其下游p-AKT蛋白表达较对照组和未处理组显著降低（均P<0.01）,而总AKT表达无明显变化（均P＞0.05）。结论：miR-125b在EC组织中普遍低表达,其在HEC-1B细胞中过表达能够明显抑制细胞增殖和周期进程,促进细胞早期凋亡,这可能与miR-125过表达抑制细胞内PI3K/AKT信号通路有关。     

miRNA-3653-3p通过抑制PLAC8-Wnt-β-catenin信号通路降低子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭能力

目的探讨miRNA-3653-3p(miR-3653-3p)对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其相关机制。方法从OncoLnc数据库中下载356例子宫内膜癌患者资料, 数据更新时间为2020年;采用Kaplan-Meier法分析miR-3653-3p表达水平与子宫内膜癌患者总生存的关系;采用miRGator数据库预测与miR-3653-3p存在结合位点的靶基因。选择人子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1A、HEC-1B、Ishikawa和人正常子宫内膜上皮细胞株ESC, 采用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-3653-3p相对表达量。选取miR-3653-3p表达最低的细胞株为研究对象, 分为阴性对照组和miR-3653-3p组, 分别转染对照空载质粒和miR-3653-3p过表达质粒。采用CCK-8法检测细胞的增殖能力, Transwell法检测细胞的侵袭能力;qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-3653-3p靶基因的表达。蛋白质印迹法检测miR-3653-3p对Wnt-β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果 OncoLnc数据库中数据分析显示,...