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1.
背景与目的:探讨Bax蛋白在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用.材料与方法:用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察细胞凋亡的形态学改变;Westem Blot法检测不同剂量VES对人胃癌SGC-7901细胞中Bax蛋白表达量的影响和VES对Bax蛋白与细胞色素c(cytochrome c,Cyt c)蛋白在细胞内分布的影响;用Mito Tracker RedCMXRos荧光染色观察线粒体膜电位(△Ψm)的变化.结果:VES可引起SGC-7901细胞发生凋亡,提高Bax蛋白表达水平,并使Bax蛋白从胞浆转移到线粒体;VES作用后发生线粒体膜电位下降,Cyt c从线粒体释放到胞浆.结论:VES可能通过Bax蛋白来启动线粒体凋亡途径,诱导SGC-7901细胞发生凋亡. 相似文献
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Bid在维生素E琥珀酸酯诱导SGC-7901细胞凋亡中的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
背景与目的:研究Bid在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用.材料与方法:在VES诱导SGC-7901细胞凋亡过程中,检测Bid蛋白的活化;用RNA瞬时干扰阻断Bid的表达,再用VES作用SGC-790细胞后,比较Bid阴性表达和Bid阳性表达细胞的凋亡率、线粒体膜电位(△Ψm)、胞浆中细胞色素C含量和PARP活化程度. 结果:VES作用细胞后Bid发生活化;Bid阴性表达细胞的凋亡率较Bid阳性表达细胞降低,线粒体膜电位升高,胞浆中细胞色素C含量减少,PARP活化减弱.结论:在VES诱导SGC-7901细胞凋亡过程中,Bid可能发挥重要作用. 相似文献
3.
目的:探讨内质网应激在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡过程中的作用。方法:分别采用Western blotting和RT-PCR检测VES不同剂量(0、5、10和20μg/ml)处理SGC-7901细胞24 h和20μg/ml VES处理SGC-7901细胞不同时间对内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白(glucose regulative protein,GRP)GRP78、GRP94和内质网应激凋亡途径关键因子C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)的蛋白和mRNA表达的影响;进一步采用RNA瞬时干扰阻断CHOP的表达后用20μg/ml VES作用SGC-7901细胞24 h,采用DAPI染色法观察细胞凋亡的改变。结果:20μg/ml VES组在mRNA水平卜均诱导GRP78、GRP94和CHOP的表达增加;在蛋白水平上20μg/ml VES显著增加GRP78和CHOP的表达,GRP94表达先降低,而后又升高;阻断CHOP后VES诱导的细胞凋亡由46.3%降低为27.9%(P0.05)。结论:内质网应激可能参与了VES诱导的SGC-7901细胞凋亡。 相似文献
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HUANG Xiao-li ZHAO Yan ZHANG Zhi-hong ZHANG Xu-guang WANG Xiao-lin JIA Li WU Kun 《癌变.畸变.突变》2012,24(3)
目的:探讨内质网应激在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡过程中的作用.方法:分别采用Western blotting和RT-PCR检测VES不同剂量(0、5、10和20μg/ml)处理SGC-7901细胞24 h和20 μ g/ml VES处理SGC-7901细胞不同时间对内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白(glucose regulative protein,GRP)G RP78、GRP94和内质网应激凋亡途径关键因子C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)的蛋白和mRNA表达的影响;进一步采用RNA瞬时干扰阻断CHOP的表达后用20 μg/ml VES作用SGC-7901细胞24h,采用DAPI染色法观察细胞凋亡的改变.结果:20μg/ml VES组在mRNA水平上均诱导GRP78、GRP94和CHOP的表达增加;在蛋白水平上20 μg/ml VES显著增加GRP78和CHOP的表达,GRP94表达先降低,而后又升高;阻断CHOP后VES诱导的细胞凋亡由46.3%降低为27.9% (P<0.05).结论:内质网应激可能参与了VES诱导的SGC-7901细胞凋亡. 相似文献
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背景与目的:研究维生素E琥珀酸酯(VES)对人胃腺癌SGG7901细胞生长的抑制作用,探索VES诱导SGC-7901细胞凋亡情况及其可能机制.材料与方法:胃癌SGC-7901细胞分为VES不同浓度处理组和1 mmol/L甘露醇+20 μg/ml VES处理组(细胞先用1 mmol/L的甘露醇处理2 h后,加入20 μg/ml的VES处理),SGC-7901细胞经受试物处理24 h后,采用MTT、单细胞凝胶电泳方法和流式细胞技术,检测VES诱导SGC-7901细胞的氧化损伤及凋亡的情况,用相应的生化检测试剂盒检测细胞内活性氧及谷胱甘肽的含量变化. 结果:0、1.25、2.5、5、10、20 μg/ml的VES对胃癌细胞SGC-7901细胞的生长均有不同程度的抑制作用,其中20 μg/mlVES组抑制作用最大,其生长抑制率达76.91%.研究结果还显示随VES浓度的增加,细胞凋亡率呈现增加的趋势.彗星实验结果显示,各实验组随着VES浓度的增加,彗星尾长与彗星细胞率呈现增加的趋势.VES 10、20 μg/ml组与阴性对照组相比,SGC-7901细胞内谷胱甘肽含量显著下降(P<0.05),同时活性氧含量显著增加(P<0.05).1 mmol/L甘露醇+20μg/ml VES处理组与VE$20 μg/ml处理组比较:SGC-7901细胞DNA损伤程度较轻,细胞凋亡率明显低于YES 20 μg/ml处理组,其细胞内活性氧的生成减少,细胞内谷胱甘肽的消耗减少(P<0.05).绪论:VES可显著抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,且随VES剂量的增加,其抑制作用越强.细胞内活性氧含量增加、谷胱甘肽耗竭所导致的氧化损伤作用可能是VES诱导细胞凋亡的机制之一. 相似文献
6.
维生素E琥珀酸酯通过氧化应激诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)是否可通过氧化应激来诱导胃癌细胞凋亡及其可能机制。方法:分别用5、10和20μg/ml的VES处理胃癌SGC-7901细胞24h,同时设阴性对照组和甘露醇(活性氧抑制剂)预处理组。通过流式细胞技术、共聚焦技术和Western blot方法,检测了VES诱导SGC-7901细胞线粒体氧化损伤及细胞凋亡的情况,用相应的检测试剂盒检测细胞内活性氧和Ca^2+含量变化情况。结果:不同浓度的VES对SGC-7901细胞均有诱导凋亡的作用。表现为随VES浓度的增加,SGC-7901细胞凋亡数量呈现增加的趋势,且SGC_7901细胞内活性氧含量及钙离子水平呈现增加的趋势,而线粒体膜电位逐渐下降。活性氧抑制剂甘露醇(1mmol/L)对VES诱导的胃癌细胞凋亡,和细胞内活性氧、钙浓度的增高及膜电位的降低均有显著抑制作用(P〈0.05)。随VES浓度的增加,SGC7901细胞内Bax蛋白的表达呈现上升的趋势,而Bcl-2蛋白的表达呈现下降趋势。甘露醇可显著降低胃癌SGC-7901细胞Bax蛋白的表达水平,同时增加Bcl-2蛋白的表达(P〈0.05)。结论:VES可显著促进胃癌细胞凋亡,并且随着VES剂量的增加,VES诱导胃癌细胞凋亡的作用越强。细胞内活性氧含量增加、细胞内钙超载所导致的线粒体氧化损伤作用可能是VES诱导细胞凋亡的机制之一。 相似文献
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<正>维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)是天然维生素E(vitamin E,VitE)的衍生物。VES不仅能抑制淋巴系统来源的肿瘤,且对血液系统和上皮组织来源的恶性肿瘤也有显著的诱导凋亡作用,具体研究发现,VES可抑制人胃癌细胞SGC-7901、人前列腺癌细胞、人乳腺癌细胞、人肝癌HepG2细胞、人肾细胞癌、人头颈部鳞癌细胞、人肺上皮癌细胞等,并能诱导肿瘤细胞凋亡、诱导细胞分化。动物实验还证实VES可抑制 相似文献
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目的:探讨cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ(cGMP-dependent protein kinaseⅡ,PKGⅡ)对人胃癌SGC-7901细胞增殖相关的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)下游核糖体S6激酶1(ribosomal S6 kinase1,RSK1)和原癌基因c-Jun、c-Fos的作用。方法:用腺病毒Ad-LacZ和Ad-PKGⅡ感染SGC-7901细胞,使细胞高表达PKGⅡ;用特异性PKGⅡ激活剂8-pCPT-cGMP[8-(p-chlorophenylthio)-cyclic GMP]作用于感染了腺病毒的细胞,再用表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)进行刺激。MTT法检测PKGⅡ对EGF刺激引起的SGC-7901细胞增殖的影响,RT-PCR法和蛋白质印迹法分别检测PKGⅡ对EGF引起的SGC-7901细胞中c-Jun、c-FosmRNA和p-RSK1、c-Jun、c-Fos蛋白表达的影响,免疫荧光显微镜下观察p-RSK1在SGC-7901细胞核内的分布情况。结果:8-pCPT-cGMP作用于感染了Ad-PKGⅡ的SGC-7901细胞后,EGF对SGC-7901细胞的增殖促进作用和EGF诱导的c-Jun、c-FosmRNA和蛋白的表达受到抑制,RSK1(Ser380)磷酸化水平明显降低;EGF刺激后,SGC-7901细胞核内大量累积p-RSK1,8-pCPT-cGMP作用后细胞核内p-RSK1减少。结论:激活的PKGⅡ可有效抑制EGF诱导的胃癌细胞的增殖、RSK1Ser380位点的磷酸化、p-RSK1在细胞核内的累积以及原癌基因c-Jun和c-Fos的表达。 相似文献
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目的: 观察维生素E琥珀酸酯 (vitamin E succinate,VES)处理SGC-7901细胞后是否发生自噬,并探讨自噬在VES抑制细胞增殖中的作用。方法:用不同浓度 (0、5、10、15、20 μg/mL)VES处理SGC-7901细胞24 h后,电子显微镜观察自噬体形态;VES处理转染GFP-LC3质粒后的SGC-7901细胞,荧光显微镜观察自噬情况;Western blot检测自噬标志蛋白LC3,以及Akt/mTOR通路关键分子Akt,mTOR活性变化;采用自噬抑制剂氯喹 (chloroquine,CQ)和3-甲基腺苷 (3-methyladenine,3-MA)处理细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力。结果:电子显微镜观察显示经不同浓度VES处理后,细胞中出现了典型的自噬囊泡以及自噬溶酶体等自噬各阶段的形态变化;荧光显微镜观察显示GFP-LC3质粒转染后随VES处理剂量的增加,绿色点状荧光逐渐聚集增强;Western blot结果显示,VES可使LC3-Ⅱ蛋白表达增强;并下调Akt/mTOR通路关键分子Akt,mTOR的活性;MTT结果显示VES+CQ组和VES+3-MA组的细胞增殖抑制率均明显高于VES单独处理组 (P均 <0.05),即自噬抑制剂CQ与3-MA预处理使细胞增殖率进一步下降,提示VES诱导的肿瘤细胞自噬对肿瘤细胞增殖具有保护作用。结论:VES可以通过抑制Akt/mTOR通路活性诱导人胃癌细胞SGC-7901细胞发生自噬,且此种自噬为保护性自噬。 相似文献
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目的:研究维生素E琥珀酸酯(VES)是否影响人胃癌SGC-7901细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性,并探讨AMPK在VES诱导自噬中的作用。方法:用不同剂量(5、10、15、20 μg/mL)VES处理SGC-7901细胞24 h,以及20 μg/mL VES分别处理SGC-7901细胞3、6、12、24 h后,Western blot法检测SGC-7901细胞中自噬标志蛋白LC3、Beclin-1及AMPK、ACC及其磷酸化蛋白的表达。用RNAi技术沉默AMPK,20 μg/mLVES处理SGC-7901细胞24 h,Western blot法检测LC3、Beclin-1蛋白以及AMPK、mTOR、p70S6K与4EBP-1及其磷酸化蛋白表达,并采用荧光定量PCR法检测LC3 mRNA表达情况。结果:VES处理SGC-7901细胞后,与对照组比较,随着VES剂量的增加、作用时间的增长,AMPK磷酸化水平上升,LC3、Beclin-1蛋白表达增加(P<0.05)。RNAi沉默AMPK后,与单纯VES处理组比较,LC3、Beclin-1蛋白表达降低,LC3 mRNA表达下降(P<0.05);mTOR、p70S6K及4EBP-1磷酸化活性升高(P<0.05)。结论:VES可诱导SGC-7901细胞中AMPK活化,AMPK活化后影响mTOR及其下游分子活性,继而诱导自噬的发生。 相似文献
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目的:探讨过表达血管生成抑制蛋白1(vasohibin-1,VASH1)对人结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响.方法:包装慢病毒并感染人结直肠癌SW680、SW620细胞以构建过表达VASH1的细胞系,以未经感染的细胞为对照;qPCR实验和WB实验检测VASH1的过表达效果,小管形成实验、CCK-8实验、软琼脂克隆形成实... 相似文献
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目的:探索PDGF-BB是否可以通过外泌体传递,并且验证其在人骨肉瘤中的促血管新生的功能.方法:分离多种人骨肉瘤细胞中的外泌体,WB法检测PDGF-BB在人骨肉瘤细胞及其外泌体中的表达,将骨肉瘤SJSA-1细胞来源的外泌体与HUVEC共孵育,免疫荧光和激光共聚焦扫描显微镜观察外泌体PDGF-BB进入细胞的方式;慢病毒感... 相似文献
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目的:分析miR-224在肝癌患者肿瘤组织和血浆中的表达水平及其与临床病理特征、诊断和预后之间的相关性,并进一步通过生物信息学方法和体外实验分析其在肝癌发生发展中的作用机制.方法:利用基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中大样本数据分析miR-224在肝癌患者肿瘤组织及正常组织中的表... 相似文献
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近年来,肿瘤免疫治疗迅速发展,其中以T淋巴细胞(T细胞)为主体的过继细胞治疗在临床上取得了一定的疗效,成为最具潜力的免疫治疗方法之一。T细胞归巢主要包括滚动、黏附、外渗和趋化等一系列过程。然而,在实体瘤中存在物理屏障、趋化因子不匹配、血管异常、免疫抑制微环境等因素限制了过继性细胞治疗的疗效。通过改善细胞表面的趋化因子受体、嵌插靶向肽、改进给药方式以及采用联合放疗、免疫检查点阻断剂、肿瘤疫苗、双特异性抗体等治疗方法,可进一步改善T细胞的归巢能力。本文主要对T细胞归巢过程、T细胞靶向肿瘤部位的影响因素以及相关治疗策略做总结与展望。 相似文献
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目的:探讨miR-449b-5p对卵巢癌细胞生长的作用和机制.方法:选取2018年6月至2020年6月于四川省人民医院妇产科接受手术的20例卵巢癌患者的癌组织和癌旁组织,以及正常卵巢上皮细胞系HOSEpiC和6种人宫颈癌细胞系SKOV3、ES-2、OVCAR-3、HO8910、CaOV-3和 A2780,用 qPCR ... 相似文献
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目的:通过Meta分析的方法评价抗生素对免疫检查点抑制剂治疗非小细胞肺癌(non-small lung cancer,NSCLC)疗效的影响.方法:检索Pubmed、Cochrane Library、EMbase、EBSCO循证医学数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI)中收录的关于抗生素对免疫检... 相似文献
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肾上腺皮质腺癌20例临床分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的分析原发性肾上腺皮质腺癌的治疗及预后。方法回顾1965年至1998年间20例肾上腺皮质腺癌术后±局部放疗或化疗的存活情况。结果18例行根治性手术,2例行姑息性手术;术后6例接受放疗,3例接受化疗。随访至1998年12月,仅1例存28年。结论肾上腺皮质腺癌应早期手术。术后辅以米托坦治疗有望改善存活。 相似文献