香烟烟雾提取物对人外周血单个核细胞IL-8 mRNA表达的影响

目的 探讨香烟烟雾提取物(CSE)对人外周血单个核细胞(PBMC)IL-8 mRNA表达的影响及其细胞内信号途径。方法 体外应用CSE与健康者PBMC共同培养，用RT-PCR检测IL-8 mRNA的表达，用免疫细胞化学染色法检测核因子κB(NF-κB)的表达；并观察NF-κB抑制剂和酪氨酸蛋白激酶抑制剂对CSE诱导的：PBMC IL-8基因表达的影响。结果 加入CSE培养的人PBMC，IL-8 mRNA的表达增加，作用24h最高，NF-κB活化细胞百分比增加；NF-κB抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂均使CSE诱导的IL-8 mRNA表达水平下降。结论 吸烟使人PBMC的IL-8 mRNA表达水平显著增加，与NF-κB和酪氨酸激酶有关。     

慢性阻塞性肺疾病合并糖尿病患者中IL-6的表达

白细胞介素6(IL-6)是由单核巨噬细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、活化淋巴细胞合成的一种细胞因子,它参与急性时相反应及调节炎症反应.本文概述了IL-6在慢性阻塞性肺疾病(COPD)和糖尿病中的水平变化及升高机制.     

慢性阻塞性肺疾病患者白细胞介素2活性变化的研究

对３５例慢性阻塞性肺疾病患者白细胞介素２（ＩＬ－２）的活性进行测定。结果表明：慢性肺患者急性发作作期ＩＬ－２活性低于缓解期、更显著低于健康人，慢性阻肺各病种间的ＩＬ－２活性，差异均无显著性。     

白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α检测在慢性阻塞性肺疾病患者病情评估中的应用

目的:白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor,TNF-α)检测在慢性阻塞性肺疾病患者病情评估中的应用.方法:选自2019年1月至2020年11月期间于我院就诊的92例慢性阻塞性肺疾病患者为此次研究对象,设为研究组;另外选取92例同期在我院体检健康者,设为对照组.对比两组患者血清以及痰液中IL-8、TNF-α水平以及不同疾病类型患者IL-8、TNF-α水平.结果:研究组患者炎性因子IL-8、TNF-α水平明显高于对照组(P<0.05);研究组患者痰液IL-8、TNF-α水平显著高于对照组(P<0.05).急性期患者血清IL-8、TNF-α水平明显高于缓解期患者(P<0.05).结论:在慢性阻塞性肺疾病患者病情评估中应用IL-8、TNF-α检测,可作为慢性阻塞性肺疾病患者患者诊断和疗效判断的指标,对指导临床治疗有重要意义.     

IL-6在慢性阻塞性肺疾病合并糖尿病大鼠肺组织中水平变化的实验研究

目的探讨白细胞介素6(IL-6)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠、糖尿病大鼠、慢性阻塞性肺疾病合并糖尿病大鼠肺组织中的浓度水平变化及其意义。方法清洁级雄性SD大鼠80只,随机分为4组即COPD组、糖尿病组、COPD合并糖尿病组和正常对照组,各组均为20只。采用每日熏香烟法制造COPD组模型,饲以高脂饲料并注射小剂量链脲佐菌素法制造糖尿病组模型,合并上述方法制造COPD合并糖尿病组模型。造模后提取各大鼠肺组织,通过病理形态学检测证明造模成功,并采用免疫组织化学方法检测4组大鼠肺组织中IL-6的浓度水平。结果 1.COPD组和COPD合并糖尿病组大鼠支气管鳞状上皮化生、呼吸道壁纤维化及肺泡壁的破坏和纤维化上皮明显增生增厚,壁有大量淋巴细胞、巨噬细胞为主的炎细胞浸润,较多中性粒细胞浸润,肺泡腔扩大,肺泡壁断裂融合形成肺泡气肿,COPD合并糖尿病组较COPD组、糖尿病组病理表现更为显著。2.免疫组化结果显示:正常组IL-6浓度为(4.27±0.89)%,COPD组IL-6浓度为(13.13±1..28)%,糖尿病组IL-6浓度为(8.26±0.92)%,COPD合并糖尿病组IL-6浓度为(20.86±2.73)%。与正常组比较,COPD组、糖尿病组和COPD合并糖尿病组IL-6水平均升高(P0.01);与COPD组比较,糖尿病组IL-6降低(P0.01),COPD合并糖尿病组IL-6升高(P0.01);与糖尿病组比较,COPD合并糖尿病组IL-6升高(P0.01)。结论大鼠肺组织中IL-6水平的增高与COPD及高血糖的炎性反应有叠加作用。     

首发精神分裂症PBMCNF-κB活性及其mRNA表达与IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达的关系

目的：探讨首发精神分裂症患者外周血单个核细胞（PBMC）NF-κB的活性及其mRNA表达与IL-β、IL-6、TNF-α mRNA表达的相互关系，为临床应用NF-κB调节剂提供理论依据。方法：应用NF-κB活性ELISA试剂盒，检测精神分裂症组和健康对照组PBMC中NF-κB活性，并采用RT-PCR方法，测定两组PBMC中NF-κB mRNA表达及IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达。结果：①精神分裂症组PBMC中NF-κB的活性及NF-κB mRNA表达量与对照组相比均明显增高，差异有显著性（P〈0．05）；②精神分裂症组PBMC中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达量与对照组相比均明显增高，差异有显著性（均P〈0．05）；③在精神分裂症组及对照组中，PBMC中NF-κB的活性与其mRNA表达量无明显相关（均P〉0．05）；④在精神分裂症组和对照组中，PBMC中NF-κB的活性与IL-1β、TNF-α mRNA均呈正相关（均P〈0．05）；无论是在精神分裂症组或对照组中，PBMC中NF-κB的活性与IL-6 mRNA均无明显相关（均P〉0．05）。结论：精神分裂症患者PBMC中NF-κB mRNA表达及活性均增高，对NF-κB活性的检测更能反映NF-κB的转录调控功能情况；活化的NF-κB对IL-1β、TNF-α的基因转录起了重要的调控作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血Th22的检测及临床意义

探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者外周血Th22的变化及其临床意义。选取2014年1月至2017年1月到我院就诊的COPD患者220例为研究对象,另取50例健康体检者为正常对照组。根据患者症状严重程度将COPD患者分为A组(低危、症状轻)、B组(低危、症状重)、C组(高危、症状轻)及D组(高危、症状重),同时针对性地给予吸入性糖皮质激素/长效β2受体激动剂或吸入性糖皮质激素/长效β2受体激动剂+长效胆碱能药物治疗,检测患者治疗前后外周血Th22、白细胞介素(IL-22、IL-17)水平及肺功能等指标,分析Th22水平与其他临床指标间的相关性。结果显示COPD患者外周血Th22、IL-22及IL-17水平显著高于健康对照组(P0.05)。B、D组COPD患者外周血Th22、细胞因子(IL-22、IL-17)水平及慢性阻塞性肺疾病评估测试(CAT评分)显著高于A、C组患者(P0.05)。与治疗前相比,COPD患者治疗后外周血Th22、细胞因子(IL-22、IL-17)水平、CAT评分明显降低(P0.05)。COPD患者Th22水平同细胞因子IL-22、IL-17水平、CAT评分均呈显著正相关(治疗前:r=0.812,P=0.010;r=0.754,P=0.020;r=0.786,P=0.015;治疗后:r=0.791,P=0.013;r=0.704,P=0.031;r=0.732,P=0.025)。研究表明外周血Th22及其相关细胞因子在COPD患者中明显升高,对于评估COPD患者病情严重程度及治疗效果具有重要的临床应用价值。     

COPD患者血清IL-6、IL-8、hs-CRP和IL-18检测的临床意义

目的：观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者治疗前后血清IL-6、IL-8、hs-CRP和IL-18水平的变化及临床意义。方法：应用放射免疫分析和免疫比浊法对32例COPD患者进行了治疗前后血清IL-6、IL-8、hs-CRP和IL-8检测,并与35名正常健康人作比较。结果：COPD患者在治疗前血清IL-6、IL-8、hs-CRP和IL-18水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经中西医结合治疗1个月后与正常人组比较仍有差异（P〈0.05）。结论：IL-6、IL-8、hs-CRP和IL-18的测定,可适用为一种筛选方法,其变化可能以不同的方式参与了COPD的发病,此外,该些项目的检测对了解病情、指导治疗具有重要的临床价值。     

脂多糖对肺微血管内皮细胞IL-8表达的影响及其调控机理

目的探讨脂多糖(LPS)的直接诱导作用对肺微血管内皮细胞(PMVEC)IL-8表达的影响及通过核因子κB(NF-κB)的调控机理。方法肺微血管内皮(PMVEC)细胞生长至80 %以上融合度时用于实验。加入LPS以100ng/ml浓度刺激细胞分别至0、0.5、1、2、4、6、8h ,或LPS分别以1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml刺激细胞至1h或6h为检测时相点 ,每组6个标本。至预定时相点离心收集培养液上清 ,行IL -8ELISA检。用原位杂交试验检测培养液上清中分泌的IL -8及PMVEC内IL-8mRNA的表达 ;凝胶电泳迁移率分析 (EMSA)检测NF-κB的活化 ,以积分灰度值表示NF-κB的活性变化。观察NF -κB活化抑制 (PDTC)对IL-8表达的影响。结果LPS能显著促进PMVEC表达IL -8,随刺激时间延长IL -8水平逐渐升高 ,与0h相组比 ,100ng/mlLPS刺激后从2小时开始即有明显上升 (P<0.05) ,8h达到峰值 ,为5.86±0.68ng/ml(P<0.01)。与对照组比 ,1ng/mlLPS刺激6h即能显著诱导IL-8的表达(P<0.05) ,10ng/ml、100ng/ml的诱导作用非常显著(P<0.01) ,随着LPS浓度的增加而增加。LPS刺激后能明显地诱导IL -8mRNA的表达。100ng/mlLPS刺激后从1h开始即在胞浆中显示IL-8mRNA的强阳性表达 ,随作用时间延长 ,IL-8mRNA表达增加。至6h达到高峰 ,8hIL -8mRNA表达略有下降。同时显示IL -8mRN     

IL-4和IL-6对慢性阻塞性肺疾病患者气道上皮细胞阿米洛利敏感的Na+通道电流的影响

目的：研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者原代培养的气道上皮细胞中阿米洛利敏感的Na+通道电流（Iamil）及IL-4、IL-6对其影响。 方法： 体外分离培养气道上皮细胞，经过终浓度均为10 μg/L的IL-4、IL-6处理，用全细胞膜片钳技术记录原代培养的气道上皮细胞中Iamil。 结果： 正常不吸烟对照组、正常吸烟对照组及COPD组Iamil值无显著差异。IL-4处理可以下调正常不吸烟对照组、正常吸烟对照组及COPD组的Iamil，下调幅度分别为59.7%、54.7%及30.0%；IL-6处理可以下调正常不吸烟对照组、正常吸烟对照组的Iamil，下调幅度分别为44.8%及34.9%，但是IL-6处理不能下调COPD组Iamil值；且IL-4、IL-6处理后的Iamil电流形状未见明显改变。 结论： IL-4及IL-6处理可以下调体外培养的气道上皮细胞的Iamil，提示在COPD患者中升高的IL-4及IL-6水平将有助于气道高分泌状态的形成，同时由于COPD患者中自身IL-4及IL-6的水平升高，导致培养的COPD患者气道上皮细胞对IL-4及IL-6处理的反应相对较弱。     

Differential effect of phosphodiesterase inhibitors on IL-13 release from peripheral blood mononuclear cells.

Increased cyclic AMP (cAMP)-phosphodiesterase (PDE) activity in peripheral blood leucocytes is associated with the immunological inflammation that characterizes allergic diseases, such as atopic dermatitis and allergic rhinitis. Recently, it has been found that IL-13 has similar biological functions to IL-4. The aim of this study was to investigate the possible involvement of cAMP-PDE activity on IL-13 release from peripheral blood mononuclears cells (PBMC) from atopic asthma patients. Phytohaemagglutinin (PHA)-induced IL-13 release from PBMC was concentration-dependently inhibited by rolipram, a type 4 PDE inhibitor, as well as by dibutyryl cAMP, a membrane-permeant cAMP analogue. However, theophylline, a non-specific PDE inhibitor, and cilostazol, a type 3 PDE inhibitor, failed to inhibit IL-13 release. The inhibitory effect of rolipram was enhanced by the addition of forskolin (10(-4) m), an adenylyl cyclase stimulator. PHA itself did not alter the intracellular cAMP level. Rolipram concentration-dependently increased cAMP level in PHA-stimulated PBMC, and this increase was synergistically facilitated by the addition of forskolin (10(-4) m). These results suggest that type 4 PDE inhibitors, alone or synergistically in combination with forskolin, inhibit PHA-induced IL-13 release from PBMC of atopic asthma patients by elevating intracellular cAMP concentrations. These inhibitors have the potential to exert an anti-inflammatory effect by inhibiting IL-13 production in allergic diseases such as atopic asthma.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中白细胞介素-10mRNA表达的研究

目的 探讨白细胞介素(IL-10)在系统性红斑狼疮(SLE)中的作用。方法 采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附法(ELISA)测定40例SLE患者和20例正常对照组外周血单核细胞(PBMC)IL-10mRNA表达及IL-10自发分泌水平。结果 SLE患者PBMC自发分泌IL-10水平及其IL-10mRNA表达水平均显著高于正常对照组(P<0.01),其中SLE活动期明显高于非活动期(P<0.01),而非活动期又明显高于正常对照组(P<0.01)。结论 IL-10在SLE发病中起重要作用,PBMC分泌IL-10水平对SLE诊断和病情活动性监测有重要临床意义,拮抗SLE患者体内IL-10水平,将为SLE治疗开辟一条新途径。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TRAF1 mRNA的表达及其意义

目的：研究肿瘤坏死因子受体相关因子1(TRAF1)mRNA表达在SLE患者的外周血单个核细胞中的表达是否异常，以及该基因mRNA表达与SLE活动指数是否相关。方法：TRAF1 mRNA表达采用RT-PCR半定量法；SLE活动指数以SLEDAI为判断标准。结果：TRAF1 mRNA在SLE患者的外周血单个核细胞中的表达较正常人为高，但与SLEDAI指数无相关。结论：TRAF1基因可能在SLE的发病机制中起重要作用。     

Expression of IL-4 mRNA in peripheral blood mononuclear cells from normal donors in relation to expression of TLR2

When IL-4 mRNA was distinguished from mRNA encoding its antagonist, the splice variant IL-4delta2, it was found to correlate directly with expression of TLR2 in fresh peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from normal donors (p=0.0013). Similarly IL-4 mRNA was high when TLR2 mRNA was abundant compared to levels of mRNA encoding its heterodimerisation partners TLR1 (p=0.0007) or TLR6 (p=0.0007). IL-4delta2 tended to show the reverse effect; IL-4delta2 mRNA was high when TLR2 was low relative to TLR1 (p=0.001). When subpopulations of the PBMCs were examined these relationships were found to be restricted to the CD3+ cells. The CD3+ cell population from 5 of 10 donors had detectable TLR2 mRNA. When levels of TLR1, IL-4 and IFN-gamma mRNA were assayed in the TLR2(low) and TLR2(high) CD3+ cells, it was found that IL-4 mRNA was restricted to the TLR2(high) T cells (p=0.007) while TLR1 was higher in the TLR2(low) T cells (p=0.015). IFN-gamma was also somewhat increased in the TLR2(low) (ns). None of these correlations with TLR mRNA expression levels were found in similar samples from tuberculosis patients, or when similar analyses were performed with data for IL-10 mRNA in cells from the same donors. We conclude that in T cell populations from normal donors, expression of IL-4 (but not of its antagonist, IL-4delta2, or of IL-10) is associated with high TLR2 and low TLR1.     

早期自然流产患者TNF-α mRNA的异常表达

目的探讨自然流产患者外周血单个核细胞内肿瘤坏死因子-α mRNA的异常表达.方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例早期自然流产患者、25例正常妊娠妇女、25例正常未妊娠妇女外周血单个核细胞内TNF-α mRNA.结果早期自然流产患者、正常妊娠妇女、正常未妊娠妇女三组研究对象外周血单个核细胞表达TNF-α mRNA相对含量分别为20.1±9.4%、68.6±14.1%、97.0±11.6%.结论早期自然流产患者外周血单个核细胞TNF-α mRNA表达水平显著下降,提示流产过程中能分泌TNF-α的单个核细胞可能聚集于母胎界面,TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产.     

急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达

背景：大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子CD28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。 目的：观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子CD28 mRNA在中的表达。 方法：急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例。并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组。采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达。 结果与结论：急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的CD28 mRNA表达量低于健康人群 (P< 0.05);急性髓细胞性白血病未缓解组中CD28 mRNA低于健康人群 (P < 0.05),完全治愈组和缓解组中CD28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义。说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在CD28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关。     

多发性硬化患者外周血单个核细胞SP3基因mRNA表达缺失研究

目的 研究我国多发性硬化(multiple sclerosis,Ms)患者外周血单个核细胞基因SP3(specificprotein 3)mRNA表达缺失的特点及其与临床表型的关系.方法 采集56例MS患者外周血单个核细胞,提取总RNA,设计SP3特异性引物,采用逆转录PCR方法观察SP3基因mRNA表达情况,并与其他疾病组、健康对照组进行比较.结果 56例MS患者中23例SP3为阴性结果,SP3表达缺失率为41.1%;健康对照组35例有5例为阴性结果,缺失率为8.6%;其它疾病对照组27例有4例为阴性结果,缺失率为14.3%.MS组与两对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.01).SP3表达缺失组与表达组急性期的改良残废程度量表评分差异无统计学意义,稳定期则差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过对MS患者SP3基因mRNA表达的研究,观察到中国人MS存在该基因mRNA表达缺失.SP3与MS临床表现及其免疫学发病机制之间可能存在一定的相关性.