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沙眼衣原体可以引起性传染病,据估计在美国每年有三百万新病例发生。这种病原体能导致严重后果,如不育症、附睾炎、幼儿肺炎。然而,病原体的分离是最好的诊断标准。因为沙眼衣原体是细胞内专性寄生物,它需要在宿主细胞内生长,大多数实验室用含有10%胎牛血清生长液中的McCoy细胞,也有的应用HeLa 229和小仓鼠肾细胞。但近年来由于胎牛血清供应减少,加之价格高昂,所以作者决定考察小牛血清对细胞生长和沙眼衣原体发育的影响。他们用五批不 相似文献
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背景 玻璃体视网膜手术后视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生和移行是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)发生的主要病理机制,干预RPE细胞的生物学行为对于PVR的靶向治疗有重要意义. 目的 观察整合素连接激酶(ILK)对RPE细胞生长、凋亡及分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响. 方法 用低糖DMEM培养基常规培养和传代人RPE D407细胞系,选择50代以内的细胞进行实验.应用特异性敲减ILK的小干扰RNA(siRNA) (ILK-siRNA)与100μl无血清培养基和RPE细胞共培养的方式转染RPE细胞作为实验组,应用非特异性siRNA转染RPE细胞作为对照组,分别将24孔板置于37℃、体积分数5% CO2孵箱中孵育.转染48 h后,应用MTT比色法检测各组RPE细胞活力;应用流式细胞仪检测RPE细胞的生长周期及细胞凋亡情况;采用Western blot法检测并比较各组RPE细胞中cyclin D1和caspase-3表达水平的变化;应用ELISA法检测并比较各组RPE细胞分泌VEGF水平的变化. 结果 转染siRNA 48 h后,MTT法检测见实验组和对照组RPE细胞活力分别为(43.69±0.89)%和(73.95±1.20)%,实验组比对照组降低了40.92%,差异有统计学意义(t=49.524,P=0.000).流式细胞术检测发现,实验组处于G1期的细胞数为(83.30±1.26)%,对照组为(47.10±0.93)%;实验组S期细胞数量显著减少,为(12.63±0.92)%,对照组为(36.25±1.21)%;实验组G2期细胞数量显著减少,为(4.07±1.40)%,对照组为(16.65±1.53)%,两组间G1、S、G2期细胞比例的差异均有统计学意义(t=56.624、-38.130、-14.860,均P=0.000).实验组的细胞凋亡率为(15.18±1.22)%,对照组为(2.20±0.15)%,二者间差异有统计学意义(t=25.742,P=0.000).Western blot 检测结果示,实验组cyclin D1的表达量明显降低,而caspase-3的表达量则明显增高.ELISA法检测结果示,实验组RPE细胞的VEGF分泌量为(1314.49±147.23) ng/L,比对照组的(3251.27± 113.87) ng/L降低了59.6%,差异有统计学意义(t=-31.217,P=0.000).结论 体外培养的RPE细胞敲减ILK后导致细胞增生活力下降,凋亡增加,且RPE细胞分泌VEGF的功能受到抑制,有望为PVR的靶向防治提供理论基础. 相似文献
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目的 研究非瑟酮(fisetin,Fis)在生理状态下及氧化应激状态下对人晶状体上皮细胞(humanlensepithelialcell,HLEC)增殖和凋亡的影响。方法 体外培养HLEC,通过H2O2氧化损伤建立氧化应激模型,设置空白对照组、H2O2组、Fis组和Fis+H2O2组,其中Fis组和Fis+H2O2组按Fis浓度(5μg?mL-1、10μg?mL-1和20μg?mL-1)分为3个亚组。分别于培养12h及24h后,倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态学改变,运用MTT法检测细胞增殖的变化,运用流式细胞技术检测细胞凋亡率的变化。结果 与空白对照组比较,H2O2组较多细胞出现典型的形态学改变,细胞增殖能力明显降低(12h、24h后分别为0.1176±0.0150和0.1172±0.0061),凋亡率明显增加(24h后为12.35% ±1.23%),差异均有统计学意义(均为P<0.01)。不同浓度Fis组间的细胞在培养12h及24h后细胞形态均无明显改变,细胞增殖也无明显变化(P>005)。培养12及24h后,与H2O2组比较,Fis+H2O2组发生形态改变的细胞减少,细胞增殖能力明显改善,且随时间、Fis浓度增加其作用更明显(最高为0.3994±0.0257)(P<0.05)。培养24h后,与H2O2组凋亡率比较,不同浓度Fis+H2O2组的细胞凋亡率逐渐降低,依次为(9.99±1.53)%、(5.80±1.55)%、(3.58±0.73)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 一定浓度的Fis在一定时段对生理状态下的HLEC增殖无明显影响。在氧化应激状态下,Fis呈时间和浓度依赖性地改善HLEC增殖能力,呈浓度依赖性地降低HLEC凋亡率。 相似文献
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探讨桑色素对人视网膜母细胞瘤细胞增生抑制及诱导凋亡的作用。设计 实验研究。研究对象 人视网膜母细胞瘤细胞Y79细胞。方法 不同浓度(0、50、100、150、250 μM)桑色素对人视网膜母细胞瘤细胞Y79细胞作用24、48、72小时后,CCK8法检测肿瘤细胞生存率的变化;细胞周期检查法检测肿瘤细胞周期的变化;用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的变化。主要指标 细胞生存率、细胞周期分布、细胞凋亡率。结果 桑色素浓度为150、250 μM,与桑色素浓度为0、50、100 μM作用于Y79细胞相比,检测时间分别在48、72小时时的细胞生存率显著下降(P<0.05),细胞周期G0-G1期显著增多(P<0.05),S期显著下降(P<0.05),细胞凋亡显著增多(P<0.05)。较高浓度的桑色素,随着作用时间的延长,引起Y79细胞生存率逐渐下降,细胞凋亡率逐渐增多,具有时间依赖性和剂量依赖性。结论 桑色素能够抑制视网膜母细胞瘤增生并促进其凋亡,提示桑色素有望成为治疗视网膜母细胞瘤的有效药物。 相似文献
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目的观察还原型谷胱甘肽(GSH)、卡林-U和内障清对牛晶状体上皮细胞(BLEC)生长的影响。方法通过噻唑蓝(MTT)法,观察不同浓度或质量浓度的GSH、卡林-U和内障清对BLEC在24、48和72h生长的影响。结果GSH(≤400μmol/L)、卡林-U(≤200μg/L)、内障清(≤2mg/L)对BLEC生长无明显影响;GSH(≥2mmol/L)、卡林-U(≥1mg/L)、内障清(≥10mg/L)对BLEC生长有抑制作用。结论一定浓度或一定质量浓度的GSH、卡林-U、内障清对LEC生长有抑制作用。 相似文献
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目的:探讨胎牛血清对小鼠角膜上皮细胞生长和分化的影响。方法:分别在无血清低钙培养基(KSFM)和含100mL/L胎牛血清的KSFM中培养小鼠角膜上皮细胞。比较两种培养基中角膜上皮细胞的群体倍增(PD)。通过RT-PCR和Westernblotting方法检测p63、角蛋白19以及involucrin的表达。结果:在KSFM中,小鼠角膜上皮细胞可稳定传代超过25代,但在含胎牛血清的培养基中,细胞仅能存活3代。在KSFM中,培养细胞呈典型铺路石样外观,RT-PCR和Westernblotting结果显示细胞表达p63、角蛋白19以及involucrin。当培养基中加入胎牛血清后,细胞形态明显增大,呈扁平状;involucrin表达显著增强。结论:胎牛血清可抑制小鼠角膜上皮细胞增生、诱导其分化。 相似文献
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视网膜下液对培养的人眼视网膜色素上皮细胞、 成纤维细胞内Bcl-2蛋白表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的了解视网膜下液(subretinal fluid, SRF)对培养的视网 膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞、成纤维细胞(fibroblas t, F B)内Bcl-2 蛋白表达的影响。方法应用Western-blotting 技术及免疫组化技术分别检测视网膜下液(subretinal fluid,SRF)作用于RPE细胞、FB一定时间后细胞内Bcl-2的表达水平。 结果在SRF作用4 h后两种细胞内bcl-2表达量与无血清培养 基静息的对照组相比都有不同程度的增加;作用36 h后,所有实验组和对照组细胞内bcl-2表达量都下降,但SRF作用下的RPE细胞和FB内bcl-2水平的下降幅度较为明显,而对照组在实验观察期末细胞内bcl-2蛋白水平仍维持在较高的水平。结论实验早期SRF具有促进RPE细胞、FB内Bcl-2表达的作用,但作用一定时间后加速细胞内bcl-2蛋白的降解。(中华眼底病杂志,2001,17:58-60) 相似文献
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bFGF、EGF和NGF对人角膜内皮细胞生长调控的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(Basicfibroblastgrowthfacfor,bFGF)、表皮细胞生长因子(Epidermalgrowthfactor,EGF)和神经细胞生长因子(Nervegrowthfactor,NGF)对体外培养的人角膜内皮细胞的生长调控作用。方法:将相同数量的人角膜内皮细胞接种于96孔板。加入浓度分别为0ng/ml、1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml的EGF、bFGF和NGF进行培养。5天后MTT法用检测增殖情况。结果:在0ng/ml、1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml浓度下bFGF组的平均OD值分别为:0.224±0.045、0.239±0.040、0.262±0.0342、0.278±0.0319、0.281±0.0324、0.260±0.0310。EGF组的平均OD值分别为:0.228±0.0304、0.245±0.0418、0.267±0.0454、0.275±0.0347、0.271±0.0449、0.250±0.0253。NGF组的平均OD值分别为:0.216±0.0187、0.228±0.0226、0.231±O.0225、0.242±0.0279、0.245±0.0294、0.247±0.0349。结论:bFGF在30ng/ml范围内对内皮细胞生长有促进作用,并具有剂量依赖性。高于100ng/ml时促生长作用降低。EGF在10ng/ml范围内对内皮细胞生长有促进作用,并具有剂量依赖性。高于30ng/ml时促生长作用降低。NGF本次实验剂量范用内对角膜内皮细胞生长无明显作用。 相似文献
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目的 观察全反视黄酸(ATRA)对培养的豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖以及分泌转化生长因子β2(TGF-β2)的影响,并观察细胞内第二信使cAMP和IP3的含量变化.方法 培养原代豚鼠RPE细胞,传2代后用于实验.实验分3组进行.第1组用不同浓度ATRA(5×10-6、10×10-6、40×10-6 mol/L)作用于豚鼠RPE细胞,24 h后用MTY法检测细胞增殖情况.第2组加入10×10-6 mol/L的ATRA.分别于2、4、6、8、16 h后收集培养液,用ELISA方法检测RPE细胞TGF-β2的分泌量.第3组以10×10-6 mol/L的ATRA作用于豚鼠RPE细胞,分别于0 min、5 min、30 min、2 h,6 h后收集细胞裂解液,行放射免疫和ELISA方法检测细胞内cAMP和IP3的含量变化.每组均以等量溶剂DMSO作为对照.对不同浓度ATRA组间MTT结果行方差分析,其余实验组与对照组间比较行配对t检验.结果 5×10-6、10×10-6、40×10-6 mol/L ATRA作用RPE细胞24 h后,OD值分别为0.099±0.008、0.117±0.008、0.0871±0.011.与对照组(0.103±0.017)比较,40×10-6 mol/L ATRA作用时OD值显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),其他浓度组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).10×10-6 mol/L的ATRA作用RPE细胞后,TGF-β2的分泌量在作用2、4、6 h时较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).8 h时无明显变化,16 h时降低(P<0.05).10×10-6 mol/L的ATRA作用于豚鼠RPE细胞后,IP3的含量在各时间点均较对照显著下降,且随时间的延长下降越明显;cAMP的含量只有在作用30 min和2 h时升高,其他时同变化不明显.结论 浓度为40×10-6 mol/L的ATRA对豚鼠RPE细胞的增殖有抑制作用.10×10-6 mol/L的ATRA作用RPE细胞后,TGF-β2的分泌量在6 h内增加,之后随时间延长而降低.ATRA对RPE细胞的作用可能与IP3的下降有关. 相似文献
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目的 观察全反视黄酸(ATRA)对培养的豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖以及分泌转化生长因子β2(TGF-β2)的影响,并观察细胞内第二信使cAMP和IP3的含量变化.方法 培养原代豚鼠RPE细胞,传2代后用于实验.实验分3组进行.第1组用不同浓度ATRA(5×10-6、10×10-6、40×10-6 mol/L)作用于豚鼠RPE细胞,24 h后用MTY法检测细胞增殖情况.第2组加入10×10-6 mol/L的ATRA.分别于2、4、6、8、16 h后收集培养液,用ELISA方法检测RPE细胞TGF-β2的分泌量.第3组以10×10-6 mol/L的ATRA作用于豚鼠RPE细胞,分别于0 min、5 min、30 min、2 h,6 h后收集细胞裂解液,行放射免疫和ELISA方法检测细胞内cAMP和IP3的含量变化.每组均以等量溶剂DMSO作为对照.对不同浓度ATRA组间MTT结果行方差分析,其余实验组与对照组间比较行配对t检验.结果 5×10-6、10×10-6、40×10-6 mol/L ATRA作用RPE细胞24 h后,OD值分别为0.099±0.008、0.117±0.008、0.0871±0.011.与对照组(0.103±0.017)比较,40×10-6 mol/L ATRA作用时OD值显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),其他浓度组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).10×10-6 mol/L的ATRA作用RPE细胞后,TGF-β2的分泌量在作用2、4、6 h时较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).8 h时无明显变化,16 h时降低(P<0.05).10×10-6 mol/L的ATRA作用于豚鼠RPE细胞后,IP3的含量在各时间点均较对照显著下降,且随时间的延长下降越明显;cAMP的含量只有在作用30 min和2 h时升高,其他时同变化不明显.结论 浓度为40×10-6 mol/L的ATRA对豚鼠RPE细胞的增殖有抑制作用.10×10-6 mol/L的ATRA作用RPE细胞后,TGF-β2的分泌量在6 h内增加,之后随时间延长而降低.ATRA对RPE细胞的作用可能与IP3的下降有关. 相似文献
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层黏连蛋白和纤维连接蛋白对人晶状体上皮细胞生长特性的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)对人晶状体上皮细胞生长特性的影响。方法 选用28只人晶状体的前囊膜,采用组织块法接种于Ln(Ln组)、Fn(Fn组)及2%牛血清白蛋白(对照组)包被的培养皿中。应用倒置显微镜观察组织块周围晶状体上皮细胞生长的时间和形态、成纤维细胞出现的时间。采用间接免疫荧光法显示连接素43、ΔNp63和整合素β1 的表达。采用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)检测ΔNp63和整合素β1 mRNA的水平。结果 Ln组和Fn组晶状体上皮细胞长出时间早[ (2. 4±0 .2)d]、细胞数量多,且Fn组成纤维细胞的生长时间[ ( 7. 6±0. 4 )d]明显早于Ln组[ (12. 7±0. 5)d] (P<0 .05)。Ln组连接素43表达的阳性率(23 /28)明显高于Fn组(14 /28)和对照组(12 /28) (P<0 .05),Fn组ΔNp63 ( 24 /28 )和整合素β1 ( 25 /28 )表达的阳性率明显高于Ln组和对照组(P<0 .05)。RT- PCR检测结果支持间接免疫荧光法的检测结果。结论 Ln可持久促进原代培养的人晶状体上皮细胞增殖,并具有一定维持正常细胞间、细胞与细胞外基质间稳态平衡的作用;Fn在细胞培养早期具有较强的促进细胞增殖的作用,但同时也具有促进上皮细胞分化和成纤维细胞生长的作用。 相似文献
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目的观察全反视黄酸(ATRA)对培养的豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖以及分泌转化生长因子p2(TGF—β2)的影响,并观察细胞内第二信使cAMP和IP3的含量变化。方法培养原代豚鼠RPE细胞,传2代后用于实验。实验分3组进行。第1组用不同浓度ATRA(5×10^-6、10×10^6、40×10^-6mol/L)作用于豚鼠RPE细胞,24h后用MTT法检测细胞增殖情况。第2组加入10×10^-6mol/L的ATRA.分别于2、4、6、8、16h后收集培养液,用ELISA方法检测RPE细胞TGF—β2的分泌量。第3组以10×10^-6mol/L的ATRA作用于豚鼠RPE细胞.分别于0min、5min、30min、2h、6h后收集细胞裂解液。行放射免疫和ELISA方法检测细胞内cAMP和IP3的含量变化。每组均以等量溶剂DMSO作为对照。对不同浓度ATRA组间MTT结果行方差分析,其余实验组与对照组间比较行配对t检验。结果5×10^-6、10×100、40×100mol/LATRA作用RPE细胞24h后,DD值分别为0.099±0.008、0.117±0.008、0.087±0.011。与对照组(0.103±0.017)比较,40×10^-6mol/LATRA作用时OD值显著降低,差异有统计学意2(P〈0.05),其他浓度组与对照组相比差异无统计学意义(p〉0.05)。10×10^-6/mol/L的ATRA作用RPE细胞后,TGF—β2的分泌量在作用2、4、6h时较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P〈0.05).8h时无明显变化,16h时降低(P〈O.05)。10×10^-4mol/L的ATRA作用于豚鼠RPE细胞后,IP3的含量在各时间点均较对照组显著下降,且随时间的延长下降越明显;cAMP的含量只有在作用30min和2h时升高.其他时间变化不明显。结论浓度为40×10^-6mol/L的ATRA对豚鼠RPE细胞的增殖有抑制作用。10×10^-6mol/L的ATRA作用RPE细胞后.TGF-β2的分泌量在6h内增加,之后随时间延长而降低。ATRA对RPE细胞的作用可能与IP3的下降有关。 相似文献
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胎牛血清对小鼠角膜上皮细胞生长和分化的影响(英文) 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨胎牛血清对小鼠角膜上皮细胞生长和分化的影响。方法:分别在无血清低钙培养基(KSFM)和含100mL/L胎牛血清的KSFM中培养小鼠角膜上皮细胞。比较两种培养基中角膜上皮细胞的群体倍增(PD)。通过RT-PCR和Western blotting方法检测p63、角蛋白19以及involucrin的表达。结果:在KSFM中,小鼠角膜上皮细胞可稳定传代超过25代,但在含胎牛血清的培养基中,细胞仅能存活3代。在KSFM中,培养细胞呈典型铺路石样外观,RT-PCR和Western blotting结果显示细胞表达p63、角蛋白19以及in-volucrin。当培养基中加入胎牛血清后,细胞形态明显增大,呈扁平状; involucrin表达显著增强。结论:胎牛血清可抑制小鼠角膜上皮细胞增生、诱导其分化。 相似文献
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目的 分析血压、血脂和血糖对视网膜血管直径的影响.方法 回顾性分析2012年至2013年来安贞医院体检的部分体检者资料,最后入选358人,其中男242人,女116人.将患者分为单纯血脂异常组(150人,男87人,女63人)和无血脂异常组(99人,男52人,女47人);高血压组(89人均为男性)和无高血压组(72人均为男性);糖尿病组(12人,男7人,女5人)和无糖尿病组(249人,男139人,女110人).ARIA 1.0分别测量比较各组视网膜颞上动、静脉直径,颞下动、静脉直径,对所得数据进行统计学分析.结果 单纯血脂异常组与无血脂异常组颞上动、静脉直径,颞下动、静脉直径差异均无统计学意义(均为P>0.05).高血压组颞上动脉直径、颞下动脉直径[分别为(108.54 ±17.10) μm、(111.18±18.64)μm]较无高血压组[分别为(116.55±13.50) μm、(120.33±19.30) μm]变细,差异均有统计学意义(均为P<0.01),而颞上静脉直径、颞下静脉直径在两组间差异均无统计学意义(均为P >0.05).糖尿病组和无糖尿病组颞上动、静脉直径,颞下动、静脉直径差异均无统计学意义(均为P>0.05).结论 高血压患者视网膜动脉变细,而视网膜静脉无显著改变.血脂、血糖异常对视网膜血管直径无明显影响. 相似文献
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中文字体大小、笔画数和对比度对阅读速度的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究字体大小、笔画数、对比度对中文阅读速度的影响。方法选取30名志愿者,采用快速系列视觉呈现方式(rapid serial visual presentation.RSVP).在50cm阅读距离处分别测量两种对比度(100%和10%)下五种字体大小(5、8、13、20.5和33point,简称为pt)与三种笔画数(少、中、多)随机组合文本的阅读速度。结果采用最小二乘曲线拟合法得到少、中、多笔画数组的临界字体大小:100%对比度下,分别为(8.43+0.25)pt,(9.29±0.51)pt,(10.89±2.75)pt;10%对比度下.分剐为(16.54±8.11)pt,(17.36±5.88)pt,(17.15±3.31)lot。低于临界字体大小的阅读速度随着字体增大呈明显上升趋势。其上升段不同字体大小组间的阅读速度差异有显著性(P〈0.01);超过临界字体大小的阅读速度基本接近,其平台期不同字体大小组间的阅读速度无明显差异(P〉0.05)。三种笔画数组的最大阅读速度比较.少〉中〉多笔画数组。多笔画数和低对比度明显影响小字体的阅读速度(P〈0.01),对大字体无明显影响(P〉0.05)。结论汉字识别存在一定的笔画数效应.可通过增大字体来消除笔画数增多和对比度下降时阅诖抹磨的影响. 相似文献
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目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体y(PPARy)激动剂罗格列酮在豚鼠形觉剥夺性近视(FDM)中的作用。方法 选取40只3周龄豚鼠(均为右眼),随机分成4组:正常组、FDM组、正常+罗格列酮组、FDM+罗格列酮组,其中正常组豚鼠不做处理,FDM组豚鼠使用头套法造模,正常+罗格列酮组豚鼠每天腹腔注射罗格列酮5 mg·kg-1,FDM+罗格列酮组豚鼠每天戴头套并腹腔注射罗格列酮5 mg·kg-1,持续28 d。实验前和实验后28 d测量豚鼠屈光度,实验后28 d测量豚鼠眼轴长度,保留眼球,免疫组织化学及Western blot测量豚鼠I型胶原蛋白(COL-I)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)蛋白的分布与表达,HE染色观察巩膜形态变化。结果 与正常组相比,FDM组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度均增加,形成相对近视,差异均有统计学意义(均为P<0.05);巩膜明显变薄,胶原纤维排列紊乱,断裂明显,分布不规则。与正常组相比,正常+罗格列酮组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度变化差异均无统计学意义(均为P>0.05);巩膜形态没有明显变化。与正常组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度变化差异均无统计学意义(均为P>0.05)。与FDM组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度均减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05);巩膜胶原纤维排列松散,分布略紊乱。Western blot检测结果显示,与正常组相比,FDM组豚鼠巩膜中COL-I、TGF-β1、TIMP-2蛋白表达量均减少,MMP-2蛋白表达量增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与正常组相比,正常+罗格列酮组豚鼠巩膜中,COL-I、TGF-β1蛋白表达量均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05),TIMP-2和MMP-2蛋白表达量差异均无统计学意义(均为P>0.05);与正常组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠巩膜中COL-I蛋白的表达接近正常组,差异无统计学意义(P>0.05),TGF-β1、TIMP-2蛋白表达量均增加,MMP-2蛋白表达量减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与FDM组相比,FDM+罗格列酮组豚鼠巩膜中COL-I、TGF-β1、TIMP-2蛋白表达量均增加,MMP-2蛋白表达量减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。豚鼠巩膜中COL-I、TGF-β1、TIMP-2、MMP-2蛋白免疫组织化学表达趋势与Western blot检测结果一致。结论 PPARy受体激动剂罗格列酮可能通过调节TGF-β1、COL-I、TIMP-2和MMP-2蛋白的表达水平抑制FDM,对正常豚鼠的屈光影响不大。 相似文献
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层黏连蛋白和纤维连接蛋白对传代人晶状体上皮细胞生长和Cx43表达的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:观察层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)形态学和连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:以层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)处理培养皿表面,以倒置显微镜观察第3代培养的hLECs生长的形态,MTT法记录其生长曲线,免疫荧光法检测Cx43表达,比较两组表达阳性率的变化。结果:在层黏连蛋白处理组,传代细胞以典型的六角形上皮细胞形态为主,而纤维连接蛋白处理组则表现为以梭形的成纤维细胞为主。MTT实验显示,传代后4~7d纤维连接蛋白处理组细胞数多于层黏连蛋白处理组(P<0.05)。免疫荧光反应中,两组Cx43表达的阳性率有明显差别(23/28vs16/28,P<0.05)。结论:层黏连蛋白可以提供适宜hLECs保持上皮细胞状态的体外培养微环境,而纤维连接蛋白可以促进hLECs的增殖和分化。 相似文献
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目的 探讨miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中的表达及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 RT-PCR检测miR-194在正常视网膜上皮细胞系ARPE-19及葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431中的表达。取SP6.5、M23及OM431细胞分成两组,miR-194过表达组(miR-194组)及阴性对照组(NC组),经LipofectamineTM 2000分别转染miR-194 mimic及阴性对照序列scramble。CCK-8实验及流式细胞仪分别测定细胞增殖和凋亡能力,细胞划痕及Transwell实验分别测定细胞迁移和侵袭能力。Western blot测定叉头盒蛋白A1(forkhead box,FOXOA1)、多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白表达。结果 正常视网膜上皮细胞系ARPE-19中miR-194的相对表达量为1.03±0.04,葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431相对表达量分别为0.25±0.02、0.37±0.02及0.47±0.03,葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431中miR-194相对表达量低于正常视网膜上皮细胞系ARPE-19(均为P<0.001 )。转染0 h、24 h、48 h、72 h、96 h后,miR-194组和 NC组A值分别为:0.23±0.02、0.21±0.03(t=0.960,P=0.391),0.38±0.02、0.37±0.03(t=0.480,P=0.656),0.75±0.04、0.78±0.06(t=-0.720,P=0.511),0.87±0.09、1.59±0.12(t=-8.313,P=0.001),1.53±0.14、3.05±0.22(t=-10.096,P=0.000);流式细胞仪检测结果显示:miR-194组细胞凋亡率为23.30%±2.10%,NC组为2.47%±0.30%,miR-194组细胞凋亡率高于NC组(t=17.007,P=0.000)。细胞划痕实验结果显示:miR-194组细胞划痕愈合率为25.3%±3.5%,NC组为72.9%±6.4%,miR-194组细胞划痕愈合率低于NC组(t=-11.302,P=0.000);Transwell实验结果显示:200倍视野下,miR-194组侵袭细胞数为(188.6±20.7)个,NC组为(352.9±32.8)个,miR-194组侵袭细胞数少于NC组(t=-7.337,P=0.001)。miR-194组FOX A1蛋白相对表达量为0.29±0.03,NC组为1.03±0.06,miR-194组FOX A1蛋白相对表达量低于NC组(t=-19.106,P=0.000);miR-194组裂解型PARP蛋白相对表达量为2.87±0.24,NC组为1.03±0.06,miR-194组裂解型PARP蛋白相对表达量高于NC组(t=12.882,P=0.000)。结论 miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中低表达,上调miR-194表达可抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖,促进凋亡,抑制迁移和侵袭,其机制可能与下调FOX A1及上调裂解型PARP蛋白表达有关。 相似文献
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运用实验性糖尿病动物模型,动态分析晶体、视网膜、肾脏和血液中镁、锰离子水平,后者的含量与变化均很微小,但镁离子在病程1个月时,血清、晶体中的含量呈下降趋势,视网膜中镁随病程而下降,肾脏镁在病程1个月时升高,以后渐降。给镁动物组织和血清中的镁浓度均不同程度恢复。表明肾功能损害可能是视网膜、晶体和血清镁浓度进一步降低的原因,通过不同途径长期、少量给镁,对恢复和提高组织中镁浓度,维护肾脏正常功能有一定作用。
(中华眼底病杂志,1995,11:237-239) 相似文献