杂交瘤细胞中细菌污染的清除试验

本实验通过杂交瘤细胞和污染细菌对不同抗菌药物的耐受性和敏感性及对瘤细胞特异性抗体的检测等试验，筛选出氟哌酸和头孢唑淋钠两种对细胞毒性小、抗菌谱广、不影响杂交瘤细胞分泌特异性抗体、且可以根除对常规双抗有耐受性的细胞污染细菌，从而摸索出消除细菌培养中细菌污染的可行方法。     

无蛋白培养中杂交瘤细胞的生长与单克隆抗体分泌

目的：建立应用无蛋白培养基大量制备单克隆抗体（McAb)的生产方法。方法：本实验以3株猪瘟病毒特异单抗杂交瘤细胞为研究对象，通过与常规的有血清培养法比较，研究了无蛋白培养基中杂交瘤的细胞生长特性、抗体分泌效率、活性和纯度。结果：无蛋白培养基中单抗的产量与效价比有血清培养的单抗高2－4倍，而且单抗的纯度显著提高。结论：无蛋白培养基可完全取代常规的有血清培养基，用于生产高滴度、高纯度单克隆抗体。     

小鼠腹腔细胞作为人杂交瘤细胞饲养细胞的实验研究

小鼠腹腔细胞作为人杂交瘤细胞饲养细胞的实验研究聂晶范永星赵洪礼（沈阳军区军事医学研究所，沈阳１１００３４）在人杂交瘤细胞克隆化的过程中，常规采用人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）作为饲养细胞，但因ＰＢＬ制备比较烦琐，来源有限，给实际工作带来不便。我们在制备...     

谷氨酰胺对JAL1杂交瘤细胞生长代谢的影响

为研究不同浓度的谷氨的酰胺对JAL1 杂交瘤细胞生长、葡萄糖消耗、乳酸及氨生成等代谢过程的影响。在细胞培养箱中 ,用含不同浓度谷氨酰胺的培养液培养细胞 ,培养条件为pH 7 0～ 7 5 ,温度 37℃ ,5 %CO2 。实验表明 ,适宜于该株杂交瘤细胞生长的谷氨酰胺浓度为 2mmol/L ,谷氨酰胺浓度与细胞的葡萄糖消耗呈反比 ,与乳酸生成浓度呈反比 ,与氨的生成浓度呈正比     

杂交瘤细胞在玻璃微载体培养中生物特性观察

本文报道以玻璃微载体小珠(CMB,Class microcarrier beads)作为载体培养杂交瘤细胞方法的建立。结果表明4株杂交瘤细胞在GMB培养显示GNB法上清中特异性单克隆抗体的滴度。OD值较单层培养法为高。比较培养7d后的杂交瘤细胞数,也以GMB法获得细胞数为多。各株细胞都诱生出高滴度腹水。亚类鉴定方面,GMB法培养的4株杂交瘤细胞上清内McAb所属亚类,又都保持了与单层法培养者完全相同的结果。表明杂交瘤细胞在CMB培养中,细胞迅速增殖,且保持各细胞株分泌其特异的McAb的生物特性,细胞活力旺盛,为今后体外培养杂交瘤细胞,制备McAb,提供了新的途径。     

适于杂交瘤细胞长期大量繁殖的SCI－8910培基的研制

单抗的免疫导向治疗已成为国内外肿瘤研究的热点之一。目前杂交瘤分泌单抗的来源一部分是小鼠腹水，另一部分培养于含血清的培养基内，这对单抗纯化带来困难，对免疫导向治疗也带来许多不利条件，如牛的ＩｇＧ、鼠的病毒等的污染。因此，我们着手研制一种能适应于杂交瘤长期培养的无血清培基，定名为ＳＣＩ－８９１０。现已进行了９株杂交瘤细胞的长期培养，同时用该培基在１．５Ｌ的Ｃｅｌｌｉｇｅｒ（ＮＢＳＵＳＡ）搅拌生物反应器中长期培养鼠－鼠杂交瘤细胞２Ｆ７（分泌抗人小细胞肺癌单抗）获得成功，经检测单抗纯度达到一定要求，产品在８ｍｇ／Ｌ以上。结果提示，该无血清培基制备的ＭＣＡｂ用于免疫导向治疗的可行性及大规模生产的可能性。     

沙门氏菌单克隆抗体研究 Ⅰ.杂交瘤细胞系的建立

用沙门氏菌O,H,Vi抗原免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术,获得分泌抗沙门氏茵0-2,4,7,8,9,3,10,11和H-a,b,c,d,i及Vi抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞系29株。所产生的抗体17株属IgM,7株为IgG3,3株为IgG1,1株为IgG_(2a),1株未测;轻链除3株为λ链外,其余为κ链。将杂交瘤细胞所诱生的腹水,组成一套(11种)沙门氏菌诊断用单克隆抗体试剂,经用沙门氏菌属和其它肠道菌属的代表菌株作鉴定,证明具有良好的特异性和敏感性、可供初步诊断伤寒,副伤寒和鼠伤寒用。与目前常规生产的家兔诊断血清相比,具有简化生产过程,节约家兔与培养基及省时省力等优点,值得在生产上和使用上推广。     

无/低血清条件下杂交瘤细胞系生长和McAb产生的研究

将3G1/3F8细胞培养于血清浓度为20％、10％、17.5％、5％、2％、1％、0％的RPMI-1640中测定细胞生长曲线和McAb产生曲线。观察血清浓度对细胞生长和McAb产生的影响。用6种无血清培养基对3G1/3F8细胞做适应性培养,活细胞数为对照组的9.5％～55％;McAb产量为81.8％～106.8％。经驯化培养3G1/3F8细胞能够在血清含量1％、5％的培养液生长传代,冻存复苏,活细胞数达到对照组的71.2％～98.2％;McAb产量为104％和108％。对不同血清浓度下接种密度对细胞生长和McAb产量的作用做了实验观察。     

甲病毒属系列单克隆抗体的研制及特性鉴定

本文报道应用电融合法和PEG法建立了11种甲病毒(SIN,SF,CHIK_1,CHIK_2,EEE,WEE,MAY,GET,RR,SAG,M-1)单克隆抗体杂交瘤细胞系。分别对各种McAb进行了多项鉴定。特异性试验结果表明,有亚组特异性的和种特异性的McAb。对于今后该类疾病的流行病学调查和临床诊断,以及有关毒株的鉴定具有一定实用价值。     

Hybridoma production and cloning with ORIGEN ™ hybridoma cloning factor

Summary Methods for producing and cloning B-cell hybridomas using ORIGEN Hybridoma Cloning Factor as a replacement for feeder cells are described.     

EBV转化的人B淋巴母细胞和人B淋巴细胞杂交瘤细胞表面标记表达的研究

本文用碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）免疫组化染色技术，对ＥＢ病毒（ＥＢＶ）转化的人Ｂ淋巴母细胞（ＬＣＬ）、人Ｂ淋巴细胞杂交瘤以及它们的亲本骨髓瘤细胞系的部分表面标记进行了检测。结果显示，人Ｂ淋巴细胞在ＥＢＶ转化或杂交过程中表面标记发生了较大的变化；对ＬＣＬ和杂交瘤细胞表面标记的检测可能为探寻人Ｂ细胞在这些过程中染色体保留或丢失的规律提供一种手段。此外，ＬＣＬ及人Ｂ细胞杂交瘤细胞系有可能被用作一种新的模型，来研究人Ｂ淋巴细胞的分化和功能。     

不同杂交瘤饲养细胞上清和条件培养液中IL-2和IL-6水平的比较

本文应用细胞因子依赖细胞株CTLL和7TD1及。~3H-TDR掺入方法,分别对6种常用培养杂交瘤的饲养细胞培养上清和条件培养液中IL-2和IL-6的生物学活性水平进行了定量检测和比较。结果发现,除大鼠混合胸腺细胞培养上清中含有约1u/ml IL-2外,其它均未测出IL-2的生物学活性。但6种上清中都含有IL-6,其中人成纤维细胞CRL_(1506)和人内皮细胞中含有很高水平的IL-6,分别为10000u/ml和2512u/ml;大鼠混合胸腺细胞和小鼠腹腔巨噬细胞培养上清分别为158u/ml和126u/ml;小鼠脾脏细胞和胸腺细胞培养上清中IL-6相对较低,分别为79u/ml和16u/ml。此外,本文还对常用饲养细胞及条件培养液在杂交瘤细胞生长中可能起的主要作用进行了讨论。