载肝癌细胞GPC3抗体的纳米级脂质超声微泡制备及体外寻靶研究

目的：探索制备载肝癌细胞磷酯酰肌醇蛋白多糖-3（glypican-3,GPC3）抗体的新型纳米级脂质超声微泡造影剂的方法,并评价其体外对肝癌细胞的靶向结合效果。方法：以机械振荡法制备纳米级脂质微泡,并通过光学显微镜及电子显微镜检测纳米微泡大小形态、粒径分布;生物素-亲和素桥接肝癌细胞GPC3抗体与纳米级脂质超声微泡,流式细胞仪检测微泡与抗体结合效率;免疫组化检测常见3种肝癌细胞的GPC3阳性表达;微泡体外与肝癌细胞靶向结合,激光共聚焦显微镜检测寻靶效果。结果：纳米脂质微泡呈圆形,分布均匀,无明显聚集,粒径范围约350~450 nm。微泡与抗体结合效率达85.05%,人SMMC-7721、HepG2及Huh7肝癌细胞GPC3表达阳性,激光共聚焦显微镜显示载GPC3抗体纳米级脂质微泡可与肝癌细胞特异性结合。结论：本研究成功制备了具备靶向性的新型纳米级脂质超声微泡,生物素-亲和素桥接GPC3抗体可特异性结合肝癌细胞,达到靶向性识别效果,为微泡的靶向诊断及治疗研究奠定了基础。     

HER2靶向聚合物超声造影微泡的制备及其体外实验

目的：制备以HER2受体为靶点的靶向聚合物微泡超声造影剂,并观测其理化特性、体外肿瘤靶向性及体外超声显像效果。方法：利用生物素-亲和素法构建HER2靶向聚合物微泡,测定其粒径、电位,评价其稳定性。在体外肿瘤靶向性实验中观察其与HER2（+）的乳腺癌细胞BT-474以及HER2（-）的乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞结合情况。并观察靶向聚合物微泡体外超声显影效果。结果：HER2靶向聚合物微泡平均粒径为（1.78±0.37）μm,平均表面Zeta电位为（-37.40±5.74）mV。12 h内靶向聚合物微泡粒径变化差异无统计学意义（P＞0.05）。HER2靶向聚合物微泡在体外对HER2（+）肿瘤细胞具有特异靶向性。体外超声显像显示靶向聚合物超声造影剂呈细腻均匀的点状密集高回声。结论：HER2靶向聚合物微泡稳定性好,靶向能力较强,具有良好的体外超声显影效果,为进一步进行体内肿瘤靶向超声造影奠定了基础。     

N-羧甲基壳聚糖微泡超声造影剂的制备与性能评价

目的制备N-羧甲基壳聚糖微泡超声造影剂,观察其基本特征及对动物肝脏超声显影效果。方法采用(油/水)/油复合乳液-溶剂蒸发法制备微泡超声造影剂,通过光学显微镜和扫描电镜观察微泡的大小、形态及粒径分布,通过股动脉注射0·5ml该超声造影剂到动物体内,观察动物肝脏超声显影效果。结果N-羧甲基壳聚糖微泡为空心球形结构,分散均匀,形状规则,粒径在2~3μm,壁厚为250~300nm。该造影剂对动物肝脏超声显影效果明显增强。结论N-羧甲基壳聚糖微泡可作为一种性能较好的超声造影剂。     

携载G250单克隆抗体的纳米微泡靶向于肾细胞癌的体内外实验研究

目的 本研究拟制备携载G250单克隆抗体的纳米微泡,在体内和体外研究其对肾细胞癌的靶向性.方法 机械振荡法制备空白脂质纳米微泡并观察其稳定性,生物素-亲和素连接技术将纳米微泡与G250单克隆抗体相连,采用免疫荧光进行验证.细胞免疫荧光实验鉴定所使用的两种肾细胞癌细胞(786-O和ACHN细胞)中G250的表达情况,靶向结合实验鉴别靶向纳米微泡对786-O和ACHN两种肾细胞癌细胞的体外寻靶能力.在肾细胞癌的裸鼠皮下移植瘤模型中,使用纳米微泡进行超声造影,并将采集到的动态图像在定量分析软件Qlab 8.1中进行数据分析.结果 成功制备了平均粒径为404.9 nm空白纳米微泡和平均粒径为611.4 nm靶向纳米微泡,稳定性能好,同时免疫荧光证实了靶向纳米微泡构建成功,能够与FITC标记的二抗结合,从而显示出绿色荧光;细胞免疫荧光证实G250抗原在786-O细胞中呈膜表达,而ACHN细胞中不表达.在细胞结合实验中发现靶向纳米微泡能够特异性的结合786-O细胞,但不能结合于ACHN细胞.体内超声造影显像从平均值和最大值分析,靶向纳米微泡和空白微泡在786-O肾细胞癌细胞的裸鼠模型的显影效果存在显著差异[平均值:(11.74±0.52) vs (16.34±0.40),P=0.001;最大值:(13.07±0.94) vs (18.09±0.82),P=0.003].结论 G250靶向的纳米微泡可在体外能够特异性的结合G250表达阳性的肾细胞癌细胞,在动物体内能够明显的增强移植瘤的超声显影效果.     

纳米液态氟碳脂质微球超声造影剂的制备及体外聚集实验研究

目的制备一种新型超声造影剂——纳米液态氟碳脂质微球造影剂,并研究其体外基本特性及聚集后增强超声显影性能。方法采用高压均质法制备纳米液态氟碳脂质微球超声造影剂,检测一般理化性质,再制备生物素化微球,以空白微球为对照组,分别在加入亲和素前后,观察体外聚集情况及超声显影效果,并用DFY超声图像定量分析统计软件计算、比较超声图像平均灰度值。结果所制备的液态氟碳脂质微球为外观呈乳白色的混悬液,镜下微球形态圆整,大小均一,性质稳定,粒径（171.9±91.0）nm;制备的生物素化微球在加入亲和素后聚集成团状,并可增强超声显影,经DFY软件分析,加入亲和素前后超声图像平均灰度值差异有统计学意义。结论成功制备出稳定的纳米液态氟碳脂质超声造影剂,并采用生物素亲和素法证明了该微球具有聚集后增强超声显影性能。     

KGDS血栓靶向超声造影剂的制备及其初步评价

目的：探讨制备靶向结合活化血小板的脂质超声造影剂的新方法,评价制备的靶向超声造影剂体外与血栓靶向结合的能力。方法：首先合成荧光标记的,能与血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体特异性结合的赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸多肽-棕榈酸化合物（KGDS-Palm）。采用“超声-高速剪切”法,以带荧光FITC的KGDS-Palm为主要原料之一,制备靶向脂质超声造影剂。马尔文公司粒径测定仪检测微泡大小及分布;Coulter计数仪分析浓度;荧光显微镜下观察KGDS多肽与微泡的结合情况;流式细胞仪评价多肽与微泡的结合效率;观察靶向微泡在体外的稳定性;采用体外血栓模型,检测靶向微泡与血栓靶向结合的特异性。结果：KGDS靶向超声造影剂呈淡黄色混悬液,微泡浓度约为1.5×109/mL,平均粒径为1.5 μm,98%的微泡小于5 μm。荧光显微镜显示靶向超声造影剂表面呈明亮的绿色荧光;流式细胞仪检测KGDS结合效率为90.04%;体外4 ℃保存48 h后微泡浓度及粒径无显著改变;体外靶向及其拮抗实验证实,靶向超声造影剂与血栓特异性结合。结论：采用“超声-高速剪切法”制备靶向超声造影剂,方法简单易行,有利于靶向造影剂的制备及纯化;KGDS靶向超声造影剂稳定性好、靶向结合特异性强。     

磁性脂质超声微泡造影剂的制备及影像增强的实验研究

目的:探讨自制磁性脂质微泡超声造影剂在体外的基本特性及体内的影像增强效果,为研制既能在超声诊断中使影像增强,又能对肿瘤进行热疗的超声造影剂提供理论基础和实验依据.方法:(1) 采用化学共沉淀法制备Fe3O4磁性纳米材料,机械振荡法制备磁性脂质微泡.(2) 马尔文粒径测量仪测量磁性脂质微泡粒径,血球计数板测量浓度,扫描电镜及能谱分析对其形态和成分进行分析.(3) 将已制备的磁性脂质微泡原溶液放入4 ℃冰箱里储存2周后观察其形态和粒径的变化.(4) 大型彩超仪评价其在兔肝脏的显像效果.(5) 分别将含有不同浓度磁性纳米粒子的脂质微泡置于频率230 kHz、输出电流30 A的SPG-06A高频磁感应加热设备平板线圈上加热1 h,观察其体外升温情况.结果:此微泡平均粒径为1 127 nm,浓度为3×109ml-1.在4 ℃冰箱中放置2周后,其形态和粒径未发生明显改变.经耳缘静脉注入兔肝脏后,肝实质回声可见明显增强.一定浓度的磁性脂质微泡在一定磁场作用下具有升温恒温的特性,温度可恒定在42～62 ℃之间.结论:此磁性脂质微泡造影剂粒径小,性质稳定,影像增强效果好,在磁场作用下具有升温恒温能力,为今后临床的进一步应用提供了实验依据.     

靶向微泡造影技术在超声诊疗中的应用

靶向微泡造影技术是通过静脉注射靶向微泡超声造影剂对体内组织器官微观病变进行分子水平的探测与显像,并可作为一种有效的基因或药物运载工具。靶向微泡造影剂的研究和应用,对组织、血栓及肿瘤的靶向显影应用前景广阔,在治疗中也显示出巨大的潜力。近几年来国内外对于靶向微泡造影技术的研究和应用也相当广泛。现就此项新技术在超声诊断与治疗中的进展予以综述。     

多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂的制备

目的制备多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂,观察其对正常兔肝脏超声显影效果。方法采用声空化方法制备表面活性剂(Span60和Tween80)包裹全氟丙烷气体的超声造影剂微泡(ST68-PFC)。然后以微泡为模板粒子,用带相反电荷的聚赖氨酸(PLL)和海藻酸钠(Alg)为包膜材料,通过静电吸引层层自组装技术对微泡进行包覆和表面修饰,观察其对正常兔肝实质的造影效果。结果声空化法能够制备出粒径分布均匀的超声造影剂微泡,聚电解质有效地组装到ST68-PFC微泡表面。动物肝脏造影实验证明经过多层聚电解质膜包覆的微泡造影剂能够有效增强兔肝实质显像效果。结论经过层层自组装修饰的微泡造影剂在赋予更多功能的同时,并没有减弱其造影效果。通过选择含有氨基、羧基等基团的高分子材料作为微泡的最外层,可以方便地将特异性配体连接到微泡表面上,实现靶向目的。     

超声造影在肝脏的应用

超声造影剂通过改变声波与组织间的吸收、反射和折射,使所在部位的回声信号增强。新兴的超声造影显像技术包括二次谐波显像、间歇式谐波显像、脉冲反向谐波显像、次谐波显像等,使超声造影剂的显像得到极大提高。肝脏应用的超声造影剂分为自由微气泡、糖化微粒悬浮液、包裹微气泡、过氟化物气体微泡、组织特异性造影剂等几大类,可分别通过增强肝实质和肝肿瘤的不同血管结构的显示,或造影过程中时相变化提供的血流灌注信息等,为诊断提供更多的依据,提高肝占位病变的诊断特异性。     

新型含铁聚合物纳米气泡超声造影剂的制备及其声学特性

目的：制备含铁的聚氰基丙烯酸丁酯（PBCA）杂化纳米气泡（UPNBs）,并研究不同条件下UPNBs的性质及超声成像强度。方法：以PBCA为原料,通过乳化聚合法制备气泡并采用简单的机械搅拌法进行纯化,再用水包油的方法把氧化铁纳米粒子封装在PBCA纳米气泡中,从而得到UPNBs。用贝克曼库尔特计数器分析杂化气泡的平均直径和浓度,用电感耦合等离子体质谱仪测定铁的浓度,用超声成像仪分析不同气泡的成像对比强度。结果：经过杂化得到的纳米气泡在超声成像中有着强烈的成像对比度。此外,随着铁浓度的增加,纳米气泡的粒径仅有细微的改变,但其在超声成像中有着良好的背向散射能力。结论：这些纳米气泡有望成为超声分子成像中良好的造影剂,同时作为混合成像剂可能是核磁共振引导的超声介导的药物和基因传递的潜在载体。     

离体细胞气泡损伤模型的建立及评估

目的 建立离体细胞气泡损伤模型，用于潜水减压病等气泡损伤相关疾病的发病机制研究。方法 研制离体细胞气泡损伤装置，以原代培养大鼠肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cells，PMVEC）为研究对象，通过检测细胞活力变化和凋亡细胞染色，观察细胞损伤与气泡直径和气泡触碰时间之间的量效关系，最终建立稳定的离体细胞气泡损伤模型。结果 离体细胞气泡触碰装置包括气泡生成注射器、细胞培养皿和打孔装置，通过改变气泡生成注射器末端直径大小可以获得不同直径大小的气泡。0.5 mm直径气泡触碰1、2、3、4 h 均未对PMVEC细胞产生明显损伤（P均>0.05），1.0、1.5和2.0 mm直径气泡触碰1、2、3、4 h虽然对PMVEC造成损伤（P均＜0.01），但是只有2.0 mm直径气泡触碰时间>3 h时PMVEC细胞损伤率才较大，触碰3h时细胞存活率为（84.27±1.35）%。结论 本研究建立了稳定的细胞气泡触碰损伤模型，可用于减压病等气泡损伤相关疾病的研究。就PMVEC细胞而言，直径为2 mm气泡触碰损伤3 h可作为最适的气泡损伤条件。     

乳安片对大鼠乳腺增生及调节激素水平研究

[目的] 研究乳安片对大鼠乳腺增生及调节激素水平的研究。[方法] 建立大鼠乳腺增生模型,灌胃给予乳安片(高、中、低3个剂量组)4周,测定乳头直径及长度,计算乳头体积;血清中雌二醇(E₂)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)及睾酮(T)含量。取胸前第1、2对乳房乳腺、子宫卵巢称质量,计算脏器系数;取乳腺组织做组织病理学检查。[结果] 乳安片高、中、低剂量组能够显着减小乳腺增生大鼠乳头直径、长度及乳腺体积,显着减轻乳腺质量、乳腺系数和子宫卵巢系数;明显降低乳腺增生大鼠血清E₂、PRL和E₂/P含量,增加血清中T和P含量;减少乳腺小叶数、小叶腺泡数、乳腺腺泡数目及腔内分泌物。[结论] 乳安片能够通过调节乳腺增生大鼠的性激素水平,改善增生乳腺的形态学变化,对大鼠乳腺增生病具有显着的治疗作用。关键词:乳安片;乳腺增生;雌二醇;孕酮     

基于区域医学影像共享平台的大影像教学资源开发和教学革新

[目的]探讨基于区域医学影像共享平台的大影像教学资源开发和信息技术的教学革新。[方法]在基于区域影像共享（cross-enterprise document sharing for imaging,XDS-I）技术框架的区域医学影像共享平台的基础上,利用整合在影像工作站的电子教案（electronic teaching file,ETF）生成模块,设计和集成脑图软件、视频报告、考试软件,并通过与医学影像共享平台交互的接口,利用区域医学影像共享平台中海量的数字化大影像资料,实现大影像电子教案的制作,构建包含放射、核医学、超声、病理等学科的大影像教学系统。[结果]通过整合在影像工作站中的ETF生成模块,集成脑图软件、视频报告和考试模块,成功构建包含放射、核医学、超声、病理等学科的大影像教学系统。[结论]成功构建基于区域医学影像共享平台的大影像教学系统,最大限度实现大影像教学资源共享,将改变大影像教学模式,极大地提升影像医学的教学质量。     

X线与超声检查诊断泌尿系结石对比分析

[目的]探讨泌尿系结石的X线、超声表现特征,为临床医生提供综合可靠的影像资料.[方法]搜集我院收治的690例典型泌尿系结石患者的X线、超声影像资料,结合文献对其影像学表现做回顾性比较分析.[结果]X线、超声检查对本组690例泌尿系结石患者的阳性诊断率各有不同,其中超声检查诊断泌尿系结石阳性患者为660例,阳性率为95.65%;X线检查诊断泌尿系结石阳性患者为360例,阳性率为52.17%.[结论]超声检查在诊断泌尿系结石方面比X线平片检查更具优势.     

2型糖尿病合并肺结核CT检查研究

目的：研讨2型糖尿病合并肺结核CT表现和特点。方法：45例糖尿病合并肺结核患者全部作常规胸片和胸部CT扫描，部分病例局部行高分辨CT(HRCT)，8例作了增强扫描。结果：96个肺段发现病灶，其中实变为主15例，空洞11例，结节肿块11例，斑片影8例。结论：2型糖尿病合并肺结核CT影象表现多样性，CT(HRCT)对确诊病灶和判断活动性具有决定意义，多发虫蚀样空洞为糖尿病合并肺结核病灶特征表现。     

肺放线菌病的CT表现

目的总结肺放线菌病的CT表现特点,进一步提高本病的诊断准确率。方法回顾性分析邯郸市第三医院2004年1月至2012年8月确诊的6例肺放线菌病患者的临床资料及CT检查资料。结果 6例患者均行胸部CT平扫,为进一步观察病灶特点,对其中5例行强化扫描,均表现为肺外围胸膜下的团块状影,大多与胸膜粘连,病变多为囊实性,内见空洞影和气泡影;增强扫描后,病灶实性部分强化,囊性部分无强化,3例行手术切除病变组织送病理确诊,另外3例患者行CT引导下经皮穿刺活检确诊。结论肺放线菌病的影像学表现有一定特点,仔细观察病灶的影像表现,密切结合临床,能够提高诊断准确率。     

构建基于PACS的医学影像教学资源中心提升教学质量

[目的]构建基于图像存档与传输系统（picture archiving and communication system,PACS）的数字化医学影像教学资源中心,提升医学影像学教学质量。[方法]设计电子教案（electronic teaching file,ETF）生成模块,并把它整合在PACS系统报告工作站,配置电子教案服务器,建立电子教案数据库,并通过与PACS系统交互的接口模块,实现影像电子教案的制作,然后利用医院PACS系统中海量的数字化医学影像资料,建立数字化医学影像教学资源中心。[结果]通过整合在PACS系统报告工作站中的电子教案生成模块,选择典型病例、感兴趣病例,并经过简单的处理后自动快速地生成电子教案,成功构建数字化医学影像教学资源中心。[结论]基于PACS系统成功构建数字化医学影像教学资源中心,最大限度实现医学影像教学资源共享,将改变医学影像学教学模式,极大地提升医学影像学教学质量。     

肺放线菌病的影像学表现

目的探讨肺放线菌病的影像学表现,提高本病的诊断准确率。方法综合分析2004年1月-2012年8月期间我院6例肺放线菌病的临床资料及影像学征象。结果所有6例患者均行胸部CT平扫检查,其中5例行强化扫描,均表现为肺外围胸膜下的团块状影,大多与胸膜黏连,病变多为囊实性,内见空洞影和气泡影,增强扫描,病灶实性部分强化,囊性部分无强化,3例患者行CT引导下经皮穿刺活检确诊,3例行手术切除后病理确诊。结论肺放线菌病的影像学表现有一定特点,仔细观察病灶的影像表现,密切结合临床,能够提高诊断准确率。     

以丁醇为润湿介质的除菌过滤器完整性测试研究

叙述了以水为介质进行的除菌过滤器的完整性测试在制药工业实际生产中的缺点;由于供应商提供的水的泡点或者扩散流值是与细菌截留试验相关的,在科学的完整性测试理论的支持下,合理的进行试验设计,通过确定丁醇与水的泡点和扩散流的比值,间接建立了丁醇泡点和扩散流与细菌截留试验的关系,最终确定了丁醇完整性测试的泡点和扩散流值,同时得出丁醇泡点和扩散流测试程序。