巢蛋白及性别决定基因高迁移率组蛋白在SAMP8小鼠穹隆下器的表达及意义

目的观察巢蛋白(Nestin)与性别决定基因高迁移率组蛋白(SOX2)在快速老化小鼠SAMP8穹隆下器(SFO)中的表达。方法成年8月龄SAMP8小鼠设为实验组,采用免疫组织化学和免疫组织化学荧光染色的方法观察Nestin及SOX2在穹隆下器中的表达,同时设正常老化小鼠SAMR1对照。结果 Nestin免疫组织化学染色发现,对照组免疫阳性细胞呈突起分布,放射丝状表达;实验组免疫阳性细胞染色深,丝状结构粗大,在血管周围密集分布,阳性细胞百分比(49.17±7.60)%较对照组阳性细胞百分比(16.33±4.41)%明显增多,差异有统计学意义(P0.01)。SOX2免疫组织化学染色,对照组免疫阳性细胞散在分布,染色深浅不一;实验组大部分阳性细胞染色较深,在血管周围密集分布;阳性表达细胞百分比(62.17±20.27)%较对照组阳性表达细胞百分比(36.00±16.20)%明显增多,差异有统计学意义(P0.05)。荧光双标染色,对照组SOX2散在分布,其间可见Nestin阳性表达,室管膜下区可见少量SOX2/Nestin双表达细胞。实验组阳性表达强烈,SOX2/Nestin双表达细胞增多。结论 Nestin及SOX2在快速老化小鼠SAMP8穹隆下器的表达明显增强,表明阿尔茨海默病(AD)在一定时期可能引起穹隆下器神经干细胞/祖细胞的增殖或分化增强,进而可能影响穹隆下器的神经生发功能。     

巢蛋白及性别决定基因高迁移率组蛋白在SAMP8小鼠穹窿下器的表达及其意义

目的 观察巢蛋白（Nestin）与性别决定基因高迁移率组蛋白(SOX2)在快速老化小鼠SAMP8穹隆下器（SFO）中的表达。 方法 成年8月龄SAMP8小鼠设为实验组,采用免疫组织化学和免疫组织化学荧光染色的方法观察Nestin及SOX2在穹隆下器中的表达,同时设正常老化小鼠SAMR1对照。结果 Nestin免疫组织化学染色发现,对照组免疫阳性细胞呈突起分布,放射丝状表达;实验组免疫阳性细胞染色深,丝状结构粗大,在血管周围密集分布,阳性细胞百分比（49.17±7.60）%较对照组阳性细胞百分比（16.33±4.41）%明显增多,差异有统计学意义（P＜0.01）。SOX2免疫组织化学染色,对照组免疫阳性细胞散在分布,染色深浅不一;实验组大部分阳性细胞染色较深,在血管周围密集分布;阳性表达细胞百分比（62.17±20.27）%较对照组阳性表达细胞百分比（36.00±16.20）%明显增多,差异有统计学意义（P＜0.05）。荧光双标染色,对照组SOX2散在分布,其间可见Nestin阳性表达,室管膜下区可见少量SOX2/Nestin双表达细胞。实验组阳性表达强烈,SOX2/Nestin双表达细胞增多。结论 Nestin及SOX2在快速老化小鼠SAMP8穹隆下器的表达明显增强,表明阿尔茨海默病（AD）在一定时期可能引起穹隆下器神经干细胞/祖细胞的增殖或分化增强,进而可能影响穹隆下器的神经生发功能。     

巢蛋白在成年大鼠室周器官细胞的表达

目的:观察巢蛋白在成年大鼠室周器官细胞的表达,并根据巢蛋白阳性表达细胞的位置、大小及形态特点进行分类.方法:成年SD雄性大鼠,经心灌注后,用免疫组织化学检测巢蛋白在室周器官细胞的表达.结果:在正中隆起(64.32％±8.55％)、穹隆下器(15.76％±2.16％)、连合下器(40.15％±6.16％)和最后区(28.85％±4.53％)都可见大量的巢蛋白阳性表达细胞.根据细胞所在位置、大小和形态将其分为5类.Ⅰ类是室管膜细胞,部分室管膜细胞有长10～180 μm的胞突;Ⅱ类细胞较小,细胞及细胞核呈圆形或卵圆形,有1～2个纤细长达20～30 μm的胞突;Ⅲ类细胞胞体较Ⅱ类大,细胞及细胞核不规则,胞质浅染,无胞突;Ⅳ类细胞及细胞核呈圆形或卵圆形,大部分细胞无胞突,部分细胞有长4～15 μm的胞突;Ⅴ类细胞胞体较大,细胞及细胞核呈圆形或卵圆形,有1～3个粗长的突起,并可见2～3级分支,胞突长50～100μm.结论:成年大鼠室周器官有大量巢蛋白阳性表达细胞,有的是具有增殖和分化潜能的神经干细胞/祖细胞,有的是巢蛋白阳性表达的神经元.     

巢蛋白在成年大鼠海马神经元的表达及巢蛋白阳性神经元的生后发育

本文采用免疫组织化学方法对成年大鼠海马巢蛋白阳性神经元及其出生后的发育变化进行了研究。结果显示 ,在成年大鼠海马 CA1、CA2和 CA3区锥体层某些特定部位的神经元呈巢蛋白阳性反应。巢蛋白阳性神经元出生后 3周开始在海马中出现 ,并且到 12月龄大鼠海马内仍有存在。双重反应结果显示 ,巢蛋白与 GABA在海马神经元内无共存。成年大鼠海马锥体层神经元表达巢蛋白的生物学意义尚不清楚     

SOX2/Nestin阳性细胞在糖尿病大鼠穹窿下器中的表达

目的:观察神经干细胞特异性标记物性别决定基因高迁移率组蛋白(SOX2)、巢蛋白(nestin)在不同时期糖尿病大鼠穹窿下器(SFO)中的表达情况并探讨其意义。方法:雄性Wistar大鼠给予链脲佐菌素(STZ,60mg/kg,腹腔一次性注射)建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型。用免疫组织化学染色方法观察SOX2、Nestin阳性表达细胞在正常大鼠及2、4、8、12周糖尿病大鼠SFO的表达情况。结果:模型组各个时间点的SOX2和Nestin的阳性表达细胞数量及平均光密度均高于正常对照组,且均在第4周表达达到高峰,而后逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:在不同病程糖尿病大鼠模型中,SOX2及Nestin在SFO的阳性表达一过性增强,表明糖尿病时可能会短暂性提高SFO神经干细胞的增殖功能。     

性别决定与分化相关基因在大鼠肝再生中的表达模式和作用分析

目的 在基因转录水平了解调控性别决定与分化基因在肝再生中的作用.方法 查阅相关论文和NCBI、GENMAPP、KEGG、BIOCARTA、RGD等网站获得调控性别决定与分化基因,用Rat Genome 230 2.0芯片分析它们在大鼠肝再生中表达变化和作用.结果 肝再生启动[部分肝切除(PH)后0.5～4 h]、G0/G1过渡(PH后4～6 h)、细胞增殖(PH后6～66 h)、细胞再分化和组织结构功能重建(PH后72～168 h)等4个阶段起始表达的基因数为41、6、18和3;总表达的基因数为41、25、57和41.表明肝再生相关基因主要在肝再生启动阶段开始表达,在不同阶段发挥作用.它们表达的相似性分为均上调、上调占优势、均下调、下凋占优势、上调和下调次数相近等5类,涉及22、9、15、9和7个基因,共表达上调231次、下调146次,表明肝再生中多数基因表达加强,少数基因表达降低.它们表达的时间相关性分为15组,表明肝再生中细胞生理生化活动具有阶段性.它们的表达模式分为20类,表明肝再生中细胞生理生化活动多样和复杂.结论 雄性性别决定、分化和雌性性别分化相关基因主要在肝再生晚早期和前期表达增强,雌性性别决定相关基因主要在肝再生前期表达增强,与肝再生密切相关.     

高迁移率组蛋白B1对大鼠门静脉血栓形成的调控机制

目的探究高迁移率组蛋白B1(HMGB1)对静脉血栓(Portal vein thrombosis,PVT)形成的调控机制,为改进PVT的治疗策略提供新思路。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组;模型组和假手术组通过门静脉短暂结扎联合破坏血管内膜的方法建立大鼠PVT模型,假手术组仅分离门静脉;治疗组在术前给予抗HMGB1单克隆抗体治疗;通过超声检测3组大鼠肝门静脉血栓的大小;采用ELISA方法检测血清P选择素(P-Selectin)和D-二聚体(D-Dimer)的含量。结果超声检查发现模型组门静脉内形成稳定血栓,治疗组经抗HMGB1单抗治疗后门静脉内血栓明显减小;ELISA结果显示模型组血清P-Selectin和D-Dimer含量较假手术组明显增多;而治疗组经抗HMGB1单抗治疗P-Selectin和D-Dimer水平显著减少。结论 HMGB1通过上调P-Selectin和D-Dimer表达促进大鼠门静脉血栓的形成。     

大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗后穹隆下器一氧化氮合酶表达的变化

目的：探讨穹隆下器(subfornical organ,SFO)在脑肿瘤免疫过程中的作用及意义。方法：脑胶质瘤大鼠分伽玛刀治疗和对照组。通过NADPH-d和iNOS免疫组化染色,观察SFO阳性细胞面密度,并测定大鼠外周血NO的含量。结果：与对照组大鼠比较,治疗组大鼠SFO处阳性数量明显增多,以其腹内侧区为著。阳性细胞排列呈团状或片状,胞质深染,并可见大量浓染的阳性突起,细胞面密度较对照组非常明显增高。治疗组大鼠外周血NO的含量为(12．63±1．16)μmol/L,非常显著高于对照组的(8．33±0．21)μmol/L)。结论：大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗后NOS和iNOS在SFO的表达显著增多,提示SFO可能与放射治疗引起的神经免疫调节有关。     

卵巢癌患者血管内皮生长因子和高迁移率组蛋白B1的表达及临床意义分析

目的本文旨在探讨血管内皮生长因子(VGCF)和高迁移率组蛋白B1(HMGB1)在卵巢癌中的表达情况及其临床意义。方法选取2017年3月～2019年7月本院妇产科收治的46例卵巢癌患者作为研究对象,所有患者在入院后均进行手术和术后病理检查,以术中切除的癌变组织作为观察组,选取癌变组织5cm外的正常组织作为对照组。使用S-P免疫组化染色,根据染色结果比较两组VGCF和HMGB1的表达水平以及HMGB1、VGCF表达与病理参数(肿瘤大小、临床分期、病理分型、病理分级)的关系。结果观察组HMGB1、VGCF染色阳性率分别69.56%、60.86%,明显高于对照组(P0.05);观察组HMGB1、VGCF阳性率与临床分期、病理分级呈正相关性,(r=0.471,P0.05)。结论 VGCF和HMGB1在卵巢癌患者癌变组织中都有较高的表达水平,与卵巢癌患者临床分期、病理分级呈正相关,可为临床鉴别诊断提供参考信息,值得临床推广应用。     

巢蛋白在成年C57小鼠和SD大鼠中枢神经系统中的分布及比较

目的 观察巢蛋白(nestin)在成年C57小鼠和SD大鼠中枢神经系统中的分布,探讨并比较神经干细胞在两种啮齿类动物中分布的异同。方法 采用免疫组织化学ABC法和间接免疫荧光法,显示含神经干细胞特征性的标志物巢蛋白的阳性结构在上述两种啮齿类动物中枢神经系统中的分布。结果 在成年C57小鼠中枢神经系统中,巢蛋白在整个脑室系统周围均有表达,免疫阳性结构位于室管膜细胞胞体及其突起,并呈现由吻端向尾端渐次减少的趋势。在成年SD大鼠的脑室系统中,巢蛋白主要分布在侧脑室外侧壁及其周围脑区。此外,在两者的齿状回、穹窿下器、最后区等脑结构中也有巢蛋白的表达。成年C57小鼠中枢神经系统中巢蛋白的表达,无论在免疫阳性结构的数量上还是在染色强度上都明显多于和强于成年SD大鼠。结论 巢蛋白在成年C57小鼠中枢神经系统中的广泛脑区均有表达,而在成年SD大鼠中仅见于有限的脑区,提示成年C57小鼠中枢神经系统可能具有较强的神经可塑性和损伤修复能力。     

伽玛刀照射后胶质瘤大鼠穹隆下器的扫描电镜观察

目的：探讨伽玛刀照射大鼠脑胶质瘤前后，穹隆下器(subfornical organ，SFO)室管膜面发生的微观变化。方法：建立C6大鼠脑胶质瘤模型，以胶质瘤为靶区对大鼠行伽玛刀照射，用扫描电镜观察伽玛刀照射前后SFO的形态学变化。结果：在胶质瘤生长期，SFO室管膜细胞出现胞体固缩、胞膜凹陷，细胞表面微绒毛、微突起和单根纤毛减少，室管膜面纤维网发生缠结、断裂；伽玛刀照射后上述变化进一步加重，除胞膜凹陷外，SFO室管膜细胞还出现胞膜破裂，胞核裸露，室管膜面纤维网完全脱落。结论：在胶质瘤生长和伽玛刀照射后肿瘤坏死过程中，SFO室管膜细胞的形态出现明显变化，可能与SFO参与神经免疫调节机制有关。     

巢蛋白在胚胎及新生大鼠脊髓的表达

目的　检测不同发育时期巢蛋白 (nestin)在脊髓神经干细胞的表达水平 ,探讨脊髓神经干细胞的发育规律 ,为分离、富集和增殖均质的神经干细胞以及后期的研究工作如神经干细胞定向分化及移植治疗等研究提供实验依据。方法　将Wistar大鼠按胎龄及日龄分组 ,剥离脊髓 ,制成单细胞悬液 ,经间接荧光法标记nestin抗原 ,用流式细胞仪检测和分析。结果　从E13到P7整个发育过程中都有nestin抗原的表达 ,呈升高趋势 ,其中P1期表达水平最高。出生后表达下降 ,趋近于 90d(同型对照 )表达水平。结论　巢蛋白在脊髓的表达出现于胚胎早期 ,表达水平随胎龄轻微波动 ,呈升高趋势 ,P1达到高峰 ,出生后表达下降 ,趋于成鼠的微量表达     

哺乳动物的性别决定和哪些基因有关

Y连锁、X连锁的锌指基因和某些常染色体基因均参与哺乳动物性别决定。Y染色体上睾丸决定因子基因和某些X连锁基因及常染色体基因协同活动引致睾丸的发育;睾丸决定因子基因缺如兼X连锁基因、常染色体基因产物的特定剪接则诱导卵巢发育。     

高迁移率族蛋白B1在脂多糖致幼年大鼠脑损伤中的表达

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility gnmp box 1,HMGB1)在脂多糖(LPS)致幼年大鼠脑损伤中的表达变化.方法 SD大鼠随机分为对照组(NS组,n=80),颈外动脉注射生理盐水;脂多糖组(LPS组,n=80),颈外动脉注射LPS,于注射药物后6、12、24、48、72 h处死,甲酰胺法测脑组织伊文思蓝(EB)含量;免疫组织化学技术检测脑组织HMGBI、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;RT-PCR技术检测HMGB1 mRNA的表达变化.结果 LPS组脑组织的EB含量、NSE、GFAP蛋白表达均为6 h开始增加,24 h达高峰;HMGB1蛋白及HMGB1 mRNA于6 h开始增加,24 h达高峰,与EB含量、NSE、GFAP蛋白含量呈正相关.各时间点与NS组比较,差异显著.结论 HMGB1可能作为晚期炎症因子参与LPS致脑损伤的发生发展过程.     

组蛋白H2AX在高氧致肺损伤新生大鼠肺组织的表达

目的 研究组蛋白H2AX在高氧致肺损伤新生大鼠肺组织中的表达,并探讨其在高氧肺损伤中的作用.方法 将80例新生大鼠随机分为实验组(高氧组)和对照组(空气组),建立高氧致新生大鼠肺损伤的模型,在实验开始后1、2、3、5、7天取肺组织标本,运用免疫荧光技术和Western-blot方法检测高氧肺损伤过程中H2AX的表达规律...     

同源盒基因Lhx3和Lhx4在成年大鼠缺血性脑损伤后的表达变化

目的 揭示发育基因Lhx3和Lhx4参与成年动物中枢神经损伤修复的过程。方法 线栓法制作局灶性脑缺血模型,阻断成年大鼠右侧大脑中动脉,缺血2h后再灌注,分别于损伤再灌注后3d、7d、14d和2ld取左右侧大脑皮层组织,采用RT-PcR结合HPLC测定方法,相对定量分析上述不同损伤时相同源盒基因Lhx3和Lhx4在损伤侧与对照侧皮层运动神经元mRNA表达量的改变。结果 正常成年大鼠大脑皮层运动神经元中,从Lhx3和Lhx4基因均维持一定的表达水平,在局灶性脑缺血再灌注3d、7d、14d后,大脑皮层运动神经元损伤侧的从Lhx3和Lhx4基因表达均有明显改变,但变化规律不同。其中Lhx3在损伤后mRNA表达量较自身对照侧明显降低,而Lhx4的mRNA表达量较自身对照侧明显升高,该结果与成年大鼠坐骨神经夹伤后,脊髓中Lhx3和Lhx4的基因表达变化规律基本一致。结论 LIM同源盒基因家族中的Lhx3和Lhx4基因不仅在神经元发育过程中起重要调控作用,而且可能参与成年动物中枢神经损伤的修复过程。     

巢蛋白在垂体和垂体腺瘤中表达的研究进展

巢蛋白(nestin)是第Ⅵ类中间丝蛋白,主要在胚胎期神经前体细胞和神经干细胞一过性表达。在正常细胞演变成肿瘤细胞过程中,巢蛋白又呈现返祖性表达。近年来研究发现nestin阳性细胞散在的分布于垂体的前叶、中间部和神经部。但这些nestin阳性细胞是否包括了垂体前体细胞还不清楚。在垂体腺瘤的部分毛细血管内皮细胞中也检测到nestin的表达,推测它可作为垂体血管发生的一种检测指标。     

Nestin在成年大鼠基底前脑表达的鉴定

目的鉴定巢蛋白(Nestin)在成年大鼠基底前脑的表达。方法应用小鼠抗大鼠Nestin单克隆抗体(Rat401)对成年大鼠基底前脑进行了免疫组织化学研究和Westen-blot检测。结果Nestin免疫反应阳性神经元广泛分布于成年大鼠基底前脑的隔-斜角带(MS-DBB)复合体,基底前脑MS-DBB复合体的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)和斜角带水平支(hDB)分别有一相对分子质量约为240000的单一蛋白带。结论成年大鼠基底前脑MS、vDB和hDB均存在Nestin表达。     

Smad2和Smad4蛋白在成年大鼠睾丸的表达

目的 探讨转化生长因子－β超家族肽类的细胞内信号转导分子Smad2和Smad4蛋白在成年大鼠睾丸的表达及在精子发生中的作用机理。方法 用免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶－DAB－硫酸镍铵增强技术,检测成年大鼠睾丸Smad2和Smad4蛋白的表达和定位。结果Smad2蛋白主要表达在大鼠睾丸生精小管的精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞中,免疫反应物质主要定位于细胞质,胞核为阴性;而Smad4蛋白同主要表达于间质细胞的胞质中,支持细胞呈弱阳性染色,结论 Smad2蛋白主要表达于睾丸生精小管各级生精细胞,Smad4蛋白表达于间质细胞,为揭示TGF－β超家族在精子发生中的分子机理提供了直接证据。