冷冻方法对人卵裂期冷冻胚胎移植周期妊娠结局的影响

目的探讨慢速冷冻和玻璃化冷冻方法对人卵裂期冷冻胚胎移植周期妊娠结局的影响。方法回顾性分析2011年1月~2015年12月在北京大学第一医院进行卵裂期冷冻胚胎移植的1331个周期,包括慢速冷冻周期431个和玻璃化冷冻周期900个,比较两种不同冷冻方法的胚胎复苏率、完整胚胎率、临床妊娠率、种植率、流产率等各项指标,并分析卵裂球损伤对胚胎发育潜能的影响。结果玻璃化冷冻的胚胎复苏率(92.53%)、完整胚胎率(75.43%)、临床妊娠率(45.72%)、种植率(27.41%)高于慢速冷冻(76.93%、48.46%、39.52%、19.88%,P0.05);而流产率分别为12.20%、12.56%(P0.05);周期取消率分别为3.71%、1.33%(P0.05)。慢速冷冻移植0、1、2、3个无卵裂球损伤胚胎的临床妊娠率分别为:36.2%、37.7%、42.0%、44.3%(P0.05);玻璃化冷冻移植0、1、2、3个无卵裂球损伤胚胎的临床妊娠率分别为:20.5%、42.3%、48.8%、54.1%(P0.05)。结论玻璃化冷冻法更适合于人卵裂期胚胎冷冻保存,其冷冻胚胎移植周期的妊娠结局要优于慢速冷冻法;卵裂球损伤对玻璃化冷冻复苏胚胎的发育潜能影响较大。     

玻璃化冷冻人卵裂期胚胎的效果观察

目的观察总结玻璃化冷冻第三天(D3)胚胎复苏后的存活率与妊娠率。方法对人D3早期胚胎进行玻璃化冷冻,统计分析了2013年1月份至2013年12月份来我中心进行冷冻胚胎复苏移植的215个周期。结果胚胎复苏215个周期,共493个胚胎,胚胎复苏后存活487个,胚胎存活率为98.8%(487/493),487个存活胚胎均予以移植;临床妊娠90例,临床妊娠率为41.9%(90/215)。妊娠的90例中分娩59例,流产31例(其中宫外孕4例)。妊娠90例中单胎68例,双胎20例,3胎2例。结论玻璃化冷冻对人卵裂期胚胎的损伤较小,适用于临床对卵裂期胚胎长期保存的需求。     

两种冻融方法对人卵裂期胚胎冷冻复苏效果的系统评价

目的系统评价体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗中玻璃化和程序化2种冷冻方法对卵裂期胚胎的冷冻复苏效果。方法检索了Pub Med、The Cochrane Library、EMbase、CBM、CNKI、Wan Fang Data和VIP,搜集冻融胚胎移植周期中玻璃化冷冻和程序化冷冻效果比较的随机对照试验(RCT),检索时限均为从建库至2015年2月。由2位评价者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量,然后采用Rev Man 5.2软件进行Meta分析。最终纳入5个RCT,共计1229例患者。结果 Meta分析结果显示:玻璃化冷冻在复苏胚胎存活率方面[RR=1.24,95%CI(1.04,1.49),P=0.02]和胚胎完整率方面[RR=1.61,95%CI(1.43,1.83),P0.00001]优于程序化冷冻;临床妊娠率方面[RR=1.70,95%CI(1.18,2.46),P=0.005]和胚胎种植率[RR=1.99,95%CI(1.16,3.43),P=0.01]也优于程序化冷冻。结论现有证据显示,玻璃化冷冻在提高胚胎存活率、胚胎完整率、临床妊娠率及种植率方面优于程序化冷冻。受纳入研究数量及质量限制,上述结论尚需开展更多大样本、高质量、长期随访的RCT来加以验证。     

种属和发育期及不同实验条件对卵裂期胚胎冷冻复苏结局的影响

背景：人卵裂期胚胎冷冻复苏的研究中,不同的实验条件及实验动物模型是否与人类胚胎具有相同的敏感性从而反映出实验方案的优劣值得探讨。 目的：观察胚胎种属和发育期及不同冷冻条件对卵裂期胚胎冷冻复苏结局的影响。 方法：将人卵裂期胚胎作为对照组,将KM小鼠胚分为2细胞,4细胞,8细胞组。各组胚胎随机采用以下实验方案：①冷冻操作环境温度18~20 ℃、24~26 ℃和37 ℃。②慢速程序化方案、自制straw叶片玻璃化方案和CPS玻璃化方案。③与玻璃化液接触时间< 40 s、40~60 s和60~90 s。各组胚胎比较不同实验条件下胚胎复苏率和培养24 h发育率。 结果与结论：①对照组24~26 ℃冷冻操作环境温度复苏率高于37 ℃冷冻操作环境(P < 0.05)。②对照组和4细胞鼠胚组采用自制straw叶片玻璃化方案复苏率高于慢速程序化方案(P < 0.05),培养24 h胚胎发育率差异无显著性意义(P > 0.05)。③各组胚胎与冷冻保护剂接触不同时间胚胎复苏率差异无显著性意义(P > 0.05)。表明卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏效果优于慢速程序化,24~26 ℃操作环境、减少冷冻保护剂剂量和缩短接触时间可改善玻璃化冷冻复苏结局;相同冷冻条件下,胚胎种属和发育阶段对冷冻复苏结局有影响,4细胞鼠胚更适合作为研究人类卵裂期胚胎冷冻复苏的实验模型。     

胚胎早期卵裂观察在胚胎发育潜能评估中的应用分析

目的探讨取卵后第一天(Day1)胚胎早期卵裂的观察在胚胎发育潜能及临床妊娠结局的预测价值。方法分析2013年5月至2014年4月179个常规IVF周期,依据受精后28±1h双原核(2pn)受精卵早期卵裂情况,分为早期卵裂组(A组)、pn消失未早期卵裂组(B组)、pn未消失未早期卵裂组(C组),比较每组优质胚胎率、可利用囊胚形成率和临床妊娠率等,其中移植结局又根据移植胚胎来源分4组,a组全移植早期卵裂来源胚胎、b组1个为早期卵裂来源胚胎、c组为pn消失未早期卵裂来源胚胎、d组为pn未消失未早期卵裂来源胚胎。结果 1.Day3评分A组、B组、C组的优质胚胎率(61.3%vs 53.1%vs32.1%),差异有统计学意义(P0.05);胚胎可利用率为(72.2%vs 65.5%vs 39.1%),差异有统计学意义(P0.05);可利用囊胚形成率(41.6%vs 37.9%vs 22.2%),差异有统计学意义(P0.05)。2.早期卵裂细胞数为2且评分≤2级的胚胎形成优质胚胎率、可利用囊胚形成率均高于早期卵裂细胞数≥3或评分≥3级的胚胎,差异有统计学意义(P0.05)。3.移植a组、b组、c组、d组的临床妊娠率为63.5%、48.3%、50.0%、44.6%,移植a组的临床妊娠率明显高于其它组别,但差异无统计学意义(P0.05)。结论早期卵裂组的优质胚胎率、可利用囊胚形成率及胚胎移植结局明显高于非早期卵裂组,提示胚胎早期卵裂的观察有助于预测胚胎发育潜能,而早期卵裂细胞数为2且评分≤2级的胚胎发育潜能高。     

玻璃化冷冻人不同发育时期的胚胎对其发育潜能的影响

目的分析使用玻璃化冷冻法对人D3卵裂期细胞及囊胚进行冷冻,对胚胎发育潜能的影响。方法从2013年3月至2015年12月180周期358枚胚胎行解冻胚胎移植,将胚胎分为卵裂组及囊胚组,统计解冻后存活率,移植后着床率、妊娠率、流产率及多胎妊娠率。结果 D3卵裂组与囊胚组解冻后存活率没有差异,但移植后发育潜能卵裂组明显低于囊胚组。结论冷冻解冻移植囊胚期的胚胎比卵裂期的胚胎更有发育潜能。     

玻璃化冷冻法和程序化冷冻法对人卵裂期胚胎冷冻复苏效果及临床结局的比较

目的比较辅助生殖技术中玻璃化和程序化2种冷冻方法对卵裂期胚胎的冷冻复苏效果及临床结局。方法对3396个玻璃化冷冻周期和685个程序化冷冻周期的相关资料进行回顾性统计学分析,比较解冻后胚胎复苏率、优质胚胎率、临床妊娠率和胚胎着床率等指标。结果玻璃化冷冻后的胚胎复苏率、优质胚胎率、临床妊娠率和胚胎着床率均显著高于程序化冷冻,且复苏周期移植取消率显著低于程序化冷冻。结论相对于程序化冷冻法,玻璃化冷冻法具有更好的冷冻复苏效果以及临床结局,更适用于卵裂期胚胎的冷冻保存。     

不同内膜准备方法对卵裂期胚胎解冻移植妊娠结局的影响

目的三种不同内膜准备方法在卵裂期胚胎解冻移植后对妊娠结局的影响。方法回顾性分析2015年2至2018年2月在本生殖中心卵裂期胚胎解冻移植(FET)治疗的856个周期的资料,依据三种不同的内膜准备方法分成三组:A组:自然周期组冻融胚胎解冻移植241例;B组:人工周期组冻融胚胎解冻移植293例;C组:促排卵周期组冻融胚胎解冻移植322例。比较三组解冻胚胎的复苏率、妊娠率、流产率、宫外孕率等指标是否存在差异。结果三种不同内膜准备方法的胚胎解冻复苏率、妊娠率、流产率、宫外孕率等差异无统计学意义(P0.05)。结论在冻融卵裂期胚胎解冻中,不同的内膜准备方法不影响其妊娠结局,在临床的工作中可以根据患者的具体情况,个体化的选择方法准备内膜。     

激光辅助孵化对玻璃化冷冻的卵裂期胚胎妊娠结局的影响

目的探讨激光辅助孵化(LAH)对玻璃化冷冻的卵裂期胚胎妊娠结局的影响。方法回顾性分析2017～2018年198个卵裂期胚胎解冻移植周期,其中行激光辅助孵化(LAH)64个周期,未进行激光辅助孵化(NLAH)134个周期。结果 LAH组的临床妊娠率和胚胎种植率均低于NLAH组,而多胎率和流产率均高于NLAH组,但差异没有统计学意义(P0.05)。结论激光辅助孵化对于玻璃化冷冻的卵裂期胚胎的妊娠结局没有明确的作用。     

胚胎培养密度对胚胎发育潜能的影响

目的探讨在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术中胚胎培养密度对胚胎发育潜能的影响。方法选取应用延时摄像技术进行胚胎微滴聚集培养的119个周期为研究对象,以同期同条件的IVF/ICSI常规培养患者119个周期为对照组,比较两组胚胎培养结果的差异;同时比较微滴聚集培养9孔与16孔培养结果。结果微滴聚集培养的胚胎培养方式与常规培养方式比较,卵裂率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率、临床妊娠率和胚胎种植率(分别为98.2%、58.6%、54.1%、31.5%、57.9%,48.5%VS 97.1%、59.0%、49.6%、33.9%、60.9%、50.5%)差异均无统计学意义(P0.05)。9孔与16孔D3优胚率有显著性差异(分别为55.7%VS63.5%,P0.05),其余卵裂率、囊胚形成率、优质囊胚率、临床妊娠率和胚胎种植率无统计学意义(P0.05)。结论胚胎培养密度(1-16个/30μl)的胚胎发育潜能相似,延时摄像技术采用的微滴聚集培养与常规传统培养可以获得相似的培养效果。     

人卵裂胚和囊胚的玻璃化冷冻及临床应用

目的探索人卵裂胚及囊胚玻璃化冷冻的有效性。方法来源于生殖中心IVF或ICSI助孕的共270个胚胎（卵裂胚167个,囊胚103个）,用Cryoloop作为胚胎载体和相同的玻璃化方法进行冷冻、复苏和移植,观察其复苏存活率、临床妊娠率、植入率和流产率。结果卵裂胚和囊胚的复苏率、植入率和妊娠率分别为97.0%、33.1%、42.9%和96.1%、43.9%、52%,流产率分别为13.3%和15.4%。结论以Cryoloop为胚胎载体,使用相同的玻璃化冷冻方法对人类卵裂胚和囊胚均可获得同样理想的冷冻效果和临床结局。     

胚胎密度对卵裂期优质胚胎率的影响

目的 通过调整协变量来探索培养的胚胎密度与第3天卵裂期胚胎发育结果之间的相关性.方法 回顾性分析206对夫妇1196个胚胎体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的资料.培养条件为低氧,培养液每微滴体积为30 μl.以第3天卵裂期胚胎的优质胚胎率为终点指标对胚胎质量进行评价.选择女方年龄,男方年龄,窦卵泡数,抗苗勒管激素...     

卵裂期胚胎质量对单囊胚移植结局的影响

目的研究辅助生殖技术体外培养第3天胚胎质量对所形成的囊胚临床结局的影响。方法回顾性分析本中心行单囊胚移植的483个复苏周期共432个病人的资料,根据所移植囊胚在第3天卵裂期胚胎的细胞数和碎片量进行分组,分析细胞数量和碎片量对囊胚移植临床妊娠率、流产率的影响。根据第3天细胞数分成≤6细胞组、7~9细胞组和≥10细胞组3组;根据细胞碎片量分成≤2级组和≥3级组。结果碎片量≤2级组和≥3级组在临床妊娠率(57.14%vs.58.65%)、流产率(13.50%vs.16.67%)方面均无统计学差异(P0.05)。≤6细胞组、7~9细胞组和≥10细胞组的临床妊娠率分别为49.30%、60.24%、52.5%;流产率为31.43%、11.5%、14.29%,各组间临床妊娠率无统计学差异(P0.05),≤6细胞组的流产率明显高于7~9细胞组(P0.05)。≤6细胞组优质囊胚的流产率(28%)仍明显高于7~9细胞组(P0.05)。结论经囊胚培养形成的囊胚的临床妊娠率和流产率与第3天胚胎碎片的多少关系不大;第3天6细胞以下胚胎形成的囊胚质量较差,即使形成优质囊胚其发生流产的风险也较高。     

形态学评分对胚胎发育潜能预测价值的探讨

目的探讨形态学评分对胚胎发育潜能预测价值。方法比较不同原核评分、不同卵裂球数及不同胚胎碎片的胚胎D5或D6囊胚形成情况。结果 D1天原核评分各组囊胚形成率及优质囊胚率无显著差异(P均0.05)。D3天不同碎片含量胚胎囊胚形成率有显著差异(P0.001)。S1组(碎片10-25%)、S2组(碎片25-50%)优质囊胚形成率显著高于S3组(碎片50%),P均0.001,S1与S2组相比,优质囊胚形成率则无显著差异(P0.05)。D3天C2组(7-9-cells)的胚胎囊胚形成率和优质囊胚率最高,与C1组(≤6-cells)相比差异有统计学意义(P0.001),但与C3组(≥10-cells)相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论 D1天原核形态学评分不能有效预测胚胎发育潜能,D3天胚胎碎片少于50%,细胞数大于6的胚胎具有较高的发育潜能。     

不同冷冻方法对人卵巢组织血管内皮生长因子表达及血管生成的影响

背景:人卵巢组织冷冻已成为一种保存生育能力的手段,卵巢组织移植后必须经过血管重建过程才能恢复血供,冷冻保存和复苏技术是影响移植后卵巢组织血管重建的关键。目的:比较新型玻璃化冷冻和慢速冷冻后人卵巢组织血管内皮生长因子表达情况及微血管密度,探讨不同冷冻方法对人卵巢组织血管重建的影响。方法:8份卵巢组织标本取自子宫内膜癌患者手术切除的正常卵巢组织,将每份卵巢皮质切成1.5mm×1.5mm×1.0mm大小的组织块共12块后,随机数字表法分为3组:对照组(新鲜组)、新型玻璃化冷冻组和慢速冷冻组。将新型玻璃化冷冻组卵巢组织块依次在含体积分数7.5%乙二醇+体积分数7.5%二甲基亚砜+体积分数20%胎牛血清的TCM-199培养液和含体积分数15%乙二醇+体积分数15%二甲基亚砜+0.5mol/L蔗糖的TCM-199培养液中平衡脱水,然后直接浸入液氮并装入冷冻管保存,解冻时按浓度梯度1.0,0.5,0.25mol/L蔗糖和含体积分数20%牛血清的TCM-199培养液依次洗脱冷冻保护剂。将慢速冷冻组人卵巢组织块放入盛有1mL冷冻液(含1.5mol/L二甲基亚砜+体积分数20%牛血清+0.1mol/L蔗糖的TCM-199培养液)的1.8mL冷冻管内平衡,然后放入程序冷冻仪中按设定程序进行冷冻。解冻时按浓度梯度1.0mol/L二甲基亚砜+0.1mol/L蔗糖、0.5mol/L二甲基亚砜+0.1mol/L蔗糖、0.25mol/L二甲基亚砜+0.1mol/L蔗糖和0.1mol/L蔗糖依次洗脱冷冻保护剂。冻融组及对照组均进行体外培养。免疫组织化学观察培养0,2,4,6d各组人卵巢组织血管内皮生长因子和CD34表达情况,并进行微血管计数。结果与结论:3组人卵巢组织培养前后间质细胞中均见血管内皮生长因子成斑片状弱表达,培养2d血管内皮生长因子表达均增加并达到峰值,培养4d均开始减弱,6d时进一步减弱;与慢速冷冻组相比,新型玻璃化冷冻组血管内皮生长因子表达更接近对照组。3组人卵巢组织培养2d微血管密度均增加并达到峰值,对照组和新型玻璃化冷冻组明显高于慢速冷冻组(P0.05);慢速冷冻组培养4d时微血管密度较培养2d时显著下降(P0.05);3组培养6d时微血管密度较培养2d时显著下降(P0.05)。与慢速冷冻法相比,新型玻璃化冷冻法能更好地保存人卵巢组织间质细胞和细胞外基质,对卵巢组织血管内皮生长因子表达及微血管生成的影响更少。     

人体外受精-胚胎移植中第3天胚胎发育潜能的评估

目的通过分析第3天(D3)胚胎的优质囊胚形成率,探讨形态学评估在胚胎发育潜能评估中的价值。方法选取接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不育症夫妇1 185对,其中女方年龄21~45岁,平均年龄30.88岁。对正常自然受精的8 184个D3胚胎进行囊胚培养,所有的培养都为25μL液滴单培养,对其形成的优质囊胚情况进行比较。结果 D3胚胎中8Ⅰ级胚胎发育形成优质囊胚概率最高(76.49%),明显优于<8细胞的Ⅰ级胚胎(35.10%),与9细胞(68.12%)、>9细胞(70.36%)的Ⅰ级胚胎相比,差异有显著统计学意义(P<0.01);同为8Ⅰ级优质胚胎在高龄人群(≥35岁)优质囊胚形成率明显低于年龄较低人群(<35岁),差异有显著统计学意义(P<0.01);高龄人群优质囊胚形成率8细胞以上Ⅰ级胚胎>8Ⅰ级胚胎>7Ⅰ级胚胎(68.29%vs 68.06%vs 40.82%),差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 8细胞Ⅰ级胚胎仍为卵裂期胚胎移植首选,但传统D3的7、8、9细胞的Ⅰ、Ⅱ级胚胎为优质胚胎的方法值得进一步商榷;高龄人群D3优质胚胎评估标准有待进一步阐明。     

玻璃化和程序化冻融人卵裂期胚胎结果分析

目的探讨冻融周期中玻璃化和程序化两种不同方法对人卵裂期胚胎的冷冻复苏效果。方法回顾性分析35例玻璃化冷冻复苏周期和123例程序化冷冻复苏周期资料,比较冷冻胚胎复苏后的胚胎存活率、完整性胚胎存活率,冻融前后的优质胚胎率,临床妊娠率、胚胎种植率。结果①玻璃化法与程序化法冷冻前优质胚胎率无显著性差异（70．83％和71．97％,P〉0．05）,冷冻后优质胚胎率差异显著（63．89％和47．75％,P〈0．05）,复苏后的胚胎存活率差异显著（95．83％和86．16％,P〈0．05）,完整性胚胎存活率差异极显著（90．28％和63．32％,P〈0．01）;②玻璃化法与程序化法临床妊娠率差异显著（48．57％和29．27％,P〈0．05）,种植率差异显著（31．88％和18．83％,P〈0．05）。结论在冻融人卵裂期胚胎的过程中,玻璃化优于程序化,可以更好的提高累积临床妊率。     

不同麻醉方法对高血压病人围手术期血浆NPY含量的影响

目的 :探讨了不同的麻醉方法对高血压病人围术期血浆中NPY的影响。方法 :择期上腹部手术的高血压病人 90例。随机分为硬腹外麻醉组、全麻组和联合组 ,每组 30例。分别于麻醉前、麻醉后 1 5分钟、手术后 2 0分钟和术终 1 0分钟测定患者血浆中NPY含量。结果 :在麻醉和手术后E组和G组病人的血压与NPY与麻醉前相比有显著性差异 (p <0 0 1 )。C组的血压和心率和NPY在手术开始后与组间相比亦有差异 (p <0 0 5 )。结论 :两种麻醉方法联合应用于高血压患者的上腹部手术 ,可有效地抑制手术引起的应激反应     

不同包埋剂对冷冻切片质量的影响

冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要手段,切片质量的好坏直接影响快速诊断的效果及科研的可靠性[1,2].影响冷冻切片质量因素较多,冷冻包埋剂是重要影响因素之一.     

玻璃化冻融人胚胎卵裂期与囊胚期移植临床应用的效果比较

目的比较人胚胎卵裂期与囊胚期在玻璃化冻融胚胎移植结局的应用效果。方法回顾性分析2013年度在我院接受冻融卵裂期胚胎移植的267个周期(A组)和2012年11月至2014年5月接受囊胚期移植的91个周期(B组)的相关资料,根据患者年龄、内膜厚度及促排方案、移植优质胚胎数,比较两组之间的临床妊娠率、种植率、流产率。结果B组较A组妊娠率、种植率、流产率妊娠均有显著性差异(65.94%vs40.07%,48.85%vs23.10%,6.67vs14.94%),P0.05。两组间在年龄、内膜厚度及促排方案结果有一致性也有不同性;单胚胎移植,优质胚胎B组较A组有显著性差异(80.0%VS50.0%),卵裂期:ET2枚优胚与ET3枚优胚结局(43.51%VS51.92%)比较无差异性;ET1个优囊较卵裂期ET3个优胚的临床妊娠率(50.0%VS51.92%)有一致性。结论玻璃化冻融胚胎移植,年龄、内膜厚度及促排方案、移植优质胚胎数对妊娠的成功起主要作用,囊胚移植能取得较高的临床妊娠率,移植2枚优质胚胎在卵裂期与囊胚期均能获得较好的临床结局。