HIF-1α、VEGF及AMH在多囊卵巢综合征中的表达及其临床意义

  目的  研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和抗苗勒管激素(AMH)在多囊卵巢综合征(PCOS)中的表达水平,探讨其临床意义。  方法  选择2018年6月—2020年6月湖州市中心医院收治的130例PCOS患者为观察组,同期100例健康女性为对照组,采用免疫化学发光法检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)、孕酮(P)和雌二醇(E2)水平,酶联免疫吸附法检测血清HIF-1α、VEGF和AMH水平,分析HIF-1α、VEGF和AMH的相关性及对PCOS的预测价值。  结果  观察组患者的FSH[(5.81±0.92)mU/mL]、LH[(10.54±0.72)mU/mL]、PRL[(398.55±80.47)ng/mL]、T[(7.76±2.27)nmol/L]、P[(5.29±0.92)nmol/L]、E2[(118.63±42.78)pmol/L]显著高于对照组(t值为3.179、12.150、4.284、11.223、43.724、3.955,均P＜0.05)。观察组患者HIF-1α[(163.12±25.17)pg/L]、VEGF[(257.03±30.45)pg/L]和AMH[(7.29±1.02)pg/L]显著高于对照组(t值为42.592、31.612、47.194,均P < 0.05)。HIF-1α与VEGF、AMH水平均呈正相关(r=0.811、0.848、0.762,均P < 0.05)。血清HIF-1α、VEGF及AMH曲线下面积分别为0.764、0.731、0.742,95%CI分别为0.681~0.852、0.634~0.819、0.649~0.827。  结论  PCOS患者HIF-1α、VEGF及AMH水平显著升高,对PCOS具有较高的预测价值,可作为临床诊断的指标。      

类风湿性关节炎患者血清IL-6、TNF-α、CRP的水平变化及意义

目的 探讨类风湿性关节炎患者血清IL-6、TNF-α、CRP的水平变化及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫比浊法对74例RA患者(RA活动期组48例、RA非活动期组26例)血清IL-6、TNF-α、CRP水平进行检测,并与30例正常对照组的健康受试者进行比较分析.结果 RA组患者血清IL-6 [(8.03±0.98)pg/L]、TNF-α [(7.54±0.82)pg/L]、CRP[(11.40±1.25)mg/L]等检测指标水平显著高于正常对照组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05);RA活动期组患者血清IL-6[(10.42±1.51 )pg/L]、TNF-α[(10.32±1.34)pg/L]、CRP[(15.02±1.8 1)mg/L]等检测指标水平显著高于非活动期组,差异亦均具有统计学意义(均P＜0.05);RA患者血清IL-6、TNF-α水平呈正性显著相关(r=0.61,P＜0.05); IL-6、TNF-α.与CRP水平呈正性显著相关(r=0.52,r=0.71,均P＜0.05).结论 检测RA患者血清IL-6、TNF-α与CRP水平对观察其病情变化具有重重的临床价值.     

心肺复苏后大鼠脑组织精脒/精胺-N1-乙酰基转移酶2与HIF-1α表达的动态变化规律

目的研究心肺复苏后大鼠脑组织中精脒/精胺-N1-乙酰基转移酶2(spermidine/spermine-N1-acetyltrans-ferase2,SSAT2)与缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)表达的动态变化规律,分析二者相关性。方法 88只成年SD大鼠随机数字表法分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=40)和心肺复苏组(n=40)。其中假手术组和心肺复苏组再分为1、8、24、48、72 h 5个亚组,每亚组8只。采用RT-PCR、Western blot法分别检测脑组织中HIF-1αmRNA和HIF-1α、SSAT2蛋白的表达。结果 SSAT2的表达在复苏后明显降低,1 h[(0.314±0.027),P<0.01]表达最低,随后逐渐升高(P<0.01),至72 h[(0.731±0.024),P>0.05]时回升到正常对照组水平(0.736±0.02),而假手术组SSAT2的表达与正常对照组相比无显著变化(P>0.05)。HIF-1αmRNA的表达在复苏后1 h[(0.245±0.021),P<0.05]时降低,但8 h[(0.430±0.019),P<0.05]时明显增强,后24 h[(0.387±0.018),P<0.05]、48 h[(0.385±0.019),P<0.05]下降,至72 h时回落到正常对照组水平(0.343±0.022);但HIF-1α蛋白在复苏后1 h[(0.755±0.012),P<0.01]显著增高,随后逐渐下降(P<0.01),至72 h[(0.033±0.002),P<0.01]时仅轻度增高,而在正常对照组和假手术组未能检测出HIF-1α表达。SSAT2表达与HIF-1α表达在复苏后72 h内呈负性相关(r=-0.945,P<0.01),SSAT2表达与HIF-1αmRNA表达在复苏后8～48 h呈负相关(r=-0.614,P=0.01)。结论在心肺复苏后一定时间内,大鼠脑组织SSAT2表达减弱,HIF-1αmRNA及蛋白表达增加,两者呈负相关表达,提示SSAT2对HIF-1α蛋白、HIF-1αmRNA可能起负性调节作用。     

吸烟对2型糖尿病患者血清细胞黏附分子水平和氧化应激的影响

目的 探讨吸烟对男性2型糖尿病(T2DM)患者血清细胞黏附分子(CAM)水平和氧化应激的影响.方法 选择112例男性T2DM患者,其中吸烟T2DM患者63例,非吸烟T2DM患者49例,另选择30例男性非吸烟健康者为对照组.检测3组受检者血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、E-选择素、丙二醛水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 吸烟T2DM组患者血清丙二醛、sICAM-1、sVCAM-1水平及SOD活性[分别为(8.2±3.6)、(1 033±201)μg/L、(2.2±1.5)μg/L、(71±10)U/ml]与对照组[分别为(4.2±2.4)μmol/L、(579±112)μg/L、(1.4±0.9)μg/L和(105±16)U/ml]及非吸烟T2DM组[分别为(6.5±4.9)μmol/L、(899±121)μg/L、(1.4±0.8)μg/L和(82±11)U/ml]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).吸烟T2DM患者和非吸烟T2DM患者E-选择素水平[(62±28)μg/L和(59±19)μg/L]与对照组[(41±15)μg/L]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).重度吸烟T2DM组患者血清sICAM-1、丙二醛水平[分别为(1 119±188)μg/L、(9.5±3.4)μmol/L]及SOD活性[(61±10)U/ml]与非吸烟T2DM组[分别为(899±121)μg/L、(6.5±4.9)μmol/L和(82±11)U/ml]、轻度吸烟T2DM组[分别为(938±137)μg/L、(7.6±2.4)μmol/L和(77±9)U/ml]、中度吸烟T2DM组[分别为(986±151)μg/L、(8.3±2.5)μmol/L和(67±12)U/ml]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);中度吸烟T2DM组患者血清sICAM-1、丙二醛水平及SOD活性与非吸烟T2DM组、轻度吸烟T2DM组比较,差异亦均有统计学意义(P＜0.05).吸烟T2DM患者血清sICAM-1水平与收缩压、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及丙二醛、E-选择素水平呈正相关(r值分别为0.36、0.29、0.38、0.28,P＜0.05),与SOD活性呈负相关(r=-0.25,P＜0.05);血清sVCAM-1水平与收缩压、HOMA-IR、丙二醛水平呈正相关(r值分别为0.25、0.28、0.32,P＜0.05);E-选择素水平与HOMA-IR、sICAM-1、丙二醛水平呈正相关(r值分别为0.31、0.28、0.30,P＜0.05),与SOD活性呈负相关(r=-0.22,P＜0.05).结论 吸烟可增加男性T2DM患者血清CAM水平及氧化应激,且吸烟量与sICAM-1和氧化应激水平相关.     

高同型半胱氨酸血症与急性脑梗死患者载脂蛋白(a)水平相关性分析

目的 探讨高同型半胱氨酸血症与急性脑梗死患者载脂蛋白(a)水平相关性.方法 选取101例急性脑梗死患者作为试验组,选取同期体检的非脑梗死101例作为对照组,对比分析2组间同型半胱氨酸和载脂蛋白(a)的差异及其两者之间的相关性.结果 试验组同型半胱氨酸水平[(18.62±10.11)μmol/L]显著高于对照组[(12.01±2.92) μmol/L] (P＜0.01).试验组载脂蛋白(a)水平[(1.18±0.19) g/L]显著低于对照组[(1.35±0.15)g/L](P＜0.01).同型半胱氨酸水平与载脂蛋白(a)水平呈负相关(r=-0.402,P＜0.05).结论 急性脑梗死与同型半胱氨酸升高和载脂蛋白(a)下降密切相关,同时同型半胱氨酸的上升与载脂蛋白(a)水平密切相关,两者联合检测对预后效果观测具有重要意义.     

糖尿病肾病患者血TNF-α和PAF的检测及其临床意义

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血小板活化因子(PAF)在糖尿病肾病诊治中的应用价值.方法采用生物活性法及ELISA双抗体酶联免疫吸附法,测定30例糖尿病无肾病患者和35例糖尿病肾病患者和31例正常对照组血浆PAF及血清TNF-α的水平.结果TNF-α及PAF水平,糖尿病肾病患者组[(200.18±34.38)ng/L,(2.17±0.31)μg/L]与糖尿病无肾病患者[(144.27±18.74)ng/L,(1.80±0.21)μg/L]均较正常对照组[(81.40±5.81)ng/L,(1.22±0.13)μg/L]明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01),糖尿病肾病组较糖尿病无肾病组高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论血清TNF-α和血浆PAF在糖尿病肾病患者中显著升高,提示两者在糖尿病肾病进程中起着重要作用,其测定可能有助于糖尿病及其并发症的早期诊断和病情的监测.     

无症状性脑梗死患者血清脂蛋白(α)水平与纤溶活性检测

目的:探讨无症状性脑梗死(SCI)患者血清脂蛋白(α)[Lp(α)]水平与纤溶活性的关系.方法:采用Olimpus-AU 5400全自动生化分析仪测定53例SCI患者和55例健康者(对照组)血清Lp(α)水平,用发色底物法检测血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)活性,并对SCI患者的血清Lp(α)水平与血浆t-PA和PAI活性进行相关分析.结果:SCI组血清Lp(α)水平[(238.48±48.76)mg/L]高于对照组[(198.36±38.42)mg/L,t=4.759,P＜0.05];SCI组t-PA活性[(0.11±0.01)IU/mL]低于对照组[(0.49±0.12)IU/mL,t=-22.973,P＜0.05],而PAI活性[(0.86±0.22)AU/mL]高于对照组[(0.48±0.10)AU/mL,t=11.626,P＜0.05].SCI组血清Lp(α)水平与t-PA活性呈负相关(r=-0.676,P＜0.05),与PAI活性呈正相关(r=0.813,P＜0.05).结论:血清Lp(α)水平升高是SCI重要的危险因素;其可能通过降低t-PA的活性和(或)增强PAI的活性,干扰纤溶系统的平衡,参与SCI的形成.     

首次发病精神分裂症和抑郁症患者的血浆瘦素及总胆固醇水平的研究

目的 比较精神分裂症、抑郁症患者血浆瘦素及总胆固醇水平.方法 48例首发精神分裂症患者,用简明精神病评定量表(BPRS)、阳性和阴性症状量表(Positive and Negative Syndrome scale,PANSS)量表评定,45例首发抑郁症用汉密顿抑郁量表(HAMD-24)进行评定,32例体检职工为对照组,所有人组对象服药前测定体质量指数、血浆瘦素和总胆固醇.结果 (1)正常对照组[(4.8±0.9)mmol/L]总胆固醇均高于抑郁症组[(3.7±1.0)mmol/L]及精神分裂症组[(3.4±0.9)mmol/L;P＜0.05～0.01],而抑郁症组与精神分裂症组之间的差异无显著性(P＞0.05);正常对照组血浆瘦索[(13.4±6.7)g/L]高于抑郁症组[(9.6±4.2)g/L]及精神分裂症组[(5.8±3.4)g/L;P＜0.05～0.01],抑郁症组高于精神分裂症组(P＜0.05).(2)3组的血浆瘦素及总胆固醇均与BMI呈正相关(r=0.48～0.63;P＜0.01);精神分裂症组的血浆瘦素和总胆固醇与PANSS阳性分、BPRS分均呈显著负相关(r=-0.38～-0.50;均P＜0.01);抑郁症组的血浆瘦素、总胆固醇与HAMD分呈显著负相关(r=-0.37～-0.41;P＜0.05～0.01).结论 精神分裂症和抑郁症患者的血浆瘦素及总胆固醇水平的降低独立于药物治疗和BMI改变之外,其在精神障碍中的重要病理生理学机制值得进一步深入探讨.     

脂多糖对人单核细胞株THP-1细胞HIF-1α及其靶基因GLUT-1表达的影响

目的 研究脂多糖(LPS)对人单核细胞株THP-1细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其靶基因葡萄糖转运载体-1(GLUT-1)表达的影响.方法 以1 μg/mL LPS分别处理体外常规培养的THP-1细胞0、2、4、6、8 h.采用Western blotting检测THP-1细胞HIF-1α蛋白表达,RT-PCR技术检测HIF-1α mRNA与GLUT-1 mRNA表达.以不同浓度的LPS(0、0.01、0.1、1 μg/mL)分别刺激THP-1细胞6 h,Western blotting检测HIF-1α蛋白表达.结果 1 μg/mL LPS作用2 h时,THP-1细胞的HIF-1α蛋白表达开始增加,4 h时显著增加(P＜0.05),6～8 h时达高峰(P＜0.01).0.01 μg/mL LPS刺激6 h,THP-1细胞的HIF-1α蛋白表达较对照组明显升高(P＜0.05);当0.1 μg/mL LPS和1 μg/mL LPS刺激6 h时,HIF-1α蛋白表达更高,与对照组相比差异有高度统计学意义(P＜0.01).提示LPS能够诱导THP-1细胞内HIF-1α蛋白表达,并且呈时间和浓度依赖性.1 μg/mL LPS作用2、4、6、8 h均能上调THP-1细胞HIF-1α与GLUT-1 mRNA水平(P＜0.01),且随时间的延长表达逐渐增加.结论 LPS能够促进人单核细胞株THP-1细胞HIF-1α及其靶基因GLUT-1的表达.     

代谢综合征氧化应激与血清脂联素水平的关系

目的 分析代谢综合征(MS)患者氧化应激状态与血清脂联素水平的关系.方法 依照纳入排除标准收集MS患者126例(MS组),对照组收集年龄性别匹配,血脂、血糖、血压以及肝肾功能正常的健康体检者98例.测定MS组和对照组总脂联素(Total-Ad)、高分子量脂联素(HMW-Ad)以及氧化应激指标[还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和丙二醛(MDA)]的含量.比较对照组和MS组各项指标差异;并用多重线性回归模型分析MS组和对照组中脂联素与氧化应激指标的相关性.结果 MS组与对照组比较,Total-Ad[(3.51±0.83) μg/mL vs (4.34±0.98) μg/mL]、HMW-Ad[(1.32±0.42) μg/mL vs (2.15±0.85) μg/mL]和GSH[(1.15±0.54) μmol/L vs (1.96±0.62) μmol/L]水平降低(P均＜0.01),GSSG[(1.20±0.47) μmol/L vs (0.90±0.23) μmol/L]和MDA[(6.92±1.50) nmol/L vs (4.05±0.65) nmol/L]水平升高(P均＜0.05);在MS组脂联素与各项参数建立的多重线性回归模型中,Total-Ad和HMW-Ad与氧化应激指标中的GSH呈正相关性,偏相关系数分别为0.587和0.480(P＜0.05),与MDA呈负相关性,偏相关系数分别为-0.222和-0.389(P＜0.05).对照组的多重线性回归模型分析得出氧化应激指标与脂联素水平无相关性(P＞0.05).结论 MS患者伴随氧化应激,脂联素与GSH的相关性大于其余氧化应激指标.MS中低脂联素水平和氧化应激密切相关.     

抑郁症患者帕罗西汀治疗前后血清细胞因子C-反应蛋白和锌水平变化的研究

目的探讨IL-6、IL-1β、TNF-α、CRP、锌在抑郁症病理生理机制中的作用.方法抑郁症患者33例,符合CCMD-3和ICD-10诊断标准;正常对照组23例.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组血清IL-6、IL-1β、TNF-α的水平,同时采用散射比浊法测定CRP,化学比色法测定锌水平.于治疗前后评定HAMD,分析抑郁症病情严重程度、病程、发病起始年龄、性别、HAMD总分及其因子分与血清IL-6、IL-1β、TNF-α、CRP、锌水平的关系.结果1.抑郁症组治疗前血清IL-6[(8.90±5.63)pg/ml]、TNF-α[(13.57±7.63)pg/ml]、CRP[(6.18±5.68)mg/L]水平显著高于正常对照组[(IL-6:(5.95±3.66)pg/ml,TNF-α:[12.87±5.34)pg/ml],CRP:[(2.50±1.44)mg/L],血清锌水平[(11.88±2.37)mmol/L]显著低于正常对照组[(13.60±1.90)mmol/L];抑郁症组血清锌水平[(11.19±2.21)mmol/L]女性患者显著低于男性患者(14.04±1.48)μmol/L;2.抑郁症组治疗前血清锌与HAMD中迟缓因子分有显著的正相关关系(r=0.351,P＜0.05);3.帕罗西汀治疗后血清IL-6、TNF-α、CRP水平较治疗前显著下降(P＜0.05),血清锌水平较治疗前显著升高(P＜0.01).结论1.血清IL-6、TNF-α、CRP水平升高可能是抑郁症的免疫学标志之一;2.锌可能对抑郁症的发病有一定作用;3.帕罗西汀可能对IL-6、TNF-α、CRP、锌有一定影响.     

加强随访管理对改善社区6~12月龄婴儿轻度贫血的效果研究

目的探讨加强随访管理对改善社区6~12月龄婴儿轻度贫血的效果。方法2016年4月至2017年1月,选择在常州市兰陵街道社区卫生服务中心儿保门诊接受系统管理的6~12月龄轻度贫血患儿84例为研究对象,完成研究者75例,简单随机法分为试验组(36例)和对照组(39例)。实验组给予加强随访管理,对照组给予常规系统管理,随访2和6个月,比较两组血红蛋白(Hb)值、Hb变化值、贫血纠正率、结案率,以及两组铁剂治疗患儿的服药情况、Hb值。结果随访2个月时,试验组Hb值[(113.50±5.40)g/L比(109.13±7.91)g/L,t=2.772,P=0.007]、Hb变化值[(13.22±4.56)g/L比(7.54±6.75)g/L,t=4.240,P<0.001]、贫血纠正率[77.8%(28/36)比46.2%(18/39),χ^2=6.617,P=0.010]均显著高于对照组;随访6个月时,试验组Hb值[(116.22±3.72)g/L比(112.23±5.90)g/L,t=3.471,P=0.001]、贫血纠正率[88.9%(32/36)比66.7%(26/39),χ^2=4.082,P=0.043]及结案率[77.8%(28/36)比41.0%(16/39),χ^2=8.967,P=0.003]均显著高于对照组。对接受铁剂治疗的患儿,随访2个月时,试验组规范用药比例显著高于对照组(14/14比4/8,χ^2=5.525,P=0.019);随访2和6个月时,试验组Hb值均显著高于对照组[随访2个月时:(109.93±3.51)g/L比(102.88±2.88)g/L,t=4.820,P<0.001;随访6个月时:(114.50±4.00)g/L比(108.55±5.04)g/L,t=3.297,P=0.003]。结论提示加强随访管理可显著提高社区6~12月龄轻度贫血患儿的Hb水平、贫血纠正率和结案率。     

首发精神分裂症患者治疗前后血清游离脂肪酸和血脂水平变化及临床意义

目的 探讨首发精神分裂症患者治疗前后游离脂肪酸及血脂水平变化及临床意义.方法 选取2013年1月～2014年1月于淮安市第三人民医院诊治的首发精神分裂症患者40例为病例组,选取同期37例健康人为对照组.检测并比较精神分裂症患者治疗前后及健康人血清游离脂肪酸及血脂水平.结果 病例组治疗前游离脂肪酸水平[(0.88±0.54) mmol/L]显著高于对照组[(0.60±0.21)mmol/L](P=0.004),校正年龄、性别后差异仍有统计学意义(P=0.005);治疗前总胆固醇[(3.80± 1.14) mmol/L]显著低于对照组[(4.49±0.78)mmol/L] (P=0.003);治疗前低密度脂蛋白胆同醇[(1.75±0.61) mmol/L]显著低于对照组[(2.19±0.61)mmol/L](P=0.002);治疗前载脂蛋白B[(0.53±0.15)g/L]低于对照组[(0.81±0.19)g/L](P＜ 0.001).病例组治疗后与治疗前比较,游离脂肪酸水平显著降低[(0.61±0.31)mmol/L](P=0.003).进一步分析发现,校正年龄、性别和病程后,低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白A1变化与游离脂肪酸的变化存在显著线性关系,标化回归系数分别为0.389(P=0.019)、0.380(P=0.021)、0.364(P=0.030).结论 首发精神分裂症患者治疗前血清游离脂肪酸高于正常人群,经治疗后显著降低,并受血脂水平变化影响.     

Necrostain-1对缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元caspase非依赖性死亡的保护作用

目的 研究低氧诱导因子(HIF)-1α是否介导缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元caspase非依赖性细胞死亡,Necrostain-1( Nec-1)能否抑制其表达起到保护作用.方法 (1)原代皮质神经元培养14d,予caspase抑制剂z-VAD.fmk(z-VAD)预保护30 min,同时分别予Nec-1 0.1,1,5,10,25,50 μmol/L,缺糖缺氧(OGD)2h、再灌注12h,通过LDH测细胞死亡情况;(2)予z-VAD作用后30 min后,缺糖缺氧(OGD)2h再灌注0,2,6,12,24,48 h,Westernblot检测HIF-1α蛋白表达情况,RT-PCR测HIF-1αRNA表达;(3)予z-VAD和Nec-125 μmol/L作用30min,OGD2h、再灌注12h后检测HIF-1α蛋白及RNA表达情况.结果 (1)予Nec-1 5μmol/L(6.97±0.06)后与未加Nec-1组(14.23 ±0.08)比较LDH水平明显下降(P＜0.05),Nec-1 25 μmol/L(2.21 ±0.05)时LDH降至正常水平与正常组(1.03±0.03)比较,P＞0.05);(2)缺糖缺氧2h再灌注后HIF-1α蛋白表达增加,再灌注2h后(0.57±0.09)与正常组(0.24±0.01)相比差异有统计学意义(P＜0.05),再灌注12h(0.91 ±0.08)达高峰,HIF-1 αRNA表达无变化(P＞0.05);(3)与未予Nec-1组(0.83±0.03)相比,Nec-1组(0.32±0.04) HIF-1 α蛋白表达明显降低(P＜0.05),HIF-1αRNA表达无变化(P＞0.05).结论 HIF-1α介导了缺氧缺氧诱导的原代皮质神经元caspase非依赖性死亡,Nec-1能够抑制HIF-1α的表达起到保护作用.     

乙型肝炎肝硬化合并肝性脑病患者血清LPS、TNF-α和IL-6的表达变化及意义

目的检测乙型肝炎肝硬化合并肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)患者血清中内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6水平,探讨其表达变化及意义。方法选择2014年8月~2016年8月在嘉兴市第一医院住院的患者90例,将68例乙肝肝硬化合并肝性脑病的患者设为A组,其中25例临床分级0级为A1组,25例1~2级为A2组,18例3~4级为A3组,22例乙肝肝硬化患者为B组,20例健康体检者为正常对照组(C组)。检测研究对象血清中LPS、TNF-α和IL-6水平,并分析其与TBil、ALT、AST、ALB、血氨的相关性。结果 A组患者血氨浓度较B组、C组升高,差异有统计学意义(P0.05)。血清LPS[(266.6±85.2)ng/L]、TNF-α[(41.9±7.0)μg/L]、IL-6[(48.9±10.3)ng/L]水平均明显高于B组[LPS:(121.4±24.1)ng/L;TNF-α:(28.3±4.6)μg/L;IL-6:(32.6±8.5)ng/L]和C组[LPS:(24.2±5.1)ng/L;TNF-α:(19.0±3.4)μg/L;IL-6:(16.8±4.9)ng/L],差异有统计学意义(F=112.6、127.05、103.24,P0.05)。A1、A2、A3组LPS、TNF-α和IL-6、血氨水平逐渐升高,各组相比,差异有统计学意义(F=87.94、25.39、26.95、11.67,P0.05)。血清LPS、TNF-α和IL-6水平均与血氨浓度呈正相关(r=0.267、0.322、0.311,P0.05),与TBil、ALT、AST、ALB无明显相关性(P0.05)。结论 LPS、TNF-α和IL-6是HE发生发展中重要的炎症介质,参与HE的免疫调节过程,分析其水平及变化可能有助于HE的病情判断及预后评估。     

艾芬地尔鞘内注射对骨癌痛模型小鼠痛行为的改善作用

目的 在小鼠骨癌痛模型上观察鞘内注射N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)拮抗剂艾芬地尔的镇痛效果.方法 将含2×105个纤维肉瘤细胞NCTC 2472的最小必需培养基(α-MEM)注射到C3H/HeJ小鼠右侧股骨远端骨髓腔,制作骨癌痛模型(T组).同时设假手术组(S组,n =10),注入不含肿瘤细胞的α-MEM.所有小鼠均于接种前1 d,接种后第3,5,7,10,14天检测痛行为学指标,包括自发性抬足次数、机械痛缩足阈值(PWMT)和热痛缩足潜伏期(PWTL).骨癌痛模型制作成功的T组小鼠在接种后第14天,进一步分为艾芬地尔 2.5 μg、5.0 μg、10.0 μg组(I1、I2、I3 组,n =10)和对照组(C组,n =10),I1～I3组鞘内注射相应剂量的艾芬地尔,C组及S组给予溶媒,注药体积均为5.0 μl,鞘内注射后2 h、12 h、24 h再进行行为学检测.结果 与S组[(2.44±0.79)次]和术前基础值[(2.20±0.85)次]相比,肿瘤细胞接种后第14天T组小鼠自发性抬足[(13.16±1.78)次]显著增多( P ＜0.05),PWMT[(0.47±0.19)g]较S组[(1.70±0.31)g]和基础值[(1.83±0.23)g]降低( P ＜0.05),PWTL[(10.01±1.42)s]较S组[(17.62±1.07)s]和基础值[(18.32±1.57)s]缩短( P ＜0.05);给药后2 h、12 h,与C组及14 d 给药前比较,I2和I3组自发性抬足次数减少( P ＜0.05),PWMT增高( P ＜0.05),PWTL延长( P ＜0.05),且I3组比I2组对痛行为学的改善更显著( P ＜0.05);I1组给药后痛行为学无明显变化( P ＞0.05).结论 鞘内注射艾芬地尔有效改善骨癌痛小鼠的痛行为学反应.     

井下矿工高血压病患者血浆血管紧张素Ⅱ和皮质醇水平的相关性分析

目的通过对煤矿工人血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和皮质醇(CORT)水平的分析,探讨井下作业对高血压病矿工的影响及危害.方法对地面与井下作业的煤矿工人进行问卷调查和血压、身高、体重的测量,用放射免疫测定法测定研究对象的血浆AngⅡ和CORT水平.结果高血压病组血浆AngⅡ[(91.7±50.6)ng/L]和CORT[(328.2±145.5)μg/L]水平显著高于非高血压病组血浆AngⅡ[(57.2±24.8)ng/L]和CORT[(283.2±131.8)μg/L]水平(均P＜0.01),两组血浆AngⅡ水平均与CORT水平呈显著正相关(r=0.511,P＜0.01和r=0.605,P＜0.01);矿工平均动脉血压与血浆AngⅡ和CORT水平均呈显著正相关(r=0.412,P＜0.01和r=0.309,P＜0.01).在高血压病矿工中,井下作业组血浆AngⅡ和CORT水平显著高于地面作业组(均P＜0.01),且井下作业组中又以安装维修组最高;高盐饮食组血浆AngⅡ和CORT水平显著高于正常饮食组(均P＜0.01),而年龄、工龄、家族史、体重指数、吸烟和酗酒等不良行为对高血压病矿工血浆AngⅡ和CORT水平均无显著性影响.结论煤矿井下作业可能作为一种应激源,在高盐饮食协同作用下,通过AngⅡ和CORT介导引发矿工高血压病的发病,从而对高血压病矿工具有危害性.     

肿瘤坏死因子α诱导的胰岛素抵抗对小鼠脂肪甘油三酯水解酶的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的胰岛素抵抗(IR)对糖脂代谢及脂肪甘油三酯水解酶(ATGL)的影响.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组,分别给予腹腔注射TNF-α6μg·kg-1·d-1(TNF组,20只)和等体积生理盐水(NC组,20只)共7 d.采用2-脱氧-3H葡萄糖(2-DOG)为示踪剂的扩展胰岛素钳夹技术评价小鼠胰岛素敏感性和糖代谢变化,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法分别测定代谢相关基因ATGL、激素敏感性脂酶(HSL)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)等组织mRNA或血浆蛋白表达水平的变化.结果 TNF-α处理后,小鼠空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素和游离脂肪酸(FFA)水平均增高.在胰岛素钳夹术中,TNF组血浆胰岛素水平明显高于NC组[(341.7±17.7)vB(84.7±5.5)mU/L,P＜0.01],胰岛素对FFA的抑制作用明显障碍[FFA,TNF组:(0.82±0.03)mmol/L,NC组:(0.43±0.07)mmol/L,P＜0.01].TNF组葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组[(39.1±2.3)vs(54.2±2.2)mg·kg-1·min-1,P＜0.01],骨骼肌葡萄糖摄取率(MGU)也明显低于NC组[(15.8±1.7)vs(20.9±2.5)μmol·100 g-1·min-1,P＜0.01].TNF组脂肪组织ATGL mRNA表达明显低于对照组(0.85±0.09 vs 1.37±0.12,P＜0.01),ATGL蛋白水平也明显低于对照组(0.53±0.03 vs 0.65±0.05,P＜0.05).TNF组小鼠脂肪组织PPARγ/mRNA表达明显低于对照组(0.83±0.07 vs 1.07±0.07,P＜0.05).结论 在TNF-α诱导的IR中,ATGL在脂代谢相关通路中起着调控作用.     

Disulfiram联合Cu通过上调TNF-α表达及蓄积ROS诱导白血病干细胞凋亡

目的 探讨Disulfiram联合Cu(DS/Cu)诱导急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)细胞凋亡及其相关分子机制.方法 磁珠筛选CD34+ CD38-的KG1 α细胞作为AML干细胞,流式细胞术检测空白对照组、DS单药组(5μmol/L)、DS/Cu组(5μmol/L/0.5μmol/L)、DS/Cu+NAC组(5μmol/L/0.5 μmol/L/10 mmol/L)的AML干细胞24 h后凋亡比率及ROS水平;qRT-PCR检测上述各组TNF-α、CD40、TNFRSF11B、TNFRSF1B、HRK凋亡相关基因mRNA表达水平;Western blot检测各组处理后TNF-α的蛋白表达水平;予以中和抗体TNF-α mAb(2μg/mL)和对照抗体IgG(2 μg/mL)预处理2h后,流式细胞术检测空白对照组、DS/Cu组、TNF-α mAb组、TNF-α mAb+DS/Cu组、IgG组及IgG+ DS/Cu组的AML干细胞24 h后的ROS水平.结果 予以DS或DS/Cu处理CD34+ CD38-KG1α细胞后,细胞凋亡率由空白对照组的(6.65±0.64)％分别上升至(11.87±1.30)％、(27.43±1.65)％,差异均具有显著性统计学意义(P =0.01和P＜0.01);CD34+ CD38-KG1 α细胞ROS也分别上升了(1.39±0.12)倍和(2.81±0.11)倍,差异也具有统计学意义(P＜0.03和P＜0.01),并且DS/Cu组比DS组更明显(P=0.00);应用NAC抑制DS/Cu诱导ROS蓄积后,细胞凋亡率由(27.43±1.65)％下降到(12.37±0.85)％(P＜0.01).qRT-PCR结果显示DS及DS/Cu均上调TNF-α、CD40、TNFRSF1B、TNFRSF11B、HRK凋亡相关基因的mRNA水平(P＜0.05),且DS/Cu组较DS组上调的更明显(P＜0.05),但是予以NAC预处理2h后,仅TNF-α基因水平依然高表达(P=0.73),而CD40、TNFRSF11B、TNFRSF1B、HRK基因水平均明显下调(P＜0.05).为进一步证实TNF-α作用,分别予以TNF-α mAb(2 μg/mL)或IgG(2μg/mL)预处理2h后,TNF-α mAb+DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS相对变化率由(2.78±0.25)倍下降到(1.28±0.17)倍(P=0.00),而IgG+ DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS相对变化率无显著性差异(P=0.23),TNF-α mAb及IgG组相比空白对照组的ROS水平无显著性差异(P=0.09和P=0.50).结论 DS/Cu可通过上调TNF-α表达及蓄积ROS诱导AML干细胞凋亡.     

孤独症谱系障碍儿童血清生物学因子水平分析

目的 分析孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)儿童血清铜蓝蛋白(ceruloplasmin,Cp)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、叶酸、血氨(blood ammonia,BA)、铁蛋白(serum ferritin,SF)、乳酸(lactic acid、LA)、微量元素(Fe、Mg、Ca、Zn、Cu、Pd、Cd)及维生素(VA、VE、VD)水平,为ASD儿童的预防和诊治提供理论依据.方法 选取2020年1月至2021年5月郑州大学第三附属医院确诊为ASD的184例儿童为ASD组,在儿童发育行为科就诊并最终排除神经发育障碍性疾病的96例儿童为对照组.采用电化学发光免疫分析法测定叶酸、VB12、SF和VD水平,终点法测定BA水平,色谱分析法测定VA、VE水平,酶循环法测定Hcy水平,免疫比浊法测定Cp水平,酶法测定LA水平,原子吸收法测定微量元素水平.结果 ASD组儿童的血清Fe[(6.78±0.89) mmol/L比(8.04±0.86) mmol/L]、Mg[(1.56±0.20) mmol/L比(1.61±0.18) mmol/L]、Cu[(15.32±2.68) μmol/L比(18.91±2.77) μmol/L]、叶酸[(26.49±8.15) nmol/L比(33.35±5.40) nmol/L]、VA[0.33(0.29,0.38) mg/L比0.38(0.33,0.41) mg/L]、VD[(43.79±10.85) mg/L比(55.16±3.67) mg/L]和Cp[(304.85±37.11) mg/L比(337.31±37.71) mg/L]水平低于对照组.Ca[(1.79±0.16) mmol/L比(1.56±0.18) mmol/L]、VB12[(722.42±63.53) pmol/L比(700.02±77.45) pmol/L]、BA[(28.40±10.68) μmol/L比(22.98±3.39)μmol/L]、SF[(28.75±11.08) μg/L比(26.18±7.06) μg/L]、Hcy[(7.42±0.46) μmol/L比(6.59±0.61) μmol/L]、VE[(9.27±1.07) mg/L比(8.64±0.99)mg/L]和Pb[27.04(17.40,39.87) μg/L比18.51(7.36,34.20) μg/L]水平高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).将单因素筛查有意义的因子纳入二元logistic回归分析显示,Cp(OR=0.988,P=0.037)、Fe(OR=0.124,P=0.000)为ASD的保护性因素,VE(OR=1.704,P=0.008)、BA(OR=1.091,P=0.002)、Ca(OR=65.034,P=0.001)为ASD的独立危险因素.结论 与正常儿童相比,ASD儿童Fe、Mg、Cu、叶酸、VA、VD和Cp水平更低,Ca、VB12、BA、SF、Hcy、VE和Pb水平更高;导致ASD发生的因素并不单一,可能有多种因素参与ASD的发病过程.因此寻找ASD的病因,建立有效的预警机制是治疗ASD的根本.