HPLC法同时测定对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和维生素C的含量

目的：建立同一色谱条件下对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和维生素C含量的HPLC测定法。方法：采用高效液相色谱法,以Capcell-pak C18为色谱柱,流动相为乙晴/庚烷磺酸钠溶液缓冲液（30/70）,检测波长为210nm,流速1.0ml.min-1,采用外标法计算含量。结果：对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和维生素C的分离度好,乙酰氨基酚在15mg.100ml-1～120mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9999）;咖啡因在6.25mg.100ml-1～50mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9994）;盐酸麻黄碱在6.25mg.100ml-1～50mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9998）;维生素C在40mg.100ml-1～320mg.100ml-1范围内线性关系良好（r=0.9994）。实验的精确度和稳定性良好,样品回收率高。结论：本方法操作简单,结果准确,可以有效地控制该类制剂的质量。     

双价志贺菌苗滴鼻免疫对小鼠NALT、GALT和脾淋巴细胞的影响

本文是探讨滴鼻免疫对NALT、GALT和脾淋巴细胞中特异性抗体分泌细胞及淋巴细胞表型变化的影响。将Balb/c小鼠随机分为 3组 ,每组 2 0只。FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2周 ,3次免疫后 7d活杀 ,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP及MLN淋巴细胞 ,采用BA ELISPOT法检测其中特异性抗福氏、宋内LPSIgA和IgG分泌细胞 ;采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化。结果是两株菌苗经鼻内免疫都诱发了NALT、NP、GALT内 (PP、MLN、LPL )以及代表系统免疫反应的脾淋巴细胞中特异性抗福氏、宋内LPSIgA、IgG ASC的显著增加 (P <0 0 1) ;NALT、NP和PP淋巴细胞中CD3+T细胞显著增加 ,其中以CD4+T细胞增加为主 ;FSM 2 117免疫组的脾细胞中B2 2 0 +细胞显著增加 (P <0 0 1) ,而FS 5 416免疫组的脾细胞中CD3+T细胞显著增加 (P <0 0 1)。说明两株菌苗经鼻粘膜免疫均可诱导鼻粘膜局部、GALT及系统免疫反应的发生 ,是一个安全有效的免疫途径     

芬太尼、麻黄碱和丙泊酚序贯用于无痛人流术麻醉的观察

观察无痛人流术的麻醉中,序贯使用芬太尼口麻黄碱和丙泊酚对患者循环、呼吸的影响。全麻中加入麻黄碱,患者手术时生命体征平稳,麻醉满意。     

芬太尼、麻黄碱和丙泊酚序贯用于无痛人流术麻醉的观察

观察无痛人流术的麻醉中,序贯使用芬太尼口麻黄碱和丙泊酚对患者循环、呼吸的影响.全麻中加入麻黄碱,患者手术时生命体征平稳,麻醉满意.     

盐酸脱钙液后脱钙在骨髓组织活检中的应用及体会

<正>骨髓组织活检是明确骨髓病变最主要的方法之一,但由于骨髓组织中含有大量的磷酸钙和碳酸钙,在常规制片中易致切片破碎、刀痕严重等问题,因此对骨髓组织进行充分的脱钙也显得格外重要[1-2]。目前在临床工作中,我们常使用的脱钙液有酸类脱钙液、电解质脱钙液、螯合剂脱钙液、离子交换树脂脱钙液等[2-3]。这些脱钙液作用机制不同,效果各有千秋[4]。在实际临床工作中我们对脱钙液选择的标准应该是效果强、时间短、对组织细胞形态以及对抗原影响小等[5]。本实     

巴细胞分离液在新生儿外周血染色体制备应用评价

由于遗传因素或环境因素而使正常的胚胎发育过程发生紊乱,从而使新生儿出现先天性畸形或生理机能障碍[1],就有必要做新生儿染色体检测。在遗传室工作以来,发现新生儿染色体的制备一直就存在分裂相少,铺展不开,     

全自动免疫组化仪在标准化染色质量控制中的应用体会

正免疫组化技术不仅用于病理辅助诊断,还用于肿瘤靶向治疗的靶点检测和预后评估,其正确的检测结果关系到患者的治疗方向,进而标准化管理和质量控制是重中之重[1]。影响免疫组化染色的因素很多,其中包括环境条件、组织处理、抗体质量、染色流程等。传统的手工操作步骤多、时间长,操作过程中难免会产生人为的实验误差和染色质量问题,影响染色结果的准确性与稳定性,甚至误导病理诊断医师[2]。为进一步改善免疫组化染色结果的一致性、重复性和可靠性,我科室自2012     

硬脂酸和组织脱蜡透明液替代二甲苯在病理制片中的应用

目前绝大多数病理切片的制作仍延用传统的石蜡切片制作技术.病理制片过程中,组织的透明和切片染色前后的脱蜡、透明三个环节,普遍采用二甲苯作为透明、脱蜡剂.二甲苯属有毒物质,其毒性主要是对中枢神经和植物神经的麻醉及粘膜的刺激作用[1],且二甲苯在组织处理过程中,易使组织收缩、硬化变脆[2],对切片质量有一定影响.为此,我们通过反复试验,对传统石蜡病理制片方法进行了改良,应用无毒性的硬脂酸和组织脱蜡透明液完全替代二甲苯,取得了良好的制片效果,并有效避免了二甲苯对人体的危害及对环境的污染.     

复方党参通气液对实验兔腹部术后血浆SP、MOT的影响

目的：观察复方党参通气液对实验兔腹部手术后胃肠激素P物质（SP）、胃动素（MOT）水平的影响。方法：65只实验兔随机分为正常对照组（10只）、假手术组（10只）、模型组（45只）。模型组又分为实验组（复方党参通气液组）、对照组（大承气汤组）、空白组（生理盐水）。观察术后中药治疗对血浆中SP、MOT的影响。结果：假手术组术后第1d血浆中的SP、MOT水平较正常对照组有一定的下降（P〈0.05,P〈0.01）,第7d血浆中SP、MOT水平基本恢复正常（P〉0.05）;空白组术后第1d和第7d血浆中的SP、MOT水平均明显降低,与假手术组比较有显著差异（P〈0.05）。在药物治疗后7d,实验组血浆中SP、MOT水平与对照组及空白组比较均有明显差异（P〈0.01,P〈0.05）。结论：复方党参通气液能刺激兔胃肠激素SP、MOT的分泌增多,促进胃肠功能恢复。     

酸化高锰酸钾液与盐酸酒精液在瑞-姬氏染色涂片褪色中的应用

在我们的日常工作中常常会遇到这样一种情况,由于诊断的需要要求改变原涂片的染色,这就必须首先将涂片原有的染色褪掉再行所需要的其他染色.     

应用亚硫酸钠快速制备低氧性肺血管收缩离体模型所需低氧性Krebs-Henseleit液的方法及评价

 目的：探讨应用亚硫酸钠（sodium sulfite, Na₂SO₃）快速去氧制备低氧性肺血管收缩（hypoxia pulmonary vasoconstriction, HPV）离体模型所需低氧性Krebs-Henseleit（KH）溶液的可行性。方法：在暴露于空气的开放环境中将不同剂量Na₂SO₃加至0.5 L 温度为37 °C的KH溶液中,用i-STAT便携式临床分析仪检测加样1 min后溶液pH值、氧分压（PO₂）、二氧化碳分压（PCO₂）和钠离子（Na⁺）浓度的变化;选择适合HPV模型条件的Na₂SO₃剂量溶入0.5 L KH液后,检测此低氧溶液在1、10、20、30、60和90 min时上述指标的变化。结果：大于0.2 g（包括0.2 g）Na₂SO₃加至0.5 L KH液中可降低KH液的PO₂（P<0.01）,且随着剂量的增加,PO₂降低。其中,1.5 g Na₂SO₃剂量可使0.5 L KH液达到HPV模型所需的低氧状态PO₂（20~40 mmHg）并维持此低氧状态至少90 min,溶液pH值、PCO₂和Na⁺浓度均处于正常范围。结论：应用Na₂SO₃可制备HPV离体模型所需的低氧溶液,方法简单,快速可行,状态稳定,无需密闭。     

牙周炎患者龈沟液IL-10、IL-18和IFN-γ测定的临床意义

目的：测定牙周炎患者龈沟液IL-10、IL-18及IFN-γ浓度,探讨三种细胞因子含量的变化及其意义。方法：IL-10、IL-18及IFN-γ三种细胞因子均采用放射免疫分析。结果：牙周炎患者治疗前IL-18及IFN-γ两项龈沟液细胞因子的浓度极显著高于正常对照组（P均〈0.01）;IL-10水平略低于正常对照组,但无明显统计学意义（P〉0.05）;治疗一个月后,IL-18及IFN-γ两项龈沟液细胞因子的浓度显著下降,但仍显著高于正常对照组（P均〈0.05）;IL-10含量则升高极显著（P〈0.01）。相关分析数据显示,牙周炎组IL-18及IFN-γ两项龈沟液细胞因子的浓度与牙周袋深度、附着丧失呈显著正相关（r=0.2617、0.2802,P均〈0.05）。而IL-10浓度与牙周袋深度、附着丧失程度呈显著负相关（r=-0.1743,P〈0.05）。结论：牙周炎患者龈沟液IL-10、IL-18及IFN-γ三项细胞因子水平发生了显著变化,表明牙周炎患者体内存在免疫功能调节紊乱。     

翻译控制肿瘤蛋白TPT1的原核表达、纯化、抗体制备和初步应用

目的:原核表达并纯化翻译控制蛋白TPT1,免疫日本大耳白兔制备其抗体。方法:构建原核表达质粒pRSE-TA2-TPT1,转化大肠杆菌BL21(DE3),TPT1蛋白经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。融合蛋白通过Ni-NTA树脂亲和纯化后免疫兔子制备抗体血清。以间接ELISA法检测抗体效价,Western blot和免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果:在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的TPT1融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫大白兔,获得了高特异性的抗TPT1抗血清。结论:成功构建原核表达质粒pRSETA2-TPT1,表达并纯化TPT1蛋白,制备出高滴度、高特异性的多克隆抗体.为进一步研究TPT1在肿瘤等疾病发生、发展过程及治疗中的作用奠定基础。     

类风湿性关节炎患者滑膜液中IL-10、IL-12和sFasL含量的检测

为了研究细胞因子和凋亡分子在类风湿性关节炎(RA)发病中的作用,用ELISA法分析了26例RA患者滑膜液和血清中IL-12、IL-10和可溶性FasL(sFasL)的含量。结果表明RA患者滑膜液中IL-12、IL-10含量分别为(419.9±89.2)pg/ml和(187.7±34.5)pg/ml,外周血中这两种细胞因子的含量均较低,分别为(65.3±34.2)pg/ml(IL-12)和(85.0±12.7)pg/ml(IL-10)。滑膜液中sFasL的含量为266pg/ml,明显高于血清含量(36pg/ml)。这一结果提示,RA患者滑膜液中IL-12含量和sFasL增高,这些炎性细胞因子增高可能参与了关节滑膜中的自身反应性T细胞的活化,继而造成免疫损伤。     

液基细胞学和HPV原位杂交检测及其联合应用在子宫颈癌筛查中的作用

目的评价液基细胞学检测和HPV DNA检测在子宫颈癌筛查中的应用价值及临床意义。方法收集2008年3月～2009年5月间在武汉市江夏区第一人民医院妇科门诊接受子宫颈病变筛查的597例患者,所有病例均进行液基细胞学检测、高危型HPVDNA原位杂交检测,同时进行子宫颈活检组织病理学检查。结果以组织病理学结果做为判定标准,液基细胞学检测方法的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为86.5%、93.9%、93.3%、57.7%、98.7%、0.805;HPV DNA原位杂交检测法的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为78.8%、85.7%、85.1%、34.5%、97.7%、0.645。联合使用液基细胞学检测和HPV DNA检测方法的灵敏度为96.2%,特异度为80.4%,准确性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为81.7%,31.8%,99.6%,0.765。结论液基细胞学检测法筛查子宫颈癌及癌前病变的灵敏度超过了85%,降低了筛查的假阴性率,综合评价较好;原位杂交HPV DNA检测灵敏度较低,但其特异度相对较高。并联使用液基细胞学及HPV DNA检测灵敏度提高,但特异度下降。应根据不同的实际情况,制定最佳的子宫颈病变筛查策略。     

液基细胞技术在术前检测乳腺癌ER和PR中的应用

雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)是乳腺癌重要的预后因素和预测激素治疗反应的指标.术前检测乳腺癌ER和PR的方法主要是用针吸细胞学标本进行免疫细胞化学染色,由于制片质量不稳定,常导致检测结果不理想.液基细胞制片技术是近几年发展起来的新技术,本实验把液基细胞制片技术引入到乳腺癌ER和PR的术前检测中,尝试对传统检测方法的进一步完善.     

哮喘儿童支气管肺泡灌洗液IL-17、 IL-8和VEGF水平测定及意义

目的: Th17细胞是以分泌IL-17为主的新型T细胞亚群,其在哮喘中的作用尚不十分清楚。本文通过观察哮喘急性发作儿童支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-17、IL-8、血管内皮生长因子(VEGF)等的水平变化,探讨其在哮喘急性发作儿童气道炎症中的作用。方法: 我院2009年2月-2009年12月期间行纤维支气管镜检查患儿共88例,包括哮喘急性发作组(哮喘组,n=52)、非喘息组(肺炎组,n=25)及对照组(n=11),收集所有病例的BALF,进行细胞学分类,ELISA法测定BALF中细胞因子IL-17、IL-8、VEGF、IL-4、IFN-γ和IL- 4/IFN-γ水平。结果: 与对照组比较,哮喘组和肺炎组患儿的IL-17和IL-8水平均明显增高(均P<0.05);哮喘组患儿的IL-8水平较肺炎组低(P<0.05),而2组IL-17水平无显著差异(P>0.05);与肺炎组和对照组比较,哮喘组患儿VEGF水平明显增高(均P<0.01);肺炎组与对照组患儿VEGF水平无显著差异(P>0.05);3组患儿的IL-4,IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平均无显著差异(均P>0.05)。与对照组比较,哮喘组及肺炎组患儿中性粒细胞百分比明显增高(均P<0.01),而哮喘组与肺炎组患儿的中性粒细胞百分比无显著差异(P> 0.05)。结论: IL-17、IL-8及VEGF在哮喘儿童气道炎症中发挥重要作用,Th17细胞可能参与儿童哮喘急性发作的发病机制。     

慢性牙周炎患者龈沟液EA、COL-Ⅱ和KGF-1水平的变化及其意义

目的:探讨慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)患者龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)弹性蛋白酶(elastase,EA)、Ⅱ型胶原酶(collagenase-Ⅱ,COL-Ⅱ)和角质细胞生长因子-1(keratinocyte growth factor-1,KGF-1)水平的变化及其临床意义.方法:正常对照组为58名正常成人和儿童.将62例CP患者根据不同病情分为:轻度(30例),中度(18例),重度(14例)三组.GCF中EA、COL-Ⅱ和KGF-1测定分别采用底物催化法和酶联免疫分析法.结果:EA水平轻度组与正常对照组比较略高,但无统计学差异(P>0.05),中度和重度组则显著高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),重度组又分别显著高于轻度和中度组(P<0.05,P<0.01).COL-Ⅱ水平的变化规律同EA.KGF-1水平则轻度组与正常对照组比较呈显著高水平(P<0.05),中度和重度组水平与正常对照组比较升高更为显著(P均<0.01),重度组则显著高于轻度和中度组(P<0.05,P<0.01).结论:CP患者GCF中三项指标水平变化与病情的进展关系密切.其测定对于CP的诊断和炎症程度的评估有一定的帮助.     

EMS患者腹腔穿刺液IL-6、IL-8和血清TNF-α、IL-6、IL-8检测的临床意义

本文通过对腹腔穿刺液IL-6、IL-8和血清TNF-α、IL-6和IL-8等的检测和分析,旨在对子宫内膜异位症（EMS）的发病机制和手术治疗效果判定的意义。1对象和方法1．1对象选取2010年1月～2013年1月EMS患者在我院住院手术治疗的56例为观察组,选取同期患妇科疾病（排除EMS）于我院进行手术治疗的58例患者为对照组,     

牙周炎患者龈沟液IL-6、IL-8和TNF-α检测的临床意义

文献报告[1],牙周炎患者机体抗感染时所产生的毒性自由基及某些炎性介质可导致牙周炎的发生与发展。本文报告牙周炎患者龈沟液中IL-6、IL-8和TNF-α水平的变化,现将结果报告如下。1资料和方法1.1临床一般资料1.1.1牙周炎组:39人(男25,女14),均为我院经临床明确诊断的牙周炎患者,其中重度牙周炎患者20例,轻、中度牙周炎患者19例,并经口腔X线摄片确诊为慢性牙周炎。