T细胞因子4基因表达与肝癌侵袭转移的关系

目的　研究人T细胞因子 4基因 (hTcf- 4)在原发性肝癌及肝癌细胞株中表达情况 ,以探讨hTcf- 4基因与肝癌发生发展的关系。方法　用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR) ,检测了 32例原发性肝癌组织、癌旁组织及 5株肝癌细胞株中hTcf- 4基因表达。结果　hTcf- 4mRNA在癌旁组织中的表达率为 71 9% ,而在癌组织中的表达率达 90 6 %。且癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织 (P <0 0 0 1)。同时在肿瘤包膜不完整及有转移的癌组织中该基因表达明显增高。不同细胞株中均有hTcf- 4基因表达。肝癌细胞株中表达水平高于正常肝细胞株 (P <0 0 0 1) ,而高转移肝癌细胞株MHCC97中表达水平又高于低转移肝癌细胞株 (P <0 0 5 )。结论　hTcf- 4基因表达增高与肝癌发生发展及侵袭转移有关 ,提示hTcf- 4可能成为协助肝癌诊断、判断预后及疗效评价的指标。     

肝细胞肝癌中T细胞转录因子4基因表达及突变

目的 :研究人T细胞转录因子 4(hTcf 4 )基因在肝细胞肝癌中表达及突变和肝癌发生发展的关系。方法 :用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 32例肝癌组织及癌旁组织中hTcf 4基因表达 ,并用聚合酶链反应 -单链构像多态性分析 (PCR SSCP)方法检测了肝癌组织中hTcf 4外显子 1、4、9、15的突变情况。结果 :hTcf 4mRNA在癌组织及癌旁组织中表达率分别为 90 .6 %和 71.9%。且癌组织中表达水平明显高于癌旁组织 [(0 .71±0 .13)vs (0 .2 9± 0 .0 5 ) ,P <0 .0 0 1]。同时 ,此基因在包膜不完整及有转移的癌组织表达增高更为显著。 32例肝癌中仅检测到 2例hTcf 4基因外显子 15突变 ,突变率为 6 .2 5 %。结论 :hTcf 4基因在肝细胞肝癌 ,尤其伴转移肝癌组织中表达增高 ,并与肝癌侵袭转移有关 ,而该基因突变与肝癌关系不密切。     

基质金属蛋白酶-9基因及RECK基因在肝癌组织中的表达

目的探讨肝癌患者基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因及RECK基因表达的情况。方法33例原发性肝细胞癌患者术中取癌组织及癌旁组织;提取组织总RNA;用逆转录共扩增定量PCR方法测定MMP-9基因及RECK基因表达水平。结果肝癌组织MMP-9基因表达水平明显高于癌旁的肝硬化组织及正常肝组织,肝癌组织RECK基因表达水平明显低于癌旁的肝硬化组织及正常肝组织。肝癌患者MMP-9基因表达水平与血清AFP浓度、肿瘤大小无关。RECK基因及MMP-9基因在肝癌组织中的表达呈负相关（P=0．019）。结论RECK与MMP-9在肝癌组织中的表达呈负相关;MMP-9及RECK基因在肝癌的进展中可能起重要作用。     

CTHRC1基因在人肝癌中高表达并促进MHCC97L肝癌细胞的转移

目的：分析CTHRC1基因在人肝癌组织和肝癌细胞株中的表达情况及其对MHCC97L肝癌细胞转移能力的影响。方法：采用northem blot、RT—PCR和荧光定量PCR分析人肝癌组织和肝癌细胞株中CTHRC1 mRNA水平。构建包含CTHRC1基因编码框的真核表达载体pCMV-3Tag-CTHRC1，通过体外实验分析CTHRC1在MHCC97L细胞中过表达对MHCC97L细胞迁移、侵袭等转移能力的影响。结果：Northern blot、RT—PCR和荧光定量PCR结果显示，14例肝癌患者中11例存在癌组织CTHRC1 mRNA表达水平高于癌旁组织，8种肝癌细胞株中5种肝癌细胞株存在着CTHRC1的高表达。当CTHRC1过表达后，MHCC97L细胞的迁移及侵袭能力显著增强（P〈0．001）。结论：CTHRC1基因在人肝癌组织和人肝癌细胞株中存在着高表达，同时该基因可使肝癌细胞MHCC97L的转移能力明显增强，提示CTHRC1基因可能在肿瘤转移中起重要作用。     

mdr-1表达与食管癌相关病理因素的研究

目的：探讨食管癌组织中多药耐药基因（mdr-1)表达与相关病理因素的关系。方法：应用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法，对78例食管癌及癌旁组织中mdr-1表达进行检测，结果：78例食管癌中mdr-1阳性32例（41％），癌旁组织mdr-1阳性率8例（10％），癌组织mdr-1阴性与癌旁组织比较具有显著性差异（P＜0．001），mdr-1表达阳性与肿瘤大小，浸润深度，病理分期及淋巴结转移与否无明显关系，但在肿瘤侵犯深肌层或纤维层时的mdr-1表达阳性率（45．8％）明显高于侵犯浅肌层或粘膜层者（26．3％），低分化食管癌的mdr-1阳性分布显著高于高中分化肿瘤（P＜0．05），对术后1年以上的42例患者随访发现，mdr-1阳性的肿瘤复发，转移发生率也高于mdr-1表达阴性者，结论：食管癌组织中mdr-1基因表达增高，mdr-1的阳性表达不仅表现肿瘤的多药耐药性，还可能提示肿瘤的分化不良，并与食管癌的复发和转移密切相关。     

吲哚胺2,3-双加氧酶在肝癌组织的表达及其临床意义

目的：探讨吲哚胺2，3-双加氧酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO）在原发性肝癌细胞、癌旁肝细胞及肿瘤浸润淋巴细胞中的表达及其临床意义。方法：选择经临床确诊的21例原发性肝癌患者的手术切除和（或）肝穿刺所取肝癌组织及癌旁组织标本，通过免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织IDO的表达，并分析其与临床病理特征的关系。结果：IDO在原发性肝癌细胞与肿瘤浸润淋巴细胞的表达水平相对较低，在癌旁肝硬变细胞中表达明显增高（P〈0．01）。IDO表达强度与患者的年龄、性别、TNM分期无关（P〉0．05）；与患者大体病理分型有一定的相关性，浸润型IDO表达强度较块状型明显增高（P〈0．05）；有血管浸润及癌栓形成患者IDO也呈高表达状态（P〈0．05）；IDO的表达还与病理组织学分化情况相关，低分化肿瘤组织IDO的表达强度明显增高（P〈0．05）。结论：IDO的表达与肝细胞癌恶性有一定的相关，故IDO拟可以作肝癌预后差的一个参考指标。     

G3BP和TIP30基因表达与子宫颈癌细胞转移潜能相关性的初步研究

目的：检测肿瘤转移基因G3BP和肿瘤转移抑制基因TIP30在正常子宫颈组织及子宫颈癌组织中的表达水平,探讨两者对子宫颈癌细胞转移潜能的影响。方法：选取2010—2011年我院妇检及行宫颈癌根治术的患者90例。采用Taqman探针实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PcR）方法,检测正常子宫颈组织（30例）、子宫颈浸润癌（均为子宫颈鳞状细胞癌）未转移组及转移组组织（各30例）中G3BP、TIP30基因表达情况,并对其进行比较分析。结果：1）G3BP基因在子宫颈癌转移组中的表达水平（0．088±0．081）显著高于未转移组（0．006±0．003）及正常子宫颈组织（0．000±0．000）,P值均〈0．001;子宫颈癌未转移组的表达水平高于正常子宫颈组,差异有统计学意义,P〈0．001。2）TIP30基因在子宫颈癌转移组中的表达水平（0．000±0．000）显著低于未转移组（0．001±0．000）及正常子宫颈组织（0．012±0．001）,P值均〈0．001,子宫颈癌未转移组的表达水平低于正常子宫颈组,差异有统计学意义,P〈0．001。结论：G3BP在正常子宫颈组织、子宫颈癌未转移组及转移组中呈升序表达,而TIP30基因则呈降序表达,G3BP和TIP30基因在子宫颈癌细胞的转移中发挥一定作用,从而影响子宫颈癌的发生、发展。     

microRNA-21在老年肝细胞癌中的表达及临床意义

探讨miRNA-21在肝细胞癌（hepatoeellular carcinoma,HCC）组织及患者血浆中的表达水平以及临床意义。方法选取泰州市人民医院30例HCC患者为研究组,30例慢性乙型病毒性肝炎肝硬化患者为对照组,采用实时荧光定量RT-PCR法检测老年肝癌组织及对应癌旁组织中以及患者血浆中miRNA-21表达水平。结果 miRNA-21在肝细胞癌组织中的表达水平显著高于对应癌旁组织及对照组,差异均有统计学意义（均P＜0．05）;肝癌患者血浆中miRNA-21的表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）。Spearman相关分析显示,肝癌组织及血浆中miRNA-21表达与肝癌的分化程度均显著正相关（r＝0．685,P＜0．05;r＝0．603,P＜0．05）;而肝癌癌旁组织中miRNA-21表达与肝癌分化程度无显著相关（r＝0．125,P＞0．05）。结论 miRNA-21在老年肝细胞癌组织中的表达较对应癌旁组织及乙型病毒性肝炎肝硬化组织明显升高,其与肿瘤细胞的分化程度关系密切,提示miRNA-21可能作为老年肝癌潜在预后评价指标。     

肝细胞癌中Hep Par 1、p53、HBsAg表达差异与细胞形态计量学变化的关系

目的 探讨原发性肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织中肝细胞抗原（Hep Par1)，p53，乙型肝炎表面抗原（HBsAg)的表达差异及与细胞形态学变化的相关性。方法 用免疫组织化学方法（两步法－EnVision System-HRP)检测10对肝癌和癌旁组织，3例正常肝组织中Hep Par1,p53,HBsAg等蛋白的表达差异；用HPIAS－1000图像分析系统测量实质细胞的总面积（以细胞直径代替）和核质比。结果 1）Hep Par 1:正常肝组织中肝细胞中度表达，癌旁肝组织中肝细胞为弥漫性高表达，肝癌细胞中阳性率为24．53％（13／53）；2）p53：正常肝组织和癌旁肝组织中均呈阴性；肝癌组织，在被检的10例样品中肝癌细胞均为阳性；3）HBsAg:正常肝组织中肝细胞呈阴性，癌旁肝组织中肝细胞为片状弥漫性或散在性高表达，肝癌组织，在被检的10例样品中肝癌细胞仅有1例呈阳性；4）各种组织中实质细胞的平均直径为癌旁肝细胞＞正常肝细胞＞肝细胞癌细胞；5）正常肝细胞和癌旁肝细胞的核质比无差别（P＞0．05），但均明显＜肝细胞癌细胞（P＜0．01和P＜0．01）。结论 肝细胞抗原（Hep Par 1)在分化较高的肝细胞癌细胞中有不同程度的表达，可作为鉴别原发性肝细胞癌细胞来源的标志；原发性肝细胞癌细胞核质比明显＞正常肝细胞和癌旁肝细胞（P＜0.01和P＜0.01)。     

HIF-1α和VEGF 的表达与肝细胞癌侵袭转移的关系

 目的 探讨HIF-1α、VEGF的蛋白表达与肝细胞癌血管新生及侵袭转移特性之间的关系。方法 采用免疫组化SP法检测肝细胞癌、癌旁肝组织和正常肝组织中HIF-1α、VEGF的表达，并计数MVD值。结果 HIF-1α在肝细胞癌中的阳性表达率为50．0％，显著高于癌旁（16．1％）和正常肝组织的（8．3％）（P=0．001）；VEGF在肝细胞癌中的阳性表达率为81）％，显著高于癌旁（59．4％）和正常肝组织（41．7％）（P=0．044）；肝细胞癌组织中MVD值显著高于癌旁和正常肝组织（P=0．001）。HIF-1α蛋白表达与有无门静脉或胆管癌栓及肿瘤分化程度有关（P〈0．05）；VEGF蛋白的表达与有无肝内或淋巴结转移及有无门静脉或胆管癌栓有关（P〈0．05）。HF-1α与VEGF表达有关（P=0．005）；HF-1α与VEGF共同表达阳性组的MVD值显著高于共同表达阴性组MVD值（P=0．001）。结论 HF-1α可能通过调节VEGF的表达促进肝细胞癌血管新生，从而促使肝细胞癌侵袭转移。     

肺癌中血管内皮生长因子及突变型p53基因表达及其临床意义研究

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）、突变型p53（rhtp53)基因表达水平与肺癌病理生理学特征之间的关系。方法 采用免疫组化方法（LSAB法）,检测120例肺癌组织及相应癌旁组织,40例肺良性病变组织中的VEGF、mtp53表达水平。结果 肺癌组织中VEGF、mtp53基因的表达水平显著高于癌旁肺组织和肺良性病变组织（P＜0．01）。VEGF、mtp53基因表达水平与肺癌患者在性别、年龄、吸烟史、组织学类型均无明显关系（P＞0．05）,与原发肿瘤大小、细胞分化程度、淋巴结转移状态、P－TNM分期均有密切关系（P＜0．01）。mtp53基因表达水平与VEGF表达水平呈显著正相关（P＜0．01）。结论 VEGF、mtp53基因可能参与了肺癌的发生、发展进程,可以作为肺癌生物学行为恶化的一项指标。     

肺癌组织中耐药相关基因的表达水平及其临床意义

目的 探讨肺癌组织耐药相关基因产物的表达水平及其临床意义。方法 采用免疫组化法S－P对60例肺癌组织及30例癌旁肺组织中Pgp,MRP,GST-π，TopoⅡ进行检测。结果 肺癌组织中Pgp,MRP,GST- π，TopoⅡ表达阳性率分别为40．0％（24／60）、61．7％（37／60）、45．0％（27／60）、81．7％（49／60），均明显高于癌旁肺组织（P＜0．01），上述耐药相关基因表达阳性率与肺癌TNM分期、病理类型、细胞分化程度、淋巴结转移状态均无显著关系（P＞0．05）。结论 肺癌在癌变发生过程中其耐药相关基因均有不同程度的过度表达，联合检测这些基因的表达水平有助于指导化疗。     

血管内皮细胞生长因子及其受体在乳腺癌组织的表达

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体在乳腺癌恶性进展中的作用及机制。方法：使用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）及计算机条带分析半定量方法检测VEGF4种异构体（121，165，189，206）及VEGF受体（flt-l及KDR）mRNA在29例乳腺癌组织及相应癌周组织的表达水平。结果：VEGF的2种主要异构体（VEGF121，VEGF165）及KDR在癌组织的表达水平明显高于癌周组织（P＜0．001）。flt-1的表达在癌组织及癌周组织之间则没有显著性差异（P＞0．5）。在癌组织及癌周组织，VEGF121表达和KDR表达之间具有明显直线正相关及回归依存关系（P＜0．001，P＜0．02），而flt-1表达水平则没有直线相关关系（P＞0．1）。乳腺癌组织VEGF121表达量在未绝经组患者高于绝经组（P＜0．01）。结论：KDR是乳腺癌组织中VEGF发挥功能的主要受体，其表达增高可能是因为受到VEGF的诱导上调作用；体内卵巢激素水平可以影响乳腺癌组织VEGF表达。     

肝癌组织中Ki-67表达水平及微血管密度与患者年龄的相关性

目的探讨原发性肝癌中Ki-67表达水平及微血管密度（MVD）与患者年龄的相关性。方法应用免疫组织化学法检测肝癌切除标本癌组织Ki-67表达水平及MVD,并分析其与年龄的相关性。结果48例肝癌组织中Ki-67有程度不同的表达,阳性率为83．3％（40／45）,在相应的癌旁组织中Ki-67无表达（P〈0．01）。在癌组织及癌旁组织CD34标记的MVD分别为32．17±8．06、10．83±2．85,癌组织的MVD要高于癌旁组织（P〈0．01）。肝癌组织中年龄与Ki．67表达水平及MVD均呈负相关（r=-0．418,P：0．003;r=-0．443,P=0．002）。结论肝癌组织中Ki-67表达水平及MVD与患者年龄呈负相关,提示年轻的肝癌患者可能预后更差。     

肺癌中FHIT基因异常甲基化及其蛋白表达的意义

目的：检测肺癌组织FHIT蛋白表达及基因异常甲基化，探讨其在肺癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组化SP法和甲基化特异性PCR（MSP）检测肺癌组织与癌旁组织（n=60）中FHIT蛋白表达和基因异常甲基化情况，并对基因甲基化扩增产物进行测序，对60例患者随访调查。结果：FHIT蛋白在癌旁组织的阳性表达明显高于癌组织，二者差异存在统计学意义（76．7％vs50．0％，P〈0．05）；FHIT基因异常甲基化在癌组织中的发生率明显高于癌旁组织，二者差异存在统计学意义（68．3％vs35．0％，P〈0．001）；FHIT基因甲基化的发生率在FHIT蛋白阴性患者中高于阳性表达者（83．3％vs53．5％，P〈0．05）；FHIT蛋白表达及基因甲基化发生率均与性别、年龄、吸烟状况、组织学类型、大体分型、TNM分期及淋巴结转移无关（P〉0．05）；FHIT蛋白阳性表达患者生存率高于阴性表达者（P〈0．05），FHIT蛋白是影响无瘤生存时间的危险因素（P〈0．001）。结论：肺癌中FHIT基因异常甲基化频繁发生，FHIT蛋白表达明显下调，FHIT在肺癌的发生发展中可能具有重要的作用，FHIT蛋白可以作为判断患者预后的重要指标。     

人和大鼠肝细胞癌中骨桥蛋白表达的定量检测

目的骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)是一种分泌性的磷酸糖蛋白,参与了包括肝癌在内的多种恶性肿瘤的增殖和转移,本文检测了 OPN基因在人肝细胞癌组织和大鼠肝癌模型中的表达。方法实时荧光定量逆转录PCR检测OPN基因表达,二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DENA)诱导SD大鼠肝癌模型并动态检测在大鼠肝癌发生发展过程中的OPN基因表达。结果在103例人肝细胞癌病例中69例(67％)肝癌组织中OPN基因表达水平高于癌旁组织,其中58例(56％)超过2倍以上,肝癌和癌旁组织中OPN平均表达水平具有明显差异(0．53±0．91和0．11±0．28,P<0．001)。大鼠肝癌模型中随着肝癌的发生和发展OPN表达水平逐渐上升。结论OPN在肝癌组织中高表达并且随着肝癌的发生发展逐渐升高。     

原发性肺癌端粒酶活性检测及其临床应用价值

目的：研究原发性肺癌组织端粒酶活性检测的临床应用价值。探讨其作为肺癌诊断和预后评价指标的可行性。方法：采用端粒重复序列扩增－酶联免疫吸附法（TRAP－ELISA法），对32例原发性肺癌手术切除组织及相应的癌旁组织进行端粒酶活性分析，并以7例肺良性病变作为对照。结果：32例肺癌组织端粒酶水平明显高于癌旁组织（P＜0．05），及良性病变组织（P＜0．001），肺癌组织中端粒酶阳性率为84．4％，癌 旁组织为9．4％，在良性组织中未检出端粒酶阳性，端粒酶活性随临床分期有升高趋势，伴淋巴结转移标本组中其阳性率明显高于非淋巴结转移组（P＜0．05），但与肿瘤病理组织学类型，分化程度等未显示有统计学差异。结论：端粒酶激活与肺癌的发生，发展密切相关，端粒酶可以成为一种用于肺癌辅助诊断，预后判断的重要标志物并在肺癌的基因治疗中发挥作用。     

突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性研究

目的：探讨突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性。方法：随机选择41例肝细胞肝癌患者的癌和癌旁肝组织标本，SP法检测其p53蛋白表达，分析突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成的相关性。结果．p53在癌和癌旁肝组织中阳性表达率分别为43．9％和6．67％，两者比较，差异显著（P〈0．01）；p53蛋白阳性表达率，Ⅲ-Ⅳ级肝癌明显高于Ⅰ～Ⅱ级肝癌，发生转移（血道或淋巴道转移）肝癌明显高于未发生转移（血道或淋巴道转移）肝癌，两者之间比较，差异有显著性意义（P〈0．05）；但p53蛋白阳性表达率与肝癌组织大小和其是否有包膜无关（P〉0．05）。结论：突变型p53基因与肝细胞癌组织学分级、转移密切相关，但与肝癌组织大小和包膜形成无关。     

PTEN基因甲基化及其表达异常与胃癌的关系

目的：探讨PTEN基因表达、启动子区甲基化与胃癌及其临床病理特征的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法（MSP）和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法，分析胃癌组织及相应癌旁正常组织中PTEN基因启动子区甲基化及其mRNA表达情况。结果：48．2％（27／56）的胃癌组织和3．6％（2／56）的癌旁胃组织PTEN基因启动子区发生甲基化．癌组织PTEN基因启动子区甲基化率显著增高（P〈0．05）：其中，2例甲基化癌旁胃组织均为胃癌组织中有甲基化的病例．发生淋巴结转移的29例胃癌组织中．19例PTEN基因启动子甲基化；发生淋巴结转移的PTEN基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，所有甲基化的胃癌组织中PTEN mRNA均无表达，结论：胃癌中PTEN基因mRNA失表达与其启动子区甲基化有关，这可能是胃癌发生、发展以及转移的原因之一。     

基质金属蛋白酶-9与原发性肝癌侵袭转移关系的初步研究

目的　探讨原发性肝癌中MMP -9基因的表达 ,研究其与原发性肝癌侵袭转移的关系。方法　采用逆转录 -聚合酶链式反应技术 (RT -PCR ) ,对 41例原发性肝癌手术切除肿瘤组织、癌旁组织标本的MMP -9基因进行检测 ,并结合随访资料进行分析。结果　肝癌组织和癌旁 1cm、5cm组织中分别有 70 .7%、48.9%、41.5 %MMP -9表达阳性 ,癌组织MMP -9表达水平显著高于癌旁 5cm组织 (P <0 .0 1) ,癌组织与癌旁 1cm组织比较 ,MMP -9表达水平无显著性差异。癌组织MMP -9表达水平与肿瘤复发、有无包膜、门静脉癌栓显著相关 (P <0 .0 5 )。结论　MMP -9基因的过度表达与肝癌侵袭转移密切相关 ,并可作为判断其预后的指标之一