宫颈癌组织中P16和HPV16/18 E7的表达及意义

①目的研究宫颈癌组织中抑癌基因p16 mRNA和蛋白质的表达,以及与HPV16/18 E7表达的关系.②方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测45例宫颈浸润癌组织、12例宫颈原位癌组织和20例正常宫颈组织中HPV16/18的感染情况;采用RT-PCR技术检测上述标本中HPV16/18阳性者E7 mRNA的表达水平及所有标本中p16 mRNA表达水平;采用免疫组化技术进一步检测HPV16/18 E7、P16蛋白的表达情况.③结果宫颈原位癌和浸润癌HPV16/18的感染率、HPV16/18 E7 mRNA和蛋白表达阳性率明显高于正常宫颈组织,差异有显著性(χ2=5.12～15.78,P<0.05、0.01),原位癌和浸润癌组之间比较差异无显著性(χ2=0.119、0.000,P>0.05);原位癌和浸润癌p16 mRNA的相对表达量明显高于正常宫颈,差异有显著性(F=5.412,q=4.125、5.519,P<0.05);HPV16/18 E7阳性组p16 mRNA的表达阳性率明显高于阴性组,差异有显著性(t=4.127,P<0.01);P16蛋白在宫颈原位癌和浸润癌组织中呈现过表达,在正常组织中为阴性表达或弱表达;p16 mRNA的相对表达量与HPV16/18 E7 mRNA的相对表达量呈显著正相关(r=0.813,P<0.05);P16蛋白的过表达与HPV16/18 E7蛋白表达有相关关系(χ2=8.959,P<0.01);HPV16/18 E7 mRNA和蛋白及p16 mRNA和蛋白的表达与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移、肿瘤的大小和病人的年龄无关(P均>0.05).④结论抑癌基因p16的过表达发生在宫颈癌的早期和癌前病变阶段,可用于临床筛查和早期诊断宫颈癌.     

宫颈病变患者HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测的临床意义

目的:探讨宫颈病变患者人乳头状瘤病毒(HPV)DNA和HPV E6/E7 mRNA检测的临床意义。方法:将2015年1月至2017年1月在宜昌市第三人民医院进行阴道镜宫颈检查的200例患者分为宫颈上皮内瘤变低级别组(A组,n=67)、高级别组(B组,n=99)及宫颈癌组(C组,n=34),同时纳入妇科炎症组(D组,n=40),进行E6/E7蛋白免疫组化和HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测。结果:A、B、C组HPV DNA拷贝数、HPV E6/E7蛋白、DNA、mRNA阳性率均高于D组(均为P<0. 05),但A、B、C组的DNA阳性率及DNA拷贝数差异比较不显著(P>0. 05);A组、B组和C组患者的E6/E7 mRNA阳性率均高于D组(P<0. 05),且C、B组的HPV E6/E7 mRNA(阳性率、拷贝数)及蛋白均高于A组(P<0. 05);HPV E6/E7 mRNA检测特异度在低级别宫颈上皮内瘤变中稍低于HPV DNA,在高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的特异度均相对更高。结论:HPV E6/E7 mRNA检测对宫颈癌发生及发展的检测价值更高。     

喉部肿瘤HPV感染与p53基因变异的研究

应用PCR－SSCP及Southern杂交技术检测了56例喉鳞癌和35例喉乳头状瘤组织中HPV16／18的DNA及p53基因点突变。结果显示24例喉部肿瘤组织p53基因点突变；35例喉癌及24例喉乳头状瘤组织中检出了HPV－DNA。在13例喉癌组织和3例喉乳头状瘤组织中同时检出p53点突变和HPV－DNA。提示HPV感染和p53变异与喉部肿瘤发生有关，其内在联系有待深入研究。     

宫颈癌组织中HPV16 E6基因的检测及其意义

目的：探讨宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒16型(HPV16)E6基因的检测及其意义。方法：运用PCR方法扩增HPV16E6／E7基因，分子克隆技术进行基因的克隆后进一步测定基因序列，宫颈炎和宫颈癌的确诊依赖于病理学方法。结果宫颈癌组织中HPV16E6基因的检出率为45％，显著高于宫颈炎组织中5％的检出率，两者有统计学差异。HPV16E7基因的检出率在两者之间没有显著性差异。结论：HPV16E6基因在宫颈癌的发病中起到重要的作用。宫颈组织中HPV16E6基因的检测有望成为宫颈癌筛查的新手段。     

喉鳞癌组织中HPV16、18E6和HPV16E7蛋白表达及其相关性研究

目的 :探讨人乳头瘤病毒 (HPV) 16、18型E6和E7蛋白与喉鳞癌发生的关系以及两种蛋白在致病过程中的相互关系。方法 :采用免疫组化SABC方法对 5 8例喉鳞癌 ,30例癌旁组织和 30例声带息肉进行检测。结果 :在喉鳞癌和癌旁组织中的E6蛋白的表达率分别为 31 0 % (18/5 8)和 2 0 0 % (6 /30 ) ;E7蛋白的表达率分别为 32 7%(19/5 8)和 2 0 3 % (7/30 )。声带息肉组中未见E6和E7蛋白阳性表达。E6和E7蛋白表达率在喉癌组与息肉组之间 ,有颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组之间均有显著性差异 (P <0 .0 1)。E6和E7蛋白在喉鳞癌中的表达结果具有明显的相关性。结论 :HPV16、18E6和HPV16E7蛋白与喉鳞癌发生、发展关系密切 ,E6与E7蛋白在致癌过程中有协同作用     

朗格汉斯细胞与宫颈癌及HPV16 E6的关系

目的:研究宫颈组织中朗格汉斯细胞(LC)的数量、形态及分布特点与宫颈癌及人乳头瘤病毒(HPV)16E6的关系.方法:用免疫组织化学技术(SP染色法)对标本的朗格汉斯细胞进行检测,以直接PCR法检测HPV16E6并对E6基因测序.结果:40例宫颈鳞癌,16例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ/Ⅲ级与14例正常宫颈组织中,S-100蛋白阳性LC数量在正常组、CINⅡ/Ⅲ组、宫颈癌组中依次增加(P=0.000),与宫颈癌的临床分期呈负相关(R=-0.552,P=0.000),随宫颈癌组织分化程度降低而减少(P=0.039),与淋巴结转移无关(P=0.245).HPV16 E6在正常对照组、CINⅡ/Ⅲ组和浸润癌组中的阳性率依次上调(P=0.000).HPV16 E6(+)组中LC数量比HPV16E6(一)组少(P=0.011).LC的表达在HPV16 E6原型组和在HPV16 E6 D25E突变株组中无统计学差异(P=0.813).结论:LC功能缺陷与宫颈癌的发生有关.     

自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV感染的关系

目的 探讨自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中的蛋白表达以及对人乳头状瘤病毒(HPV)16 E6、E7感染的影响.方法 采用免疫组化SP法检测81例宫颈鳞癌、20例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅱ-Ⅲ级和20例正常宫颈组织中自噬基因Beclin 1的表达,采用PCR扩增法检测宫颈鳞癌组织中HPV16E6、E7的DNA状况.结果 宫颈鳞癌组织中Beclin 1阴性、弱阳性、强阳性表达率依次是43.2%(35/81),34.6%(28/81),22.2%(18/81),分别与正常宫颈组15.0%(3/20)、30.0%(6/20)、55.0%(11/20)和宫颈上皮内瘤样病变组20.0%(4/20)、30.0%(6/20)、50.0%(10/20)相比,Beclin 1在宫颈鳞癌中的表达存在显著下调(P=0.009,P=0.033).HPV16E6、E7在宫颈鳞癌中的阳性率分别为66.7%和58.0%,HPV16 E6、E7感染与宫颈鳞癌中Beclin 1蛋白的表达无相关性(r=-0.126,P=0.262;r=-0.125,P=0.270).结论 自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中表达下调,其表达对HPV16E6、E7感染无明显影响.     

Toll样受体4在宫颈细胞系和宫颈上皮病变中的表达及与HPV16感染的关系

目的：检测Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）在宫颈细胞系和宫颈病变组织中的表达,探讨TLR4在宫颈病变进展中的作用及与人乳头状瘤病毒（human papillomavirus 16,HPV16）感染的关系。方法：用RT-PCR检测H8, SiHa,Caski细胞中HPV16 E6基因的mRNA含量;Western免疫印迹测定3种细胞系中TLR4蛋白含量;免疫组织化学检测127例慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（cervical intra-epithelial neoplasia,CIN）以及宫颈鳞癌病变组织石蜡切片中TLR4蛋白的表达。抽提石蜡组织总DNA,用PCR方法检测组织中HPV16的感染情况。结果：Caski和SiHa细胞中HPV16 E6基因mRNA含量和TLR4蛋白表达明显高于H8正常对照（P〈0.05）,且Caski细胞中HPV16 E6基因mRNA含量和TLR4蛋白表达也显著高于SiHa细胞（P〈0.05）;TLR4在慢性子宫颈炎,CIN和宫颈鳞癌组织的表达分别为32.0%,59.4%和77.8%,随着宫颈上皮病变加重TLR4表达增强（P〈0.01）,并且与宫颈癌分化程度有关（P〈0.01）;HPV16在宫颈病变组织中的表达随着病理分级逐渐增高,在慢性子宫颈炎、CIN和宫颈鳞癌组织中分别为8.0%,48.4%和81.0%（P〈0.01）;在CIN和宫颈癌组织中TLR4与HPV16相关（r=0.303,P〈0.05;r=0.633,P〈0.05）。结论：HPV16感染可以上调TLR4在宫颈上皮病变中的表达,TLR4与HPV16共同作用对宫颈上皮从炎症发展到CIN至宫颈癌过程中发挥重要作用。     

成人喉乳头状瘤组织中HPV/E7、ki-67表达与微血管密度的相关性

目的：探讨人乳头状瘤病毒、细胞增殖活性及新生血管的生成在喉乳头状瘤中的作用。方法:选取21例成人喉乳头状瘤组织标本,以14例声带息肉和14喉鳞癌组织标本为对照组,PCR方法检测HPV16/E7的表达,免疫组化法检测Ki 67、CD34的表达。结果:HPV16/E7在声带息肉、成人喉乳头状瘤和喉鳞癌组织中的阳性表达率分别为:14.3%、66.7%、85.7%;Ki-67标记指数（labeling index,LI）分别为6.30±2.03、13.73±3.42、25.55±3.92;MVD分别为3.97±1.38、14.61±1.64、25.34±2.63;差异有统计学意义(P＜0.01)。HPV16/E7, CD34和Ki 67呈正相关（r＝0.854,P＜0.01;r=0.878,P＜0.01)。结论:Ki-67、MVD与细胞的增殖活化程度明显相关,可以作为反映成人喉乳头状瘤恶变潜能的指标之一。     

HPV16、HPV16 E7蛋白与Rb蛋白在喉癌发生中的作用

目的观察HPV16及其早期区基因E7表达蛋白与Rb蛋白在喉癌发生中的相关性,为探索喉癌的病因学提供依据。方法用免疫组织化学方法检测82例喉鳞癌、39例非癌组织标本中HPV16、HPV16 E7以及Rb的蛋白表达。结果HPV16 E7和Rb蛋白表达的阳性率在非癌及癌组织中有非常显著的差异（P〈0.01）,HPV16的阳性率在非癌及癌组织中有显著性差异（P〈0.05）。喉癌组织中,Rb蛋白在HPV16和HPV16 E7阳性及阴性组中的阳性率显著不同（P〈0.01）,而在非癌组织中则无此现象（P〉0.05）。结论喉癌组织中HPV16 E7的高表达导致的pRb功能失活是引起喉癌的主要原因之一。     

喉癌组织中人类乳头瘤病毒抗原的检测

①目的了解人类乳头瘤病毒（ＨＰＶ）抗原在喉癌组织中的分布情况及其关系。②方法用免疫组织化学方法，对喉癌组织进行了ＨＰＶ抗原检测。③结果６０例病人中，１７例为ＨＰＶ抗原阳性，阳性率为２８％．在１６例高度分化的喉癌中，７例ＨＰＶ抗原阳性（４４％）；在２３例中度分化的喉癌中，８例ＨＰＶ抗原阳性（３５％）；在２１例低度分化的喉癌中，只有２例ＨＰＶ抗原阳性（１０％）。经统计学检验，细胞分化程度高的喉癌组织，其ＨＰＶ抗原检出率明显高于细胞分化程度低者（χ２＝１０．５９，Ｐ＜０．０１）。④结论ＨＰＶ与喉癌的致病有关，且ＨＰＶ抗原检出率与细胞分化程度有关。     

喉癌组织中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达及意义

目的:观察喉癌组织中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达,并初步分析其与喉癌组织临床分期、病理分级的相关性.方法:147例喉组织标本,其中喉鳞状细胞癌组织82例,非癌组织39例(声带息肉27例,距肿瘤＞1.0 cm的癌周正常组织12例),癌前病变(声带白斑)26例.免疫组织化学检测各组标本中HPV16及其早期区基因E6、E7蛋白的表达.分析喉鳞癌组织中3种蛋白表达情况与临床分期、病理分级的相关性.结果:喉鳞癌组织中HPV16蛋白及E6、E7蛋白的阳性率明显高于癌前病变组织(P＜0.05或0.01),后者高于非癌组织 (P＜0.05或0.01).非癌组织中HPV16蛋白阳性率明显高于E6、E7蛋白的表达(P＜0.05或0.01),而喉癌组织及癌前组织中三者间无显著差异.不同临床分期(Ⅰ～Ⅳ期)及不同病理分级(Ⅰ～Ⅲ级)喉癌组织中HPV16的阳性率间有显著差异(P＜0.05);而不同临床分期及病理分级间HPV16 E6、E7蛋白表达率无显著差异.结论:HPV16感染后其早期区基因E6、E7的表达可能是诱发喉癌的因素之一,应用免疫学方法抑制E7蛋白的表达对于喉癌的治疗有积极的意义,但其预防和治疗作用不应过分夸大.     

HPV16/18与喉鳞状细胞癌发生发展的关系

目的：研究喉鳞状细胞癌的发生与HPV16／18的相关性。方法：采用原位杂交法检测54例喉癌中HPV16／18的表达。结果：54例喉癌组织中30例HPV16／18阳性，喉癌组HPV16／18的阳性表达为55．6％，癌旁不典型增生组为38．1％，二者比较有显著性差异（P〈0．05）；HPV16／18在癌周正常组织、癌旁单纯增生及轻度不典型增生组织中无表达。随着不典型增生程度的增大，HPV16／18阳性表达率增高，轻、中、重度增生分别为0％、7．1％和12．5％；HPV16／18的表达与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：HPV16／18与喉癌的发生有关，与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关。     

喉鳞状细胞癌组织中HPV16/18感染与hTERT、c-myc蛋白表达的关系及意义

目的研究喉鳞状细胞癌组织中人乳头状瘤病毒（HPV）16／18感染与端粒酶催化亚单位（hTERT）和c—myc蛋白表达的关系及意义。方法在39例喉鳞癌组织、10例声带息肉组织中应用原位杂交法检测HPV16／18的感染情况,同时应用免疫组化法检测hTERT和c—myc蛋白的表达情况,并分析喉鳞癌组织中HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白表达之间的相关性。结果39例喉鳞癌组织中HPV16／18感染阳性表达率48．7％（19／39）,hTERT、c—myc蛋白阳性表达率分别为84．6％（33／39）、82．1％（32／39）。10例声带息肉组织中HPV16／18感染、hTERT蛋白均未见阳性表达,c—myc蛋白阳性表达率为10％（1／10）。经统计学分析HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白在喉鳞癌组织与声带息肉组织间的表达差异均有统计学意义。喉鳞癌组织中HPV16／18感染与hTERT和c—myc蛋白阳性表达之间均存在显著正相关关系。结论喉鳞癌组织中hTERT和c—myc蛋白表达的改变可能与HPV16／18感染有关,且三者相互作用,共同影响喉鳞癌的发生、发展。这些指标综合分析可能为阐明HPV16／18的恶性转化机制以及为喉鳞癌早期诊断和基因治疗提供参考依据。     

以HPV基因通用引物行PCR检测阴茎肿瘤组织中HPV.DNA

为了探讨人乳头瘤病毒感染与阴茎肿瘤的关系。用人乳头瘤病毒基因通用引物行聚合酶链反应,检测５２例阴茎鳞癌。ＨＰＶ阳性率为６７％,３１例为ＨＰＶ－１６,３例为ＨＰＶ１６／１８,１例为ＨＰＶ１１／１８。４例阴茎淋巴结转移灶标本,３例检出与原发癌一致的ＨＰＶ．ＤＮＡ。６例阴茎乳头状瘤标本,４例检出ＨＰＶ－６或１１。２０例正常阴茎包皮均阴性。提示ＨＰＶ有阴茎肿瘤的发生发展中有一定的作用,但与肿瘤的病理分级无     

TLRs表达和HPV16感染与宫颈鳞癌的相关性研究

目的 分析Toll样受体（TLRs）mRNA在宫颈鳞癌和宫颈炎组织中的表达差异及与HPV16感染之间的关系,为研究TLRs在宫颈鳞癌发生发展中的作用提供依据。 方法 以RT-PCR方法检测80例临床组织样本中HPV16 E6和E7的表达及TLRs mRNA的表达,分析各组表达率的差异。 结果 未发现鳞癌组和宫颈炎组HPV16感染与TLRs mRNA表达具有相关性;鳞癌中TLR3 mRNA表达率低于宫颈炎组（P<0.05）;TLRs mRNA在中分化与低分化鳞癌中的表达差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 TLR3 mRNA可能与宫颈鳞癌的发病机制有关,TLRs mRNA和HPV16在宫颈鳞癌中的表达未见相关性。     

喉癌中HPV 16/18 E6蛋白的表达

目的检测HPV16／18E6蛋白在喉癌中的表达水平,研究其表达与临床、病理参数的关系,探讨HPV在喉癌病因学中的作用。方法选取喉癌30例,另选声带息肉30例及正常喉组织6例作为对照,采用免疫组织化学方法(S-P法)检测其HPV16／18E6蛋白的表达。结果喉癌中HPV16／18E6、凹空细胞的阳性率分别为56.7％(17／30)、46．7％(14／30)。声带息肉中凹空细胞的阳性率为40％(12／30),HPV16／18E6为阴性。正常喉组织均为阴性。喉癌中凹空细胞表达与组织分化正相关,分化越高,阳性率越高。喉癌中HPV16／18E6表达与凹空细胞表达呈正相关,与组织分化负相关,分化越低,阳性率越高。结论HPV16、18型与喉癌的发生密切相关。     

HPV16、18E6基因在喉癌组织中的表达

目的 检测HPV16、18E6基因在喉癌中的表达，探讨其在喉癌发病过程中的作用。方法 应用RT－PCR、琼脂糖凝胶电泳方法检测30例声带息肉组织及48例喉癌组织。结果 30例声带息肉组织中6．67％（2／30）有HPV16、18E6基因表达，48例喉癌组织中87．5％（42／48）扩增HPV16E6基因，79．17％（38／48）有HPV18E6基因表达。HPV16、18E6基因与喉癌的临床分型、病理分化程度、临床分期无明显关系（P＞0．05），与淋巴结转移有关（P＜0．05）。结论 HPV16、18E6基因与喉癌的发生密切相关，是喉癌恶性转化的关键，预示着喉癌有较强的增殖能力及转移能力。     

某市食管癌组织中人类乳头状瘤病毒感染情况的研究

目的研究河南省食管癌高发区食管癌组织中人类乳头状瘤病毒感染与食管鳞状细胞癌发生的关系。方法利用PCR和免疫组织化学技术检测68例食管癌,15例非典型增生食管上皮和53例正常食管黏膜组织中人类乳头状瘤病毒HPV16／18感染和HPV16／18E6蛋白的表达情况。结果68例食管癌中,HPV DNA阳性率为67．6％（46／68）。在正常食管黏膜、非典型增生上皮及鳞状细胞癌组织中HPV16／18E6的阳性率分别为9．4％（5／53）、40．0％（6／15）和61．2％（42／68）,癌组织中HPV16／18E6蛋白的阳性表达率明显高于非典型增生上皮和正常食管黏膜（P〈0．05）,非典型增生上皮中HPV16／18E6蛋白的阳性表达率亦明显高于正常食管黏膜（P〈0．05）。结论HPV16／18型感染可能在某食管癌高发区食管癌的发生中起重要作用。