Caspase-3和P—gP在原发性肝细胞癌中的表达和相关性研究

目的通过检测原发性肝细胞癌及其癌旁组织中Caspase-3和P-糖蛋白（P—gp）的表达,了解两者与原发性肝细胞癌临床病理特征之间的关系及两者的相关性,为原发性肝细胞癌的治疗提供一定的理论依据。方法采用免疫组织化学Envision^TM二步法检测50例原发性肝细胞癌及其癌旁组织中Caspase-3和P—gp的表达,并结合患者的临床病理特征、随访资料进行分析。结果Caspase-3在原发性肝细胞癌组织中的表达低于癌旁组织（P〈0．05）;Caspase-3在原发性肝细胞癌组织中的表达与Edmonson病理分级、有无包膜有关（P〈0．05）。P—gP在原发性肝细胞癌组织中的表达高于癌旁组织（P〈0.05）;肝癌组织中P—gp的表达与Edmonson病理分级、是否有肝硬化有关（P〈0．05）。Caspase-3和P-gP的表达呈负相关（r=-0．600,P=0．000）。Caspase-3阳性表达的患者预后较好,P—gP阴性表达的患者预后也较好。结论Caspase-3可能促进原发性肝细胞癌细胞凋亡,抑制原发性肝细胞癌的发生;P-gP与原发性肝细胞癌的耐药性有关,还可能具有抗凋亡作用。Caspase-3低表达或失表达可能与原发性肝细胞癌细胞凋亡抵抗和多药耐药有关。     

非小细胞肺癌中caspase-3、survivin和k-ras的表达及其意义

背景与目的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的预后与众多因素有关,凋亡相关基因在肿瘤的发生发展过程中发挥重要的作用,但其在NSCLC中作为生物预后因素的意义还不明确。本研究的目的是探讨凋亡相关基因caspase-3、survivin、k-ras在NSCLC中的表达与不同临床病理特征和预后的关系,并探讨三者在NSCLC发生过程中可能存在的相关性。方法采用免疫组化SP二步法检测91例石蜡标本癌组织和癌旁正常组织中caspase-3、survivin、k-ras蛋白的阳性表达。结果Caspase-3在癌组织中阳性表达率低于癌旁正常组织,survivin、k-ras在癌组织阳性表达高于癌旁正常组织,均具有统计学差异(P<0.05)。Caspase-3阳性表达与年龄、病理类型、TNM分期、淋巴结状态、分化程度有关(P<0.05),而与病灶大小、有无吸烟史等无关(P>0.05);survivin阳性表达与年龄、TNM分期、分化程度、淋巴结状态有关(P<0.05),而与病理类型、病灶大小、有无吸烟史等无关(P>0.05);k-ras阳性表达与病理类型、吸烟有关(P<0.05),与年龄、TNM分期、淋巴结状态、分化程度、病灶大小等均无关(P>0.05)。Caspase-3与survivin的阳性表达呈负相关(r=-0.662,P<0.001)。Cox多因素分析survivin,caspase-3,TNM分期、病理类型、分化程度5个因素具有独立预后价值(P<0.05)。结论Survivin和k-ras在NSCLC中高表达,而caspase-3在NSCLC中低表达,可能在肿瘤细胞凋亡过程中起着重要的作用;Caspase-3低表达、survivin高表达可作为术后NSCLC预后不良的独立性因素;K-ras与NSCLC预后的关系需要进一步研究。     

原发性肝细胞癌p53蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及意义

目的探讨原发性肝细胞癌中P-gp、p53蛋白的表达及相互关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测37例原发性肝细胞癌及19例非肝癌肝组织中p53蛋白与P-gp的表达。结果37例原发性肝细胞癌P-gp及p53蛋白的表达率为81.08%和64.86%,19例非肝癌肝组织P-gp及p53蛋白的表达率为42.10%和36.84%,相对应的两者有显著性差异(P<0.05);在原发性肝细胞癌中,P-gp的表达与远处转移相关,p53蛋白的表达与原发性肝细胞癌远处转移、肝内转移以及肿瘤的Edmondson分级相关(P<0.05),而且P-gp表达与p53蛋白的表达间具有相关性(P<0.05)。结论原发性肝细胞癌的P-gp及p53蛋白的表达,对于临床上认识原发性肝细胞癌的生物学特性,选择合理的化疗用药及估计预后具有重要意义。     

膀胱移行细胞癌P—gp表达与凋亡相关蛋白p53、bcl—2的关系

目的探讨膀胱移行细胞癌组织中MDR1基因产物P-gp表达与凋亡相关蛋白p53、bcl-2的相互关系及其临床意义.方法采用免疫组化S-P法检测107例原发性膀胱移行细胞癌组织中P-gp、p53、bcl-2蛋白的表达情况.结果P-gp、p53、bcl-2蛋白的阳性表达率分别为63.6%、72.9%、54.2%,三者的过度表达均与膀胱癌的病理分级、临床分期和术后腔内化疗后复发有关;P-gp表达与p53、bcl-2蛋白的表达密切相关(P＜0.01或P＜0.05).结论P-gp、p53、bcl-2蛋白的过度表达不仅是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的重要指标,而且凋亡相关蛋白p53、bcl-2可能参与膀胱移行细胞癌多药耐药的形成.     

乳腺浸润性导管癌组织Livin和Caspase-3蛋白表达及其相关性研究

目的:探讨细胞凋亡相关因子Livin和Caspase-3在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及相关性.方法:应用免疫组织化学SP法检测70例乳腺浸润性导管癌、20例乳腺增生和10例乳腺癌旁组织(距癌组织≥4 cm,组织学结构正常)标本中Livin、Caspase-3的表达情况,探讨两者的相关性及其与临床病理因素的关系.结果:Livin蛋白在癌组织中的阳性表达率为64.3％,高于乳腺增生和乳腺癌旁组织的25.0％和10.0％( P＜0.05);Caspase-3蛋白在癌组织中的阳性表达率为45.7％,明显低于乳腺增生和乳腺癌旁组织中的75.0％和80.0％(P＜0.05);Livin蛋白与Caspase-3蛋白表达呈负相关,P＜0.05.Livin蛋白的阳性表达率随着临床分期增加显著升高(P＜0.05),但与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移无关,P＞0.05.Caspase-3蛋白的表达随着临床分期的增加其阳性表达率下降(P＜0.05),与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级和淋巴结转移无关,P＞0.05.在乳腺浸润性导管癌组织中Livin蛋白与ER、PR表达负相关(P＜0.05),与c-erbB-2的表达无相关性,P＞ 0.05.Caspase-3蛋白与ER、PR表达显著正相关(P＜0.05),与c-erbB-2表达无相关性,P＞0.05.结论:Livin在乳腺癌的发生发展中发挥重要促进作用,可能成为乳腺浸润性导管癌诊断中的标志,并有望成为乳腺癌治疗的新靶点.Caspase-3在Livin抗凋亡通路中发挥着重要作用.     

survivin与HIF-1α在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制蛋白生存素(survivin)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在人肝细胞癌组织中的表达及相关性,分析其与肝细胞癌转移复发的关系.方法 应用免疫组化S-P法检测80例肝细胞癌组织和癌旁组织中survivivn和HIF-1α蛋白的表达情况.结果 80例肝细胞癌组织中survivivn和HIF-1α蛋白表达的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05),两者的表达与门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤分化程度表达密切相关,HIF-1α的表达还与临床分期有关(P<0.05).survivivn和HIF-1α的表达有显著相关性(r=0.349,P=0.001).结论 survivivn和HIF-1α与肝细胞癌侵袭转移的发生有密切关系.     

石蜡包埋的肝细胞癌组织中ASPP家族的表达

目的:研究肝细胞癌中p53凋亡刺激蛋白（ASPP）家族的表达以及临床意义。方法:应用免疫组织化学SP方法检测73例甲醛固定和石蜡包埋的肝细胞癌组织切片和相应癌旁正常组织中ASPP蛋白家族的表达情况。结果:在癌旁正常组织中,ASPP1和ASPP2的表达阳性率高于肝细胞癌组织(P=0.000,0.000),但是肝细胞癌组织中iASPP的表达阳性率高于相应癌旁正常组织(P=0.000)。在肝细胞癌组织中,ASPP1的表达与患者性别、年龄、临床分期以及淋巴结转移均无相关性(P＞0.05),但与病理分级有关(P=0.001);ASPP2的表达与病理分级和临床分期有关(P=0.000,0.000),与性别、年龄以及淋巴结转移无关(P＞0.05)。iASPP的表达与淋巴结转移有关(P=0.004),但是与性别、年龄、病理分级和临床分期无关(P＞0.05)。结论:ASPP蛋白家族异常表达可能与肝细胞癌的发生机制相关,ASPP1和ASPP2表达水平下调并与肝细胞癌病理分级相关,而 iASPP的表达水平上调与癌的淋巴转移相关,iASPP可能是基因治疗肝细胞癌的一个靶点。      

MGMT和Ki-67抗原在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)和细胞增殖核抗原Ki-67在原发性肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达及意义.方法 应用免疫组化S-P法检测68例HCC组织及癌旁组织中MGMT及Ki-67抗原的表达.结果 MGMT、Ki-67抗原在HCc组织中的表达率分别为44.12%(30/68)和57.35%(39/68),MGMT的表达与Hcc组织病理分级有关(P<0.05),与其它临床因素无关(P>0.05);Ki-67抗原的表达与HCC的肿瘤大小、包膜是否完整、脉管有无癌栓、病理分级有关(P<0.05),与血清AFP的浓度无关(P>0.05);并且随Ki-67抗原表达强度的增加,MGMT的表达强度明显下降,Ki-67抗原与MGMT表达呈负相关(γ=-0.301,P<0.05).结论 MGMT在HCC的发生发展中可能起抑制作用,MGMT的缺失是HCC发生的重要分子事件之一,检测Ki-67抗原有助于判断HCC恶性程度及复发转移的风险,联合检测MGMT和Ki-67抗原有助于预测HCC患者预后.     

Survivin和PTEN基因在肝癌组织中表达关系探讨

目的 研究肝癌组织中 Survivin 和 PTEN 基因表达.探讨两种基因和其编码的蛋白产物之间的相互关系以及它们与肝癌临床病理因素的关系.方法 RT-PCR 法检测28例肝癌组织和其相对应的癌旁组织中 Survivin 和 PTEN 基因 mRNA 的表达情况,免疫组化方法检测51例肝癌组织石蜡切片中 Survivin 和 PTEN 蛋白的表达.分析两者 mRNA 和蛋白的表达情况与肝癌临床病理因素的关系.结果 28例肝癌组织中 Survivin mRNA 表达率为46.43%(13/28),高于癌旁组织O%(0/28)(P<0.05);PTEN mRNA 在癌组织中表达率分别为35.71%(10/28),低于癌旁组织71.43%(20/28)(P<0.05).Survivin mRNA 的表达与肝癌病理分级和癌栓形成有关.PTEN mRNA 的表达与肝癌病理分级有关(P<0.05).Survivin 蛋白在肝癌组织中阳性表达率为64.70%(33/51),与肝癌的病理分级有关.PTEN 蛋白在肝癌组织中阳性表达率为47.06%(24/51),与肝癌的病理分级和癌栓形成有关.结论 高表达 Survivin 的肝癌细胞常分化差,易转移.PTEN 在肝癌细胞中表达显著减少或缺失,与癌的分化和转移密切相关.肝癌时Survivin激活与上调,PTEN 失活、下调或缺失.共同参与调控肝癌分化和转移.     

肝细胞癌中eIF3h的表达及其临床意义

目的 探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中真核起始因子3h(eukaryotic initiation factor 3h,eIF3h)的表达及其与临床病理特征的关系和对HCC预后的意义.方法 应用免疫组织化学法检测90例HCC及55例癌旁肝组织中eIF3h的表达.结果 eIF3h在HCC组织中的表达水平高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.01).eIF3h高表达与低表达组在肿瘤分化程度、包膜侵犯及脉管浸润方面比较差异均具有统计学意义(均P<0.05).eIF3h高表达HCC患者5年生存期短于低表达患者(P<0.01).结论 eIF3h可能参与HCC的发生及发展,可以作为HCC预后的标志物.     

细胞凋亡相关基因在食管上皮癌变中的表达及其意义

 目的　探讨食管上皮癌变过程中多个相关的细胞凋亡调控因子的表达状况及其意义。方法　应用碘化丙啶染色和间接免疫荧光标记方法,采用流式细胞术对60例食管癌组织及相应的癌旁组织进行定量检测。结果　bcl-2、c-FLIP基因蛋白在食管癌中的表达皆显著高于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）;Fadd、Caspase-8和Caspase-3 蛋白在食管癌中的表达皆显著低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）。基因相关性比较结果显示,Fadd 与Caspase-8基因蛋白表达之间呈正相关关系（P＜0.01）,与正常黏膜组织和不典型增生组织相比,癌组织中DNA含量明显增高,异倍体细胞显著增加。结论　细胞凋亡的级联调控机制c-FLIP-Fadd-Caspase-8-Caspase-3-bcl-2在食管上皮癌变过程中起着重要作用。食管上皮癌变过程中,DNA含量及异倍体率增加。     

半乳糖凝集素3 在膀胱癌组织中表达和临床意义及其对T24 细胞恶性生物学行为的影响

[摘要] 目的：探讨半乳糖凝集素3（galectin-3）在膀胱癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系及其对膀胱癌T24 细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法：收集2014 年5 月至2016 年6 月在川北医学院附属医院收治的、经病理切片确诊的104 例膀胱癌患者的癌和癌旁组织标本，用免疫组织化学法检测膀胱癌和癌旁组织中半乳糖凝集素3 蛋白的表达，分析其表达与患者临床病理特征的相关性。将siRNA-Gal3、siRNA-Control 分别转染至T24 细胞，用Weatern blotting 检测细胞的半乳糖凝集素3 蛋白表达水平，MTT法检测细胞的增殖，Transwell 实验检测细胞的侵袭，流式细胞术检测细胞的凋亡。结果：膀胱癌组织中半乳糖凝集素3 阳性表达率显著高于癌旁组织（73.1% vs 9.6%，P<0.05），膀胱癌组织中半乳糖凝集素3 的表达与组织学分级、肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和TNM分期均有关（均P<0.05），与性别和年龄无关（P>0.05）。siRNA-Gal3 显著下调半乳糖凝集素3 蛋白的表达水平（P<0.05），干扰半乳糖凝集素3 表达后：T24 细胞的增殖能力和侵袭能力均明显降低（均P<0.05）；细胞的凋亡率明显增加（P<0.05）。结论：半乳糖凝集素3 在膀胱癌组织中呈高表达，并与膀胱癌患者临床病理特征存在密切关系。干扰半乳糖凝集素3 蛋白的表达可抑制膀胱癌T24 细胞的增殖与侵袭，促进细胞的凋亡。     

LRRK2在乳腺癌细胞增殖和耐药中的作用及其机制研究

目的:探讨LRRK2在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、凋亡及耐药的作用和分子机制.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测了48例乳腺癌组织及其配对正常组织中LRRK2表达;并检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231、BT-483及阿...     

ID3基因在逆转骨肉瘤顺铂耐药中的作用及其机制的研究

目的 探讨ID3基因在逆转骨肉瘤顺铂耐药中的表达及对骨肉瘤细胞耐药、凋亡及RhoE、P-gp、Cas-pase-3表达的影响.方法 MTT法检测顺铂处理对U-2 OS及U-2 OS/DDP细胞生长功能的影响,qRT-PCR及Western blot法检测U-2 OS及U-2 OS/DDP细胞中ID3的表达;用ID3过表达载体转染U-2 OS/DDP细胞,以空脂质体转染的细胞作为对照组,各组细胞培养24 h后,用Western blot法检测细胞中RhoE、P-gp、Caspase-3蛋白表达变化;MTT检测耐药细胞耐药性的逆转作用;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 顺铂耐药株U-2 OS/DDP细胞耐药能力明显高于U-2 OS细胞;ID3在顺铂耐药株U-2 OS/DDP细胞表达水平低于U-2 OS细胞;ID3基因过表达对骨肉瘤细胞耐药性具有逆转作用;ID3基因过表达可促进U-2 OS/DDP细胞凋亡;ID3过表达后,P-gp的表达下调,RhoE和Caspase-3的表达上调,差异有统计学意义(P﹤0.05).结论 ID3基因在顺铂耐药株U-2 OS/DDP细胞中表达水平较低,过表达ID3基因能逆转U-2 OS/DDP细胞耐药情况,并通过调节RhoE、P-gp、Caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡,其可能的机制与耐药蛋白的调控有关.     

MTSS1在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖凋亡的作用研究

目的 探讨肿瘤转移抑制候选基因(MTSS1)在胃癌组织中的表达水平及对胃癌细胞增殖凋亡的作用.方法 Western Blot检测胃癌组织及对应的癌旁组织中MTSS1蛋白表达水平.通过细胞转染的方法 将过表达载体pEGFP-N1-MTSS1、空载体pEGFP-N1转染至胃癌细胞中,MTT法检测转染48 h的细胞增殖情况,流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡情况,Western Blot检测转染48 h细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平.胃癌细胞与NOTCH信号通路抑制剂S2188作用48 h后,检测细胞凋亡及细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平.结果 胃癌组织中MTSS1蛋白水平明显低于癌旁组织(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞存活率明显低于pEGFP-N1组(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞凋亡率明显高于pEGFP-N1组(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2表达水平与pEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义(P=0.000);NOTCH信号通路抑制剂S2188作用胃癌细胞48 h后,抑制剂组的细胞凋亡率明显高于对照组(P=0.000),两组的Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P=0.000).结论 MTSS1在胃癌组织中表达下调.MTSS1能促进胃癌细胞凋亡,抑制胃癌细胞增殖,作用机制与NOTCH信号通路有关.     

RP、P-gp、GST-π蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨肺癌耐药蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽转移酶π(GST-π)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法,检测60例肺癌组织和30例癌旁正常肺组织中LRP、P-gp和GST-π蛋白的表达结果 .并分析3者与NSCLC各临床病例特征的关系.结果NSCLC癌组织中LRP、P-gp和GST-π蛋白阳性表达率(76.67%,51.67%,78.33%)均显著高于癌旁组织(36.67%,20.00%,30.00%),差异均具有统计学意义(P<0.05).LRP、P-gp和GST-π蛋白在中低分化程度(65.00%,48.33%,75.00%)和Ⅰ~Ⅱ期癌组织中阳性表达率(56.67%,40.00%,71.67%)均分别显著高于高分化(1.67%,0,5.00%)和Ⅲ~Ⅳ期癌组织(10.00%,6.67%,8.33%),差异均具有统计学意义(P<0.05).LRP、P-gp和GST-π蛋白阳性表达率有淋巴结转移(43.33%,26.67%,40.00%)与无淋巴结转移(40.00%,20.00%,40.00%)比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 LRP、P-gp和GST-π蛋白表达水平NSCLC组织高于癌旁组织,并且与NSCLC的病理分级和TNM分期有关,与淋巴结转移无关.