白细胞介素-10多克隆抗体对缺氧缺血新生大鼠大脑皮层c-fos表达的调节

目的：探讨白细胞介素-10（IL-10）多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后大脑皮层c-fos表达的调控作用，以期阐明内源性IL-10对缺氧缺血新生动物神经保护作用的可能机制。方法：建立新生大鼠缺氧缺血性脑病标准化的动物模型，应用免疫组织化学和免疫印迹技术，分别对缺氧缺血、IL-10多克隆抗体预处理后予缺氧缺血、免疫对照组及正常对照组4组新生大鼠大脑皮层c-fos表达进行分析。结果：新生大鼠缺氧缺血后，缺血侧大脑皮层c-fos表达明显高于正常对照组（P<0.01），腹腔注射IL-10多克隆抗体可进一步提高大脑皮层c-fos含量（P<0.01）。结论：c-fos的表达可能在缺氧缺血后脑组织损伤演变过程中起着重要的病理作用；IL-10多克隆抗体可以增强脑内c-fos的表达，提示IL-10对缺氧缺血新生动物的神经保护作用可能与其抑制大脑皮层c-fos表达有关。     

C-fos在多发性梗死性痴呆大鼠大脑皮层和海马的表达

目的研究即早基因c-fos与多发性梗死性痴呆(MID)的关系。方法采用微栓子注入颈内动脉的方法制备大鼠大脑多发性梗死性痴呆模型,通过免疫组织化学方法检测不同时间段大鼠脑内c-fos基因的表达。结果正常大鼠大脑皮层和海马内即有c-fos基因的表达,假手术组的表达略高于正常组(P>0.05);大鼠多发性梗死性痴呆后大脑c-fos基因过表达,在皮层和海马的表达明显高于正常对照组及假手术组(P<0.05)。随着缺血时间延长,缺血24h达高峰,持续至1个月。结论多发性梗塞性痴呆后c-fos基因呈现规律性的过表达。     

肾上腺功能水平对脑缺血再灌注大鼠海马bax和bcl-2基因表达的影响

目的：观察肾上腺功能水平对大鼠脑缺血再灌注后海马bax和bcl-2基因表达的影响。方法： 成年雄性Wistar大鼠36只随机分为单侧肾上腺切除组（ADX）、单侧肾上腺切除+注射糖皮质激素组（GC）和假手术对照组（sham）。所有大鼠在单侧肾上腺切除或假手术14 d后行全脑再灌注手术。每组大鼠分别于再灌注后1 h、4 h、8 h、24 h随机取3只断颈处死，取海马组织提取总RNA，RT-PCR半定量检测c-fos、bax和bcl-2的表达情况。另设3只大鼠为正常组（normal）。结果： c-fos、bax表达水平在ADX、GC、sham 3组之间无统计学差异（P>0.05）。Sham组bcl-2表达水平明显高于ADX组和GC组(P<0.05)，而ADX组与GC组bcl-2表达无统计学差异(P>0.05)。Sham组bax/bcl-2明显低于ADX组和GC组(P<0.05)，而ADX组与GC组间bax/bcl-2无统计学差异(P>0.05)。结论: 肾上腺功能水平对脑缺血再灌注后大鼠海马组织c-fos和bax基因表达无影响，但肾上腺功能低下会导致脑缺血再灌注后大鼠海马组织bcl-2基因表达下调，bax/bcl-2比值升高，可能促进海马组织细胞发生凋亡，补充糖皮质激素对此bcl-2基因表达下调无纠正作用，表明还有其它机制存在。     

点燃癫痫模型大鼠皮层与海马c—fos、c—jun基因的表达

目的：通过点燃癫痫模型大鼠脑内c-fos、c-jun基因表达的观察以探讨癫痫的发病机理。方法：选用大鼠杏仁核快速点燃癫痫模型，应用免疫组织化学技术观察点燃癫痫大鼠的皮层与海马c-fos、c-jun基因的表达。结果：杏仁核点燃癫痫大鼠的皮层与海马c—fos、c-jun基因表达明显增强，阳性细胞数量显著增加。结论：c—fos、c-jun基因的表达与痫性发作的机制相关。     

点燃癫癎模型大鼠皮层与海马c-fos、c-jun基因的表达

目的:通过点燃癫癎模型大鼠脑内c-fos、c-jun基因表达的观察以探讨癫癎的发病机理.方法:选用大鼠杏仁核快速点燃癫癎模型,应用免疫组织化学技术观察点燃癫癎大鼠的皮层与海马c-fos、c-jun基因的表达.结果:杏仁核点燃癫癎大鼠的皮层与海马c-fos、c-jun基因表达明显增强,阳性细胞数量显著增加.结论:c-fos、c-jun基因的表达与癎性发作的机制相关.     

c-fos mRNA在围产期缺血缺氧脑损伤后的表达特点

为探讨围产期缺血缺氧脑损伤的发病机制，本实验对c-fos在脑缺血缺氧后的表达变化规律进行了研究。通过结扎Wistar孕鼠一侧子宫角血管的方法（未结扎侧子宫角作为对照），建立围产期缺血缺氧脑损伤动物模型。采用原位杂交方法观察了剖宫产后存活不同时间的大鼠大脑c-fosmRNA的表达，结果发现，缺血后即刻，大脑皮层和海马即出现c-fosmRNA的表达。随时间延长，表达量逐渐增加，至1h时，杂交信号最强，维持到2、4h后逐渐减弱。但到24h时.c-fosmRNA又出现第二次高表达，以后又逐渐减低，48h表达极微，3d后各组都未检出其表达。对照组仅在生后1h海马有较少量c-fosRNA的表达。结果表明，宫内缺血缺氧引起了即刻早期基因c-fosmRNA的表达增强，且具有一定规律性。c-fos的改变可能会引起其后续靶基因尤其是一些与细胞死亡相关基因的转录，从而引起脑组织的病理损害。     

羟丁酸钠对缺氧缺血后新生大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的：观察羟丁酸钠(GHB)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后海马CA1区神经元Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法：生后 7 d SD大鼠采用Rice等法，制成HIBD动物模型。新生大鼠随机分成假手术（sham）组、缺氧缺血（HI）组、GHB组。其中GHB组包括GHB50（50 mg/kg）、GHB100（100 mg/kg）、GHB200（200 mg/kg）亚组。各组在缺氧完成后 1 h、3 h、24 h、72 h 和 168 h 时点取脑切片作HE染色，用免疫组化染色观察Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：①光镜下HE染色结果：HI组海马CA1区锥体细胞排列紊乱，锥体细胞减少，海马带宽窄不一，可见细胞肿胀和核碎裂。GHB50组和GHB100组可减轻锥体细胞层病理改变。②免疫组化染色结果：HI组缺血缺氧后1h海马CA1区 Bcl-2、Bax表达开始增强，24 h 时达到高峰，其后逐渐减弱。在GHB50组和GHB100组可使Bcl-2表达明显高于HI组（P<0.05，P<0.01），Bax表达明显低于HI组（P<0.05，P<0.05）。结论：GHB可通过对Bcl-2、Bax表达的调控抑制新生大鼠HIBD后海马CA1区神经元损伤。     

CGRP和NGF对全脑缺血再灌注大鼠脑组织Erk mRNA表达的调节作用

目的　检测大鼠脑缺血再灌注后细胞外信号调节蛋白激酶信使RNA(ErkmRNA)的表达,探讨降钙素 基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对脑组织的保护作用。　方法　采用颈动脉负压分流法制作大鼠脑缺 血再灌注模型,采用原位杂交及显微图像分析方法检测海马及皮质内Erk的表达。　结果　大鼠缺血再灌注海马 及皮质内ErkmRNA较正常组增多(P<0.05),而注射CGRP或NGF后ErkmRNA明显高于缺血再灌注组(P< 0.01),两者联合应用效果更加显著(P<0.05)。　结论　CGRP及NGF可能参与缺血神经元ErkmRNA的调节,两 者对缺血神经元有协同修复作用。     

新生大鼠缺血缺氧性脑病时脑微循环血流及一氧化氮的变化

目的：探讨脑微循环血流及一氧化氮（NO）在新生大鼠缺血缺氧性脑病（HIE）时的变化。方法：结扎新生大鼠右侧颈总动脉，观察脑微循环血流量、脑组织含水量、NO、丙二醛（MDA）含量的变化。结果：新生大鼠HIE动物有明显的左侧偏瘫等行为障碍，肉眼观察脑组织变白，脑微循环血流量（2 h、第2 d、第4 d）明显低于对照组（P<0.01）；脑组织含水量（2 h、第2 d）明显高于对照组（P<0.01）；NO及MDA含量（2 h、第2 d、第4 d）明显多于对照组（P<0.01或P<0.05）。结论：新生大鼠HIE时脑微循环血流量减少、NO含量及脂质过氧化的代谢产物MDA含量增高。     

CGRP对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质CREB和p-CREB的上调作用

目的：探讨外源性降钙素基因相关肽（CGRP）对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质CREB和磷酸化CREB（p-CREB）表达的影响。方法:用线栓法阻塞大鼠右大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注模型，应用免疫组织化学、Western blotting和图像分析方法检测大鼠手术侧顶叶皮质CREB和p-CREB表达。结果:缺血再灌注组大鼠顶叶皮质CREB表达少于假手术组，CGRP组大鼠顶叶皮质CREB表达多于缺血再灌注组（P<0.05）。假手术组右侧顶叶皮质p-CREB表达很少，缺血再灌注组顶叶皮质p-CREB表达多于假手术组，CGRP组p-CREB表达多于缺血再灌注组（P<0.05）。结论:CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠右侧顶叶皮质CREB和p-CREB的表达，CGRP对缺血神经元的保护作用可能是通过上调神经元内CREB和p-CREB来实现的。     

腺苷A_(2A)受体拮抗剂SCH58261减轻胎兔缺氧缺血性脑损伤

目的:研究腺苷A_(2A)受体拮抗剂SCH58261减轻成熟胎兔缺氧缺血性脑损伤的作用。方法:选择孕29 d的普通级新西兰孕白兔随机分为假手术组(SO组)、缺氧缺血组(HI组)、SCH58261 0.04 mg/kg剂量组、SCH58261 0.12 mg/kg剂量组和药物溶剂组(DMSO组)。制备胎兔缺氧缺血性脑损伤模型,孕兔均在术后24 h行剖宫产,将存活新生兔置入已提前预热为35℃的婴儿暖箱内保暖。记录新生兔的一般状况;评估存活新生兔神经行为学改变;利用质谱法测孕兔血清、新生兔血清及脑组织的SCH58261浓度;采用real-time PCR检测新生兔脑组织皮质、海马和纹状体区Bcl-2和Bax的mRNA表达;利用Western blot实验检测新生兔脑组织皮质、海马和纹状体区p-P38 MAPK的蛋白水平。结果:新生兔血清和脑组织中均能检测到SCH58261的存在。与HI组比较,SCH0.04 mg/kg组和SCH 0.12 mg/kg组新生兔脑皮质、海马和纹状体区Bcl-2的mRNA表达均增加(P0.05),而Bax的mRNA的表达均减少(P0.05)。将p-P38 MAPK在新生兔脑皮质、海马和纹状体区的表达水平进行比较,SCH0.04 mg/kg组和SCH 0.12 mg/kg组的P38 MAPK磷酸化水平均低于HI组(P0.05),且SCH 0.12 mg/kg组与SCH 0.04 mg/kg组相比稍降低(P0.05)。结论:腺苷A_(2A)受体拮抗剂SCH58261可能通过阻断腺苷A_(2A)受体,抑制神经元P38 MAPK的磷酸化,进一步抑制脑细胞凋亡而减轻宫内缺氧缺血性脑损伤。     

降钙素基因相关肽和神经生长因子对短暂性脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fos mRNA及蛋白表达的影响

目的：探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对短暂性脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fos mRNA及蛋白表达的影响。方法：在脑缺血后再灌注模型上，应用原位杂交和免疫组织化学结合显微图像分析方法检测c-fos mRNA及蛋白表达。结果：缺血组大鼠纹皮质较假手术组c-fos mRNA和蛋白表达非常显著增加；CGRP组和NGF组c-fos mRNA和蛋白表达分别显著弱于缺血组；CGRP和NGF合用组c-fos mRNA和蛋白表达非常明显弱于缺血组、CGRP组和NGF组。结论：CGRP和NGF分别抑制脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fos mRNA及蛋白表达，联合应用则能显著抑制脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fos mRNA及蛋白表达，二者对保护缺血神经元可能有协同作用。     

黄芪多糖对缺血脑损伤大鼠海马神经递质及c-fos mRNA表达的影响

目的: 观察黄芪多糖(astragalan,AG)对缺血性脑损伤大鼠海马乙酰胆碱(ACh)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及c-fos mRNA表达的影响。方法: 取Wistar雄性大鼠100只,随机分成假手术组(sham-operated group,SOG)、模型组(model group, MG)、低剂量黄芪多糖治疗组(low-dose astragalan treatment group, L-AGTG)、高剂量黄芪多糖治疗组(high-dose astragalan treatment group, H-AGTG),每组10只。所有MG和AGTG组颈部切开阻断右侧大脑中动脉,造成缺血性脑损伤后,AGTG组腹腔注射AG(5 mg·kg^-1和15 mg·kg^-1)。于1 d、3 d和7 d分别脑血流再灌注,随即评分神经功能缺损情况后取材,测定海马匀浆中ACh、NE和5-HT的含量,采用RT-PCR法半定量分析大鼠海马c-fos的mRNA水平。结果: AG能减轻脑缺血引起的海马损伤。L-AGTG 7 d和H-AGTG 3 d、7 d海马匀浆ACh、5-HT和NE的含量均显著高于MG而低于SOG(P<0.05或P<0.01),且呈现剂量递增趋势;SOG的c-fos mRNA表达低于MG(P<0.05或P<0.01),提示脑缺血因素造成了 c-fos 基因表达增强,加速了下游基因表达,有利于神经细胞的保护;H-AGTG 3 d、7 d c-fos mRNA表达均高于MG(P<0.05),提示黄芪多糖具有上调c-fos mRNA表达的作用。结论: 黄芪多糖能减轻脑缺血再灌注引起的神经细胞损伤、改善海马神经功能,其作用机制与提高海马ACh、NE、5-HT含量和促进 c-fos 基因表达有关。     

吗啡依赖小鼠海马神经元c-fos的表达

目的:探讨吗啡依赖小鼠海马不同亚区神经元c-fos表达的差异。方法:以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,腹腔注射纳洛酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应强度。采用免疫组织化学法显示吗啡依赖小鼠和正常对照组小鼠海马神经元c-fos的表达。结果:吗啡依赖组海马CA1区和齿状回Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),CA3区无明显改变(P>0.05)。纳洛酮催促戒断组海马CA1和CA3区Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),齿状回Fos阳性神经元数目增加更为明显(P<0.01)。吗啡依赖组与纳洛酮催促戒断组CA3区阳性神经元数目有显著性差异(P<0.05)。结论:海马神经元c-fos的表达增强可能与吗啡依赖对神经元的损伤有关。     

Fmr1基因在大鼠快速眼动睡眠剥夺后脑皮质、海马和丘脑区的表达

目的探讨快速眼动(REM)睡眠剥夺过程中Fmr1基因在大鼠皮质、海马和丘脑区的表达及变化。方法采用改良多平台水环境法(MMPM)制作大鼠睡眠剥夺模型,采用免疫组织化学法及RT-PCR方法检测Fmr1基因的表达变化。结果在皮质和丘脑中,与CC组和TC组相比,SD1d和SD2d组的Fmr1基因表达无明显变化,SD3d组开始增高(P0.05),SD5d、SD7d组和SD9d组显著增高(P0.01);在海马中,与CC组和TC组相比,SD1d和SD2d组的Fmr1基因表达无明显变化,SD3d组开始降低(P0.05),SD5d、SD7d组和SD9d组显著降低(P0.01)。结论 Fmr1基因在大鼠睡眠剥夺第3天开始表达发生变化,在皮质和丘脑中表达增高,在海马中表达降低。     

脑缺血诱导大鼠皮层和海马二价金属离子转运体1表达增加的研究

目的:探讨脑缺血对大鼠皮层、海马二价金属离子转运体1(DMT1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为脑缺血1、3、7、28 d和假手术组。结扎双侧颈总动脉建立脑缺血模型组,假手术组仅分离双侧颈总动脉但不结扎。采用RT-PCR测定DMT1+/-IRE mRNA的表达;采用免疫组化染色测定大鼠皮层及海马组织DMT1的表达。结果:大鼠皮层和海马DMT1+/-IRE mRNA的表达随缺血时间的延长逐渐增加。与假手术组比较,皮层DMT1+/-IRE mRNA的表达在缺血1、3 d时无差异(P>0.05);缺血7 d时表达增加(P<0.01),缺血28d时增加更明显(P<0.01)。海马DMT1-IRE mRNA表达除在缺血1 d时与假手术组无差异外(P>0.05),其余时间点DMT1+/-IRE mRNA表达均高于假手术组(P<0.01)。随缺血时间的延长,大鼠皮层、海马的锥体细胞、颗粒细胞及血管内皮细胞DMT1的表达逐渐增加。DMT1的表达除缺血1 d组与假手术组无差别外(P>0.05),其余各组均高于假手术组(P<0.05)。结论:脑缺血可诱导大鼠皮层及海马DMT1表达升高,DMT1表达的改变可能参与了脑缺血引起大鼠脑铁含量升高及神经元铁沉积过程。     

过氧化物酶体增生物激活受体激活物对ox-LDL诱导内皮细胞c-fos表达的影响

目的 观察过氧化物酶体增生物激活受体α激活物K877对氧化型低密度脂蛋白所诱导的人脐静脉内皮细胞c-fos基因表达的影响及机制。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,采取氧化型低密度脂蛋白刺激,应用K877干预,逆转录聚合酶链反应检测c-fos基因的表达。结果 与对照组比较,氧化型低密度脂蛋白组c-fos基因表达增加（P＜0.05）;与氧化型低密度脂蛋白组比较,K877组c-fos基因表达减少（P＜0.05）;与K877组比较,K877联合多聚肌甘酸c-fos基因表达进一步下降（P＜0.05）。结论 氧化低密度脂蛋白促进了人脐静脉内皮细胞c-fos基因的表达,过氧化物酶体增生物激活受体α激活物K877可抑制c-fos基因的表达,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1参与了该过程。     

高脂饮食对大鼠海马、大脑皮质和脊髓GDNF表达的影响

目的:探讨高脂饮食对大鼠海马、大脑皮质和脊髓胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的影响。方法:20只雄性SD大鼠随机分成两组:普通饮食组(ND)和高脂饮食组(HFD),每组10只,分别给予两组大鼠普通饮食和高脂饮食14周,测量各组大鼠体重、脂肪重、Lee’s指数和脂体比。应用real time RT-PCR检测各组大鼠海马、大脑皮质和脊髓GDNF mRNA的表达;应用Western Blot检测各组大鼠海马、大脑皮质和脊髓GDNF蛋白的表达;应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组大鼠海马、大脑皮质和脊髓肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的水平。结果:高脂饮食导致大鼠体重、脂肪重、Lee’s指数和脂体比均明显升高(P <0.05); HFD组大鼠海马、大脑皮质和脊髓GDNF mRNA表达水平较ND组均显著下降(P <0.01),HFD组大鼠海马、大脑皮质和脊髓GDNF蛋白表达水平较ND组均明显下降(P <0.05); HFD组大鼠海马、大脑皮质和脊髓中TNF-α、IL-1β和IL-6水平与ND组相比均明显升高(P <0.0...     

CGRP和NGF对全脑缺血再灌注大鼠脑组织Erk表达的调节作用

目的 :检测大鼠脑缺血再灌注后细胞外调节蛋白激酶 (Erk)的表达 ,探讨降钙素基因相关肽 (CGRP)和神经生长因子 (NGF)对脑组织的保护作用及机制。方法 :采用颈动脉负压分流法制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,采用免疫组织化学SABC法及显微图像分析检测海马及皮质内Erk的表达。结果 :大鼠缺血再灌注海马及皮质内Erk免疫反应阳性产物较正常组增多 (P <0 .0 5 ) ,而注射CGRP或NGF后阳性产物明显高于缺血再灌注组 (P <0 .0 1 ) ,二者联合应用效果更加显著 (P <0 .0 5 )。结论 :CGRP及NGF参与缺血神经元Erk的调节 ,二者对缺血神经元有协同修复作用