大鼠心肌梗塞后梗塞区胆碱能神经支配的变化

目的：探讨大鼠心肌梗塞区胆碱能神经支配的变化。方法：实验用20只大鼠，以组织化学Karnovsky-Roots法显示胆碱能神经纤维。应用多功能图像分析仪测定梗塞区胆碱能神经纤维密度。结果：大鼠心肌梗塞后4天，梗塞区胆碱能神经纤维密度显著下降；梗塞后14天，梗塞区胆碱能神经纤维完全消失；梗塞后120天，心肌梗塞区的部分区域出现胆碱能神经纤维，结论：大鼠心肌梗塞后14天，梗塞区发生完全的去胆碱能神经支配，120天后部分区域出现胆碱能神经再支配。     

神经生长因子对大鼠心肌梗塞后胆碱能神经的保护作用

目的　观察神经生长因子(NGF)对大鼠心肌梗塞后胆碱能神经的影响,探讨NGF对心肌梗塞的可 能治疗作用。方法　SD大鼠20只制心梗模型,其中10只心梗后给予NGF为实验组,2天后取材,同时取正常心肌 作对照。以Karnovsky Roots法,显示胆碱能神经纤维,应用多功能真彩色病理图像分析系统分析胆碱能神经纤维 密度。结果　心梗左心室心肌梗塞区及梗塞周围区存活心肌中胆碱能神经纤维密度比正常组明显降低(P<0. 01);实验组应用NGF后胆碱能神经纤维密度较心梗组升高。结论　神经生长因子能增加大鼠心肌梗塞后胆碱能 神经纤维的密度,可能对心梗有治疗作用。     

葛根素对大鼠心肌梗死后梗死部位肾上腺素能神经纤维的影响

目的观察葛根素对大鼠心肌梗死后梗死部位。肾上腺素能神经纤维分布的影响，以求证实葛根索的神经保护作用。方法Wister大鼠120只，分为假手术组、心肌梗死模型组和葛根素组。分别于术后6h、2、4、7、14时取材，应用免疫组织化学方法，显示肾上腺素能神经纤维，应用多功能真彩色病理图像分析系统分析。肾上腺素能神经纤维的密度。结果心肌梗死模型组大鼠在术后6h、2、4、7、14时，梗死区肾上腺素能神经纤维密度均比假手术组明显降低（P〈0．01）。葛根素组大鼠在术后7、14d时，梗死区。肾上腺素能神经纤维密度较心肌梗死模型组明显增多（P〈0．01）；与假手术组相比无显著差异（P〉0．05）。结论葛根素能干预大鼠心肌梗死后的肾上腺素能神经纤维分布减少，具有神经保护作用。     

生长激素释放肽对心衰大鼠植物神经重构的影响

本研究观察了生长激素释放肽(GHRP)的应用对心衰动物胆碱能神经和肾上腺素能神经支配的影响。Wistar大鼠50只,随机分为:假手术组10只;GHRP组30只;模型组10只。心衰模型成功后4周,Karnovsky-Roots法及免疫组织化学方法分别显示心肌胆碱能神经纤维及肾上腺素能免疫阳性纤维,应用多功能真彩色病理图像分析系统分析两种神经纤维密度。结果显示,模型组大鼠心肌中胆碱能神经纤维和肾上腺素能神经纤维密度明显低于假手术组(P<0.01);GHRP组大鼠心肌中两种神经纤维密度较模型组明显增高(P<0.01),但略低于假手术组神经纤维密度(P<0.05)。上述研究表明GHRP可延缓大鼠心衰后的去神经支配,改善神经重构。     

大鼠心肌梗死后AChE阳性神经纤维再支配的观察

目的：观察大鼠心肌梗死后，梗死灶边缘区乙酰胆碱酯酶（AChE）阳性神经纤维密度的变化，探讨AChE阳性神经纤维的再支配过程。方法：实验用大鼠，结扎左冠状动脉前降支制备急性心肌梗死（AMI）模型，应用Kamovsky--Roots法和电镜组化技术，显示左心室梗死周围区1、2、12周AChE阳性神经纤维的密度变化。结果：①AMI后1、2周左心室梗死边缘区的AChE阳性神经纤维密度降低（P〈0．05），②12周后梗死边缘区的AChE阳性神经纤维密度升高，接近对照组。③电镜下见AChE阳性反应物以散在颗粒形式出现于肌间神经纤维走行处。结论：大鼠急性心肌梗死后12周，梗死周围区的存活心肌出现了神经再支配。     

神经生长因子联合神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤

背景:单纯的神经干细胞移植对受损脊髓组织的修复作用并不理想,研究证实神经生长因子兼有神经元营养和促突起生长双重作用,可以有效的促进脊髓损伤后神经功能的恢复。目的:观察神经干细胞移植联合应用神经生长因子对脊髓损伤后大鼠运动功能恢复的影响。方法:SD大鼠42只,建立急性脊髓损伤模型后随机分成3组,伤后1周于损伤处分别注入培养液、单纯神经干细胞或神经干细胞联合神经生长因子。于伤后1,2,4,6,8周进行BBB评分和斜板实验等运动功能检测。伤后4周取材行病理切片苏木精-伊红染色及BrdU免疫组化染色,伤后8周取材行辣根过氧化物酶示踪观察及体感诱发电位观察神经电生理恢复情况。结果与结论:伤后4周单纯神经干细胞组、神经干细胞联合神经生长因子组大鼠后肢运动功能均有较明显恢复,神经干细胞联合神经生长因子组较单纯神经干细胞组快,差异有显著性意义(P0.05)。培养液组亦有所恢复,但程度较轻。病理切片显示培养液组未见神经轴索通过。单纯神经干细胞组可见少量神经轴索样结构,神经干细胞联合神经生长因子组可见较多神经轴索样结构。BrdU的阳性细胞数及HRP阳性神经纤维数:神经干细胞联合神经生长因子组单纯神经干细胞组培养液组且各组之间差异有显著性意义(P0.01)。神经干细胞联合神经生长因子组大鼠体感诱发电位的潜伏期、波幅优于单纯神经干细胞组(P0.05),明显优于培养液组(P0.01)。结果提示神经干细胞移植对于后肢功能的恢复有促进作用,联合应用神经生长因子有协同效果。     

NGF和GM1联合应用对去细胞异种神经支架移植后神经再生和修复的影响

为了探讨神经生长因子(NGF)和单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)联合应用对去细胞异种神经支架移植后神经再生及功能恢复的影响,本研究将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、NGF治疗组、GM1治疗组、NGF+GM1联合治疗组,选取兔胫神经进行化学萃取,形成去细胞异种神经支架桥接大鼠10mm坐骨神经缺损,移植前分别用等渗盐水(NS)、NGF液、GM1液或NGF+GM1液浸泡去细胞异种神经支架,术后各组大鼠术侧小腿肌内分别注射NS液、NGF液、GM1液或NGF+GM1液。术后4、8周行大体观察并用神经电生理、肌湿重、免疫组织化学等方法测定神经纤维再生及功能恢复情况。结果显示:在同一时间点,NGF+GM1联合治疗组坐骨神经运动传导速度恢复率、小腿腓肠肌复合动作电位波幅恢复率、小腿三头肌湿重恢复率均优于单独用药组(P<0.05);免疫组织化学结果显示NGF+GM1联合治疗组有大量再生有髓神经纤维顺畅地通过远端吻合口。本研究结果提示联合应用NGF和GM1可明显促进去细胞异种神经支架移植后的神经纤维再生与功能恢复。     

家兔主要大脑动脉胆碱能神经与蝶腭神经节、耳神经节的关系

应用神经节切除术和胆碱酯酸级化法，对19只新西兰家兔大脑前、中、后动脉的胆碱能神经的形态学变化进行了比较观察，目的在于探明主要的大脑动脉胆碱能神经与蝶腭神经节、耳神经节的关系．根据两组动物实验（①非手术组：不切除神经节，只对大脑前、中、后动脉进行胆碱酯酶染色，作为正常对照之用；②手术组：按五组不同组合方式，分别切除神经书，然后进行胆碱酯酶染色，观察不同方式的切除手术后的胆碱能神经的变化）的结果证明：非手术组的各主要大脑动脉壁上均存在丰富的棕红色胆碱能神经纤维，主干及分支都清晰可见，神经纤维密度呈（+++）．手术组各种方式的切除神经节的结果，表现为出现胆碱酯酶聚积现象和神经纤维的分布密度降低（++、+），未发现神经纤维消失．本研究的结果又提示，家兔一侧的主要大脑动脉胆碱能神经的节后神经元可能与双侧的蝶腭神经节和耳神经节有关。     

骨髓基质细胞与葛根素联合治疗大鼠缺血性脑损伤

目的:探讨葛根素与骨髓基质细胞(BMSCS)治疗缺血性脑损伤的可能机制.方法:制备永久性局灶性脑缺血大鼠模型,分为空白组、髓基质细胞(BMSCs)组、葛根素组、联合用药组.BrdU标记的3代BMSCs在脑缺血后1d经尾静脉移植大鼠体内,Zausinger六分法检测大鼠神经功能恢复情况,TTC染色法计算脑梗死体积,免疫组织化学和免疫荧光方法观察BrdU阳性细胞及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达.结果:BMSCs组、葛根素组、联合用药组神经功能相比空白组有改善;联合用药组较BMSCs组和葛根素组改善更为明显.BMSCs组、葛根素组以及联合用药组脑梗死体积均明显缩小,联合用药组与BMSCs组、葛根素组之间差异显著.联合用药组脑损伤区BrdU阳性细胞明显多于BMSCs组.BMSCs组、葛根素组、联合用药组NSE表达均高于空白组,联合用药组与BMSCs组和葛根素组间差异显著,葛根素组NSE表达要低于BMSCs组.荧光显微镜下,绿色荧光的细胞主要集中在海马CA1区,而且同时显示红色荧光.结论:BMSCs和葛根素都可以改善永久性局灶性脑缺血大鼠的神经功能,促进脑损伤的修复;葛根素能够促使BMSCs进入脑损伤区,从而促进BMSCs对缺血行脑损伤的修复作用;BMSCs进入大脑后主要聚集在伤侧海马CA1区,并分化为神经元发挥脑损伤修复作用.     

神经生长因子不同给药方式对坐骨神经吻合后修复与再生的影响*

背景：神经生长因子对神经损伤后的修复有促进作用,但目前对不同用药方式的优劣性尚有争议。 目的：观察鞘膜内与局部应用神经生长因子对兔坐骨神经吻合后修复与再生的影响。 方法：将24只新西兰大白兔坐骨神经切断后再缝合,分别向兔鞘膜内或损伤局部注射30 μg神经生长因子或等量生理盐水。 结果与结论：坐骨神经损伤后12周,鞘膜内注射神经生长因子组损伤坐骨神经鞘膜增厚,神经纤维排列较整齐,与正常神经纤维差异不大;且其神经干传导速度、有髓神经纤维数目、髓鞘厚度也明显高于其他组(P < 0.05),损伤局部注射神经生长因子组次之。说明神经生长因子具有促进外周神经吻合后修复与再生的功能,鞘膜内应用优于局部注射。     

神经生长因子促进老年鼠大脑皮质胆碱能纤维损伤后再生

目的：探讨神经生长因子（nerve growth factor,NGF)对老年鼠大脑皮质胆碱能神经纤维损伤后再生的影响。方法：老年SD大鼠顶皮质切一宽2mm的冠状切口,侧脑室注射NGF,AChE纤维染色结合体视系分析正常组,损伤对照组和NGF用药组切口嘴,尾侧区的胆碱能纤维的再生情况。结果：损伤对照组损伤1个月后,嘴侧AChE阳性纤维增生至正常111．44％,尾侧纤维减少至正常67．14％;NGF用药组嘴侧纤维密度比损伤对照组增多,为正常145．93％,尾侧纤维为正常127．95％,结论：提示NGF对老年乳类皮质胆碱能纤维后损伤再生具有一定促进作用。     

NGF treatment promotes development of basal forebrain tissue grafts in the anterior chamber of the eye

Summary The effects of nerve growth factor (NGF) on developing central cholinergic neurons were studied using intraocular grafts of rat fetal (E17) basal forebrain tissue. Prior to grafting, grafts were incubated in NGF or saline. Transplants were allowed to mature for six weeks, receiving weekly intraocular injections of NGF or saline. Measurements of NGF levels in oculo after one single injection showed that NGF slowly decreases in the anterior chamber fluid, and after one week, low but significant levels were still present in the eye. Following pretreatment with diisopropylfluorophosphate (DFP), the cholinergic neurons in the grafts were analyzed using three morphological markers: antibodies to cholineacetyltransferase (ChAT), antibodies to acetylcholinesterase (AChE Ab) and acetylcholinesterase histochemistry (AChE). The transplants grew well and became vascularized within the first week. The growth of the NGF-treated basal forebrain grafts was significantly enhanced as compared to the growth of the saline-treated grafts evaluated with repeated stereomicroscopical observations directly through the cornea of the etheranaesthetized hosts. The NGF-treated grafts contained almost twice as many cholinergic neurons seen with all the cholinergic markers used, as the salinetreated grafts. However, there was no difference in cholinergic cell density between the two groups. The morphology and size of an individual cholinergic neuron was similar in the two groups. The fiber density as evaluated with AChE-immunohistochemistry did not change after NGF-treatment. The DFP-treatment did not seem to affect the AChE-immunoreactivity since an extensive fiber network was found, whereas almost no fibers were seen using conventional AChE histochemistry. We have demonstrated that in oculo transplantation of basal forebrain is a useful model for examining in vivo effects of NGF on central cholinergic function. The marked volume increase of NGF-treated grafts and the unchanged density of cholinergic cells and terminals suggests, that NGF increases the survival of not only developing cholinergic neurons, but possibly other non-cholinergic neurons and non-neuronal cells as well. These results support the notion that NGF acts as a neurotrophic factor on cholinergic and possibly non-cholinergic cells in the central nervous system     

PDLLA/NGF复合膜用于自体神经移植促进神经再生实验研究

目的：探讨外消旋聚乳酸／神经生长因子(PDLLA／NGF)复合膜用于自体神经移植是否具有促进神经再生作用。方法：雌性Wistar大白鼠16只，随机分为2组：A组(自体神经移植)8只；B组(自体神经移植并包绕PDLLA／NGF复合膜)8只。显露每只动物的右侧坐骨神经，A组将坐骨神经切除10mm长一段，以外膜缝合法行原位移植；B组与A组同样行神经原位移植并在远近两个神经缝接部位各包绕1块PDLLA／NGF复合膜(含NGF总量为400u)。6个月后观察比较两组神经再生情况。结果：B组的小腿三头肌湿重恢复率、运动神经传导速度、再生的有髓神经纤维数量、直径、轴突直径、髓鞘厚度均优于A组：结论：PDLLA／NGF复合膜包绕自体神经移植的神经缝接部位具有促进神经再生作用.     

外源性NGF对大鼠坐骨神经切断缝合术后脊髓和背根节CGRP表达的影响

观察外源性神经生长因子(NGF)对坐骨神经切断立即缝合后大鼠脊髓和背根节(DRG)内不同时间点降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响。成年SD雄性大鼠随机分为NGF组、生理盐水(NS)组、假手术组与正常对照组。实验组动物右侧坐骨神经切断后立即缝合,每天给予NGF(400单位/kg腹腔注射),动物分别存活1、3、5、7、14、21、28d,免疫组织化学方法结合图像分析检测相应节段脊髓和背根节内CGRP的表达。结果表明,NGF处理组术侧背根节与脊髓后角内的CGRP表达明显高于同时间点的NS对照组,平均光密度值相比P<0.05。但各组中脊髓前角运动神经元内的CGRP表达没有明显变化(P>0.05)。结果提示外源性的NGF能明显增加损伤后背根节感觉神经元与损伤侧脊髓后角的CGRP表达,对CGRP在脊髓前角运动神经元内的表达没有明显影响。     

聚乳酸/神经生长因子缓释导管修复周围神经缺损实验研究

目的：观察聚乳酸／神经生长因子(PDLLA／NGF)缓释导管对大鼠坐骨神经缺损再生的促进作用及其性能、降解过程。方法：SD大鼠60只，随机分为4组：自体神经移植组(A组)，单纯PDLLA导管组(B组)，单纯导管加导管内一次性给药组(C组)，缓释导管组(D组)，每组15只。制作坐骨神经10mm缺损模型，分别用自体神经移植、单纯PDLLA导管、PDLLA／NGF缓释导管桥接修复。于第1、2、3月后行大体观察、三头肌湿重恢复率测量、电生理检测、组织学和图象分析对比。结果：同时间段组间比较，除三头肌恢复率低以外，D组再生神经取得了和A组相似的效果，明显比B组和C组恢复好。结论：PDLLA／NGF缓释导管桥接修复大鼠坐骨神经缺损，能够有效促进神经再生，效果接近自体神经移植。     

神经生长因子（NGF）对基底前脑NGF－受体阳性神经元损伤后的保护作用

切断老年鼠（２４月龄）左侧穹窿海马伞，造成隔海马胆碱能系统损伤模型。用免疫组化方法分析脑室注射ＮＧＦ对基底前脑神经生长因子受体（ＮＧＦ－Ｒ）阳性神经元损伤的影响、实验证明损伤一个月后，损伤对照组损伤例内侧隔核和斜角带核垂直支ＮＧＦ－Ｒ阳性神经元数量分别减少了５９．４％和３７．２４％，残存的神经元发生萎缩及表面受体含量增加。ＮＧＦ治疗组，损伤侧的内侧隔核和斜角带核垂直支的ＮＧＦ－Ｒ阳性神经元数量只减少４．４７％和２．３６％，细胞形态学参数及受体灰度值都类似于正常。提示ＮＧＦ对基底前脑ＮＧＦ－Ｒ阳性神经元损伤后有较好的保护作用。     

Transplants of NGF-secreting fibroblasts restore stimulus-evoked activity in barrel cortex of basal-forebrain-lesioned rats

Cholinergic nuclei in the basal forebrain supply the cerebral cortex with acetylcholine (ACh). Depletion of cholinergic fibers following basal forebrain lesion results in reduced stimulus-evoked functional activity in rat barrel cortex in response to whisker stimulation. We showed previously that exogenous delivery of nerve growth factor (NGF) to the lateral ventricle restores reduced functional activity toward normal despite persistent reductions in cortical cholinergic activity. Gene transfer of therapeutic peptides using genetically engineered cells allows for localized and biological delivery of compounds to the CNS, circumventing systemic administration or repetitive invasive surgery. In this study, we grafted genetically engineered fibroblasts that secrete NGF (NGF+) into three CNS loci of rats with unilateral basal forebrain lesions, along with control fibroblasts (NGF-) that did not secrete NGF. Only NGF+ fibroblasts grafted into ACh-depleted somatosensory cortex resulted in improvement of functional activity following cholinergic depletion. NGF+ fibroblast transplants into the lateral ventricle or basal forebrain did not improve functional activity nor did NGF- fibroblasts in any site. Similar to our previous experiments using intraventricular NGF injections, despite improvements in functional activity, the affected barrel cortex remained depleted of acetylcholinesterase-stained fibers following insertion of NGF+ fibroblasts. These data support the idea that NGF can act directly on the cerebral cortex following reductions in cholinergic innervation. The mechanism of NGF action is elusive, however, since the presence of its high-affinity receptor, trkA, in the cerebral cortex is controversial.