醒脑增智方对AD模型大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响

目的研究醒脑增智方对AD模型大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响。方法采用AlCl3中毒法制成SD大鼠老年性痴呆模型,连续治疗30d。应用TUNLE法和免疫组化法对所设各组SD大鼠脑组织凋亡细胞的分布及BCL-2免疫阳性细胞进行观察。结果显示模型大鼠有明显的学习记忆障碍,与空白(A)组比较均有显著差异(均P<0.01),治疗后西药(C)组、醒脑增智方(D)组大鼠电击次数较模型(B)组有明显减少(均p<0.05);治疗后,BCL-2免疫阳性细胞数西药(C)组、醒脑增智方(D)组与模型(B)组有显著性差异(均P<0.05);细胞凋亡数目C、D组与B组有显著性差异(均p<0.05)。结论此方可减少老年性痴呆大鼠DNA双键断裂(TUNLE阳性),提高海马皮层BCL-2的含量,抑制细胞凋亡,从而保护脑神经细胞,发挥对老年性痴呆的治疗作用。     

醒脑增智方对AD鼠β淀粉样蛋白神经毒性拮抗作用的实验研究

目的:探讨自拟醒脑增智方对β-AP含量的影响,以验证醒脑增智方对β-AP神经毒性的拮抗作用。方法:采用D-半乳糖加速衰老合并M eynert核毁损为模型,随机分为醒脑增智方组,脑复康对照组,造模组和对照组,行为学采用Y型电迷宫测试,动物经治疗处理后,采取放免法检测β-AP的含量。结果:行为学测试表明醒脑增智方能改善痴呆大鼠低下的学习、记忆等能力;造模组β-AP的含量明显高于对照组(P<0.01),醒脑增智方组和脑复康组能够显著降低升高的β-AP含量,差异有显著性(P<0.05),但醒脑增智方组和脑复康组之间则无显著性差异(P<0.05)。结论:醒脑增智方能够对抗β淀粉样蛋白对神经产生的毒作用。     

醒脑增智方对AD鼠GSH-PX、SOD、MDA影响的实验研究

目的:探讨醒脑增智方改善老年性痴呆(Alzheimer's disease-AD)的作用机制。方法:采用AlCl3中毒法制成AD大鼠模型,连续治疗30d。分别观察治疗前后各组动物行为学的改变,测定各组动物脑组织中GSH-PX、SOD、MDA的水平。结果:模型大鼠学习、记忆明显改善(P<0.01);GSH-PX、SOD活性明显提高,MDA含量明显下降(P<0.05)。结论:醒脑增智方能够改善大鼠的学习、记忆能力,对AD有一定治疗作用。其机制可能与提高AD鼠脑组织中GSH-PH、SOD活性,清除自由基,减少脑内脂质过氧化反应和脂质过氧化产物MDA的生成有关。     

补阳还五汤对Aβ1-40所致老年性痴呆大鼠海马区β淀粉样前体蛋白及相关基因表达的影响

目的探讨补阳还五汤对老年性痴呆（AD）大鼠海马区B淀粉样前体蛋白（β-APP）及相关基因：环氧合酶2（COX-2）、核转录因子抑制蛋白α（IκB-α）、神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的影响及可能的作用机制。方法采用Aβ1-40海马区注射,建立AD大鼠模型,免疫组化法观察中药补阳还五汤对AD大鼠海马区β-APP,COX-2,IKB-α及nNOS的影响。结果补阳还五汤能明显降低AD模型大鼠海马区B-APP,COX-2,IκB-α表达,使nNOS表达升高。结论补阳还五汤可能通过COX-2,NF-κB／IκB-α,增加模型大鼠海马区nNOS表达,影响B-APP生成,延缓神经元细胞的早期损伤和迟发性损伤,从而起到治疗AD的作用。     

醒脑益智方对AD大鼠胆碱能系统的影响

目的：观察醒脑益智方对AD模型大鼠海马中枢神经递质的影响，研究其作用效果及机制。方法：将Wistar大鼠随机分为6组，按文献复帝1AD大鼠模型，并用脑复康组进行对比研究。结果：大鼠海马ChAT和Ach活性的影响方面，与模型组比P〈0．05或P〈0．01；与阳性对照组相比P〈0．05或0．01，说明本方能显著提高模型大鼠海马ChAT和Ach的活性，可能是本方治疗AD作用的机制之一。     

醒脑益智方对AD大鼠胆碱能系统的影响

目的:观察醒脑益智方对AD模型大鼠海马中枢神经递质的影响,研究其作用效果及机制。方法:将W istar大鼠随机分为6组,按文献复制AD大鼠模型,并用脑复康组进行对比研究。结果:大鼠海马ChAT和Ach活性的影响方面,与模型组比P<0.05或P<0.01;与阳性对照组相比P<0.05或0.01,说明本方能显著提高模型大鼠海马ChAT和Ach的活性,可能是本方治疗AD作用的机制之一。     

醒脑益智汤对AD模型小鼠tau蛋白及Aβ表达的影响

目的观察醒脑益智汤对AD模型小鼠tau蛋白及Aβ表达的影响。方法小鼠右侧海马注射3μL老化的Aβ_25-35(3 nmol/L)构建AD模型,将114只ICR小鼠随机分成假手术组、模型组、醒脑益智汤组(18 g生药/kg)、醒脑益智汤组(9 g生药/kg)、醒脑益智汤组(4.5 g生药/kg)、多奈哌齐组(1.3 mg/kg)。造模后第2天,小鼠分别灌胃给予不同剂量的醒脑益智汤及盐酸多奈哌齐,灌胃28 d。第23天进行Morris水迷宫训练;第28天,ELISA及硫黄素S染色测定Aβ表达;Western blot测定tau蛋白磷酸化位点(Ser 202,Thr 231)、PI3K/Akt及NEP、IDE蛋白表达。结果醒脑益智汤可降低AD模型小鼠的游泳潜伏期,降低Aβ表达,抑制tau蛋白化点(Ser 202,Thr 231)发生磷酸化,增加p-PI3K、p-Akt、NEP及IDE的表达(P<0.05)。结论醒脑益智汤可能是通过PI3K/Akt信号通路,抑制tau蛋白位点的异常磷酸化,通过增加NEP、IDE的表达,抑制AD模型小鼠脑内的Aβ表达,进而改善其学习记忆...     

通络醒脑泡腾片对AD大鼠学习记忆和海马胰岛素降解酶表达的影响

目的:探讨通络醒脑泡腾片对Aβ_25-35海马注射拟痴呆大鼠学习记忆和海马胰岛素降解酶表达的影响,为其防治老年痴呆提供依据。方法:建立Aβ_25-35海马注射痴呆大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型对照组、安理申组(1.4 mg·kg^-1)、通络醒脑泡腾片高、中、低剂量组(7.56,3.78,1.59 g·kg^-1),另取海马注射生理盐水的大鼠为假手术组,10 mL·kg^-1,每日1次,连续灌胃给药90 d,采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学和图像分析技术对大鼠海马胰岛素降解酶表达进行定量分析。结果:通络醒脑泡腾片能够显著缩短大鼠定向航行测试的逃避潜伏期,显著延长空间探索测试第一象限停留时间和减少第三象限停留时间,增加经过平台次数,与模型组比较有显著差异(P<0.05),并能够显著提高海马区胰岛素降解酶平均吸光度,提高海马区胰岛素降解酶的表达,与模型组比较有显著差异(P<0.05)。结论:通络醒脑泡腾片具有提高AD大鼠学习记忆能力,促进海马胰岛素降解酶表达的作用,提示其益智作用与提高海马胰岛素降解酶活性有关。     

纤溶酶对实验性脑梗死的预防作用及对血浆血栓前体蛋白的影响

目的观察纤溶酶对实验性脑梗死大鼠的预防作用及对血栓前体蛋白(Tp P)水平的影响。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及纤溶酶低、中、高剂量组,每组10只。除假手术组外,其余各组均建立脑梗死模型,其中纤溶酶低、中、高剂量组分别于手术前30 min经尾静脉给予纤溶酶1,2,4 IU/10 g,假手术组和模型组给予等量生理盐水。手术成功后6 h从心脏取血、测定血浆中Tp P水平,取脑测定脑梗死体积。结果纤溶酶低、中、高剂量组梗死面积百分比、Tp P水平均明显低于模型组(P均<0.05);纤溶酶高剂量组梗死面积和百分比明显低于低剂量组(P<0.05),血浆Tp P水平明显低于中、低剂量组(P均<0.05)。结论纤溶酶对实验性脑梗死具有预防作用,并能降低Tp P水平。     

独活对AD模型大鼠定位航行行为学的影响

目的:观察独活改善老年性痴呆(AD)模型大鼠定位航行学习记忆功能的作用。方法:应用Morris水迷宫检测独活对AD模型大鼠定位航行学习记忆改善的情况。结果表明:独活能够改善模型大鼠的定位航行学习记忆能力,缩短模型大鼠在水迷宫中定位航行的时间,提示独活对AD模型大鼠的定位航行学习记忆能力有一定的改善作用。     

醒脑益智方对老年性痴呆模型大鼠大脑皮质及海马区nNOS表达的影响

目的:观察醒脑益智方对老年性痴呆模型大鼠大脑皮质及海马区nNOS表达的影响,以研究其作用效果及机制。方法:将Wistar大鼠随机分为6组,按文献复制AD大鼠模型,并用脑复康组进行对比研究。结果:与模型组相比差异有显著意义,P<0.05~0.10;与阳性对照组相比差异有显著意义,P<0.05。结论:醒脑益智方能改善模型大鼠海马区NOS神经元的损伤,激活cNOS的活性,促进NO的合成,改善记忆调节过程,可能是本方治疗AD的作用机制之一。     

海风藤抑制淀粉样前体蛋白基因表达的研究

目的:研究海风藤对人类神经母细胞瘤细胞系列淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达的抑制作用。方法:应用Northern印迹杂交观察βAPPmRNA的变化,应用细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)释放、细胞集落观察海风藤对神经细胞的直接作用。结果:海风藤选择性的抑制β-APP基因表达。实验浓度内未发现细胞毒性作用。结论:β-APP与Alzheimer’s病(AD)的发病关系密切,海风藤选择性抑制β-APP基因表达为其防治AD提供了一定的依据。     

醒脑益智胶囊不同配比 对阿尔茨海默病大鼠行为学的影响

目的: 观察醒脑益智胶囊各组成药物有效部位不同配比对阿尔茨海默病大鼠(AD)行为学的影响,寻找药物最佳配伍比例。方法: 雄性Wistar大鼠随机分为假模型组、模型组、阳性药对照组(石杉碱甲0.05 mg·kg^-1)、醒脑益智胶囊全方组及8种不同配比药物组。大鼠常规饲养3 d后,Morris水迷宫训练7 d,进行1.25% D-半乳糖腹腔注射(4 mL·kg^-1),连续6周,联合Aβ_1-40海马内注射2 μL(5 g·L^-1)复合造模,造模1周后,连续ig给药30 d,采用Morris水迷宫实验观察不同配比药物改善学习记忆的作用。结果: 与模型组比较,各给药组大鼠空间学习能力显著提高,定向航行试验中搜索平台潜伏期缩短,空间探索实验中跨台次数增加,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。其中4组即冰片:淫羊藿苷:远志总皂苷:三七总皂苷45:6.8:32.6:0(mg·kg^-1)影响较为明显。结论: 醒脑益智胶囊各组成药物有效部位不同配比均具有改善大鼠空间学习记忆的能力,但作用效果存在差异。     

补肾醒脑方对实验性血管性痴呆大鼠学习记忆行为学的影响

目的:研究补肾醒脑方对血管性痴呆模型大鼠学习记忆行为学的影响.方法:采用反复夹闭双侧颈总动脉伴低血压造成血管性痴呆大鼠模型,通过跳台实验与水迷宫实验测试其学习与记忆能力,观察补肾醒脑方的脑保护作用.结果:补肾醒脑高、低剂量组在各时期均能提高痴呆模型大鼠的学习记忆能力,可减少跳台实验中学习成绩和记忆成绩的错误反应次数,并可以延长记忆成绩的触电潜伏期.在Merris水迷宫实验中,补肾醒脑高、低剂量组在各时期均能缩短痴呆大鼠寻找平台潜伏期,增加反应期大鼠跨越平台次数.结论:补肾醒脑方能显著改善痴呆模型大鼠的学习和记忆能力.     

风药、补虚药对脑缺血大鼠淀粉样β蛋白及其蛋白前体表达的影响

目的：观察侯氏黑散方中风药、补虚药、风药补虚药联用对脑缺血大鼠淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein,APP）、β-淀粉样蛋白（Aβ）表达的影响。方法：线栓法阻断大鼠大脑中动脉,制备局灶性脑缺血大鼠模型,采用免疫组化与医学图像分析相结合的方法检测侯氏黑散方中风药、补虚药、风药补虚药联用对APP及Aβ42表达的影响。结果：脑缺血24h、48h,模型组大鼠皮层APP、Aβ42表达较假手术组明显增强（P〈0.01）。缺血24h,补虚药、风药补虚药联用可明显下调APP表达,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;缺血48h,风药组大鼠皮层APP表达较模型组明显降低（P〈0.05）;缺血48h,风药补虚药联用可明显降低Aβ42表达,与模型组相比有统计学意义（P〈0.01）。结论：风药补虚药联用可明显下调APP表达,抑制Aβ42的异常积聚,降低Aβ42的毒性,从而发挥抗脑缺血损伤的作用。     

耳穴埋针对血管性痴呆大鼠记忆障碍及β淀粉样前体蛋白表达的影响

目的探讨耳针对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆障碍的改善及其与β淀粉样前体蛋白（APP）表达的关系。方法采用4-血管阻断（4-VO）全脑缺血再灌注制备VD大鼠模型,针刺脑、肾耳穴后,作行为学检测、免疫组化、图像分析。结果迷宫学习记忆能力测试表明,耳针组大鼠成绩优于VD模型组（P〈0．05）。耳针组大鼠脑内APP免疫阳性神经细胞数低于VD模型组,其平均光密度值高于VD模型组（P〈0．05）。结论耳针改善了VD模型大鼠学习记忆,这可能是耳针抑制了VD大鼠APP的过量表达,从而对VD模型大鼠海马神经元起到保护作用。     

人参皂苷Rg1、Rb1对淀粉样前体蛋白分泌酶代谢途径的影响

目的观察人参皂苷Rg1、Rb1对淀粉样前体蛋白代谢途径中α分泌酶活性和基因表达的影响。方法用转染突变型PSl（ML46L）和野生型PSl的CHO细胞，通过荧光酶标技术检测α分泌酶活性，Westernblot免疫印迹、RT-PCR技术检测α分泌酶基因ADAM9、ADAM10的蛋白和RNA表达。结果转染突变型PSlML46L组a分泌酶活性较转染野生型PS1（WT组）低（P〈0．05），加用人参皂苷Rg1、Rb1后转染突变型PSlML46L组α分泌酶活性较未加用组不同程度增高（P〈0．05），同时ADAM9、ADAM10的蛋白及RNA表达较未加用组有不同程度增多（P〈0．05）。结论人参皂苷Rg1、Rb1均可不同程度增加α分泌酶中ADAM9、ADAM10基因表达，提高α分泌酶活性，且人参皂苷Rg1调节作用优于人参皂苷Rb1。     

复方地黄对AD大鼠行为学改变及海马CA1区神经元形态结构的影响

目的：观察复方地黄对阿尔茨海默病（Alzheimer’sDisease,AD）模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元形态结构的影响。方法：在腹腔注射D一半乳糖造成大鼠衰老的基础上,海马CA1区注射喹啉酸（QA）造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型,复方地黄汤治疗后,观察光、电镜下海马CA1区神经元形态的变化。结果：复方地黄可明显缩短AD大鼠的Morris水迷宫潜伏期、增加平台象限路程比和跨平台次数,明显减轻海马CA1区神经元的损伤,阻止神经元数量上的过度缺失,明显修复线粒体,保护高尔基复合体、粗面内质网的形态,减少突触的溶解。结论：复方地黄对AD模型大鼠受损的神经行为学有明显的改善,对损伤的神经元有一定的保护作用;尤其对损伤突触有一定程度的修复.     

参芪复方对糖尿病早期大血管病变大鼠白色脂肪过氧化物酶体增生物激活受体γ的影响

目的观察参芪复方对糖尿病早期大血管病变大鼠白色脂肪过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)的影响。方法模型组、雷米普利组、参芪复方低剂量组、高剂量组及正常对照组分别给予相应受试物32天。实时定量RT-PCR法检测脂肪PPARγ和脂联素mRNA的表达。结果参芪复方低剂量组、高剂量组大鼠的PPARγ及其下游靶基因脂联素mRNA表达量均较模型组明显增加,且二者呈明显正相关关系。结论上调和活化PPARγ可能是参芪复方抗糖尿病早期大血管病变的作用机制之一。     

电针对老年性痴呆大鼠行为学及CAT、MDA影响的实验研究

目的:观察电针"肾俞、风府、足三里、三阴交"穴位对老年性痴呆(AD)大鼠行为学和脑组织及血清中过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量的影响,进一步探讨其机制。方法:选用健康成年Wister大鼠30只,随机分为3组,假手术组、模型组、电针组,每组大鼠各10只。其中模型组、电针组采用β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)微量注射至大鼠右侧海马区建立AD模型,并采用Y型电迷宫试验进行模型验证。假手术组在相同位置注射同等剂量标准的生理盐水。电针组针刺肾俞、风府、足三里、三阴交穴。模型组、假手术组不予以治疗,给予电针组相同的抓取和固定。AD大鼠治疗后测试行为学和检测脑组织及血清中CAT活性、MDA含量。结果:模型组Y型电迷宫试验达标所需训练次数多于假手术组(P<0.05),电针组达标所需训练次数较模型组减少(P<0.05),与模型组相比电针组能提高AD大鼠脑组织及血清CAT活性(P<0.05),降低MDA含量(P<0.05)。结论:电针"肾俞、风府、足三里、三阴交"穴可以减少行为学测试达标所需训练次数,提高CAT活性,降低MDA含量,其机制可能是电针提高了CAT抗氧化系统的活性而发挥了对神经元的保护作用,并增强氧自由基清除系统的功能,从而提高机体抗氧化能力实现的。