新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用机制研究

目的:探讨新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用及其可能的分子机制。方法:采用MTT法检测新藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用;DAPI染色及荧光显微镜观察细胞凋亡情况;FCM法检测细胞周期分布;蛋白质印迹法检测新藤黄酸对cyclin D1、cyclin E、P21、P27和多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]蛋白表达的影响。结果:新藤黄酸对HCT116细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度和时间依赖性。DAPI染色后荧光显微镜观察发现,新藤黄酸能明显诱导HCT116细胞凋亡。FCM法检测发现,新藤黄酸可以使HCT116细胞G0/G1期比例显著升高,S期比例相应降低,表明细胞周期阻滞于G0/G1期。蛋白质印迹法检测结果表明,新藤黄酸下调了细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin E的表达,上调了P21和P27的蛋白表达,诱导了PARP蛋白的剪切。结论:新藤黄酸通过下调细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin E的表达和上调P21、P27的表达,使HCT116细胞阻滞在G0/G1期,进而显著抑制HCT116细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

吲哚美辛诱导肝癌HepG2细胞凋亡及其对cyclin E蛋白表达的影响

目的　观察吲哚美辛诱导肝癌 Hep G2细胞凋亡 ,及其对 cyclin E蛋白的影响。方法　采用 MTT比色法观察吲哚美辛对肝癌 Hep G2细胞增殖的影响 ;采用流式细胞仪检测吲哚美辛对 Hep G2细胞周期分布的影响 ,同时结合透射电子显微镜观察吲哚美辛诱导肝癌 Hep G2细胞凋亡的作用 ;免疫细胞化学方法观察吲哚美辛对Hep G2细胞周期调控蛋白 cyclin E的影响。结果　吲哚美辛可抑制肝癌 Hep G2细胞的增殖 ,诱导其凋亡 ,改变细胞周期分布 ,使 G0 /G1 期细胞比例增高 ,S期比例降低 ,同时还可使 cyclin E蛋白表达下降。上述作用具有剂量和时间依赖性 (P<0 .0 5 )。结论　吲哚美辛可诱导肝癌 Hep G2细胞凋亡 ,改变细胞周期分布 ,影响细胞周期调控蛋白表达 ,从而抑制细胞增殖。     

低氧下三氧化二砷对食管癌Eca109细胞放射敏感性的影响

目的： 观察三氧化二砷（As 2O 3）在低氧条件下对食管癌Eca109细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,探讨其发挥放射增敏作用的可能机制。 方法： CoCl 2处理模拟肿瘤细胞模拟低氧微环境,MTT法分别检测常氧和低氧条件下不同浓度As2O3及不同剂量放射线对食管癌Eca109细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测低氧下As 2O 3、放射线单独及两者联合对细胞周期及凋亡的影响,Western blotting检测经As 2O 3、放射线单独及两者联合作用后Eca109细胞中HIF-1α、p27蛋白的表达情况。 结果： 在常氧和低氧两种条件下,As2O3均呈时间和剂量依赖方式抑制Eca109细胞增殖,相同时间和相同剂量条件下,其抑制水平相当（P>0.05）;而低氧下放射线对Eca109细胞增殖的抑制作用较常氧下明显减弱（P<0.05）。低氧下Eca109细胞周期出现G 0/G 1期阻滞、G 2/M期细胞比例明显减少（P<0.05）,As 2O 3在低氧条件下可诱导G 2/M期阻滞、G 0/G 1期细胞比例减少。As 2O 3与放射线联合作用时,Eca109细胞的凋亡率大于两者单独作用之和。低氧条件下,Eca109细胞HIF-1α、p27蛋白表达均明显增强,As 2O 3可逆转HIF-1α、p27表达水平的升高。 结论： 低氧条件下,As 2O 3对食管癌Eca109细胞有放射增敏作用,其机制可能与下调HIF-1α进而降低p27表达水平、解除G 0/G 1期细胞周期阻滞和促进细胞凋亡有关。     

白藜芦醇通过下调PRMT5表达抑制肝胆管癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和细胞周期

目的：探究白藜芦醇（Res）通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法：常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞术和WB法分别检测Res处理后PRMT5 mRNA在LO2和SMMC-7721细胞中的表达,Res对SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡,以及PRMT5、cyclin D1和cyclin E1蛋白表达的影响。结果：PRMT5在SMMC-7721细胞中呈高表达（P<0.01）;20、40、80μmol/L Res均能明显抑制PRMT5 mRNA和蛋白在SMMC-7721细胞中的表达（均P<0.01）,抑制SMMC-7721细胞的增殖能力（P<0.01）和侵袭能力（P<0.05）,阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期并促进其凋亡（P<0.01）,明显抑制SMMC-7721细胞中周期蛋白cyclin D1、cyclin E1蛋白的表达（P<0.01）。...     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷对多药耐药MCF-7/ADR和KBV/200细胞增殖及细胞周期影响作用机制的研究

目的:探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC)对肿瘤多药耐药细胞生长抑制率、细胞周期的影响及可能的作用机制。方法:采用MTT法检测5-Aza-dC对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR、口腔表皮癌多药耐药细胞KBV/200及其相应的亲本敏感MCF-7和KB细胞的生长抑制率;FCM法检测不同浓度5-Aza-dC(1、5和10μmol/L)作用72h及5-Aza-dC(10μmol/L)作用24、48和72h后,各细胞周期分布的变化;分别采用实时荧光定量-PCR及蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1mRNA及蛋白的表达情况。结果:5-Aza-dC对耐药细胞株MCF-7/ADR及KBV/200均呈现明显的生长抑制作用,细胞周期被阻滞在G2/M期,并呈时间及剂量依赖性;细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1mRNA及蛋白的表达均上调。结论:5-Aza-dC可以通过使MCF-7/ADR及KBV/200细胞的细胞周期被阻滞在G2/M期,从而抑制肿瘤多药耐药细胞的增殖;其作用机制可能与上调细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1的表达有关。     

野生型RASSF1A基因抑制肝癌细胞增殖的分子机制

背景与目的:RASSF1A(ras association domain family 1A)基因抑制肿瘤增殖的分子机制目前尚未完全明确,本文将探讨野生型RASSF1A基因抑制肝癌细胞增殖的分子机制.方法:利用已构建成功的稳定表达野生型和突变型RASSF1A基因的肝癌细胞株QGY-7703,使用流式细胞仪对其进行细胞周期的测定,Western blot分析其cyclin D1、cyclin E及P21蛋白的表达水平,通过检测荧光素酶报告基因活性及RT-PCR检测野生型RASSFIA基因的表达来分析RASSF1A基因对cyclin D1启动子和mRNA表达水平的影响.结果:野生型RASSF1A基因的表达可使QGY-7703细胞的细胞周期发生G1/S期阻滞,使其cyclin D1蛋白的表达水平下调,但不影响cyclin E和P21蛋白的表达水平.外源性cyclin D1的表达可使野生型RASSF1A基因引起的QGY-7703细胞G1/S期阻滞消失.野生型RASSF1A基因表达不影响QGY-7703细胞cyclin D1启动子的活性和cyclin D1 mRNA的表达水平.结论:野生型RASSF1A基因通过转录后机制负性调控cyclin D1蛋白的表达,使肝癌细胞株QGY-7703细胞周期阻滞在G1/S期.     

Wnt信号通路在姜黄素诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡中作用机制

目的 探讨Wnt通路在姜黄素诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中的作用机制.方法 将MCF-7细胞培养液随机分为5组,分别加入15、30、60、120μmol/L的姜黄素,对照组不加,培养12,24,48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖能力.分A、B两组(剂量组、时间组)采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术(FCM)观测细胞凋亡及细胞周期分布;Western Blotting法检测A、B两组的Wnt通路相关蛋白,并进行相应的相关性分析探讨Wnt通路与乳腺癌MCF-7细胞凋亡的关系.结果 CCK-8结果显示,随培养时间延长,姜黄素各浓度组MCF-7细胞增殖抑制率逐渐增高(均P<0.05);在同一时间点,随着姜黄素浓度升高,细胞增殖抑制率逐渐增高(均P<0.05).FCM染色结果显示,随着姜黄素浓度增加、作用时间延长MCF-7细胞凋亡指数逐渐上升(均P<0.05),且G1/S期细胞增加越多(P<0.05).Western Blotting实验结果显示MCF-7细胞中Wnt1、β-catenin的表达下调程度呈现剂量时间依赖性(P<0.05).相关性分析显示细胞抑制率、G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率均与Wnt通路相关蛋白Wnt1、β-catenin的表达呈现较明显的相关性(P<0.05).结论 姜黄素的抗癌活性与抗增殖能力具有明显的剂量时间依赖性,且Wnt通路在姜黄素诱导乳腺癌MCF-7细胞抑制、凋亡过程中发挥了重要作用.     

丙戊酸钠诱导Siha细胞周期阻滞的实验观察

目的:研究丙戊酸钠对人宫颈癌Siha细胞增殖和细胞周期的影响.方法:MTT检测生长抑制,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白质印迹法检测p21WAF1/CIP1、p-CDK2和cyclin E蛋白.结果:丙戊酸钠以剂量依赖性方式抑制Siha细胞生长IC20和IC50分别为2.0 mmol/L和8.0 mmol/L;丙戊酸钠上调G0/G1期比例由(74.92±0.60)%升高至(84.475±1.11)%,P=0.001,下调S期(13.19±0.70)%降为(7.72±1.40)%,P=0.004和G2/M(11.89±1.30)%降为(7.81±0.31)%期比例,P=0.006.丙戊酸钠上调p21WAF1/CIP1蛋白,下调cyclin E和p-CDK2蛋白.结论:丙戊酸钠上调p21WAF1/CIP1表达和抑制cyclin E表达,使细胞阻滞于G0/G1期,抑制Siha细胞生长.     

靛玉红甲肟对人食管癌细胞株EC-1和Kyse70体外增殖和细胞周期的影响

目的:探讨靛玉红甲肟(indirubin-3'-monoxime)对体外培养的人食管癌细胞株EC-1和Kyse70细胞增殖和细胞周期的影响.方法:不同浓度靛玉红甲肟处理食管癌EC-1和Kyse70细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖活性,FCM法和RT-PCR法检测细胞周期分布及bcl-2和bax mRNA表达的变化.结果:靛玉红甲肟对人食管癌细胞EC-1和Kyse70的生长具有明显的抑制作用,且表现为剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05).FCM法检测发现,以5 μmol/L的靛玉红甲肟对EC-1细胞处理24、48和72 h后,G0/G1期细胞比例逐渐下降(P<0.05),S期细胞比例未见明显改变,G2/M期细胞比例逐渐上升(P<0.05),呈时间依赖性.RT-PCR法检测发现人食管癌细胞bcl-2和bax mRNA比例呈时间依赖性下调.结论:靛玉红甲肟对人食管癌细胞EC-1和Kyse70具有明显的增殖抑制作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期G2/M期和下调bcl-2/bax 表达比例有关     

桥接整合因子1 去甲基化诱导细胞周期阻滞抑制食管鳞状细胞癌EC109细胞增殖

目的：分析桥接整合因子1（bridging integrator-1, Bin1）去甲基化对Bin1 基因表达和食管鳞状细胞癌EC109 细胞增殖能力的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法：甲基化特异性PCR（methylation specific polymerase chain reaction, MSP）法检测去甲基化药物5-氮杂-2''脱氧胞苷（5-Aza-2''-deoxycytidine, 5-Aza-dc）处理后EC109 细胞Bin1 启动子区域的甲基化状态,用qPCR、Western blotting 和MTT法分别检测单独5-Aza-dc 和5-Aza-dc 加转染Bin1 基因干扰片段（Bin1 siRNA）处理对EC109 细胞Bin1 mRNA及其蛋白表达和细胞增殖能力的影响,流式细胞术和Western blotting 检测5-Aza-dc 处理后EC109 细胞周期和细胞周期相关蛋白（Cyclin D1 与CDK4）表达的变化。结果：去甲基化药物5-Aza-dc 处理后,EC109 细胞Bin1 基因启动子区域发生去甲基化。5-Aza-dc 处理的Bin1 去甲基化EC109 细胞Bin1 mRNA和蛋白表达明显上调（均P<0.05）,细胞增殖能力明显下降（P<0.05）,细胞阻滞在G0/G1 期,表现为S 期细胞比例显著减少,细胞周期相关蛋白Cyclin D、CDK4 表达均明显下调（均P<0.05）。Bin1 去甲基化EC109 细胞转染Bin1 siRNA后,Bin1 mRNA和蛋白表达明显下调,细胞增殖能力增强（均P<0.05）。结论：Bin1 基因启动子区域在EC109 细胞中呈完全甲基化状态,5-Aza-dc 去甲基化可使食管鳞癌细胞EC109 细胞Bin1 表达升高,通过降低细胞周期相关蛋白表达诱导细胞周期阻滞抑制EC109 细胞增殖。证实表观遗传学变化可能与食管癌细胞恶性增殖有关,可为食管癌治疗提供新的思路。     

姜黄素活化caspase-3诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的研究

目的探讨姜黄素活化caspase-3诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的作用机制。方法20、40、80mmol/L姜黄素作用于食管癌Ec-109细胞,流式细胞仪检测细胞亚二倍体凋亡峰变化及线粒体膜电位变化;Western-blot检测细胞色素C释放及caspase-3表达。结果姜黄素呈剂量依赖性诱导食管癌Ec-109细胞凋亡,20、40、80mmol/L姜黄素作用后,细胞亚二倍体凋亡峰分别为（16.07±1.71）%、（25.54±1.25）%、（37.67±1.09）%,对照组为（3.65%±0.56）%,比较有统计学意义（F=6.14,P〈0.01）。上述浓度姜黄素作用6小时后线粒体膜电位出现降低,比较均有统计学意义（F=5.37,P〈0.05）;12小时出现细胞色素C表达,24小时检测到caspase-3表达,且姜黄素浓度越高,细胞色素C及caspase-3表达越明显。结论姜黄素通过损伤细胞线粒体,使之释放出细胞色素C,激活caspase-3,而且其呈剂量依赖性诱导食管癌细胞凋亡。     

原花青素对食管癌细胞增殖及糖酵解的影响及作用机制研究

目的 探讨原花青素对食管癌细胞株细胞增殖及糖酵解的影响及作用机制.方法 采用0、60、120、180、240、300 μmol/L的原花青素作用于食管癌细胞株OE33、CP-C、Eca109后,噻唑蓝检测细胞存活情况,计算半数抑制浓度,筛选增殖抑制作用最大的Eca109细胞继续研究.用半数抑制浓度的原花青素作用于Eca109细胞后,分别用试剂盒检测三磷酸腺苷(ATP)含量、丙酮酸激酶活性、己糖激酶活性及上清中乳酸含量,Western blot法检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的Akt(p-Akt)、信号转导与转录因子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)的表达水平.结果 原花青素能够呈浓度依赖地抑制食管癌细胞株OE33、CP-C、Eca109的增殖,其半数浓度依次为(285.48±3.58)μmol/L、(291.00±3.36)μmol/L、(237.95±4.91)μmol/L,其对Eca109细胞增殖抑制作用最大,后续选用240 μmol/L的原花青素作用于Eca109细胞.240 μmol/L原花青素作用后,Eca109细胞的ATP含量、丙酮酸激酶活性、己糖激酶活性和分泌的乳酸水平均较0 μmol/L组降低(P﹤0.05),p-Akt、p-STAT3水平也较0 μmol/L组降(P﹤0.05).结论 原花青素能够抑制食管癌细胞增殖,影响食管癌细胞糖酵解途径,Akt、STAT3信号通路可能是其作用机制之一.     

姜黄素对人舌鳞癌Tca8113细胞周期的影响

目的探讨不同浓度姜黄素对人舌鳞癌Tca8113细胞周期分布的影响。方法将Tca8113细胞培养于含有不同浓度姜黄素(0、20、40μmol/L)的RPM I-1640培养基中进行培养至规定时间终止培养,流式细胞仪分析细胞周期变化。结果随着姜黄素浓度的升高与作用时间的增加,其对细胞抑制作用明显增强,细胞周期中G0/G1期细胞比例逐渐增加,由46.20%上升至64.80%,S期细胞比例由53.10%下降至31.40%,不同浓度、不同时间对细胞G0/G1期的阻滞作用比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素能明显改变Tca8113的细胞周期分布,有明显G0/G1期阻滞作用,并有量-效、时-效关系。     

姜黄素诱导NSCLC细胞凋亡机制探讨

目的 肺癌位居我国居民癌症发病率和死亡率的首位,其中非小细胞癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占80%,筛选高效低毒的抗癌药物尤为迫切.本研究拟探讨姜黄素对NSCLC细胞的可能作用机制.方法 用不同浓度的姜黄素(0、10、20、30 μmol/L)或活性氧清除剂(CAT和NAC)加姜黄素处理肺癌细胞A549和SPC-A1,采用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和线粒体膜电位的变化,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白LC3、P62和细胞凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3和Caspase-9的表达变化.结果 姜黄素抑制非小细胞肺癌细胞株A549和SPC-A1增殖及克隆形成,主要将细胞阻滞在G2/M期,0、10、20和30 μmol/L姜黄素处理的A549细胞G2/M期细胞百分比分别为(12.67±2.52)%、(22.67±2.52)%、(27.00±2.01)%和(42.33±4.04)%,SPC-A1细胞G2/M期细胞百分比分别为(9.33±2.52)%、(18.33±1.53)%、(20.67±2.52)%和(30.67±1.53)%.0、10、20和30 μmol/L姜黄素处理A549细胞凋亡率分别为(4.40±1.02)%、(7.31±1.52)%、(9.32±1.08)%和(13.97±1.98)%,P<0.05;SPC-A1细胞凋亡率分别为(4.38±1.22)%、(5.98±0.75)%、(9.42±1.25)%和(16.13±3.09)%,P<0.05.姜黄素导致ROS水平增高、线粒体膜电位降低和线粒体自噬的发生,并且呈剂量依赖性,而应用ROS清除剂可以减弱以上药物作用.相关信号转导通路蛋白表达与以上细胞生物行为改变表现一致.结论 姜黄素通过ROS途径诱导NSCLC细胞发生线粒体自噬,是一种有潜力的抗癌药物.     

土木香内酯通过调节细胞周期相关蛋白的表达抑制慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/ADR增殖

目的 研究土木香内酯对慢性粒细胞白血病(CML)耐药细胞株K562/ADR增殖、周期分布以及周期相关蛋白的影响.方法 选用0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μmol/L土木香内酯作用K562/ADR细胞12、24、48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测土木香内酯对K562/ADR细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测土木香内酯对K562/ADR细胞周期分布的影响,Western blot检测周期相关蛋白的表达.结果 土木香内酯能够显著抑制K562/ADR细胞增殖,半数抑制浓度为5.0 μmol/L.流式细胞术检测结果显示,不同浓度(0、2.5、5.0、7.5 μmol/L)的土木香内酯能够使K562/ADR细胞周期阻滞在G2/M期,G2/M期细胞比例由(15.8±1.7)％分别提高到(21.0±2.4)％、(26.4±2.7)％、(30.1±3.9)％(P＜0.05).土木香内酯能够明显降低CDK1、CyclinB1的表达,上调周期抑制蛋白p21的表达.此外,土木香内酯能够有效地抑制bcr-abl融合蛋白的表达水平.结论 土木香内酯可能通过调节细胞周期相关蛋白的表达介导K562/ADR细胞G2/M期阻滞,抑制细胞的增殖.     

活性氧在顺铂诱导食管癌细胞EC-109凋亡中的作用

背景与目的:活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)是体内氧化代谢产物,是重要的信号分子,在细胞凋亡过程中担当着重要角色。本研究旨在探讨活性氧在顺铂(cisplatin,DDP)诱导食管癌细胞EC-109凋亡过程中的作用及其可能机制。方法:不同浓度DDP(0、1、5、10、15μg/ml)处理EC-109细胞,应用MTT法检测DDP对EC-109细胞增殖的影响;流式细胞仪检测活性氧、线粒体膜电位(Δψm)和细胞亚二倍体凋亡峰变化情况;并观察加入抗氧化剂-过氧化氢酶(CAT)后细胞凋亡的变化。结果:DDP可明显抑制EC-109细胞增殖;0、1、5、10、15μg/ml的DDP作用于EC-109细胞2h后,细胞内活性氧分别为(3.3±1.0)%、(21.6±2.0)%、(32.6±3.2)%、(44.7±2.2)%、(53.1±3.6)%,12h后Δψm分别为(97.2±1.9)%、(90.6±1.9)%、(85.5±1.4)%、(67.8±2.0)%、(62.4±3.0)%,24h后可见细胞凋亡率分别为(3.4±1.2)%、(16.2±2.3)%、(28.1±1.5)%、(33.2±3.9)%、(45.5±3.8)%;CAT能明显抑制DDP诱导的EC-109细胞凋亡。结论:DDP能够通过刺激EC-109细胞内活性氧的产生、损伤线粒体,使其膜电位下降,引起EC-109细胞凋亡。     

Radiosensitivity enhancement by arsenic trioxide in conjunction with hyperthermia in the EC-1 esophageal carcinoma cell line

Objective: To explore the effect on radiosensitivity of arsenic trioxide (As203) in conjunction with hyperthermiaon the esophageal carcinoma EC-1 cell line. Method: Inhibition of EC-1 cell proliferation at differentconcentrations of As203 was assessed using the methyl thiazolyl blue colorimetric method (MTT method),with calculation of IC50 value and choice of 20% of the IC50 as the experimental drug concentration. Blankcontrol, As203, hyperthermia, radiotherapy group, As203 + hyperthermia, As203 + radiotherapy, hyperthermia +radiotherapy and As203 + hyperthermia + radiotherapy groups were established, and the cell survival fraction(SF) was calculated from flat panel colony forming analysis, and fitted by the ‘multitarget click mathematicalmodel’. Flow cytometry (FCM) was used to detect changes in cell apoptosis and the cell cycle. Results: As203exerted inhibitory effects on proliferation of esophageal carcinoma EC-1 cells, with an IC50of 18.7 μmol/L. Afterjoint therapy of As203 + hyperthermia + radiotherapy, the results of FCM showed that cells could be arrested inthe G2/M phase, and as the ratio of cells in G0/G1 and S phases decreased, cell death became more pronounced.Conclusion: As203 and hyperthermia exert radiosensitivity effects on esophageal carcinoma EC-1 cells, withsynergy in combination. Mechanistically, As203 and hyperthermia mainly influence the cell cycle distribution ofEC-1 esophageal carcinoma cells, decreasing the repair of sublethal damage and inducing apoptosis, therebyenhancing the killing effects of radioactive rays.     

维生素E琥珀酸酯对人食管癌TE-1和Eca-109细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨维生素E琥珀酸酯(VES)对人食管鳞癌低分化细胞株TE-1以及高分化细胞株Eca-109增殖的抑制作用及诱发凋亡的作用。方法:不同浓度(0、5、10、15、20 μg/mL)VES分别处理TE-1及Eca-109细胞24 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况;光镜下观察细胞形态;DAPI染色观察细胞核凋亡形态,Western blot方法检测细胞中凋亡标志蛋白多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达情况。结果:与对照组比较,MTT检测结果显示随着VES剂量增加,两种细胞株均出现了不同程度的增殖抑制,在20 μg/mL VES组细胞增殖率均达到最低(TE-1:15.89%±6.22%;Eca-109:13.78%±4.89%)。光镜下细胞形态随着VES剂量增加发生明显改变,TE-1细胞在10 μg/mL VES组开始出现细胞变圆、体积缩小、漂浮死亡等形态;Eca-109细胞在15 μg/mL VES组开始出现细胞变圆、体积缩小、漂浮死亡等形态。DAPI染色结果显示,VES高剂量组(20 μg/mL)两株细胞的细胞核均出现明显的凋亡形态。Western blot显示,随着VES剂量增加,凋亡标记蛋白PARP裂解激活,在20 μg/mL VES处理组达到最大裂解程度。结论:VES对低分化及高分化人食管癌细胞的增殖均有抑制作用并诱导细胞发生凋亡。     

三氧化二砷对人食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用

目的探讨三氧化二砷(As₂O₃)对食管癌离体肿瘤细胞EC-1的放射增敏作用,并探讨其机制。方法利用多靶单击数学模型拟合放射剂量-细胞存活曲线,观察As₂O₃对食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用。流式细胞法观察As₂O₃对细胞周期分布及细胞凋亡的影响。结果As₂O₃对食管癌细胞株EC-1有明显的放射增敏效应,3 μmol/L As₂O₃作用48 h的放射增敏比为1.285。药物作用后G₂／M期细胞比例增加,G₀/G₁期和S期细胞比例减少;细胞凋亡指数增加,与对照组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。结论As2O3对食管癌细胞株EC-1有明显的放射增敏效应。放射增敏的机制可能与As₂O₃抑制EC-1细胞的修复能力、使细胞周期阻滞在G₂／M期、G₀/G₁期和S期细胞减少以及凋亡增加有关。     

手霉素对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨手霉素对食管癌细胞Eca109体外增殖活性的影响及其作用机制。方法：用不同浓度的手霉素（10、20、40、80、120txmol／L）处理Eca109细胞24、48和72h后,采用MTT方法测定肿瘤细胞生长抑制率;吉姆萨染色和透射电镜技术观察手霉素对食管癌细胞Eca109形态变化的影响;流式细胞分析技术检测手霉素对Eca109细胞周期和凋亡的影响。结果：不同浓度的手霉素对Eca109细胞增殖均有明显的抑制作用,与对照组相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）;Giemsa染色及透射电镜结果显示手霉素诱导Eca109细胞出现较典型的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变;流式细胞分析结果显示,10、20、40、80和120μmol／L的手霉素作用Eca109细胞48h后的细胞凋亡率分别为4．520％±1．035％、14．490％±1．707％、28．883％±4．299％、35．107％±2．276％、47．940％±8．126％,与对照组凋亡率（1．370％±0．028％）相比,差异均具有统计学意义（p均〈0．05）;且凋亡率呈明显的剂量依赖关系;而细胞周期分布显示G2／M期细胞显著增多。结论：手霉素体外可显著抑制人食管癌细胞Eca109增殖,诱导细胞凋亡可能是其重要途径。