镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠STAT1 mRNA和蛋白表达的影响

【摘要】 目的 探讨不同剂量的镇肝熄风汤对自发性高血压大鼠（SHR）腹主动脉血管组织STAT1蛋白和STAT1 mRNA 表达的影响。方法 将60只24周龄雄性SHR大鼠随机分为模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、复方罗布麻组,每组各12只;将同源雄性魏 凯二氏大鼠（WKY）12只设为正常对照组。 灌胃给药45天后,Western Blot 测定腹主动脉血管组织中STAT1蛋白表达,实时聚合酶链反应（RT PCR）方法测定大鼠STAT1 mRNA基因表达。结果 与模型组比较,正常组、镇肝熄风汤中药中剂量组和高剂量组STAT1蛋白表达和STAT1 mRNA表达明显降低 ( P＜0. 01) 。结论 镇肝熄风汤可以抑制腹主动脉血管组织中 STAT1蛋白表达和 STAT1 mRNA 表达,可能通过抑制腹主动脉血管细胞凋亡和减少血管细胞增殖的作用,来降低血管重构,从而达到降低血压的作用。     

老龄SHR大鼠胸主动脉PPARγ表达变化及罗格列酮干预作用

目的:探讨老龄SHR大鼠胸主动脉过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达变化情况及罗格列酮(Ros)干预作用。方法:64周龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)分为WKY,SHR及SHR+Ros组,每组9只。SHR+Ros组大鼠给予Ros(5mg/kg/d)灌胃,连续56d;WKY和SHR组大鼠分别灌服等体积的生理盐水。干预结束后采用tail cuff法测量各组大鼠尾动脉收缩压,采用HE染色观察主动脉组织病理学改变情况,采用免疫组化染色及图像分析检测胸主动脉PPARγ蛋白表达情况,采用real time-PCR检测主动脉PPARγmRNA表达情况。结果:与WKY大鼠相比,SHR大鼠血压升高(P<0.05),HE染色可见胸主动脉管壁增厚,内弹力板变直,间质增厚,细胞核着色较淡,免疫组化染色及real time-PCR结果表明SHR大鼠胸主动脉PPARγ蛋白及mRNA表达水平均下降(均P<0.05),与SHR组相比,SHR+Ros组大鼠血压降低(P<0.05),胸主动脉组织病理学改变情况缓解,管壁变薄,内弹力板趋于迂曲,间质变薄,细胞核着色变深,PPARγ蛋白及mRNA表达水平均增加(P<0.05)。结论:老龄SHR大鼠胸主动脉存在PPARγ表达下降,PPARγ配体罗格列酮可以逆转这种现象。     

自发性高血压大鼠内皮素不同组织分布及其意义

为探讨内皮素(ET)在自发性高血压大鼠(SHR)与正常血压大鼠(WKY)体内分布规律及其意义。本文选用SHR和WKY大鼠各10只,用放免法测定其血浆、脑组织和主动脉血管组织中内皮素含量的变化。发现SHR血浆、脑和主动脉中ET量均显著高于WKY组(P分别<0.01);WKY组脑较血管组织含量低(P<0.01),SHR组两者无显著性差异(P>0.05)。认为内皮素不同组织分布的变化可能与高血压的发生发展及并发症有关。     

通心络对自发性高血压大鼠血浆NO、ET及血管平滑肌iNOS表达的影响

目的 观察通心络对自发性高血压大鼠(SHR)血压、血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)以及主动脉血管平滑肌组织(VSM)iNOS mRNA表达的变化. 方法 30只12周龄雄性SHR大鼠,随机分成3组,每组10只,分别为空白对照组、通心络小剂量组、大剂量组,年龄、性别配对的正常雄性WKY大鼠作为时照.各给药组均采用灌胃法给药,对照组给予等量蒸馏水.治疗12周.放免法测定血浆ET、Ang Ⅱ浓度,NO浓度采用硝酸还原酶法测定,用RT-PCR检测VSM组织iNOS mRNA表达水平. 结果 与未治疗组SHR相比,大、小剂量通心络治疗均能在一定程度上抑制SHR大鼠血压升高(P<0.05);小剂量通心络治疗可降低血浆ET浓度(P<0.05),升高NO浓度(P<0.05),Ang Ⅱ浓度无明显变化(P>0.05),VSM iNOS mRNA表达增强(P<0.05);大剂量通心络治疗可使血浆ET明显降低(P<0.01),Ang Ⅱ浓度下调(P<0.05),NO浓度显著升高(P<0.01),VSM iNOS mRNA表达显著增强(P<0.01). 结论 通心络治疗能有效降低SHR大鼠血浆ET、Ang Ⅱ水平,促进VSM组织iNOS mRNA表达,增加血浆NO浓度,抑制血压的升高.     

加味补阳还五汤对易卒中自发性高血压大鼠靶器官的保护作用

目的观察加味补阳还五汤对易卒中自发性高血压大鼠（SHR／SP）靶器官的保护作用。方法将20只6周龄雄性易卒中自发性高血压大鼠（SHR／SP）分成2组（每组10只）,其中一组喂含补阳还五汤的饲料为用药组,另一组常规饲养,作为对照组。同时用同龄10只WKY大鼠作为正常血压组。实验周期为3个月,观察指标为：大鼠血压,血浆NO、ET—1含量,大鼠心、脑、肾的损坏程度。结果用药纽的动物血压、靶器官（心、脑、肾）的损坏程度、血浆ET．1含量明显低于对照组,用药组大鼠血浆NO含量显著高于对照组（P〈0．01）。结论加味补阳还五汤能降低SHR／SP血压,减轻SHR／SP靶器官（心、脑、肾）的损坏程度。     

二氧化硫对自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞内质网应激的影响

目的探讨二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)主动脉平滑肌细胞内质网应激的调节作用。方法4周龄正常血压WKY(wistar-kyoto rat)大鼠7只作为WKY对照组。4周龄SHR大鼠12只分为SHR(spontaneously hypertensive rat)对照组及SHR+SO2供体(Na2SO3/NaHSO3)组,每组6只。5周后检测大鼠血压,采用高效液相色谱(HPLC)法测定血浆SO2水平,采用免疫组织化学方法检测主动脉平滑肌细胞GRP78和caspase-12的蛋白表达。结果9周时SHR对照组血压明显高于WKY对照组,血浆SO2水平显著低于WKY对照组,主动脉平滑肌细胞GRP78和caspase-12蛋白表达显著增高。与SHR对照组比较,SHR+SO2供体组大鼠血压明显降低,血浆SO2含量升高,主动脉平滑肌细胞GRP78和caspase-12蛋白表达降低。结论SO2可能抑制高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞内质网应激反应的激活。     

安体舒通对自发性高血压大鼠心肌中的血管紧张素转换酶表达的影响

目的 观察自发性高血压大鼠(SHR)与Wistar-Kyoto(WKY)大鼠心肌细胞中血管紧张素转换酶(ACE)mRNA及其蛋白的表达差异,以及安体舒通对SHR心肌细胞中ACE mRNA表达的影响.方法 选取15只16周龄雄性SHR,随机分为对照组(n=7)和安体舒通组(n=8),另取10只同龄的正常血压WKY大鼠作为对照,尾袖法测定血压,药物干预4周后称取左心室质量及体质量,计算左室质量指数;采用RT-PCR法检测SHR对照组、安体舒通组、WKY组大鼠心肌中ACE mRNA的表达水平,Western blot法测定上述3组心肌中ACE蛋白表达水平.结果 (1)SHR对照组血压显著高于WKY组,差异有高度统计学意义(P<0.01);安体舒通可小幅度降低SHR血压,与SHR对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);(2)WKY组的左室质量指数显著低于SHR对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01);安体舒通组介于其他两组之间,且与SHR对照组的差异亦有高度统计学意义(P<0.01).(3)SHR对照组心肌细胞ACE mRNA及蛋白表达显著高于WKY组,差异有高度统计学意义(P<0.01);安体舒通组介于其他两组之间,高于WKY组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 安体舒通可降低自发性高血压大鼠心肌中ACE mRNA及其蛋白的表达,可能为其抑制左室肥厚的一种潜在机制.     

镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证模型大鼠脑组织谷胱甘肽抗氧化系统的影响

目的:观察镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证模型大鼠脑组织谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平的影响,并分析其作用机制。方法:105只Wistar大鼠随机分为正常对照组,假手术组,模型对照组,镇肝熄风汤低剂量组、中剂量组、高剂量组,司来吉兰组,每组15只。采用附子汤灌胃加6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)单侧损毁黑质法双因素制备大鼠帕金森病肝阳上亢证模型。镇肝熄风汤干预4周后,采用紫外分光光度法检测GSH和氧化型谷胱甘肽(glutathione oxidized,GSSG)的含量,实时定量PCR法分析谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基(glutamate cysteine ligase modifier subunit,GCLm)和谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate cysteine ligase catalytic subunit,GCLc)mRNA表达,免疫印迹法分析GCLm和GCLc蛋白表达。结果:与模型对照组(0.26±0.23)比较,镇肝熄风汤低剂量组、中剂量组和高剂量组显著增加帕金森病肝阳上亢证模型大鼠中脑GSH/GSSG(1.62±0.24、2.02±0.23、3.54±0.40)。与模型对照组(Western blot:118.8±10.1,PCR:1.20±0.11)比较,镇肝熄风汤低剂量组、中剂量组和高剂量组显著上调了帕金森病肝阳上亢证模型大鼠中脑组织GCLc蛋白(140.8±8.3、150.4±7.6、158.6±9.1)和mRNA(1.80±0.19、1.98±0.13、2.08±0.17)表达,但并没有影响GCLm基因表达。结论:镇肝熄风汤可增加帕金森病肝阳上亢证大鼠脑组织GSH含量,在转录和翻译水平上调GCLc表达,这些作用可能是镇肝熄风汤抗帕金森病的机制之一。     

PPAR-γ在自发性高血压大鼠血管平滑肌表达的增龄性变化

目的研究过氧化物酶体活化增殖受体γ（PPAR-γ）在自发性高血压大鼠（SHR）动脉血管平滑肌的表达随龄性变化。探讨PPAR-γ与高血压的发生发展关系。方法采用免疫组织化学方法检测PPAR-γ在不同周龄SHR血管组织表达变化。同时培养大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）。用RT—PCR检测PPAR-γmRNA。用Western Blot分析PPAR-γ蛋白在不同周龄大鼠原代及低代培养的VSMCs表达。采用同龄同种系正常血压的京都种大鼠（WKY）作为对照组。结果PPAR-γ在SHR血管组织的表达有随着鼠龄增加而增强的趋势。而24周与16周相比表达不再增加,PPAR-γ在4周和24周SHR和WKY表达差异无统计学意义。而8周和16周SHR的PPAR-γ表达明显高于WKY．在VSMCs。4周、8周和16周SHR和WKY的PPAR-γmRNA以及蛋白表达随着鼠龄的增加而增加．4周和24周SHR与WKY相比PPAR-γ mRNA以及蛋白表达差异无统计学意义。但是PPAR-γ表达量在8周、16周SHR VSMCs表达高于WKY,24周时在SHR VSMCs表达不再增加。表达量与同龄WKY相当。结论PPAR-γ的表达随着血压、血管平滑肌增殖和鼠龄的变化而有所不同。此变化提示PPAR-γ参与了高血压的发生发展。     

自发性高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2的表达

目的  观察不同月龄的自发性高血压大鼠(SHR)的肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)的mRNA和蛋白质表达水平,探讨ACE2与血压状态的内在联系。  方法  12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)18只和12周龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠18只。随机分为SHR组和WKY组,每组抽取各9只处死后与喂养12周后处死的24周龄大鼠一并进行ACE2的检测。采用实时定量RT-PCR法检测ACE2 mRNA的表达,免疫组织化学检测ACE2蛋白的表达。  结果  与同周龄WKY组比较,SHR组大鼠的血压显著增加(P均＜0.001),ACE2 mRNA表达显著降低(P均＜0.001);与12周龄SHR组比较,24周龄SHR的血压显著增加(P＜0.01),ACE2 mRNA表达显著降低(P＜0.01);与同周龄的WKY组比较,SHR组肾脏ACE2免疫染色表达显著减少。 结论  肾脏ACE2 mRNA和蛋白质的表达与血压升高相关。