PTEN在胚胎早期心脏发育过程中的作用

目的通过过表达PTEN,探讨胚胎早期原肠胚形成期PTEN表达及在早期心脏发生发育过程的作用和意义。方法用改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育待其发育到HH4期,对鸡胚心肌干细胞(Cardiac Stem Cell)进行PTEN电转染,转染成功后一部分鸡胚37℃孵箱继续培养30 h,待其发育形成心管,观察过表达PTEN对心管发生的影响;另一部分鸡胚在超净台内完成心肌干细胞的离体,体外培养使其分化发育成心肌组织,主要研究PTEN在细胞增殖、分化和凋亡过程中的作用。结果 30 h后鸡胚整体的免疫组织化学(N-cadherin)结果显示,PTEN-WT组和PTEN-G129E组鸡胚心管出现了反向环化、多囊化等畸形,GFP组和PTEN-C124S组心管发育受到的影响较小;转染后离体培养得到的心肌组织的跳动频率与GFP组下降的速度加快,且维持时间缩短,GFP组与PTEN-WT组差异有显著性(P<0.05),PTEN-WT组与PTEN-C124S组、PTEN-G129E组差异无显著性(P>0.05)。结论 PTEN蛋白酯酶可能参与早期胚胎心肌干细胞之间黏附分子的表达从而调节细胞迁移、分化发育,并加速了心肌组织的衰老...     

PTEN在胚胎早期心脏发育过程中作用的研究

目的 胚胎早期原肠胚形成期PTEN表达在原条及其而后发生的中胚层组织,本实验通过过表达PTEN探讨其在早期心脏发生发育过程的作用和意义。方法 《改良滤纸鸡胚胎整体培养法》取胚,37℃孵箱孵育待其发育到HH4期,对鸡胚心肌干细胞（Cardiac Stem Cell）进行PTEN电转染,转染成功后一部分鸡胚37℃孵箱继续培养30 h,待其发育形成心管,观察过表达PTEN对心管发生的影响;另一部分鸡胚在超净台内完成心肌干细胞的离体,体外培养使其分化发育成心肌组织[1],主要研究PTEN在细胞增殖、分化和凋亡过程中的作用。结果 30 h后鸡胚整体的免疫组织化学（N-cadherin）结果显示,PTEN-WT组和PTEN-G129E组鸡胚心管出现了反向环化、多囊化等畸形,GFP组和PTEN-C124S组心管发育受到的影响较小;转染后离体培养得到的心肌组织的跳动频率与GFP组下降的速度加快,且维持时间缩短,GFP组与PTEN-WT组有显著差异（P<0.05）,PTEN-WT组与PTEN-C124S组、PTEN-G129E组无显著差异（P＞0.05）。结论 PTEN蛋白酯酶可能参与早期胚胎心肌干细胞之间的粘附分子的表达从而调节细胞迁移、分化发育,并加速了心肌组织的衰老。     

胚胎素对小鼠免疫功能的影响

从发育早期鸡胚中提取的胚胎素,是一种含蛋白质的生物制品,实验与临床的初步研究提示,本品具有免疫活性,对慢性肝炎有一定的疗效。现将胚胎素对小鼠免疫功能影响的结果报道如下:     

胚胎发育早期神经上皮的显微移植技巧及应用

脊椎动物胚胎发育早期神经上皮的显微移植在运动神经元的轴突寻路、神经嵴细胞的迁移等研究中起非常重要的作用。本文以鸡胚、鸡胚-鹌鹑胚胎嵌合体为研究对象,摈弃了传统的神经上皮显微移植带来的移植失败、胚胎死亡及难以操作等缺点,总结近年来国外显微移植技术优缺点及作者的反复实验,从胚胎的预处理、显微操作针的制备,到神经上皮的显微移植等多方面详细探讨成功进行显微移植的方法和经验。为神经发育生物学,尤其是早期胚胎发育的神经干细胞迁移及轴突寻路的研究提供方法上的基础。     

EGF受体特异的酪氨酸激酶抑制剂对早期鼠胚体外发育的影响

将表皮生长因子（ＥＧＦ）受体特异的酪氨酸激酶抑制剂与２－细胞鼠胚联合体外培养２４，４８和６０ｈ。结果显示：受抑制剂作用的胚胎，５５．２％发育不超过个细胞期，仅１．５％的胚胎能发育形成胚泡，表明抑制剂能显著影响４－细胞和桑椹胚的进一步发育。提示ＥＧＦ受体在早期鼠胚发育过程中具有增殖和分化双重性作用。     

胚胎发育早期神经上皮的显微移植技巧及应用

脊椎动物胚胎发育早期神经上皮的显微移植在运动神经元的轴突寻路、神经嵴细胞的迁移等研究中起非常重要的作用。本文以鸡胚、鸡胚-鹌鹑胚胎嵌合体为研究对象，摈弃了传统的神经上皮显微移植带来的移植失败、胚胎死亡及难以操作等缺点，总结近年来国外显微移植技术优缺点及作者的反复实验，从胚胎的预处理、显微操作针的制备，到神经上皮的显微移植等多方面详细探讨成功进行显微移植的方法和经验。为神经发育生物学，尤其是早期胚胎发育的神经干细胞迁移及轴突寻路的研究提供方法上的基础。     

胚胎早期神经管形成的立体模式图

胚胎早期神经管形成的立体模式图王东珍（锦州医学院绘图室）邵佑之（组胚教研室）在许多胚胎学教材和图谱中，胚胎早期发育多用线条模式图来说明早期发育的主要阶段，而且多以截面图为主。读者对胚胎早期外形的变化的理解常常是抽象的。为使读者对胚胎早期神经管形成过程...     

小鼠胚卵石蜡切片及免疫组织化学染色方法

石蜡切片法是科研与教学工作中的一种常用实验技术,在细胞生物学、组织胚胎学及病理学中应用甚广[1].对于一般肉眼可见的较大组织标本来说,此项技术操作简便 ,标本能够长期保存.胚卵标本是研究人与动物胚胎发生发育过程中必须观察的标本,尤其是植入前的早期胚卵,对研究胚体早期发育的影响因素至关重要.本文对原有的胚卵切片技术进行了改进,为进一步研究人与动物的早期胚卵发育及其影响等诸因素提供了新的技术方法.已有研究表明层粘连蛋白(laminin,LN)在胚胎粘附、着床过程中发挥重要作用[2,3].本实验利用植入前各阶段的早期胚卵,以单个胚卵石蜡包埋切片技术为手段 ,通过免疫组化染色研究LN在小鼠早期胚卵中的分布,摸索出一套特异性强的针对单个胚卵进行免疫组化染色的方法,为进一步研究LN在小鼠早期胚卵中的免疫定位及分布奠定了基础.     

鸡胚石蜡组织切片免疫组化中的问题探讨及方法改进

目的总结鸡胚组织免疫组织化学染色中的操作经验。方法应用常规免疫组化方法对不同发育时期的鸡胚石蜡组织切片进行免疫组化染色。结果免疫组化的方法检测早期鸡胚发育中的相关抗体的表达定位准确,背景清晰。结论注意鸡胚免疫组化的操作要点,有助于提高鸡胚组织的免疫组化染色质量。     

命运分子cNumb在原肠期胚胎的表达及其生物信息学分析

目的 探讨命运分子cNumb在原肠期胚胎中的表达情况及其基因和编码蛋白的基本生物学特征.方法 利用原位杂交技术检测cNumb基因在原肠期鸡胚中的表达情况,同时应用生物学软件和在线平台对cNumb基因及其编码蛋白进行生物信息学分析.结果 cNumb mRNA在鸡胚4期开始表达于原条顶端,随发育过程逐渐扩展至亨氏节、头突和神经管,但表达区域仍相对集中.Numb基因在不同物种中具有较高保守性,cNumb编码的蛋白属于胞内蛋白,包含磷酸酪氨酸相互作用结构域和多个潜在磷酸化位点,可参与调节多种细胞生物学过程.结论 通过生物信息学分析获得了cNumb基因及其蛋白的生物学特征,为进一步研究Numb在胚胎神经发育中的调控机制奠定了基础.     

鸡和大鼠小脑发育的比较观察

观察发育阶段不同的鸡和大鼠的小脑标本外形,并在光学显微镜和电子显微镜下观察了结构。鸡卵在孵育的第6天,小脑原基出现。第15天小脑皮质形成,普肯野氏细胞(普氏细胞)排成一层。新生鸡小脑皮质发育近成年状态,普氏细胞发育基本完成。大鼠在生后第5天小脑皮质形成,第20天发育成熟。在生后第5天普氏细胞排成一层,第20天接近成熟状态,此时在电子显微镜下显示为粗面内质网和多聚核蛋白体区域性集中分布。鸡小脑比大鼠小脑发育早,这是种属差异。     

C57BL/6J小鼠及鸡胚B16细胞移植瘤血管生成拟态的观察及其MMP7和MMP9的表达

[目的]探讨黑色素瘤B16细胞鸡胚和小鼠移植瘤组织中MMP7和MMP9的表达与血管生成拟态形成的关系,初步探讨宿主微环境对肿瘤细胞的影响.[方法]分别建立黑色素瘤B16细胞鸡胚和小鼠移植瘤模型,通过HE切片观察血管生成拟态的分布情况,利用免疫组化方法检测MMP7和MMP9的表达.[结果]B16细胞鸡胚和小鼠移植瘤组织中均可见血管生成拟态,并且前者显著多于后者.鸡胚移植瘤组织和小鼠移植瘤组织中MMP7的阳性细胞百分比分别为34.55±8.98和15.27±4.21,前者显著高于后者(P＜0.01),MMP9的阳性细胞百分比分别为16.38±3.34和10.53±1.95,前者显著高于后者(P＜0.01).[结论]鸡胚移植瘤可用于研究肿瘤生长早期的生物学行为,MMP7和MMP9的表达可能与肿瘤生长早期血管生成拟态的形成有关.     

组织外植块对培养的鸡胚背根节神经突起生长的影响

为了解神经元的发育和周围组织的关系,本文分别用:(1) 10天鸡胚背根节与10天鸡胚心脏、皮肤、角膜、骨骼肌、肠、大脑、脊髓外植块联合培养;(2) 不同时期的鸡角膜与不同胚龄的鸡胚背根节联合培养;(3) 10天鸡胚背根节与雏鸡角膜内、外层联合培养。用于联合培养的背根节和组织外植块均按Maximow双盖片法种植在涂有鼠尾胶原的盖玻片上,两者相距1.5mm。外植块大小约0.5×1×1mm~3。培养48小时后取出固定,用改良的Bodian蛋白银法浸镀染色,在低倍镜下对神经突起进行半定量计数。 实验结果表明鸡胚心脏,皮肤和角膜外植块对背根节神经突起生长具较强的促进作用且对生长方向有明显诱导作用;骨骼肌、肠和大脑对神经突起生长也有不同程度促进作用,但脊髓却无明显作用。14、16、18天鸡胚角膜对8、10、12、14天鸡胚背根节神经突起生长有明显促进作用;12、14天鸡胚背根节在各时期角膜作用下神经突起生长都较丰富。含上皮层的雏鸡角膜外植块促进背根节神经突起生长的作用比含内皮层的角膜外植块要强。     

基膜结构蛋白在胚胎植入与早期胚胎发育中的作用研究进展

胚胎附着于子宫内膜组织后，蜕膜细胞分泌的多种蛋白、类固醇激素组成细胞外基质。基膜为细胞外基质的特化网状膜结构，由不同的蛋白纤维组成，在植入过程中包绕胚胎组织，以往被认为是实现物质交换的半透膜。近年研究发现基膜的重塑参与了胚胎植入和植入后胚胎发育，该文将综述基膜结构蛋白调控胚胎植入过程、影响早期胚胎发育的机制，以期为人为干预基膜重塑以改善妊娠结局提供研究思路。     

昆明小鼠卵子的体外受精及其新培养系统的建立

本研究首次将CZB培养液应用于昆明小鼠早期胚胎的培养，建立了一个可行的胚胎体外培养的新方法，采用昆明种成熟雄鼠附睾尾部精子与常规超排法得到的卵子在TYH培养液中进行体外受精后，将卵子分别移入WM和CZB培养液中进行发育培养。WM中的胚胎发生阻滞而未能继续发育；CZB培养液中的胚胎有79%发育至4细胞期，81%的胚胎发育至桑椹胚阶段，突破了胚胎培养中存在的“2细胞阻滞”现象。而于胚胎培养的不同阶段向培养液中添加葡萄糖也未表现出明显的作用。表明在昆明小鼠胚胎培养的早期阶段，葡萄糖并非一种重要的营养物质。     

Ameliorating Effects of Thyroxine and Atropine in Phosphamidon Intoxicated Chick Embryos

lNTRODUCTIONPhosphamidon(l-chloro-l-N,N-diethylcarban1oyl-lpropen-2-yl-dimethylphosphate)-isanorganophosphateinsecticideusedinagricultureagainstplantpests(Worthing,.l987).Ithasbeenreportedthat,i11additiontoitsinsecticidalpropeI-ty,itcausesalterationindini-trogenfixationandmetabolismincyanobacteriumPCC7ll9(Peronaetal.,l99l);residu-altoxicitytotheadultsofLiPaPhiserysimi(JagadishandDhinpo,l99l);changesinvita-ndnCcontentofhepatopancrea,gillandfootoftomellidenscondanus(KulkarniandKe-shava…     

3种分离流感病毒方法的比较分析

目的：为了比较流感病毒3种分离方法的敏感性及确定流感优势病毒株,1996年5月～9月,对江西南昌地区流感病毒进行了分离和鉴定研究。方法：采用细胞接种培养法、鸡胚羊膜腔接种培养法、鸡胚尿囊腔接种培养法。结果：细胞接种法分离的流感病毒株14株、鸡胚羊膜腔法得12株、鸡胚尿囊腔法得2株,共28株,其中甲1型18株、甲3型4株、乙型6株。结论：流感病毒分离中,细胞接种法与鸡胚羊膜腔接种法同样敏感。鸡胚分离培养中,应高度重视羊膜腔接种法。1996年南昌地区的优势而行珠是甲1型。