CD4细胞显微图像识别系统的研究

介绍了CD4细胞显微图像在放大约100倍的情况下,进行自动识别与计数的方法.该方法采用图像处理技术对细胞显微图像进行背景校正、图像增强和图像分割;提取CD4细胞的形态、颜色和光密度特征,构建Fisher分类器,进行细胞的识别.     

HIV感染中免疫活化与CD4辅助性T细胞死亡的关系

HIV感染后的最主要特征是CD4辅助性T细胞减少和获得性免疫缺陷.研究表明,病毒感染在CD4细胞减少中的作用有限,未感染的CD4细胞死亡才是HIV导致CD4细胞减少的主要因为.在此过程中,免疫系统活化与CD4细胞杀伤和疾病的进展有着非常高的相关性.在HIV感染中,长期非特异性的高水平免疫活化可能是HIV杀死免疫细胞的主要因为,但由于缺乏合适的体内试验模型.至今没有直接证据证明它们之间的因果关系.近年来,人源化小鼠模型的建立为解决这一难题提供了一个新的体内研究平台;HIV基因治疗技术亦取得了一定的进展,在研究HIV的致病机制及临床应用方面有着广泛的应用前景.     

手足口病患儿淋巴细胞亚群免疫特征检测及价值

[目的]总结手足口病(HFMD)患儿外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及NKT细胞免疫特征,探讨其在HFMD疾病发生发展中的机制及临床检测价值。[方法]应用流式细胞术检测152例HFMD患儿、45例健康对照组幼儿外周血中T淋巴细胞(CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞)、B淋巴细胞(CD3-CD19+细胞)、NK细胞(CD3-CD56+细胞)、NKT细胞(CD3+CD56+细胞)百分率,采用SPSS 13.0统计分析软件,分别对HFMD发病期与健康对照组、HFMD发病期与HFMD恢复期、HFMD重型组与HFMD普通组进行各组淋巴细胞亚群百分率间均数比较,两组间均数的比较方差齐时采用两个独立样本的t检验,方差不齐时用t'检验,P0.05为差异有统计学意义。[结果]HFMD发病期CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞、NK细胞百分率及CD4+/CD8+比值低于健康对照组;NKT细胞、B细胞百分率HFMD发病期高于健康对照组,各组间均数的比较,差异均有统计学意义(P0.05)。HFMD发病期CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞、NKT细胞百分率及CD4+/CD8+比值低于HFMD恢复期;B细胞、NK细胞百分率HFMD发病期高于HFMD恢复期,各组间均数的比较,差异均有统计学意义(P0.05)。HFMD重型组CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞、NKT细胞百分率及CD4+/CD8+比值低于HFMD普通组;B细胞、NK细胞百分率HFMD重型组高于HFMD普通组,除NKT细胞外,其余各组间均数的比较,差异均有统计学意义(P0.05)。[结论]HFMD患儿淋巴细胞亚群免疫功能紊乱。HFMD发病期淋巴细胞亚群中CD3+细胞、CD3+CD4+细胞百分率降低,B细胞百分率增高;HFMD恢复期NKT细胞百分率增高。淋巴细胞亚群免疫特征检测可作为HFMD患儿疾病转归分析指标。     

甲型H1N1流感病人外周血T细胞亚群检测结果分析

[目的]了解甲型H1N1流感病人抗流感病毒T细胞应答特征。[方法]分别在入院d1、d2和d4,采用流式细胞术检测31例流感病人外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的数量,并计算CD4/CD8比值。同时检测30例健康对照者。[结果]30例健康对照者外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4/CD8比值分别(1410±438)个细胞/μl、(880±275)个细胞/μl、(490±252)个细胞/μl和(1.72±0.60)。入院d1,流感病人CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4/CD8比值分别为(1099±519)个细胞/μl、(583±280)个细胞/μl、(415±222)个细胞/μl和(1.64±0.70),CD3+T细胞和CD4+T细胞显著低于对照组(P﹤0.05);d2分别为(1628±735)个细胞/μl、(886±374)个细胞/μl、(624±357)个细胞/μl和(1.65±0.73),与对照组差异无统计学意义,但都显著高于入院d1;d4分别为(1690±613)个细胞/μl、(914±255)个细胞/μl、(646±252)个细胞/μl和(1.57±0.64),CD3+T细胞和CD8+T细胞数量显著高于对照组。不同年龄段的流感病人及男女间CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4/CD8比值无显著性差异。[结论]在病毒感染初期T细胞亚群的数量短暂下降,紧接着快速增殖反应。甲型H1N1流感病毒新亚型毒株抗原能诱导机体产生T细胞应答,CD8+T细胞应答更为强烈。T细胞应答强度在男女间、不同年龄段间无差异。     

恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的 研究恩替卡韦抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者外周血CD4+ CD25+ Treg细胞的影响.方法 采集经恩替卡韦治疗4、12、24周的50例慢性乙肝患者的外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞技术,检测CD4+ CD25+ Treg细胞的比率,并分析其与乙型肝炎病毒DNA和血清丙氨酸转氨酶的相关性.结果 恩替卡韦治疗4、12、24周后CD4+ CD25+ Treg细胞的比例显著下降,与治疗前相比,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.05,P＜0.01).CD4+ CD25+ Treg细胞数量占PBMCs的比率与ALT的变化呈正相关(r=2.82,P＜0.05).结论 恩替卡韦抗病毒治疗能降低CD4+ CD25+ Treg/PBMCs的细胞比率;改善慢性乙型肝炎患者的免疫调节功能.     

调节性T细胞与肝炎病毒感染的相关研究

CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)是一类具有特定表型和免疫调节作用的T细胞亚群,在维持外周自身耐受、防止自身免疫病的发生以及抑制严重的感染性疾病和下调肿瘤免疫应答中发挥着重要的作用.此文对CD4+CD25+Tregs的来源、表型特征、作用机制及其在HBV、HCV感染中的免疫调节作用作了综述.     

慢性苯中毒患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平变化

[目的]通过测定慢性苯中毒患者、苯接触者及对照组体检者外周血中调节性T细胞(Treg)数量的变化,探讨慢性苯中毒发生的免疫学机制.[方法]采用流式细胞仪技术对30例慢性苯中毒患者、30例苯接触者及30例对照组体检者外周血标本中单个核细胞的CD4+CD25+Treg细胞进行检测,比较慢性苯中毒患者、苯接触者及对照组体检者之间CD4+CD25+ Treg细胞表达的差异.[结果]与对照组比较,慢性苯中毒患者外周血单个核细胞中CD4+CD25+ Treg细胞百分比明显降低(P＜0.05);与苯接触者比较,慢性苯中毒患者单个核细胞中CD4+CD25+ Treg细胞百分比明显降低(P＜0.05);苯接触者外周血单个核细胞中CD4+CD25+Treg细胞百分比与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]慢性苯中毒患者存在细胞免疫紊乱. CD4+CD25+Treg细胞百分比的减少可能为慢性苯中毒发生的致病机制之一.CD4+CD25+Treg有可能被作为监测长期苯作业人群的一个生物学指标.     

HBV感染者外周血T细胞亚群的研究

目的分析乙型病毒肝炎（HBV）感染者外周血T细胞亚群的特征及病程不同阶段的变化及意义。方法采用流式细胞仪对112例HBV感染者的外周血T细胞亚群进行检测,与正常对照组相比较。结果慢性乙肝、肝硬化患者的外周血CD4＋T细胞、CD8＋T细胞百分比及CD4＋TA2D8＋T较急性肝炎组及正常对照组明显减少;HBV—DNA阳性组、HBeAg阳性组外周血CD4＋T细胞、CD8＋T细胞百分比及CD4＋T／CD8＋T较正常对照组明显减少。结论HBV感染者体内存在T淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱。外周血T淋巴细胞亚群与乙肝病毒感染的慢性化及肝病的临床发生、发展有关。     

α-干扰素治疗慢性乙型肝炎可促进记忆性CD4~+T细胞群扩增

目的:探讨α-干扰素对慢性乙型肝炎患者记忆性CD4+T细胞变化的影响及其机制。方法:100例慢性乙型肝炎患者相应的治疗时间采集全血标本,分离外周血单个核细胞,采用FC500流式细胞仪收集和分析外周血记忆性CD4+T细胞亚群。结果:1.在IFN-α治疗过程中,可引起CD4+TCM、CD4+TEM和CD4+TIM细胞比例的规律性变化,即CD4+TCM与CD4+TIM变化规律基本相反,而CD4+TIM与CD4+TEM变化规律基本一致,说明用药时CD4+TCM向CD4+TIM和CD4+TEM转化。2.用药36周时CD4+TCM的增加与CD4+T细胞一致,而停药后CD4+TCM的减少与CD4+T细胞也一致,说明IFN-α导致了CD4+TCM细胞的增殖,从而使CD4+T细胞数量增加。结论:慢性乙型肝炎病毒感染患者用IFN-α治疗时,可引起CD4+TCM、CD4+TEM和CD4+TIM的规律性变化,使得效应CD4+TEM细胞增加;同时,记忆性CD4+T细胞数量增加,其增加原因可能与CD4+TCM细胞数量的增加有关。     

系统性红斑狼疮患者调节性T细胞及相关细胞因子的变化

目的 检测系统性红斑狼疮患者外周血CD4 CD25 T细胞和CD4 CD25highT细胞占CD4 T细胞的比率以及可溶性细胞因子TGF-β及IL-10、IL-12的血清浓度,初步探讨调节性T细胞在SLE体内发病机制中可能的作用.方法 采用流式细胞仪检测54例SLE患者及20例正常对照外周血CD4 CD25 T细胞和CD4 CD25highT细胞比率,ELISA检测血清细胞因子(TGF-β及IL-10、IL-12).结果 ①SLE组CD4 CD25highT细胞的比率较正常对照组降低;TGF-β水平较正常对照组降低,IL-10、IL-12水平较正常对照组均升高;CD4 CD25highT细胞与IL-12呈负相关;②初发SLE组CD4 CD25 T细胞和CD4 CD25highT细胞的比率均较正常对照组显著降低;CD4 CD25highT细胞与IL-10及IL-12均呈负相关.结论 调节性T细胞可能通过细胞因子TGF-β、IL-10、IL-12参与SLE的发病机制,但具体机制有待于进一步研究.     

湖北省艾滋病抗病毒治疗病人CD4细胞计数检测情况及变化特点

目的了解湖北省艾滋病抗病毒治疗病人的CD4细胞计数检测情况及在不同治疗时段的变化特点。方法利用国家艾滋病抗病毒治疗病人基本信息数据库以及实验室检测数据库,分析了湖北省2003年以来抗病毒治疗病人的CD4细胞计数检测情况,计算不同年份进入治疗的艾滋病病人在2003-2007年3月28日之间按照要求进行CD4随访检测率和开始抗病毒治疗后1年内按照要求随访检测率,并分析了不同治疗时段(治疗基线、治疗3、6、9、12以及18个月时)的CD4细胞计数变化特点。结果湖北省2003-2006年间抗病毒治疗人数累计达到1211人,累计CD4随访检测率呈上升趋势,治疗3、6、9、12以及18个月时,同治疗基线CD4相比,CD4细胞数明显增加,经统计学分析具有显著性差异。在治疗的头3个月内CD4细胞数平均增加29.21个/月,随着治疗时间的延长,CD4增幅减慢。结论艾滋病病人接受免费抗病毒治疗以后,CD4细胞计数逐渐上升,在治疗3个月时增幅最明显,此后缓慢上升。CD4细胞计数检测在艾滋病抗病毒治疗中发挥着越来越重要的作用。随着抗病毒治疗CD4随访检测比例不断上升,CD4检测试剂的需求逐年增加,应加强计划管理保证试剂的充足供应。     

T-cell activation after chronic ethanol ingestion in mice.

Chronic excessive consumption of ethanol causes immunodeficiency in human beings and in mice. Immunologic changes have been described in both species, including T-cell and innate immune system cell activation, among others. The features of chronic ethanol-induced activation have similarities in the two species, including an increased effector subset in both CD4+ and CD8+ T cells. There are also features of activation observed in the splenic macrophages of mice consuming ethanol chronically, including increased up-regulation of CD80 and CD86. Because these molecules are involved in T-cell-antigen-presenting cell interactions in vivo, it is of interest to ask whether these and other pathways of interaction are important in the T-cell activation and cytokine skewing described in chronic ethanol abuse. Preliminary findings from comparisons of wild-type, CD40 ligand knock-out, and CD28 knock-out C57BL/6 mice strongly support the suggestion of a critical role for T-cell-antigen-presenting cell interactions in the immune alterations observed in chronic ethanol abuse.     

肺腺癌细胞免疫指标、癌胚抗原、血清铁蛋白与预后因素的关系

目的 研究肺腺癌患者细胞免疫指标、癌胚抗原(CEA)、血清铁蛋白(SF)与预后因素的关系.方法 回顾性分析81例肺腺癌患者的临床资料,统计分析其一般情况、T淋巴细胞亚群、CEA和SF变化及其与TNM分期、淋巴结转移的关系.结果 (1)CD4+、CD4+/CD8+随TNM分期增加呈降低趋势;CD8+、CEA及SF随TNM分期增加呈增高趋势.(2)有淋巴结转移较无淋巴结转移患者,CD4+、CD4+/CD8+明显降低[分别为(25.8±7.5)%比(34.9±9.1)%、0.7±0.4比1.1±0.5,P＜0.01],CD8+、CEA及SF明显增高[分别为(39.7±9.5)%比(34.0±8.1)%、(14.2±10.8)μg/L比(6.1±6.1)μg/L、(374.4±192.9)μg/L比(276.3±167.4)μg/L,P＜0.01或＜0.05].(3)CEA(+)较CEA(-)患者,CD4+、CD4+/CD8+明显降低[分别为(26.9±7.5)%比(35.6±9.7)%、0.7±0.4比1.2±0.5,P＜0.01],CD8+及SF明显增高[分别为(40.4±9.1)%比(32.4士7.1)%、(371.9±181.5)μg/L比(261.5±174.0)μg/L,P＜0.01].(4)SF(+)较SF(-)患者,CD4+、CD4+/CD8+明显降低[分别为(26.7±7.9)%比(33.3±9.7)%、0.7±0.4比1.1±0.5,P＜0.01],CD3+、CD8+及CEA明显增高[分别为(71.1±8.5)%比(66.2 4±10.4)%、(40.5±8.6)%比(34.2±8.7)%、(13.7±10.6)μg/L比(7.3 4±7.1)μg/L,P＜0.05或＜0.01].结论 肺腺癌患者存在不同程度的细胞免疫功能紊乱,且与CEA、SF变化及TNM分期、淋巴结转移密切相关.     

Apoptosis plays a distinct role in the loss of precursor lymphocytes during zinc deficiency in mice

Lymphopenia is a characteristic of zinc deficiency, which is associated with massive loss of pre-B and pre-T cells from the primary lymphoid organs of zinc-deficient mice that have elevated serum corticosterone (CS). We examined whether this naturally elevated glucocorticoid level is associated with increased apoptotic loss of pre-T cells in the thymus of A/J and CAF1/J mice. In three experiments, partially atrophied thymuses were removed from 20 marginally zinc-deficient (ZD) young adult mice and cultured for 6 h in parallel with thymocytes prepared from 17 adequately fed mice. Thymocyte immunophenotyping combined with flow cytometric cell cycle analysis was used to identify the degree of apoptotic cell death among thymocytes of the two dietary groups, which were compared in the absence of in vivo phagocytosis. Apoptosis was enhanced 50-300% among pre-T cells (CD4+CD8+) prepared from ZD mice. This resulted in a 38% shrinkage of the thymic pre-T cell compartment, which was associated with an 80% decrease in thymic cell number. Pro-T cells (CD4-CD8-) and mature T cells (CD4+CD8-, CD4-CD8+), which express higher levels of Bcl-2 protein, survived ZD to a greater extent and formed a greater proportion of the remaining thymocyte population in ZD mice. Collectively, these data show that heightened degrees of apoptotic cell death induced in vivo by CS-disrupted thymic T cell lymphopoiesis, identifies the means of disruption of marrow B cell lymphopoiesis and explains the appearance of lymphopenia.     

CD4+ and CD8+ mediated cellular immune response to recombinant influenza nucleoprotein

The stimulatory properties of soluble recombinant influenza nucleoprotein (NP) on purified CD4(+) and CD8(+) T cells from young and elderly individuals were studied. Recombinant influenza NP failed to induce proliferation of resting CD4(+) and CD8(+) T cells in the absence of IL-2. Addition of small amounts of IL-2, however, led to strong proliferation of resting CD4(+) and CD8(+) T cells from young and elderly donors. NP-reactive CD4(+) and CD8(+) T cell lines from both age groups grew equally well under long-term culture conditions. T cell lines raised to live influenza virus could recognize recombinant influenza NP and showed a substantial proliferative response. Stimulation of CD8(+) T cells is presumably due to cross-presentation, as EBV-transformed MHC class I-positive cell lines, which are incapable of antigen processing, stimulated live influenza virus-reactive CD8(+) T cell lines when loaded with NP-derived immunodominant peptides but not following loading with the whole NP molecule. Vaccines containing recombinant influenza NP might confer cross-protective immunity and could therefore be especially useful in cases of major epidemics or pandemics.     

50岁及以上HIV感染/AIDS患者抗病毒治疗后CD4细胞动态变化及影响因素

目的 探讨常德市≥50岁人类免疫缺陷病毒感染/艾滋病(HIV感染/AIDS)患者接受国家免费艾滋病抗病毒治疗(ART)60个月内,CD4细胞的动态变化情况及影响因素.方法 选取常德市2005年1月1日—2017年12月31日已确诊登记在册的≥50岁HIV感染/AIDS病例,收集治疗前和治疗后3、6、12、24、36、4...     

Protection by universal influenza vaccine is mediated by memory CD4 T cells

There is a diverse array of influenza viruses which circulate between different species, reassort and drift over time. Current seasonal influenza vaccines are ineffective in controlling these viruses. We have developed a novel universal vaccine which elicits robust T cell responses and protection against diverse influenza viruses in mouse and human models. Vaccine mediated protection was dependent on influenza-specific CD4⁺ T cells, whereby depletion of CD4⁺ T cells at either vaccination or challenge time points significantly reduced survival in mice. Vaccine memory CD4⁺ T cells were needed for early antibody production and CD8⁺ T cell recall responses. Furthermore, influenza-specific CD4⁺ T cells from vaccination manifested primarily Tfh and Th1 profiles with anti-viral cytokine production. The vaccine boosted H5-specific T cells from human PBMCs, specifically CD4⁺ and CD8⁺ T effector memory type, ensuring the vaccine was truly universal for its future application. These findings have implications for the development and optimization of T cell activating vaccines for universal immunity against influenza.     

艾滋病合并结核感染状况的调查分析——附18例临床观察

目的调查分析艾滋病合并结核感染的状况,提高对艾滋病合并结核感染的认识,探讨艾滋病与结核病的相关性。方法对近几年在我院就诊的125例艾滋病患者的相关资料进行回顾性分析。结果①125例艾滋病患者中有18例发生结核菌感染,发病率14.4%。其中,99例成人艾滋病人有13例合并结核,发病率13.1%;儿童艾滋病26例,有5例发生结核感染,发病率19.2%。②18例合并结核感染的病人,有6例死亡,死亡率33.3%,其中儿童死亡2例,死亡率40%（2/5）;成人死亡4例,死亡率30.8%（4/13）。③临床分型：肺外结核6例,占33.3%,其中淋巴结核4例,结核性腹膜炎和脑膜炎各1例;肺结核12例,占66.7%,其中,粟粒性肺结核6例（33.3%）,浸润性肺结核5例（27.8%）,结核性胸膜炎1例。④有9例病人进行了CD4^＋细胞数目检测,在（29～84）个/μL之间,均〈100个/μL。结论艾滋病合并结核感染的发病率大约15%左右,发生血行播散型肺结核和肺外结核多见;结核是引起艾滋病机会性感染和死亡的主要疾病,而CD4^＋细胞数目和功能低下可能是最主要的原因。     

淋巴细胞主动免疫治疗对不明原因复发流产患者 Treg/Th17平衡的影响

目的：探讨淋巴细胞主动免疫治疗（LIT）对不明原因复发流产（URSA）患者的 Treg／Th17免疫平衡的影响。方法应用流式细胞学技术及 ELISA 法测量 URSA 患者 LIT 治疗前、后外周血 Treg、Th17细胞所占淋巴细胞比例和血清 IL-10、IL-17、TGF-β1水平,并对比及分析关联性。结果40例 URSA 患者 LIT 治疗后外周血CD4＋CD25＋Treg、CD4＋CD25＋CD127 low Treg 细胞所占比例高于治疗前,CD8-CD3＋IL-17A ＋Th17细胞所占比例低于治疗前,且与前两者的改变分别呈负相关（r ＝－0.724,P ＜0.01;r ＝－0.571,P ＜0.01）,Treg／Th17比例高于治疗前,差异有统计学意义。LIT 治疗后血清 IL-10、TGF-β1水平较治疗前升高,且分别与 CD4＋CD25＋Treg 细胞比例的改变呈正相关（r ＝0.654,P ＜0.01;r ＝0.658,P ＜0.01）,IL-17水平降低,且与 CD8-CD3＋IL-17A ＋ Th17细胞比例的改变呈正相关（r ＝0.693,P ＜0.01）,差异有统计学意义。结论 LIT 可能影响 URSA 患者的 Treg／Th17免疫平衡,提高 Treg 细胞亚群的数量、功能,降低 Th17细胞亚群的数量、功能,以此发挥治疗作用。