缬沙坦对心力衰竭家兔肌浆网钙ATP酶、蛋白激酶A及磷酸酶1α的影响

目的 探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌肌浆网钙ATP酶(SERCA2)、心肌蛋白激酶A(PKA)和磷酸酶1α(PP1α)表达的改变及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义.方法 21只家兔随机分为三组,假手术组、心衰组和缬沙坦组各7只,通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及SERCA2、PKA、PP1α的表达.结果 与假手术组比较,心衰组左心室重量指数(LVMI)、心率、左心室舒张末压(LVEDP)显著升高(P<0.05),左心室缩短率(LVFS)及射血分数(EF)明显降低(P<0.05);与心衰组比较,缬沙坦组LVMI、心率、LVEDP显著降低(P<0.05),LVFS及EF明显升高(P<0.05);心衰组SERCA2、PKA显著低于假手术组(P<0.05),PP1α显著高于假手术组(P<0.05);缬沙坦组SERCA2、PKA显著高于心衰组(P<0.05),PP1α显著低于心衰组(P<0.05).结论 缬沙坦长期干预心衰,能够改善心脏舒缩功能,可能与其上调SERCA2、PKA表达,降低PP1α表达有关.     

缬沙坦对心力衰竭家兔心肌细胞肌浆网兰尼碱受体的影响

目的:探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌细胞肌浆网兰尼碱受体(Ry R2)表达及其释钙功能的改变以及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义。方法:27只家兔随机分为三组:假手术组(n=9)、心衰组(n=9)和缬沙坦组(n=9),通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及心肌细胞肌浆网Ry R2的表达和功能的改变。结果:与假手术组比较,心衰组左心室重量指数、左心室舒张末压显著升高(P0.05),左心室短轴缩短率及左心室射血分数明显降低(P0.05);与心衰组比较,缬沙坦组左心室重量指数、左心室舒张末期压力显著降低(P0.05),左心室短轴缩短率及左心室射血分数明显升高(P0.05);心衰组心肌细胞肌浆网Ry R2表达和其释钙功能显著低于假手术组(P0.05);缬沙坦组心肌细胞肌浆网RyR2表达和其释钙功能显著高于心衰组(P0.05)。结论:长期应用缬沙坦能够改善心脏舒缩功能,可能与其增加心肌细胞肌浆网RyR2表达和其释钙功能有关。     

缬沙坦对心力衰竭家兔心肌细胞核及肌浆网钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的影响

【】目的 探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌细胞核及肌浆网钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达及活性的改变及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义。方法 24只家兔随机分为3组,假手术组、心衰组和缬沙坦组各8只,通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及CaMKⅡ的表达和活性的改变。结果 与假手术组比较,心衰组左心室重量指数(LVMI)、左心室舒张末压(LVEDP)显著升高(P<0.05),左心室缩短率(LVFS)及左室射血分数(LVEF)明显降低(P<0.05);与心衰组比较,缬沙坦组LVMI、LVEDP显著降低(P<0.05),LVFS及LVEF明显升高(P<0.05)；心衰组细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达及活性显著高于假手术组 (P<0.05)；缬沙坦组细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达及活性显著低于心衰组(P<0.05)。结论 缬沙坦长期干预心力衰竭,能够改善心脏舒缩功能,可能与其降低细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达及活性有关。     

心力衰竭家兔肌浆网钙泵的异常

目的 探讨家兔慢性心力衰竭（心衰）时心肌肌浆网钙泵（SERCA2）表达和功能的改变.方法 14只家兔随机分为2组,假手术组和心衰组各7只.通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型.于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及SERCA2的表达和功能的改变.结果 与假手术组比较,心衰组左心室重量指数（LVMI）、左心室舒张末压显著升高（P〈0.05）,左心室短轴缩短率及左室射血分数明显降低（P〈0.05）;心衰组SERCA2的表达和功能显著低于假手术组（P〈0.05）.结论 心肌SERCA2的表达和功能降低可能是心力衰竭发生因素之一.     

缬沙坦对心力衰竭家兔钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的影响

目的 探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达及活性的改变及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义.方法 27只家兔随机分为3组,假手术组、心衰组和缬沙坦组各9只,通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血液动力学的变化及CaMK Ⅱ的表达和活性的改变.结果 与假手术组比较,心衰组左室重量指数(LVMI)、左窒舒张末压显著升高(P＜0.05),左室短轴缩短率及左室射血分数明显降低(P＜0.05);与心衰组比较,缬沙坦组左室重量指数、左室舒张未压显著降低(P＜0.05),左室短轴缩短率及左室射血分数明显升高(P＜0.05);心衰组CaMK Ⅱ蛋白表达及活性显著高于假手术组(P＜0.05);缬沙坦组CaMKⅡ蛋白表达及活性显著低于心衰组(P＜0.05).结论 缬沙坦长期干预心衰,能够改善心脏舒缩功能,可能与其降低CaMK Ⅱ蛋白表达及活性有关.     

心力衰竭家兔心肌细胞核及肌浆网钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的变化

目的:探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌细胞核、肌浆网钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达及活性的改变。方法:16只家兔随机分为两组,假手术组、心衰组各8只,通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血液动力学的变化及心肌细胞核、肌浆网CaMKⅡ的表达和活性的改变。结果:与假手术组比较,心衰组左心室重量指数[(132±0.06)g/kg vs(3.61±0.09)g/kg]、左心室舒张末压[(-1.50±0.50)mmHg vs(23.00±2.37)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)]显著升高(P均0.05),左心室短轴缩短率(37.83%±3.58%vs 17.38%±3.13%)及左心室射血分数(71.92%±4.56%vs 38.50%±6.07%)明显降低(P均0.05);心衰组心肌细胞核和肌浆网的CaMKⅡ蛋白表达及活性均显著高于假手术组(P均0.05)。结论:心肌细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达及活性增加可能是心衰发生的机制之一。     

辛伐他汀对心力衰竭家兔蛋白激酶A及磷酸酶1α的影响

目的:探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌蛋白激酶A和磷酸酶1α蛋白表达的改变及辛伐他汀干预的意义.方法:21只家兔随机分为3组,假手术组、心衰组和辛伐他汀组各7只,通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及心肌蛋白激酶A、磷酸酶1α的表达.结果:血流动力学和心功能比较:与假手术组比较,心衰组左心室重量、左心室重量指数、心率、主动脉收缩压、主动脉脉压、左心室收缩末压(LVESP)、左心室舒张末压(LVEDP)、室间隔厚度、左心室后壁厚度(LVPW)、左心室舒张末径(LVDED)、左心室收缩末径(LVSED)、左心房内径显著升高,左心室缩短率及左心室射血分数显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与心衰组比较,辛伐他汀组的左心室重量、左心室重量指数、心率、主动脉收缩压、主动脉脉压、LVESP、LVEDP、室间隔厚度、LVPW、LVDED、LVSED、左心房内径显著降低,左心室缩短率及左心室射血分数显著升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).心肌蛋白激酶A、磷酸酶1α蛋白半定量分析结果:与假手术组比较,心衰组蛋白激酶A水平显著下降,而磷酸酶1α蛋白水平显著增加,差异均有统计学意义(P均＜0.05).辛伐他汀组较心衰组蛋白激酶A蛋白水平显著增加,磷酸酶1α蛋白水平明显降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论:辛伐他汀干预心衰,能够改善心脏舒缩功能,可能与其上调心肌蛋白激酶A表达,降低磷酸酶1α表达有关.     

心力衰竭家兔心肌细胞钙调控蛋白表达的异常

目的探讨心力衰竭(心衰)心肌细胞钙调控蛋白表达异常的临床意义。方法 16只家兔随机分为两组,假手术组和心衰组各8只。通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,利用心导管术和心脏多普勒观察手术前后家兔血流动力学及心脏结构和功能的变化。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法测定心肌组织 L 型钙通道(LTCC)、肌浆网钙释放通道(RyR2)、肌浆网钙泵(SERCA2a)以及钠钙交换体(NCX)表达水平。结果家兔心衰组与假手术组相比,左室/体重比值、心率、左室舒张末压明显增加(P<0.01);左室短轴缩短率[(21.3±4.00)%与(36.5±1.36)%]和左室射血分数(0.45±0.07与0.70±0.02)降低(P<0.01);心肌组织 LTCC、RyR2表达下降(R_(LTCC/actin):0.287±0.029与0.624±0.009,R_(RyR2/actin):0.106±0.001与0.203±0.011,P<0.01);SERCA2a、NCX 表达增加(R_(NCX/actin:0.497±0.015与0.221±0.014,R_(SERCA2a/actin:0.611±0.036与0.433±0.008,P<0.01)。结论 LTCC 和 RyR2表达下调是心衰心肌收缩力降低的因素之一,而心衰早期 SERCA2a、NCX 表达增加可能有利于心肌舒缩功能的保持。     

氯沙坦对心力衰竭兔肌浆网钙调控蛋白的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦干预慢性心力衰竭对兔心肌肌浆网钙泵（SERCA2）、钙释放通道（RyR2）、受磷蛋白（PLB）基因表达的影响及意义。方法通过结扎兔冠状动脉前降支复制心肌梗死（心梗）模型,以氯沙坦进行干预。于心梗后8周比较观察左室结构、血流动力学的变化及SERCA2、RyR2、PLB基因的表达。结果与对照组相比,心梗组左室舒张末压（LVEDP）显著升高（P〈0．01）,左室压力上升和下降最大速度（＋dr,／dtmax、-dp／dtmax）显著降低（P〈0．01）;氯沙坦组LVEDP显著低于心梗组（P〈0．05）,＋dp／dtmax、-dp／dtmax显著高于心梗组（P〈0．05）。心梗组SERCA2、RyR2、PLBmRNA显著低于对照组（P〈0．01）,而氯沙坦组的上述三项显著高于心梗组（P〈0．05）。结论氯沙坦长期干预心力衰竭,能够改善心脏舒缩功能,可能与其上调肌浆网的钙调控蛋白SERCA2、RyR2、PLB的基因表达有关。     

缬沙坦对心力衰竭家兔肌质网钙ATP酶表达及功能的影响

目的 探讨家兔慢性心力衰竭时心肌肌质网钙ATP酶（SERCA2）表达和功能的改变及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义。方法27只家兔随机分为3组,假手术组、心力衰竭组和缬沙坦组各9只。通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心力衰竭模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及SERCA2的表达和功能的改变。结果与假手术组比较,心力衰竭组左心室质量指数【（1．32±0．06）vS（3．61±0．09）g／kg】、左心室舒张末压【（-0．50±1．05）vs（23．00±2．37）mmHg）】显著升高（P〈0．05）,左心室短轴缩短率【（37．83±3．58）％vs（17．38±3．13）％】及左室射血分数【（72±5）％vS（38±6）％】明显降低（P〈0．05）;与心力衰竭组比较,缬沙坦组左心室质量指数和左心室舒张末压显著降低【（2．07±0．14）g/kg;（2．17±0．72）mmHg;P〈0．05】;左心室短轴缩短率及左室射血分数明显升高【（33．8±2．9）％;（65±4）％;P〈0．05]。心力衰竭组SERCA2的表达【（0．69±0．04）vS（1．02±0．02）】和功能【（54．4±7．9）％w（95．5±2．1）％】显著低于假手术组（P〈0．05）。缬沙坦组SERCA2的表达和功能显著高于心力衰竭组[（0．91±0．02）;（81．7±4．9）％;P〈0．05]。结论缬沙坦长期干预,能够改善心力衰竭心脏舒缩功能,可能与增加SERCA2的表达和提高其功能有关。     

心力衰竭家兔钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ异常的研究

目的探讨家兔慢性心力衰竭（心衰）时心肌钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）蛋白表达及活性改变的意义。方法14只家兔随机分为2组,假手术组和心衰组各7只,通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及CaMKⅡ的表达和活性的改变。结果与假手术组比,心衰组左心室重量指数[（1．3±0．1）g／kg比3．6±0．1）g／kg]、左室舒张末径[（13．3±1．8）him比（21．4±2．5）mm]、左室后壁厚度[（2．0±0．2）mm比（2．9±0．8）min]、左心室舒张末压[（01．5±O．5）mm Hg比（23．0±2．4）mmHg]明显升高（P〈0．05）,左心室缩短率[（37．8±3．6）％比（17．4±3．1）％]及左室射血分数[（71．9±4．6）％比（38．5±6．1）％]明显降低（P〈O．05）;CaMKII蛋白表达（1．45±0．13）及活性[（3．54±0．17）pmol·min-1·μg-1]显著高于假手术组[（O．89±0．05）,（2．18±0．13）pmol·min-1·μg-1]（P〈0．05）。结论心肌CaMKⅡ蛋白表达及活性增加可能是导致心力衰竭的发生因素之一。     

rAAV-asPLB transfer attenuates abnormal sarcoplasmic reticulum Ca2+ -ATPase activity and cardiac dysfunction in rats with myocardial infarction

BACKGROUND: Diminished myocardial sarcoplasmic reticulum Ca(2+)-ATPase (SERCA) activity and upregulated phospholamban (PLB) level during cardiac dysfunction, had been reported in many studies. AIMS: The current study was designed to examine the effects of rAAV-antisense phospholamban (asPLB) gene transfer on cardiac function, SERCA expression and activity, as well as PLB expression and phosphorylation (Pser16-PLB), in a rat myocardial infarction (MI) model. METHODS AND RESULTS: Rat MI model was generated by ligating the left anterior descending coronary artery. Four weeks later, left ventricular ejection fraction (LVEF), left ventricular systolic pressure (LVSP), the maximal rates of increase and decrease in intraventricular pressure (+/-dp/dt(max)) were significantly depressed, and left ventricular end diastolic pressure (LVEDP) was increased. Myocardial PLB was markedly increased while both SERCA activity and Pser16-PLB level were decreased. In rAAV-asPLB transfected rats, rAAV-asPLB, which was injected into the myocardium around the infarction area immediately after the coronary artery ligation, effectively attenuated the depression of cardiac function, significantly inhibited the expression of PLB, restored Pser16-PLB level and enhanced myocardium SERCA activity. CONCLUSION: rAAV-asPLB transfer in rats with MI effectively prevented the progression of heart failure.     

胰岛素与二甲双胍对Ⅱ型糖尿病大鼠心梗后心脏交感神经重构的影响

目的:探讨胰岛素与二甲双胍对Ⅱ型糖尿病(DM)大鼠心梗(MI)后心脏交感神经重构的影响。方法: 将30只实验大鼠随机分为对照组、胰岛素干预组及二甲双胍干预组,每组10只,分别从各组大鼠的左心室梗死周边、室间隔和右心室取材,通过免疫组化染色法并结合计算机图像处理技术,对心肌中交感神经的分布密度进行对比分析。结果: 与对照组比较,胰岛素干预组心脏各部位交感神经的密度均增加(P<005);而二甲双胍干预组则表现为降低(P<005)。结论: 胰岛素可加重Ⅱ型DM大鼠MI后心脏交感神经重构的程度;而二甲双胍正好相反。     

Enhanced phosphorylation of phospholamban and downregulation of sarco/endoplasmic reticulum Ca2+ ATPase type 2 (SERCA 2) in cardiac sarcoplasmic reticulum from rabbits with heart failure.

OBJECTIVES: To assess the phosphorylation of myocardial phospholamban (PLB) and quantify protein levels of PLB and sarco/endoplasmic reticulum Ca2+ ATPase type 2 (SERCA 2) in a rabbit model of heart failure. Furthermore, to correlate these parameters with the rate of Ca2+ uptake into sarcoplasmic reticulum (SR) vesicles. METHODS: Heart failure in the rabbit was indicated by the pronounced ventricular contractile dysfunction accompanied by post-mortem evidence of lung and liver congestion 8 weeks after a coronary artery ligation procedure. Phosphorylation of PLB was measured by reduced mobility of the phosphorylated forms on Tris-glycine gels. Phosphoserine and phosphothreonine-specific antibodies against PLB were used to determine the phosphorylated residues. Immunoblotting combined with densitometry was used to assess PLB and SERCA 2 levels. Finally, oxalate-supported Ca2+ uptake into SR vesicles was studied using the fluorescent indicator Fura-2. RESULTS: The phosphorylation state of PLB was significantly higher in myocardium isolated from left ventricles of heart failure rabbits (8.3 +/- 0.42 P-PLB) when compared with sham-operated animals (4.0 +/- 1.7 P-PLB). The kinase activity associated with SR vesicles isolated from animals with heart failure was a factor of 1.58 +/- 0.21-times higher than sham hearts, as assessed by the initial rate of phosphorylation of PLB. This higher kinase activity observed in heart failure was not completely abolished by inhibitors of either A-kinase, C-kinase or Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase (CaM-kinase). Abundance of SERCA in heart failure myocardial homogenates was significantly less than sham values (0.68 +/- 0.11 vs. 1.74 +/- 0.27) as was PLB (0.41 +/- 0.08 vs. 0.69 +/- 0.13), similar reductions were seen in vesicle preparations. The rate constant of Ca2+ uptake into the isolated SR vesicles was lower in preparations from heart failure myocardium than from sham myocardium (2.50 +/- 0.23 ms vs. 4.43 +/- 0.3 ms). CONCLUSIONS: The higher level of phosphorylation of PLB observed in the left ventricle of rabbits with heart failure is associated with a higher intrinsic kinase activity of the SR. However, the abundance of both of SERCA 2 and PLB proteins are lower in heart failure. The net effect of these changes appears to be a reduced rate of Ca2+ uptake by the SR in heart failure.     

稳心颗粒对心力衰竭兔心肌细胞肌浆网钙泵基因和蛋白表达的影响

目的探讨稳心颗粒对心力衰竭（简称心衰）兔肌浆网钙泵基因和蛋白表达的影响及其意义。方法采用主动脉瓣返流联合腹主动脉缩窄制作家兔慢性心衰模型。36只日本大耳白兔随机分为假手术组（Sham）、假手术稳心颗粒组（Sham—drug）、心衰组（HF）、心衰稳心颗粒组（HF—drug）。仅游离结扎右颈总动脉和分离腹主动脉,并不造成主动脉瓣返流和腹主动脉缩窄为假手术处理,稳心颗粒组于主动脉瓣返流术后第二天开始喂药稳心颗粒。连续给药8周后行心脏超声检查观察兔心脏结构和功能的变化,并检测肌浆网钙泵（SERCA2a）和受磷蛋白（PLB）的mRNA和蛋白的表达水平。结果与Sham组比较,HF组左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）、左室舒张末期容积（LVEDV）和左室收缩末期容积（LVESV）增大（P〈0．05）,而左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）降低（P〈0．05）,HF—drug组的LVEDD、LVESD、LVEDV、LVESV均低于HF组（P〈0．05）,LVEF、LVFS高于HF组（P〈0．05）。与Sham组相比,HF组心肌SERCA2amRNA和蛋白表达明显降低（P〈O．05）;然而,HF-drug组心肌SERCA2amRNA和蛋白表达显著高与HF组（P〈O．05）。而PLB的mRNA表达和蛋白表达水平4组间无差异（P〉0．05）。结论稳心颗粒能一定程度上提高心衰家兔SERCA2amRNA和蛋白的表达,增加SERCA2a的活性,可能是稳心颗粒改善心功能的原因。