新型压电石英晶体免疫传感器抗体固定方法的建立

目的探讨并建立一种高效免疫微阵列传感器抗体固定的方法.方法分别采用普通蛋白A(SPA)法与经巯基取代SPA(自组装SPA)法固定石英晶体微阵列上抗体,并用石英晶体微天平(QCM)分别检测其不同浓度抗体、抗原条件下发生抗原抗体反应,并对其抗体包被量、反应频率漂移、非特异性反应等多项指标进行统计学分析.结果与传统SPA法相比,自组装SPA具有抗体固定量大、反应速度快、频率下降明显、非特异性反应低等优点.结论自组装SPA法具有比普通SPA法包被一致性更高的优点,可以作为新一代免疫传感器的抗体固定方法.     

纳米金型压电石英DNA传感器的电化学阻抗谱研究

目的采用电化学阻抗谱法表征所构建的纳米金型压电石英DNA传感器。方法采用构建的三电极系统,分别于空白石英晶振、探针固定后、6-巯基己醇封闭后、靶序列杂交后交流阻抗谱、纳米金磁微粒信号放大后对石英晶振表面进行交流阻抗谱分析,同时观察传感器的频率响应情况。结果进行纳米金磁微粒信号放大后,频率变化值为(127.5±6.8)Hz,与靶序列杂交、阴性对照和空白对照频率变化值差异有统计学意义(P0.01),构建的三电极系统可成功检测石英晶振表面电化学变化,并且在检测过程中的各步骤,电子转移阻抗Ret均发生了明显增加(P0.01),压电频率变化趋势与电化学阻抗变化趋势一致。结论电化学阻抗谱法可无损性地分析晶振表面膜层变化,验证了建立的压电石英DNA传感器检测方法和纳米金信号放大方法的真实性和有效性。     

多聚T尾型探针在压电石英晶体微天平DNA传感器检测铜绿假单胞菌中的实验研究

目的 构建一种压电石英晶体微天平(QCM)DNA传感器多聚T尾型探针敏感膜制备新方法,同时对其重要影响因素进行优化探讨.方法 设计一种多聚T尾型探针,固定在压电QCM DNA传感器晶振表面,对探针固定浓度.杂交温度和杂交时间等因素进行实验研究,进一步将构建的多聚T尾型探针DNA传感器和普通探针DNA传感器用于铜绿假单胞菌检测,比较两种传感器的频率响应性能,同时对该压电QCM DNA传感器的再生性能进行研究.结果 探针最佳固定浓度为2.0 μmol/L,最适杂交温度为40℃,最适杂交时间为90 min;多聚T尾型探针DNA传感器的响应性能显著大于普通探针DNA传感器(P<0.05),可以重复使用7次.结论 基于多聚T尾型探针的压电QCM DNA传感器,具有杂交效率高、技术难度低、频率响应性能高等优点,在压电QCM DNA传感器基因检测领域有较好的应用前景.     

石英晶体微天平应用于蛋白质吸附检测的研究

石英晶体微天平（Quartz Crystal Microbalance with Dissipation, QCM-D）是一种实时测量质量变化的检测器。其因为可以检测到纳克数量级的质量变化，因此可应用于微量蛋白质吸附的检测。本文主要阐述了石英晶体微天平的检测原理、应用于蛋白质吸附检测的方法及最新研究进展。     

压电传感器及其在生物医学中的应用研究

压电传感器是一种化学传感器,是利用质量变化来测量数据的一类传感器,压电传感器用途范围广,能测量温度、质量变化、力的强度以及加速度等.现在正广泛用于生物医学领域,文章就压电传感器的原理、构造及应用做一个综述.     

新型纳米金界面压电石英晶体DNA传感器的实验研究

目的构建一种新型纳米金界面压电石英晶体DNA传感器,探讨纳米金界面上进行寡核苷酸探针固定的最佳条件。方法构建纳米金颗粒修饰的石英晶振生物反应界面,进行巯基修饰的寡核苷酸探针的固定,对纳米金自组装pH值条件、探针固定浓度等影响因素进行实验研究;将构建的传感器和未经纳米金颗粒修饰的传感器用于铜绿假单胞菌检测,比较两种传感器的响应性能,并进一步对该纳米金界面压电石英晶体DNA传感器的再生进行研究。结果纳米金自组装的最佳pH值为6.0,探针最佳固定浓度为3.0μmol/L。纳米金颗粒修饰的石英晶振的响应性能大于未经修饰的石英晶振,可以重复使用5次。结论纳米金界面压电石英晶体DNA传感器,具有不需标记、操作简单、能实时在线检测、频率响应性能高、无污染和能重复使用等优点,在临床实验诊断方面应用前景广阔。     

尿β2微球蛋白压电传感器阵列的构建与临床应用

目的探讨并建立压电石英晶体免疫传感器检测尿液微量β2微球蛋白的方法。方法采用葡萄球菌A蛋白（SPA）法固定石英晶体微阵列上单克隆抗β2微球蛋白抗体,并用石英晶体微天平（QCM）检测样品反应频率漂移量;优化传感器检测条件并运用回收实验,天内、天间重复试验来验证其准确度与精密度,并将免疫比浊法作为参比方法与建立的传感器方法进行方法学比较。结果该传感器平台的非特异性反应低（FS〈20Hz）,线性范围广（0.01～40.00mg/L）,灵敏度达到3μg/L,准确度高（CV〈10%）,精密度试验总体CV〈10%,并且具有检测时间短（〈10min）等优点,与传统的免疫比浊法具有可比性。结论采用压电石英晶体免疫传感器法检测尿液微量β2微球蛋白是一种可行的检测方法,可应用于临床检测并为诊断早期肾损伤提供帮助。     

适配子型压电石英晶体传感器检测人免疫球蛋白E的实验研究

目的研制适配子型压电子石英晶体传感器阵列与常用的免疫分析方法进行比较,以评价压电石英晶体传感器阵列检测灵敏度、特异性与临床检测的可行性。方法以AT切型、基频10MHz的镀金石英晶体作为换能器,将抗人免疫球蛋白E适配子固定在石英晶体电极表面,用2×5检测池阵列构建新型适配子型压电石英晶体传感器;分别进行标准品及人血清免疫球蛋白E的检测,研究了检测灵敏度、特异性等检测指标。结果该传感器可快速完成检测且无非特异性反应,在检测范围内传感器的响应特性良好,压电晶体频率偏移值与免疫球蛋白浓度呈良好的线性关系;将此免疫传感器用于人血清标本的测定,结果与化学发光法符合(r值=0.9924)。结论研制的传感器阵列具有灵敏度高、特异性好,检测通量高,无需标记,操作简便,能实时在线检测等优点,可用于临床实验诊断,具有较高的临床推广应用价值。     

尿微量白蛋白在糖尿病肾病早期中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白在糖尿病瞥病早期中的临床意义。方法采用透射比浊法对糖尿病组患者和正常对照组进行尿微量白蛋白检测，并与尿蛋白试带条进行对比。结果尿液分析定性试带条无法准确、及时榆测尿微量白蛋白，可采用透射比浊法对糖尿病患者进行尿微量白蛋白检测。结论尿微量自蛋白是糖尿病患者早期肾脏损害和预后观察的重要指标。     

压电石英晶体非酶葡萄糖传感器的研究

本文研究了一种新型非酶葡萄糖传感器及其对尿中葡萄糖的测定应用。方法基于银镜反应产生的单质银沉积在压电石英晶体镇金名触液面上产生质量效应，由此引起晶体频率的变化与葡萄糖浓度（1．0X10－6～1．0X10－2mol／L）间具有良好的线性关系，相对标准偏差为1．7％（n=12）。避免了葡萄糖氧化酶传感器的一些不足。     

适配子型压电传感器的实验研究

目的建立适配子型压电传感器阵列检测人免疫球蛋白E,对适配子型压电石英传感器的各项参数进行初步探索。方法用生物素-亲和素法将针对人IgE的适配子探针固定在压电传感器的金膜表面,通过压电传感器对适配子与IgE的反应进行实时监测,观察不同浓度IgE的反应趋势及所引起的频率变化,获得IgE检测标准曲线;通过检测BSA、IgG、IgE非特异信号,并与特异性信号相比较对适配子检测的特异性进行检验。结果亲和素法固定适配子对IgE进行检测,最低检出限0.055mg/L,线性范围0.1～2.5mg/L,非特异性信号响应小,不超过同浓度特异性信号的5%。结论构建的适配子压电传感器可检测ng级物质且非特异性信号小,显示该平台在临床检测中有较好的应用前景。     

适配子压电石英芯片再生性能研究

目的探索适配子压电石英芯片最佳再生试剂,对固定好的适配子型芯片保存性能进行检测。方法用生物素-亲和素法将针对人IgE的适配子探针固定在压电传感器的金膜表面,分别用HCl、NaOH、EDTA、尿素、甲酰胺5种试剂对适配子芯片进行再生实验,选取较好再生试剂;将固定好的适配子芯片保存在PBS缓冲液（0.1%叠氮钠）中,对芯片的保存时间进行测定。结果用EDTA对适配子芯片进行再生效果最好,重复检测5次后芯片响应信号仍在第1次检测的〉90%,此外HCl也可对适配子芯片重复利用3次;固定好的适配子芯片在加入防腐剂的结合缓冲液中可长期保存,保存21d后信号响应无明显下降。结论与抗体压电传感器相比较,适配子压电传感器有一定优势,适配子芯片成本更低,再生能力强,固定好的芯片保存时间长,体现出适配子检测的优越性。     

糖尿病早期肾病监控指标的探讨

目的探讨非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)早期肾脏损伤的诊断方法。方法采用速率散射比浊法检测尿微量白蛋白(mALB)、全定量酶免疫法测定尿视黄醇结合蛋白(RBP);速率法检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG);Jaffe速率法测定尿肌酐。结果对照组尿mALB/Cr为(1.54±0.76)mg/mmol,RBP/Cr为(27.5±19.1)μg/mmol,NAG/Cr为(1.66±1.05)U/mmol。微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组RBP/Cr、NAG/Cr较对照组及正常白蛋白尿组显著增高(P＜0.01)。单项及二项检测mALB、RBP、NAG这三项指标阳性率较低,联合三项指标检测阳性率可达83.1%。正常白蛋白尿、微量白蛋白尿及大量白蛋白尿患者,mALB、RBP和NAG三项指标间均呈显著正相关。结论联合检测尿mALB、RBP和NAG是诊断NIDDM患者肾脏早期损伤灵敏、可靠的实验室指标。     

压电免疫传感器微阵列检测铜绿假单胞菌的实验研究

目的构建一种新型压电铜绿假单胞菌免疫传感器,并对铜绿假单胞菌进行检测,以探索临床应用的可行性.方法在免疫传感器微阵列表面固定铜绿假单胞菌单克隆抗体,对铜绿假单胞菌菌液进行检测,绘制用于检测的标准曲线并进行曲线拟合,并对50例临床标本进行检测,结果与传统分析方法进行对比.结果铜绿假单胞菌菌液的浓度在103～109细胞/ml范围内,菌量与传感器频率的变化之间呈良好的指数线性关系,指数式回归方程为△F=12.6625×C01757,r=0.9949;通过对未知浓度的铜绿假单胞菌菌液进行检测,定量结果与吖啶橙荧光显微镜直接计数法(AODC)的相关系数r为0.973;50例临床标本检测结果与常规培养检测法高度符合(P＞0.05).结论应用压电石英晶体铜绿假单胞菌微阵列免疫传感器能够对铜绿假单胞菌进行的定量和定性分析,该技术应用于检测铜绿假单胞菌具有时间短、结果准确、无需长时间培养等特点,有较高的推广应用价值.     

应用尿微量白蛋白监测乙二醇作业工人肾损伤

对133例生产过程中接触乙二醇的工人和134例对照人群进行常规尿蛋白定性检查和尿中微量白蛋白（MA）的测定。发现接触乙二醇组两种方法对尿中蛋白质的检出率均高于对照组,MA的测定比常规尿蛋白定性检查更敏感。长期低剂量接触乙二醇对肾的损害可能有累积作用。且乙二醇以肾的损害也可能累及肾小球。MA测定可作为接触肾毒性物质人群的健康监护的指标。     

人体入紫菜后尿中砷化物的排泄规律研究

目的 观察正常人摄人紫菜后,尿中不同形态砷化物随时间的排泄规律.方法 收集24名受试者(14名男性,10名女性)食人紫菜后72 h内不同时点的尿液,采用高效液相色谱.氢化物发生.原子荧光分光光度法(HPLC-HG-APS)检测尿中砷代谢产物的形态与浓度.结果 在食用紫菜后72 h内,与食用紫菜前比较,男性除第1和48 h外,尿中iAs浓度均显著增高(P<0.05);除第1和12 h外,尿中一甲基胂酸(MMA)浓度显著增高(P<0.05);第1～72 h尿中二甲基胂酸(DMA)浓度显著增高(P<0.05);女性受试者食用紫菜后,除第3、5和48 h外,尿中iAs浓度明显增高(P<0.05);除第5和12 h,尿中MMA浓度均显著增高(P<0.05);第1～72 h尿中DMA浓度均有显著增高(P<0.05).食用紫菜后,女性尿中DMA浓度显著高于男性.结论 摄入相同剂量紫菜后女性尿中DMA浓度显著高于男性,并且DMA浓度随时问先升高后降低.

Abstract：

Objective To know the effects of laver intake on arsenic species in urine of people, and investigate the characteristics of arsenic metabolism. Methods The urine samples were collected from 24 subjects who had laver available on markets, arsenic species in urine samples were detected with hydride generation atomic fluorescence spectroscopy. Results There was a significant increase of urinary iAs seventy-two hours after laver intake except one and forty-eight hours, increase of MMA seventy-two hours after laver intake except one and twelve hours, and increase of DMA from the first hour to the 72nd hour in male group. There was a significant increase in the urinary iAs seventy-two hours after laver intake except three, five and forty-eight hours, increase of MMA seventy-two hours after laver intake except five and twelve hours, increase of DMA from one to seventy-two hours after laver intake in female group. Conclusion The urinary concentration of DMA is significantly higher in female group compared with male group after laver intake in the same weight and urinary DMA increases in the beginning, after that decreases gradually.     

Urinary concentrations of bisphenol A and triclosan and associations with demographic factors in the Korean population

Bisphenol A (BPA) and triclosan are synthetic phenolic compounds to which the general public can be extensively exposed via consumer products and environmental contamination.In this study, we assessed exposure to BPA and triclosan in the Korean adult population aged 18–69 based on the Korean National Human Biomonitoring Survey conducted in 2009. Relying on data from 1870 representative Koreans, we found that the geometric mean urinary concentrations of BPA and triclosan were 1.90 ng/ml [95% confidence interval (CI): 1.81–1.99] and 1.68 ng/ml (95% CI: 1.48–1.90), respectively. The creatinine-adjusted geometric means of BPA and triclosan were 1.79 μg/g creatinine (95% CI: 1.70–1.90) and 1.58 μg/g creatinine (95% CI: 1.39–1.81), respectively. About 99.8% of the Korean adult population had urinary concentrations of BPA and about 92.6% of the Korean adult population had urinary concentrations of triclosan above the level of 0.05 ng/ml (limit of detection, LOD). Urinary BPA concentrations were higher in residents of rural areas, whereas urinary triclosan concentrations were significantly associated with cigarette smoking. These findings suggested that most Koreans had detectable levels of BPA and triclosan in their urine and that the body burden of BPA and triclosan varied according to demographic and geographic factors.