肾穿刺组织冷冻切片常见问题及对策

正肾穿刺组织冷冻切片是进行免疫荧光检查的重要环节。切片质量的优劣直接关系免疫荧光染色技术成功与否,其对肾脏疾病的诊断及分类具有重要的作用。切片内见足量的肾小球是成功的保障~[1-2]。免疫荧光检查所用的肾穿刺组织极小,制作冷冻切片具有较大的挑战性。病理技术人员只有熟练运用冷冻切片技术,掌握制片技巧,才能制作出合格的冷冻切片。肾穿刺组织冷冻切片过程中,常见下列问题:切片内无肾小球;切片不完整;切片出现冰晶空洞;切片卷曲、折叠;切     

石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用

在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。     

肾活检冷冻组织石蜡制片的方法

肾空刺取出肾组织后,一般分为3部分,一部分制作成石蜡切片,一部分制作成冷冻组织切片,另一部分进行电镜检查。石蜡切片是肾活检病理诊断的最重要部分,若因切片未见肾小球或因其他原因导致制片失败,则不能进行肾活检病理诊断。而冷东肾组织经冻融后一般不能制备出满意的石蜡切片。     

改良PAS染色法在冷冻切片中的应用

正在日常病理诊断和技术工作中,我们经常会遇到临床怀疑为肺部真菌感染的病例。如果等常规石蜡组织切片来进行诊断,因组织处理时间长,临床等候结果需要花费很多时间。为缩短临床等候病理诊断的时间,本科室在组织冷冻切片上行改良PAS染色,并与石蜡切片PAS染色对比,提高了对真菌的快速检出率,现介绍如下。1材料与方法1.1材料收集福建医科大学附属漳州市医院2016年度接收的术中怀疑真菌感染病例41例,术后常规石蜡病理明     

显示DNA含量的快速Feulgen染色技术及应用

细胞的DNA含量分析对判断肿瘤的良恶性及预后有重要参考价值[1 3 ] ,然而传统的Feulgen染色操作时间较长 ,无法应用于冷冻切片、快速石蜡切片或组织印片等快速病理制片过程。我们尝试了应用微波处理的快速Feulgen染色 ,大大缩短了染色时间 ,并取得了良好效果 ,满足了快速病理诊断的要求。一、材料和方法1.材料 :复旦大学华山医院近期外科手术切除的各 5例乳腺纤维腺瘤及乳腺癌标本 ,例 1～ 5为纤维腺瘤 ,例 6～ 10为腺癌 ,均分别制成印片、冷冻切片、快速石蜡切片各 2份。2 .试剂及仪器设备 :常规配制的Schiff试剂、0 .5 %偏重亚硫酸钠溶…     

大鼠脑组织厚冷冻切片的经验探讨

正现阶段利用动物模型可以帮助我们发现引起精神疾病临床症状的脑部异常变化,进而为治疗提供重要的理念与依据。动物模型的脑组织切片的特殊染色、免疫组化染色、免疫荧光染色等病理学技术是观察脑部组织异常改变非常重要的方法。如对大鼠脑组织行振动切片高尔基染色,以对神经元的形态进行定性或定量的观察[1]。相关文献中也经常会进行冷冻厚切片(25～50 μm)的制作[2-3]。与临床病理相比,动物实验性研究的冷冻切片病理技术操作及结果展示上会有所不同[4]     

如何减少冷冻切片中的类冰晶现象

正术中冷冻切片快速病理诊断是协助临床医师明确病变性质、指导手术方式和范围的重要依据。由于冷冻切片技术、取材范围有限和报告时间短等问题,易导致病理医师延迟诊断,甚至是误诊。高质量的冷冻切片是病理医师准确发出术中快速病理诊断的基础。笔者在临床实践操作中观察到部分冷冻切片组织结构扭曲、细胞挤压变形,存在类冰晶现象,而冰对组织石蜡切片中未见此类现象。     

新鲜组织短时固定对冷冻切片质量的影响

<正>冷冻切片是在低温环境下将术中取下的新鲜组织快速冷冻至一定硬度再制作切片,常用于临床病理快速诊断和部分形态学研究工作。用于临床的冷冻切片能够让外科医师在手术过程中尽快了解病变性质并及时决定手术方式[1-2]。精准的术中快速病理诊断结果,需高品质的冷冻切片作为保障。多种因素影响冷冻切片的效果,如冷冻时间与温度、取材、切片技术和染色等[3-4],而冰晶的形成是影响病理诊断的重要因素之一。因此在冷冻切片中防水是必须注意事项:     

油红O染色在甲醛固定的乳腺富于脂质癌中的实践应用

在临床病理诊断中,常规HE切片中常可见到胞质透亮或胞质内有许多大小不等的圆形空泡,此现象是水泡样变、黏液样物质、脂肪或脂质组织,还是溶解了的糖原,往往不易区分,这就要依赖于脂肪染色、黏液染色、糖原染色等来鉴别.黏液染色和糖原染色可用石蜡包埋后切片染色即可,而脂肪染色不能用常规石蜡包埋组织切片.日常病理诊断工作中,很多标...     

肺隐球菌病漏诊原因分析

目的 探讨病理(含术中冷冻切片)漏诊肺隐球菌病(pulmonary cryptococcosis,PC)的原因,以提高病理诊断水平.方法 回顾7例PC的临床、病理资料及其病理诊断过程.结果 7例PC中有5例病理漏诊:(1)3例活检常规石蜡切片分别初诊为"脂质肉芽肿"、"纤维肉芽组织"和"慢性炎症";1例术中冷冻切片"考虑为结核病",冷冻切片检查后相应石蜡切片改诊为"肺隐球菌病";另1例术中冷冻切片诊为"结节病",相应石蜡切片仍误诊为"结节病".(2)病理漏诊的5例PC中,4例皆被及时纠正,得以正确治疗;1例术中冷冻切片及其常规石蜡切片皆被诊为"结节病"并于2个月后继发隐球菌性脑膜炎.结论 病理漏诊PC的原因:①未虑及肉芽肿形态的多样性及其可能的病因相关性;②未将PC列入病理鉴别诊断思路;③观察镜下病变不仔细、忽视微细病变的诊断提示意义.术中冷冻切片可及时诊断PC,有助于避免过度治疗.需重视结节病与结核病、隐球菌病等感染性肉芽肿的病理鉴别诊断,应慎诊结节病.     

冷冻切片中几种不同引导切片法的比较

<正>冷冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定的硬度,然后进行切片的方法。因其操作过程较石蜡切片快速,简便,易于操作,在组织学技术中的应用十分广泛,尤其对临床手术患者的术中快速病理诊断具有重要意义,而高质量的冷冻切片对于确保术中病理诊断的科学性和可靠性,具有至关重要的作用[1]。因此,在冷冻切片过程中,高效的切片技术     

一种显示肾组织结构的新染色法——酸性复红银染法

对肾小球和其他肾脏疾病的诊断,主要依赖于对活检标本的光镜、电镜观察,或利用免疫细胞化学技术进行诊断,但电镜及免疫组化方法并非在所有病理实验室都可施行,大部分诊断仍需依赖常规福尔马林固定、石蜡包埋组织进行普通染色和一系列特殊染色.如过碘酸雪夫氏反应,Masson染色法、地衣红弹性蛋白染色和银染法等.许多肾小球的异常取决于光镜的鉴别,因此,肾组织各种结构的清晰显示与分辨至关重要,我们将常规染色与一些特殊染色相结合,建立一种显示肾组织各种结构的染色方法.     

石蜡切片的保存条件对免疫组化反应活性的影响

<正>免疫组化染色技术是一种多步骤、多因素决定的实验方法,染色过程中存在很多干扰因素[1]。组织如何保存是形态学研究的主要问题。生物样本若冷冻或低温储存,可保存多年。用固定液浸泡标本是病理实验室最常用的组织保存方法,组织固定后,石蜡包埋也可保存多年。包埋后的石蜡组织通常在行免疫组化染色前1～2天切片。实际工作中有时因组织太小不易再次切片;或者病理、科研工作中用的组织对照片会提前切片,存放太久的切片对组织抗原的影响尚未可知。     

影响淋巴结HE制片因素的探讨

淋巴瘤因其组织结构致密、细胞丰富等特点,使组织在脱水、透明、浸蜡、切片、染色等方面都受到一定的影响,导致病理诊断困难。作为一名合格的病理医师,要求懂得组织的石蜡包埋和HE染色的机制,熟练掌握石蜡切片和HE染色技术的操作并能够制出一张优质的病理玻片标本。本实验从石蜡切片和HE染色的机制出发,重点探讨淋巴结HE制片的注意事项。     

PASM-Masson套染在肾穿刺活检中的应用

肾穿刺活检组织病理诊断是肾脏疾病诊断以及鉴别的重要方法,包括常规HE染色、特殊染色、免疫荧光染色及电镜检查等。其中,特殊染色是肾穿刺活检组织的重要辅助检查方法,主要包括PAS染色、PASM染色、Masson染色以及刚果红染色等。在日常工作中,如果对穿刺肾组织分别进行染色,所需时间长,工作量大,不利于病理医师镜下观察免疫复合物沉积及其位置[1]。     

使用超声处理仪制备快速石蜡切片的体会

目前国内手术中快速病理诊断多用冷冻切片葺传统加温快速石蜡切片技术，但冷冻切片中易出现细胞肿胀等人为假象，传统加温快速石蜡切片制备过程复杂，安全性差，且易造成组织收缩和硬变。为克服上述不足，我们应用超声处理仪制备快速石蜡切片，方便快捷，效果良好。     

酵素水溶液在冷冻切片染色分化中的应用

冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要手段,切片质量的好坏直接影响快速诊断的结果及科研的可靠性。影响冷冻切片质量的因素很多,分化液是其中之一。酵素又称为酶,具有催化、净化等作用,现今在生产、生活中广泛应用,如清洗、灭菌、净化、美容、减肥等。有关其在病理切片制作中的应用尚未尝试。作者在不同组织冷冻切片染色中利用酵素水溶液分化,以期探索出提高切片染色清晰度、对比度,优化冷冻切片质量的方法。     

一种改良包埋模具和改良载玻片的设计与应用

在常规病理技术中[1,2],石蜡切片是诸多操作环节中非常重要的关键技术,能够为常规HE染色、特殊染色、免疫组化染色[3]及分子筛查等检测技术提供不同规格要求的组织切片。若宫腔刮出物、小脑占位组织、椎管内取出物等组织中的小灶组织疑有恶变或性质不能确定,可通过对原组织蜡块深切、连切、薄切等方式再进行常规HE染色,也可对重新切片的组织进行特殊染色、免疫组化染色等检测方法,以明确小灶组织的性质。     

全自动冷冻切片机的应用体会

冷冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度,然后进行切片的一种技术.随着临床的发展,手术中需要快速病理诊断的病例越来越多,冷冻切片技术对确定手术方案具有积极的临床意义[1].冷冻切片质量的优劣直接关系到病理诊断的准确率,做1张好的切片,除了技术过硬的技术员外,冷冻切片机也起着重要的作用[2,3].本文通过摸索实践,能够使各类组织的快速制片质量达到常规.现将南通市肿瘤医院病理科使用的德国Leica CM1950冷冻切片机应用体会介绍如下.     

乳腺与子宫组织的恒低温冷冻切片方法探讨

冷冻切片在组织学技术中被广泛应用,特别对临床手术患者术中快速病理诊断意义尤其重要,制作一张优良的冷冻切片是术中快速病理诊断的根本保证.但对一些特殊组织如乳腺、子宫颈等组织,要制作出优良的冷冻切片比较困难.