高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义

目的 研究高迁移率族蛋白1( high mobility group box-1,HMGB1) mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织及患者血清中的表达及其临床意义.方法 反转录聚合酶链反应( RTPCR)及Western blot分别检测HMGB1 mRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测HMGB1蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达.结果RT-PCR结果示HMGB1 mRNA(HMGB1/GAPDH)在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量((x)±s)分别为1.25±0.12、0.32±0.04,差异有统计学意义(t=40.27,P＜0.05);Western blot结果示HMGB1蛋白(HMGB1/β-actin)在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1.29 ±0.10、0.34±0.03,两组间差异有统计学意义(t=49.84,P＜0.05).结果显示HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关(P值均＜0.05);而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关(P＞0.05).ELISA结果显示,喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGB1质量浓度分别为(24.80±14.08) ng/ml、(23.58±14.69)ng/ml,差异无统计学意义(t=0.37,P＞0.05).结论 HMGB1 mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织,且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关.     

喉癌组织中抑癌基因PTEN的表达及意义

目的检测抑癌基因PTEN在喉癌组织的表达情况,探讨PTEN与喉癌发生发展之间的关系. 方法采用免疫组织化学SABC染色法观察正常喉黏膜和喉癌组织中PTNE蛋白的表达,并比较分析其与肿瘤生长部位、病理分级、临床分期和淋巴转移的关系. 结果 PTNE在喉癌组织的表达阳性率(52.3%)明显低于正常喉黏膜组织的表达阳性率96.7%,(P＜0.05);Ⅰ、Ⅱ期喉癌(71.4%、63.3%)PTEN蛋白表达阳性率又明显高于Ⅲ、Ⅳ期喉癌(25.0%、22.2%),(P＜0.05);声门型喉癌(65.8%)明显高于声门上型和声门下型喉癌(34.8%、25.0%),(P＜0.05);高分化喉鳞癌(88.0%)明显高于低分化喉鳞癌(37.5%、18.8%),(P＜0.05);N0喉癌(78.4%)明显高于N1、2喉癌(17.9%),(P＜0.05). 结论 PTNE在喉癌的发生及发展过程中有表达缺失,缺失程度与临床分期、生长部位、病理分级和淋巴转移有相关性.     

凋亡抑制蛋白Livin在喉癌中的表达和意义

目的研究凋亡抑制蛋白Livin在喉癌周黏膜、喉不典型增生和喉鳞状细胞癌(简称喉癌)组织中的表达以及与喉癌各临床因素的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测10例喉癌周黏膜,12例喉不典型增生和61例喉癌中Livin蛋白的表达,分析其与喉癌发生、发展及预后的关系。结果Livin在喉癌中阳性表达率为67.21%(41/61);在喉不典型增生中为25% (3/12);在喉癌周黏膜中表达阴性。在喉癌组中Livin高表达与临床分期、T分期、病理分化程度呈显著相关(P<0.05);与年龄、部位、淋巴转移无显著相关(P>0.05),随访发现该蛋白的表达与患者5年生存率无显著相关(P>0.05)。结论凋亡抑制蛋白Livin在喉癌的发生、发展中起着重要作用,尚不能作为判断患者预后的一项指标,该基因有望成为喉癌基因治疗的一个新的有效的靶点。     

p16、COX-2在喉癌组织中的表达及相关性研究

目的 研究喉癌组织中抑癌基因p16及环氧化酶-2(COX-2)的表达,探讨p16、COX-2在喉癌发生发展中的作用及两者之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测50例喉癌组织中p16、Cox-2的表达情况.结果 50例喉癌标本中喉癌中p16蛋白表达的阳性率为56.0%,正常喉黏膜中阳性表达率为80.0%,p16蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率明显低于正常喉黏膜组织(P<0.05),有统计学意义.随着临床分期的进展及组织学分化程度的降低,p16蛋白表达进一步降低.COX-2在喉癌组织中高表达,阳性表达率为62.0%,正常组织阳性率为24%,患者的不同临床分期的表达差异有统计学意义(P<0.05).p16与COX-2之间存在负相关性.结论 两者的联合检测对估计喉癌的恶性度,判断预后有FINDINGS REPORT定意义.     

缺氧诱导因子1α和环氧化酶2在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨喉鳞癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)和环氧化酶2(cyclooxygenage-2,COX-2)的表达情况及其与患者临床病理资料的关系和对预后的影响.方法 免疫组化Envision二步法检测60例喉鳞癌标本中HIF-1α和COX-2蛋白的表达,15例不典型增生、10例声带白斑、10例声带息肉标本作对照.结合喉鳞癌患者临床和病理资料进行分析.结果 60例喉鳞癌组织中HIF-1α呈高表达为35.0%(21/60),COX-2高表达为38.3%(23/60).两者阳性表达率与不典型增生、声带白斑及声带息肉组相比差异均具有统计学意义(Fisher确切概率法,P值均<0.01).喉鳞癌组织中HIF-1α和COX-2的表达结果 呈正相关(r=0.526,P<0.01).喉癌HIF-1α高、低表达组在临床分期(X2=4.331,P<0.05)及淋巴转移方面(Fisher确切概率法,P<0.05)组间差异具统计学意义;COX-2高、低表达组在T分期及临床分期方面组间差异具统计学意义(X2值分别为6.792和8.539,P值均<0.01).单因素分析HIF-1α高、低表达组间生存率及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为6.003和5.010,P值均<0.05),COX-2高、低表达组生存率差异及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为9.489和6.102,P值均<0.05).多因素分析提示复发及COX-2表达是影响喉癌患者预后的重要危险因素(相对危险度分别为7.104和5.714,P值均<0.01).结论 HIF-1α和COX-2在喉鳞癌发生、发展中起重要作用,两者可能有协同关系.COX-2表达及肿瘤复发情况可能作为评估喉鳞癌预后的重要危险因素.     

SHIP2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2（SH2 domain containing 5’-inosi-tol phosphatase-2,SHIP 2）蛋白在喉鳞状细胞癌（喉鳞癌）组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组织化学技术检测SHIP2蛋白在54例喉鳞癌组织及16例喉癌旁黏膜组织中的表达。结果 SHIP2蛋白在喉鳞癌组织中表达显著升高,其表达与喉鳞癌T分期、临床分期、转移及复发密切相关（P〈0.05）;生存分析表明SHIP2高表达组与低表达组患者5年无瘤生存率分别为19.2%和64.3%,5年总生存率分别为26.9%和85.7%,两组差异均有统计学意义（P〈0.05）。多因素分析示SHIP2表达水平为喉鳞癌预后的独立影响因素。结论 SHIP 2蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中发挥了重要作用,且具有预后评估价值。     

IDO和BIN1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

摘要：目的通过检测喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma)患者肿瘤组织中吲哚胺2,3 双加氧酶(indoleamine 2,3 dioxygenase,IDO)和桥接整合因子1(bridging integrator 1,BIN1)的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学染色法检测50例喉鳞状细胞癌肿瘤组织和23例正常喉黏膜组织中IDO和BIN1的表达,并分析两者表达的相关性及其与患者临床特征的关系。结果IDO在50例喉癌中阳性表达率为60%,而在癌旁正常喉黏膜组织中IDO表达为17.39%,与癌旁正常喉黏膜组织比较,喉癌IDO阳性表达率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);BIN1在50例喉癌中阳性表达率为50%,而在癌旁正常喉黏膜组织中BIN1蛋白阳性表达率为95.65%,与癌旁正常喉黏膜组织比较,BIN1阳性表达率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);而且IDO在原发灶和转移灶中的表达显著增高,BIN1在原发灶和转移灶中的表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在喉癌肿瘤组织中,IDO表达与有无淋巴结转移、临床分期相关;BIN1表达与肿瘤分化程度、有无淋巴结转移、临床分期相关。结论喉癌患者肿瘤组织和颈部转移淋巴结中IDO表达水平明显提高,而BIN1表达水平显著降低,并且与患者临床特征紧密相关,这两者可能是影响喉癌发生发展的重要因素。     

Tiam1和MTA1在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨Tiam1和MTA1在喉鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化方法检测46例喉鳞癌组织及10例癌旁正常组织中Tiam1和MTA1的表达.结果 Tiam1和MTA1在喉鳞癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.01).在喉癌组织中Tiam1的表达与肿瘤的临床分期及有无淋巴结转移有关,而与患者的年龄、性别及肿瘤的病理分级无关.MTA1的表达与肿瘤的临床分期、病理分级及有无淋巴结转移有关,而与患者的年龄、性别无关.喉癌组织中Tiam1蛋白与MTA1蛋白的表达呈正相关.结论 Tiam1和MTA1可能与喉鳞癌的侵袭、转移相关,对喉癌的诊断、治疗和预后具有重要参考意义.     

喉癌组织中EMS1和DcR3蛋白的表达及其相关性研究

目的:探讨EMS1和DcR3在喉癌组织中的表达及其相关性.方法:采用流式细胞术检测41例喉癌组织和41例相应癌旁组织中EMS1和DcR3的表达,并以15例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照.结果:①喉癌组织中EMS1和DcR3蛋白的表达量及阳性表达率均明显高于癌旁组织及正常喉黏膜组织(P＜0.05),癌旁组织及正常喉黏膜组织的表达差异无统计学意义(P＞0.05).②EMS1和DcR3蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期和病理分级有相关性(P＜0.05);与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性(P＞0.05).③喉癌组织中EMS1蛋白表达水平与DcR3蛋白表达水平呈正相关(P＜0.05).结论:EMS1和DcR3关系密切,二者在喉癌发生、发展过程中发挥重要作用.     

喉癌中PTTG的表达及其与bFGF和微血管密度的关系

目的探讨喉癌中PTTG、bFGF的表达以及在新生血管生成过程中的作用。方法应用免疫组化SP法分别检测57例喉癌、26例癌旁和9例正常喉黏膜中PTTG、bFGF蛋白的表达,用CD34标记并计数肿瘤内微血管密度。结果喉癌中PTTG蛋白和bFGF蛋白表达率分别为84.2%和78.9%,明显高于癌旁及正常喉黏膜的表达率（P＜0.05）。PTTG的表达与肿瘤分化程度、临床分期相关和淋巴结转移差异有统计学意义（P＜0.05）,bFGF的表达与肿瘤分化程度和淋巴结转移差异有统计学意义（P＜0.05）,与临床分期差异无统计学意义(P＞0.05)。两者的表达均与患者年龄、性别和肿瘤原发部位差异无统计学意义(P＞0.05),且两者之间呈显著正相关（P＜0.05）。喉癌中MVD值明显大于癌旁和正常喉黏膜（P＜0.05）,并与淋巴结转移显著相关（P＜0.05）,MVD分别与PTTG和bFGF的表达相关（P＜0.05）。结论PTTG和bFGF的表达与喉癌的临床病理学特征密切相关,二者的检测将有助于喉癌的诊断、评估喉癌患者的恶性程度。     

BUB1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中BUB1蛋白的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学EliVision二步法检测55例LSCC组织和30例癌旁正常黏膜组织中BUB1蛋白的表达,并分析其与LSCC临床病理特征的关系。结果：BUB1蛋白在LSCC组织中的阳性表达率为50．9％（28／55）,低于癌旁正常黏膜组织83．3%（25／30）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;BUBl蛋白的表达与LSCC分化程度及淋巴结转移有相关性（均P〈0．05）,而与患者性别、年龄、吸烟、肿瘤原发部位、T分期及临床分期无相关性（均P〉0．05）。结论：BUBl蛋白的低表达与LSCC的发生、发展有关,BUB1可能作为预测LSCC转移及预后的生物学指标之一。     

EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨沉默促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular re-ceptor,EphA2)与促血管生成因子(VEGF)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学技术检测EphA2、VEGF蛋白在69例喉鳞癌组织及15例癌旁黏膜组织中的表达,分析二者表达水平与临床病理特征的关系。结果 EphA2和VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率均高于癌旁黏膜组织(P均<0.05),EphA2蛋白表达尚与肿瘤原发部位相关(P<0.05),且EphA2和VEGF蛋白表达均与喉鳞癌患者的临床分期(P均<0.05)及转移(P均<0.05)密切相关,而二者表达与患者年龄、性别、组织学分级均无明显相关(P均>0.05)。喉鳞癌组织中EphA2及VEGF蛋白表达存在正相关性(P<0.05)。生存分析结果显示EphA2及VEGF蛋白表达水平与患者5年总生存率密切相关(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,淋巴结有无转移及EphA2蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素。结论 EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中表达均上调,提示二者可能存在相互作用,共同在喉鳞癌的发生、发展中起作用。     

喉鳞状细胞癌组织FLIP和PTEN蛋白的表达及其临床意义

目的：研究FLIP和PTEN在喉鳞状细胞癌组织中的表达,探讨FLIP在喉鳞状细胞癌发生发展中的作用及与PTEN的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测45例喉癌组织以及15例癌旁组织中的FLIP和PTEN的表达。结果：FLIP在喉癌中的表达阳性率（77．8％）高于癌旁组织（33．3％）（P〈0．05）,FLIP的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期及颈淋巴结转移和预后均有关。PTEN在喉癌中的表达阳性率（65．0％）高于癌旁组织（0）,（P〈0．01）,PTEN的表达与喉鳞状细胞癌的肿瘤临床分期及分化程度、颈淋巴结转移和预后有关。FLIP与PTEN在喉鳞状细胞癌中的表达呈负相关。结论：FLIP可能是喉鳞状细胞癌的一个重要的预后标记物。PTEN的表达与肿瘤临床分期、肿瘤分化和淋巴结转移有关,也可能是判断预后的一个有意义的指标。     

喉鳞状细胞癌患者预后的多因素分析

目的：探讨影响喉鳞状细胞癌患者预后的主要因素。方法：采用免疫组织化学SP法检测79例喉鳞状细胞癌患者肿瘤组织和10例癌旁正常组织中细胞s期激酶相关蛋白（Skp2）、p27、上皮细胞钙黏素（E-cad）、r连环素（α-cat）的表达,并对可能影响喉鳞状细胞癌患者预后的12项临床病理因素进行单因素和多因素分析。结果：①Skp2在喉鳞状细胞癌和癌旁正常组织中的表达率分别为53,16％和0,p27分别为30．38％和90．00％,E-cad分别为34．18％和100,00％,α-cat分别为40．51％和100,00％,其差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。②本组患者总的5年生存率为58．75％,Skp2蛋白低表达组的5年生存率（72．18％）显著高于高表达组（44．17％）（P〈0.01）;p27蛋白高表达组的5年生存率（72．98％）显著高于低表达组（51．13％）（P〈O．01）;E-cad及α-cat阳性表达组的5年生存率（分别为63．80％和81．74％）显著高于阴性表达组（分别为50.68％和41．09％）（P〈0．05和P〈0．01）。③单因素分析显示：病理分级,颈淋巴结转移,临床分期,T分期,复发,Skp2、p27、E-cad及α-cat表达对患者预后的影响均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;多因素分析显示：复发、Skp2及α-cat表达为影响患者预后的独立因素（P〈0．05或P〈O．01）。④Skp2和p27蛋白表达之间存在着负相关关系（P〈0.01）;p27和α-cat蛋白表达之间、E-cad和α-cat蛋白表达之间存在正相关关系（均P〈0．01）。结论：复发、Skp2及α-cat表达为影响喉鳞状细胞癌患者预后的重要因素。     

c-myc癌基因蛋白在喉癌及癌旁不同距离组织中的表达研究

应用枸橼酸－ＬＳＡＢ－微波免疫组化法，检测ｃ－ｍｙｃ癌基因蛋白在喉癌、边缘区及癌旁０．５、１．０、１．５、２．０ｃｍ处粘膜和４例正常喉粘膜中的表达。结果：ｃ－ｍｙｃ蛋白在喉癌组织中的阳性表达率为９６．７％（２９／３０），与正常组织相比有极显著性差异（Ｐ〈０．０１）；在癌旁２．０ｃｍ处与１．５ｃｍ以内组织的表达存在着显著性差异（Ｐ〈０．０５）。ｃ－ｍｙｃ表达依正常粘膜→癌旁组织→癌呈逐步递增趋势。ｃ     

喉鳞状细胞癌中Skp2和p27蛋白的表达

目的 探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性.方法 采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达.结果 喉癌中Skp2高表达率(53.16%)显著高于正常喉组织(0%,P＜0.05);喉癌Skp2蛋白低表达组的5年生存率(72.18%)显著高于高表达组(44.17%,P＜0.01).p27蛋白在喉癌和癌旁喉组织中的高表达率分别为30.38%和90%,差异具有显著性(P＜0.05);喉癌p27蛋白高表达组的5年生存率(72.98%)显著高于低表达组(51.13%,P＜0.01).将Skp2和p27结合分析,Skp2高表达并p27低表达组的5年生存率最低,与另一组相比具有显著性差异(P=0.001).结论 Skp2蛋白通过降解靶蛋白p27可能在喉癌发生、发展中发挥重要作用.     

基质金属蛋白酶14基因在人喉鳞状细胞癌中表达差异的分析

目的 探讨基质金属蛋白酶14(matrix mettallo-proteinase 14,MMP14)即膜性基质金属蛋白酶(membrane type-1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)基因在喉癌中表达与喉癌临床病理生物学行为的关系。方法 从分子和蛋白质水平,研究MMP14在喉癌组织和其相邻的正常黏膜组织的表达差异,分析MMP14基因及其蛋白表达与喉癌临床病理生物学行为的关系。结果 33例配对喉癌标本中MMP14基因在26例喉癌组织中的表达明显高于其相应的正常黏膜组织,2例喉癌低表达,5例表达差异不明显。MMP14基因在不同分期的声门型喉癌中的表达差异无显著性(P>0.05),但在不同分化程度、有无淋巴结转移的声门型喉癌中,表达差异有显著性(P<0.05);在不同分期、不同分化程度及有无淋巴结转移的声门上型喉癌中,表达差异有显著性(P<0.05)。MMP14蛋白绝大多数位于癌巢细胞质内及癌巢间质内的成纤维细胞质内,在部分病例中有的正常黏膜细胞内不表达,有的表达;MMP14蛋白在绝大多数喉癌组织中的表达明显高于其相邻的正常黏膜组织。MMP14蛋白表达与MMP14基因表达基本是一致的。MMP14蛋白表达差异有显著性组患者的术后生存率与表达差异无显著性组的术后生存率无统计学差异(P>0.05)。结论 MMP14蛋白在喉癌的侵袭中可能只起一定的作用,但在喉癌的淋巴结转移     

细胞周期蛋白G2在喉癌中的表达

目的探讨细胞周期蛋白G2(Cyclin G2)的表达与喉鳞状细胞癌的关系。方法收集2000年1月～2000年12月共81例喉鳞状细胞癌患者的临床资料和石蜡块,用免疫组化方法检测肿瘤组织、喉癌旁黏膜Cyclin G2表达:并分析Cyclin G2的表达与喉癌患者年龄、性别、临床分期、肿瘤分化程度以及预后等的关系。统计学分析采用SPSS12.0软件。结果Cyclin G2在喉癌中阳性表达率为67.9%,并随分化程度的降低而降低,有、无淋巴结转移者阳性率分别为38.4%和73.5%,差异均具有显著性(P>0.05)。结论Cyclin G2表达强度与喉癌的恶性程度及发展趋势明显负相关,可作为预测喉癌预后的生物学指标之一。     

晚期糖基化终产物受体在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨晚期糖基化终产物受体（RAGE）在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达与临床意义。方法：采用免疫组织化学SP法和RT—PCR法测定RAGE在37例LSCC中的表达,并以喉癌旁组织作为对照组,结合LSCC的临床和病理特征进行分析。结果：RAGE表达于细胞质与细胞膜中,在LSCC中的阳性率（51．4％）明显高于喉癌旁组织（25．0％）（P〈0．05）。在不同的病理分级中,RAGE的表达差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：RAGE的表达与LSCC的生长、分化有关。     

FoxM1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:研究FoxM1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:运用免疫组织化学方法检测89例喉鳞状细胞癌组织、89例癌旁组织及20例喉乳头状瘤组织中FoxM1蛋白的表达情况,分析其与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例喉鳞状细胞癌、20例喉乳头状瘤组织以及20例癌旁组织中FoxM1mRNA表达情况。结果:FoxM1mRNA和蛋白表达的阳性率在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及癌旁组织中逐渐降低,其差异有统计学意义(P<0.05)。FoxM1蛋白的表达随组织分化程度增高而降低(P<0.05);随T分期增高而增加(P<0.05);有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.05),随临床分期的增加而表达增加(P<0.05)。FoxM1表达率与患者年龄、性别、癌原发部位无相关性(P>0.05)。结论:FoxM1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达的上调可能与喉鳞状细胞癌的发生及浸润转移有关。