补肾方药对去卵巢大鼠骨质疏松的骨组织ER表达的影响

目的：探讨雌激素受体在骨质疏松发病中的作用及补肾方药对其调整作用。方法：通过切除大鼠卵巢造成骨质疏松模型,补肾方药和尼尔雌醇分别灌胃治疗3个月,观察补肾中药对骨质疏松的治疗作用,并且采用免疫组织化学,RT－PCR方法检测大鼠去卵巢前后骨组织中雌激素受体的变化,及补肾中药治疗对其的影响。结果：卵巢切除后大鼠的血清雌二醇水平,腰椎中的雌激素受体表达水平及股骨干骺端雌激素受体mRNA表达均下降。补肾中药能够提高去卵巢大鼠的骨密度,改善其病理变化,提高大鼠血清E2水平,并且可以从RNA,蛋白质两种水平,提高骨组织中的ER的表达,结论：补肾方药对去卵巢实验性骨质疏松大鼠有治疗作用,其作用机制不仅与其拟雌激素样作用有关,而且与其提高ERa在骨组织中的表达有关,进一步表明了雌激素受体在骨质疏松发病中的作用。     

两种不同补肾方法治疗去卵巢大鼠骨质疏松症的对比研究

目的：探讨评价中医药“活血补肾法”与“滋阴补肾法”治疗绝经后骨质疏松症的疗效作用。方法：以反应骨代谢状况的S—Ca，S—P，S—ALP，U—Ca，U—HYP，U—HYP／U—Cr，U—Ca／U—Cr等生化指标，E2、LH、CT等内分泌激素，以及股骨近端骨密度与子宫、肾上腺、股骨近端的组织形态学为观察指标，比较活血补肾的丹仙康骨胶囊与滋阴补肾的六味地黄丸对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响。结果：活血补肾的丹仙康骨胶囊比滋阴补肾的六味地黄丸更能有效的提高模鼠骨密度、降低U—Ca，U—P，U—HYP，U—HYP／U—Cr，U—Ca／U—Cr，同时能提高S—ALP，差异显著。在光镜下观察，活血补肾组、滋阴补肾组其肾上腺皮质、子宫内膜，固有腺体瘦缩都有所减轻，但两组无明显差别。活血补肾组比滋阴补肾组骨干预端软骨骨化较好，骨小梁变粗明显。结论：不同补肾方法对骨重建过程骨吸收与骨形成具有选择性差异。同滋阴补肾的六味地黄丸相比，活血补肾的丹仙康骨胶囊不仅能抑制骨吸收，还能促进骨形成，具有较好的抗骨质疏松作用。     

补肾复方含药血清对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达的影响

为研究补肾复方对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达影响。以补肾活血方、补肾健脾方、龟鹿二仙膏、金匮肾气丸、六味地黄丸、左归丸6种补肾中药复方及生理盐水给体重为250g左右的大鼠灌胃,提取含药血清;采用酶消化法从初生2天SD大鼠头盖骨中分离出成骨细胞,用含药血清及生理盐水进行成骨细胞传代培养;取第2代细胞,培养至细胞铺满培养瓶约80%时,更换含药血清培养液24小时;用含药血清培养液24小时后终止培养,提取总RNA,应用RT-PCR方法观察六种补肾复方对大鼠成骨细胞OPG、ODF表达影响。结果显示补肾活血方、补肾健脾方、金匮肾气丸、六味地黄丸和左归丸含药血清培养的大鼠成骨细胞OPG的表达量高于生理盐水对照组,龟鹿二仙膏含药血清培养的大鼠成骨细胞OPG的表达量低于生理盐水对照组,其中补肾活血方组、补肾健脾方组大鼠成骨细胞OPG表达量明显高于生理盐水对照组,统计学有显著性差异(P<0.05)。6种补肾复方含药血清培养的大鼠成骨细胞ODF表达量均低于生理盐水对照组,其中补肾活血方组、补肾健脾方组和金匮肾气丸组大鼠成骨细胞ODF表达量明显低于生理盐水对照组,统计学有显著性差异(P<0.05)。表明补肾活血方、补肾健脾方含药血清能增加大鼠成骨细胞OPG表达量,降低大鼠成骨细胞ODF表达量。     

补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织RANKL/OPG基因表达的影响

目的:研究补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)基因表达的影响,探讨补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的分子机制.方法:通过卵巢去势的方法造成大鼠骨质疏松模型,造模后随机分为6组:假手术组、模型组、仙灵骨葆组(5.0 g·kg-1)、补肾基础组(5.4 g·kg-1)、通络组(0.9 g·kg-1)、补肾通络组(6.3 g·kg-1).ig给药,1次/d,共10周.治疗10周后,在无菌条件下取出大鼠L3椎体,剔除软组织及骨膜,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测骨组织RANKL/OPG基因mRNA的表达.结果:与模型组相比,补肾通络组、补肾基础组、通络组RANKL mRNA表达明显下降,RANKL/OPG明显下降(P＜0.01),3组间比较,补肾通络组的干预作用明显优于补肾基础组与通络组(P＜0.05).结论:补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的作用机制可能与调控RANKL mRNA表达,改善RANKL/OPG,从而抑制破骨细胞活性,降低骨吸收有关.     

中药丹仙康骨胶囊防治去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

为了进一步探讨中药丹仙康骨胶囊的治疗作用,从生化、骨密度与组织形态学角度评价中药丹仙康骨胶囊的治疗效果。以卵巢切除诱导制作骨质疏松模型,观察丹仙康骨胶囊对反应骨代谢状况的生化指标,以及股骨近端骨密度与股骨近端、子宫、肾上腺的组织形态学变化的影响。结果显示用药3个月后,中药治疗组骨代谢参数明显改善,骨密度则明显增高,与模型组比较差异显著（P＜0．05）;而且中药组子宫内膜萎缩、肾上腺皮质球状带痿缩与索状带细胞浊肿均明显减轻,股骨近端骨小梁骨化良好,皮质骨厚度增大。表明中药丹仙康骨胶囊通过改善模鼠骨代谢与内分泌功能,促进骨形成,抑制骨吸收而呈现抗骨质疏松作用。     

中药丹仙康骨胶囊防治去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究1

为了进一步探讨中药丹仙康骨胶囊的治疗作用,从生化、骨密度与组织形态学角度评价中药丹仙康骨胶囊的治疗效果.以卵巢切除诱导制作骨质疏松模型,观察丹仙康骨胶囊对反应骨代谢状况的生化指标,以及股骨近端骨密度与股骨近端、子宫、肾上腺的组织形态学变化的影响.结果显示用药3个月后,中药治疗组骨代谢参数明显改善,骨密度则明显增高,与模型组比较差异显著(P＜0.05);而且中药组子宫内膜萎缩、肾上腺皮质球状带痿缩与索状带细胞浊肿均明显减轻,股骨近端骨小梁骨化良好,皮质骨厚度增大.表明中药丹仙康骨胶囊通过改善模鼠骨代谢与内分泌功能,促进骨形成,抑制骨吸收而呈现抗骨质疏松作用.     

去卵巢骨质疏松大鼠骨组织OPG/RANKLmRNA动态表达研究

目的:建立去卵巢大鼠骨质疏松症动物模型,检测造模成功后不同时期大鼠胫骨OPG/RANKLmRNA表达量及血清雌二醇水平,分析OPG/RANKLmRNA表达变化规律。方法:选取3月龄雌性SD大鼠60只随机分为2组即去卵巢组与对照组,每组30只。去卵巢组去除双侧卵巢,对照组仅去除腹腔少许脂肪。分别在造模12周后0个月、6个月、12个月每组随机处死10只,检测不同时期大鼠胫骨OPG/RANKLmRNA表达量及血清雌二醇水平。采用SPSS 17.0软件进行统计,分析数据,得出结论。结果:与对照组相比,去卵巢组胫骨OPGmRNA表达量、血清雌二醇浓度在各时间点上均显著降低(P<0.05),RANKLmRNA表达量则显著增高(P<0.05);去卵巢组0个月与6个月、6个月与12个月比较,胫骨OPGmRNA表达量及血清雌二醇浓度下降,差异具有统计学意义(P<0.05),RANKLmRNA表达量增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:造模成功后12个月内,去卵巢大鼠胫骨骨组织OPGmRNA表达量持续减少,血清雌二醇浓度均持续降低,RANKLmRNA持续高表达,OPG/RANKL比值缩小。     

补肾壮骨丹对去卵巢大鼠骨质疏松检测指标的影响

试通过对去卵巢大鼠不同时期骨质疏松相关指标的检测，为补肾壮骨丹治疗骨质疏松症提供实验依据。将雌性大鼠90只随机分为6组（假手术组、预防组、模型组、大剂量组、小剂量组、雌二醇组），分别于造模后和3、6个月检测体重、子宫重量、血清钙磷及碱性磷酸酶、骨钙磷含量、骨密度、并进行统计学分析。结果显示模型组体重明显高于正常对照组，子宫重量明显低于正常对照组，模型组骨钙磷含量、骨密度明显低于正常对照组，表明补肾壮骨丹对骨质疏松有明显预防治疗作用。     

补肾为主的中药复方对去卵巢大鼠血脂谱影响的实验研究

更年期绝经后女性动脉粥样硬化、冠心病的发病率明显高于育龄期女性 ,一般认为此与其卵巢功能衰退、雌激素分泌减少 ,导致脂质代谢紊乱有密切关系。与人相似 ,雌性老龄大鼠其血脂也会出现紊乱。因此 ,治疗绝经期综合征的同时 ,积极防治该类患者易患的动脉粥样硬化及冠心病是十分必要的。依据肾主生殖及主骨生髓的中医药理论 ,我们以肉苁蓉、补骨脂、当归、黄芪等补肾为主的中药组成复方 ,临床治疗绝经期综合征疗效肯定。为了弄清该方在治疗绝经期综合征有效的同时 ,是否还能预防性调治绝经期综合征患者易发的动脉粥样硬化或冠心病这一问题 ,…     

中药骨必康防治去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

为了探讨骨必康对绝经后骨质疏松症的防治效果及其作用机理,选用60只8月龄SD雌性大鼠,随机分为假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、尼尔雌醇组(CEE3)、骨必康低剂量组(GBK-L)和骨必康高剂量组(GBK-H),每组12只.假手术组不切除卵巢,其余各组均切除双侧卵巢,术后第4天开始灌胃给药,12周后肝静脉取血,处死动物.分离血清和血浆,测定S-AKP、S-BGP、S-Ca、S-P及血浆ACP,摘取L3椎体及左侧股骨测定BMC、BMD.结果显示,与模型组比较,骨必康低、高剂量组均能明显提高L3椎体及左侧股骨BMD(P＜0.05～0.01),且高剂量组能明显降低血浆ACP(P＜0.001);与假手术组比较,中药组S-BGP、S-AKP含量明显升高(P＜0.05～0.001).提示骨必康对绝经后骨质疏松症具有肯定的防治作用,其作用机制在于抑制骨吸收,促进骨形成,阻止骨量丢失.     

针灸对切除卵巢的大鼠骨松质结构的影响

为了探讨针灸对绝经后骨质疏松症的防治作用,采用４０只１２月龄雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分为假手术组、模型组、针刺组、艾灸组和西药组。切除大鼠双侧卵巢造成实验性骨质疏松症运动模型,于卵巢切除３天后开始针刺、艾灸和肌注雌激素,３个月后取各组大鼠股骨头进行扫描电镜观察。结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠肌小梁变细甚至中断,小梁间隙增大;针刺、艾灸和西药各组大鼠骨小梁结构的病理改变明显轻于模型组。提示针     

续断对大鼠去卵巢骨质疏松的骨形态计量学研究

观察续断提取液对去卵巢大鼠骨质疏松的骨形态计量学影响.随机将40只4月龄大鼠分为假手术组(Sham)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除续断治疗组(Herb组)和卵巢切除倍美力治疗组(Premarin组).采用双侧去卵巢6周的方法造成骨质疏松模型,分别予生理盐水、续断提取液及倍美力灌胃10周后取材.处死动物前进行骨组织的双荧光标记,处死后取近心段右侧胫骨行骨形态计量学研究.结果显示去卵巢造模后,OVX组的骨量明显减少,骨组织退化,出现骨小梁数目减少和骨小梁分离度显著增大,续断提取液和Premarin治疗组骨量明显增加,骨结构明显改善,且其疗效是由于两者都能抑制骨吸收与骨形成,降低骨高转换率,总体上抑制骨吸收大于骨形成.表明续断对骨质疏松症具有部分治疗作用.     

仙灵骨葆对切除卵巢骨质疏松模型大鼠腰椎骨抗压生物力学性能的影响

为探讨仙灵骨葆对大鼠去卵巢骨质疏松模型松质骨生物力学性能的影响,将４０只１０月龄Ｗｉｓｔａｒ月龄Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,仙灵骨葆组和倍美力组,每组１０只,正常对照组做假手术,其余３组做卵巢切除术,术后３个月开始给药,连续用药满９０天,处死,取出第３腰椎,测定其骨量并进行压应力测试与分析。结果显示,仙灵骨葆能明显增加骨质疏松大鼠腰椎骨的整体骨量,改善其生物力学抗压性能。     

中药对实验性骨质疏松大鼠骨骼影响的形态计量学研究

为研究中药接骨颗粒对实验性骨质疏松大鼠骨骼形态计量学影响。将48只动物随机分成空白组（Sham）、造模组（OVX）、造模雌激素治疗组（OVX＋E2）和造模中药治疗组（OVX＋T）。采用摘除双侧卵巢的方法造成骨质疏松，分别给予自来水灌胃、肌注苯甲酸雌二醇、中药接骨颗粒溶解液灌胃，4个月后取材（取材前15天进行荧光标记）。取大鼠股骨处理、切片、染色后，进行骨形态计量参数的测量和计算。结果显示OVX组骨小梁体积比TBV明显低于Sham、OVX＋岛和OVX＋T组，表明正常大鼠切除卵巢后，骨小梁骨量明显减少，密度减低，出现骨质结构稀疏，而雌激素和中药可以明显地抑制切除卵巢引起的骨小梁减少的变化；OVX组骨吸收表面比RBS及动态参数TOS、MOSW、MAR、MLT指标明显高于Sham、OVX＋岛和OVX＋T组，说明单纯切除卵巢大鼠骨再建活动增强，骨转换率（负平衡）增高。表明雌激素和中药对切除卵巢引起的大鼠骨吸收活性增高有明确的抑制作用。说明中药接骨颗粒对骨质疏松症具有一定的治疗作用。     

补骨脂注射液对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响

为研究补骨脂对体外成骨细胞增殖的影响.以出生24h以内的wistar大鼠为来源,酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞,胰蛋白酶消化后,传代培养大鼠成骨细胞;取一定量接种于24孔培养板细胞贴壁后,分成实验组1-5与空白对照组,分别用含补骨脂注射液5%、12.5%、25%、50%、100%、0%的DMEM培养基进行培养,连续观察7天,绘制细胞生长曲线;另取一定量接种于96孔培养板,分组及加入培养基同上,MTT法观察细胞存活和增殖能力.结果显示原代成骨细胞逐渐形成成纤维细胞集落,有成纤维细胞型表现;传代成骨细胞逐渐被细胞分泌的基质所包埋,形成钙化.补骨脂对新生大鼠成骨细胞的增殖有显著促进作用.表明利用胰酶消化法可以分离培养出纯度高,数量较多且培养时间明显缩短的成骨细胞.补骨脂抗骨质疏松的作用与其增加成骨细胞的数量和促进成骨细胞的增殖能力有关.     

健骨胶囊对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度和骨矿含量及骨重系数的影响

为探讨健骨胶囊对骨质疏松动物模型的影响,采用Wistar雌性大鼠手术摘除卵巢复制骨质疏松模型,术后30天开始给药,连续给药60天,分别于给药前、给药期结束后用二维扫描单光子骨密度仪检测骨密度、骨矿含量的变化,处死动物取股骨称量湿重和干重,并计算骨重系数.结果表明健骨胶囊对大鼠切除卵巢所致骨质疏松模型大鼠的骨矿含量下降及骨密度下降有一定的治疗和改善作用,并能明显的增加骨系数.提示健骨胶囊具有抗骨质疏松作用.     

大鼠骨质疏松症模型MDA、SOD的变化

为探讨骨质疏松症的发生与自由基的关系。对去势雌性大鼠绝经后骨质疏松症模型血清丙二醛 ( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)含量进行测定 ,并与正常假手术组比较。结果显示去势模型组血清 MDA明显高于对照组 ,SO D低于正常对照组 ,差异分别有非常显著意义 ( P<0 .0 1)和显著意义 ( P<0 .0 5 )。表明氧自由基代谢异常参与了绝经后骨质疏松症的病理进程。