心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用

目的:观察小分子多肽类物质心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用。方法:建立培养心肌细胞阿霉素(ADM)损伤模型, 观察心肌肽素对心肌细胞肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)及线粒体脱氢酶活性的影响, 以荧光染料Fura-2-AM定量测定细胞内游离Ca²⁺浓度。结果:心肌肽素可剂量依赖性降低细胞培养液中CPK和LDH活性及对抗细胞内线粒体脱氢酶活性下降, 可剂量依赖性地降低培养心肌细胞[Ca²⁺]_i。结论:心肌肽素对阿霉素损伤培养心肌细胞具有保护作用。     

心肌内向整流钾离子通道的分子机制

心肌内向整流钾电流对维持静息电位和心肌的兴奋性有重要作用。1993年以来,多种内向整流钾通道(Kir)克隆成功,为探明通道的结构特性和内向整流的产生机理创造了条件。Kir肽链含两个跨膜段(M1,M2),4条肽链聚合成一个功能单位;内向整流是胞内Mg~(2+)和多聚胺与通道负电荷区域相互作用的结果,此区域可能与M2和C末端有关。这些进展为探讨通道的功能调节和新药设计提出了新的思路。     

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的： 研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响，探讨心肌肽素在离子通道水平的作用机制。 方法： 用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞，标准全细胞膜片钳技术记录钠电流(I_Na)。 结果： 心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L使豚鼠心室肌细胞I_Na分别减少(0±1)%、(6±2)%、(10±2)%、(15±1)%、(22±9)%、(30±6)%，呈浓度依赖性抑制I_Na。心肌肽素50 mg/L使I_Na激活时间(TTP)从(2.8±0.7) ms延长至(3.0±0.8) ms (P<0.05)；使I_Na电流密度-电压曲线上移，但不改变激活电位、峰电位、反转电位和I-V曲线的形状；不影响稳态激活曲线、稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。 结论： 心肌肽素浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞I_Na，可能是其抗心律失常作用的机制之一。     

心肌肽素对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌的保护作用

目的：观察心肌肽素对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌的保护作用。方法：在大剂 量异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤模型上,观察心肌肽素对驻肌形态及脂质过氧化的影响。结果：心肌肽素可明显减轻受损心肌的变性坏死反应和减少炎性细胞浸润,非常显著地降低心肌丙二醛含量、提高心肌超氧化物歧化酶活性。结论：心肌肽素对异丙肾上腺素损伤大鼠心肌有保护作用,这可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

心肌肽素抑制大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流

目的研究新药心肌肽素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响及其在离子通道水平的作用机制。方法用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的心肌肽素对Ito的影响。结果心肌肽素呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞Ito,心肌肽素浓度(mg/L)为10、50、100、250和500时分别使Ito降低(%)4、13、22、32和38。心肌肽素50 mg/L使Ito电流密度-电压曲线下移,但不改变曲线的形状,也不改变Ito稳态激活曲线。结论心肌肽素抑制大鼠心室肌细胞Ito,可能是其抗心律失常作用的机制之一。     

丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对心肌钙反常的保护作用

豚鼠离体心脏灌流造成心肌钙反常模型,以丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(DS-201)为保护剂,测定心肌组织蛋白释放和钙摄取量,观察作用效果。并与已知钙拮抗剂异搏定比较,探讨DS-201的钙拮抗作用。实验结果表明,DS-201对心肌钙反常损伤具有明显的保护作用,抑制钙内流,减轻钙反常过程中心肌组织钙沉积和心肌损伤所致的蛋白(酶)释放(P<0.01)。该作用在一定范围内具有剂量依赖关系。30mg/L、40mg/LDS-201分别能降低心肌组织蛋白释放量52.8%、66.2%,降低钙摄取量25.8%、36.9%。作用效果优于异搏定,后者降低蛋白释放量47.5%,降低钙摄取量23.9%。     

心肌肽素对缺氧-再给氧损伤心肌

目的:研究多肽类物质心肌肽素对缺氧-再给氧损伤心肌细胞的保护作用。方法:复制培养心肌细胞缺氧-再给氧损伤模型,缺氧60min,再给氧30min,观察心肌肽素对细胞超微结构的影响。以ACAS570进行细胞内游离Ca^2＋的定性检测;以荧光染料Fura-2-AM定量测定细胞内游离Ca^2＋浓度;以荧光偏振法测定细胞膜脂质流动性。结果:心肌肽素能使心肌细胞线粒体超微结构的损伤减轻;可剂量依赖性地降低[Ca^2＋]_i和提高细胞膜脂质流动性;可明显减少Ca^2＋伪彩色三维图色彩值。结论:心肌肽素对缺氧-再给氧损伤心肌细胞有明显保护作用,可能与其降低[Ca^2＋]sub>i和提高细胞膜脂质流动性有关。     

心肌肽素对大鼠心脏缺血-再灌注损伤的治疗作用

目的:研究多肽类物质心肌肽素对大鼠心脏缺血-再灌注损伤的治疗作用。方法:在大鼠冠脉结扎致心肌缺血-再灌注损伤模型上,观察心肌肽素治疗性给药对缺血大鼠血浆中肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及脂质过氧化终产物(MDA)含量的影响。结果:心肌肽素治疗性给药能明显降低血浆CPK、LDH的活性与MDA含量,其作用具有明显的量效关系。结论:心肌肽素对心脏缺血-再灌注损伤有治疗作用,提示可能与其抗脂质过氧化和影响心肌酶的活性有关。     

磷酯酶A2抑制剂DTNB对大鼠心肌 缺血再灌注心律失常的影响

目的:研究非钙依赖性的磷脂酶A₂ (PLA₂)和ATP敏感性钾通道(K_ATP)在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)心律失常中的作用。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支造成缺血10 min,然后放开再灌注10 min。在心肌缺血前5 min分别给予PLA₂抑制剂5,5'-dithio-bis(2-nitrobenzoic acid)(DTNB)(16 mg/kg),K_ATP开放剂pinacidil(0.2 mg/kg),K_ATP阻断剂glibenclamide(0.3 mg/kg)。结果:与对照组相比,DTNB可降低心律失常评分、磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶 (LDH)值(P＜0.05);而glibenclamide对I/R心律失常无影响,但升高CPK,LDH值(P＜0.05);与glibenclamide组比,在glibenclamide阻断K_ATP后,DTNB可引起致死性心律失常,并可升高LDH值(P＜0.05);pinacidil可完全抑制I/R引起的室颤和室速。结论:PLA₂抑制剂DTNB可减轻I/R损伤,表明PLA₂在I/R心律失常中起着重要作用,同时也表明激活的K_ATP具有抗I/R心律失常的作用。但DTNB对抗I/R心律失常的作用与K_ATP的关系仍有待进一步研究。     

心肌肥大肽研究进展

心肌肥大肽是一种新发现的心脏分泌的活性肽，为目前最强的致心肌肥大物质。现已克隆出心肌肥大肽的基因。心肌肥大肽通过促进心肌细胞生长及细胞间质增生而起作用     

磷酯酶A_2抑制剂DTNB对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响

目的 :研究非钙依赖性的磷脂酶A2 (PLA2 )和ATP敏感性钾通道 (KATP)在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)心律失常中的作用。方法 :结扎大鼠左冠状动脉前降支造成缺血 10min ,然后放开再灌注 10min。在心肌缺血前 5min分别给予PLA2 抑制剂 5 ,5 -dithio -bis(2 -nitrobenzoicacid) (DTNB) (16mg/kg) ,KATP开放剂pinacidil(0 2mg/kg) ,KATP阻断剂glibenclamide(0 3mg/kg)。结果 :与对照组相比 ,DTNB可降低心律失常评分、磷酸肌酸激酶 (CPK)和乳酸脱氢酶 (LDH)值 (P <0 0 5 ) ;而glibenclamide对I/R心律失常无影响 ,但升高CPK ,LDH值 (P<0 0 5 ) ;与glibenclamide组比 ,在glibenclamide阻断KATP后 ,DTNB可引起致死性心律失常 ,并可升高LDH值 (P<0 0 5 ) ;pinacidil可完全抑制I/R引起的室颤和室速。结论 :PLA2 抑制剂DTNB可减轻I/R损伤 ,表明PLA2 在I/R心律失常中起着重要作用 ,同时也表明激活的KATP具有抗I/R心律失常的作用。但DTNB对抗I/R心律失常的作用与KATP的关系仍有待进一步研究。     

活性氧对豚鼠心室肌细胞不同钾通道离子电流的影响

目的：揭示年头自由基导致跨膜电位变化的离子电流基础。方法：采用全细胞膜片钳技术,观察了Ｈ２Ｏ２（１ｍｍｏｌ／Ｌ）对豚鼠单个心室肌细胞不同钾通道影响。结果：Ｈ２Ｏ２使习心肌细胞静息电位（ＲＰ）降低,动作电位时程（ＡＰＤ）显著缩短的同时,明显抑制超极化时的内向整流钾电流（Ｉｋ１）,致（Ｉｋ１）正常呈Ｎ字型Ｉ－Ｖ曲 成一条斜线;增强延迟整流钾电流（ＩＫ）的快组分（ＩＫＲ）和慢组分（ＩＫＡ）,尤其ＩＫＲ２     

氯化镧对下丘脑神经元L型钙通道的影响

目的和方法：采用膜片钳技术（ 细胞贴附式） 研究不同浓度氯化镧（ＬａＣｌ３） 对培养下丘脑神经元上Ｌ－ 型钙通道单通道电流的影响。结果：与加药前相比,１ μｍｏｌ／Ｌ 和１０ μｍｏｌ／Ｌ ＬａＣｌ３ 分别使Ｌ－ 型钙通道的开放下降７５ ％ （ Ｐ＜０－０１） ,开放时间缩短４４ ％ （ Ｐ＜ ０－０１） ,关闭时间延长５３ ％ （ Ｐ＜ ０－０１） ;而０－１ μｍｏｌ／ＬＬａＣｌ３ 分别使Ｌ－ 型Ｃａ２＋ 通道的开放概率增加３８ ％ （ Ｐ＜ ０－０５） ,开放时间延长４８ ％ （ Ｐ＜ ０－０１） ,关闭时间缩短２６ ％ （ Ｐ＜ ０－０５） 。结论：低浓度ＬａＣｌ３ 可兴奋培养下丘脑神经细胞Ｌ 型钙通道     

急性坏死性胰腺炎对心室肌细胞钠和钙离子电流的影响

目的:研究急性坏死性胰腺炎(ANP)后心室肌细胞钠通道电流(I_Na)、L-钙通道电流(I_Ca-L)活性的变化。方法:采用牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射建立鼠的ANP动物模型,应用膜片钳全细胞记录方法,观察ANP后1 h心肌细胞I_Na、I_Ca-L的变化。结果:I_Na和I_Ca-L电流-电压关系曲线在ANP组较对照组明显上移。ANP组I_Na电流密度峰值(-30 mV)为(12.45±2.26)pA／pF(n=16),明显低于假手术组(25.32±3.31)pA/pF(n=14),P<0.01;ANP组I_Ca-L电流密度峰值(+10 mV)为(3.63±0.65)pA／pF(n=16),显著低于假手术组(5.46±1.03)pA／pF(n=12),P<0.01。结论:ANP可导致心室肌细胞I_Na和I_Ca-L下降,引起心肌传导速度下降和动作电位时程缩短,可能是导致ANP后出现心律失常的原因。     

ATP对人不死化成纤维细胞DNA的合成、膜蛋白表达及离子通道的影响

目的：探讨ATP抑制不死化人成纤维细胞增殖过程中对其DNA合成，细胞膜蛋白的表达以及离子通道的影响，方法：将正常人TIG－7和OUMS－36细胞株，不死化人KMST－6和SUSM－1细胞株在不同浓度的ATP，ADP，AMP条件下分别进行24和96h的常规细胞培养，观察存活细胞数目，DNA的合成，[32P]ATP标记膜蛋白的表达以及不死化KMST－6的细胞分别在无钙离子培养基和应用Ca^2 和K^ 通道拮抗剂时，细胞增殖率的改变，结果：培养96h后，0．4mmol/L ATP对不死化细胞KMST－6的抑制率为77％，且DNA合成明显地被抑制，而正常OUMS－36细胞抑制率为41％，且DNA合成无明显改变，在1mmol/L ATP时，多数KMST－6细胞发生死亡，而正常OUMS－36细胞的增殖无明显影响，当ADP，AMP和腺苷或磷酸处理的细胞，仅有ADP处理的不死化细胞存活数目减少（P＜0．01），与正常细胞比较，不死化细胞30，31，33和40kD的[^32P]-ATP标记膜蛋白呈高表达，0．4mmol/L ATP与KMST－6细胞共培养时分别加入Ca^2 以及K^ 通道拮抗剂，这些药物在某种程度上可以降低ATP的增殖抑制作用，当ATP处理的细胞液中无钙离子时，它们的增殖不受影响。结论：ATP对不死化人成纤维细胞的DNA合成有明显的抑制作用。并且使磷酸化细胞膜蛋白的表达增高，其过程中有钙通道和钾通道的参与。     

肾上腺髓质素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的作用及其信号转导机制

目的: 研究肾上腺髓质素( adrenomedullin, ADM)抑制豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的信号转导机制。方法: 应用全细胞膜片钳技术,记录应用ADM(1-100 nmol·L^-1)前后L-型钙电流(I_Ca,L),以及分别记录应用ADM特异性受体拮抗剂ADM_22-52(100 nmol·L^-1)+ADM(100 nmol·L^-1)、蛋白激酶A (PKA) 特异性拮抗剂H-89(10 μmol·L^-1) + ADM(100 nmol·L^-1)、蛋白激酶C (PKC) 特异性拮抗剂PKC_19-36(10 μmol·L^-1)+ADM(100 nmol·L^-1)、PKC特异性激动剂PMA(1 μmol·L^-1)前后I_Ca,L。结果: ADM(1-100 nmol·L^-1)浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞I_Ca,L,并可被ADM_22-52(100 nmol·L^-1)完全阻断;H-89(10 μmol·L^-1)对ADM抑制I_Ca,L的作用无影响。PKC_19-36(10 μmol·L^-1)可完全阻断ADM 对I_Ca,L的抑制效应,且PMA(1 μmol·L^-1)可模拟ADM 对I_Ca,L的抑制效应。结论: ADM作用于特异性ADM受体可浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞I_Ca,L,此作用有可能与PKC激活相关。     

黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞钙通道及钠钙交换载体的效应

目的与方法；以柯萨奇Ｂ３病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞，利用膜片和记录技术了解黄芪对感染柯萨奇病毒后心肌细胞Ｌ型钙通道及钠钙交换载体的影响，以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制，结果：黄芪不影响正常心肌细胞Ｌ型钙通道电流的幅度，但可缓缓Ｌ型钙通道电流的衰减。黄芪也不影响内向ＮＣＥ电流，但使外向ＮＣＥ电流增加，从而使动作电位期间由ＮＣＥ转运人细胞内的钙离子增加。病毒感洒增加心肌细胞Ｌ型钙通道电流的