表皮生长因子协同上调不分型流感嗜血杆菌诱导的MUC5AC表达及其信号通路

目的 探索表皮生长因子(EGF)协同上调不分型流感嗜血杆菌(NTHi)诱导MUC5AC黏液素基因表达的细胞分子机制.方法 荧光定量PCR及Luciferase分析EGF协同上调NTHi诱导的MUCSAC表达.Western印迹法检测EGF及NTHi对P38有丝分裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、P21激活激酶(PAK)4磷酸化的协同作用.采用P38MAPK或EGF特异性抑制剂,共转染P38MAPK、ERK显性失活质粒及PAK4 siRNA,判断对EGF协同上调NTHi诱导MUC5AC表达的影响,并研究PAK4显性失活质粒对EGF及NTHi所致的P38MAPK及ERK协同激活的影响.结果 在HM3、HeLa和HMEEC-1细胞mRNA及转录水平上,EGF协同上调NTHi诱导的MUC5AC基因表达.EGF及NTHi对P38MAPK、ERK、PAK4磷酸化有协同作用;P38MAPK、ERK特异性抑制剂或共转染P38MAPK、ERK显性失活质粒、PAK4siRNA,可显著抑制EGF对NTHi诱导的MUC5AC表达的协同作用,PAK4显性失活质粒抑制EGF和NTHi诱导的P38MAPK和ERK磷酸化的协同作用.结论 EGF通过PAK4依赖的P38MAPK及ERK细胞信号通路协同上调NTHi诱导的MUCSAC黏液素基因表达.     

P38信号通路对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 探讨P38信号通路(P38MAPK)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的关系，以及P38MAPK在糖尿病(DM)动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法 分别以高葡萄糖(HG)、糖基化终产物(AGEs)、高胰岛素(HIns)和过氧化氢(H2O2)孵育人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，观察HUVECs P38MAPK的蛋白表达和MCP-1 mRNA表达；以P38MAPK特异抑制剂SB203580预处理，再用以上4种刺激因素孵育HUVECs，观察MCP-1 mRNA在HUVECs的表达。结果 HG、AGEs、HIns和H2O2均可独立激活P38MAPK，使磷酸化P38MAPK蛋白表达量及MCP-1 mRNA表达量增加；SB203580预处理后，MCP-1 mRNA表达被明显抑制。结论 P38MAPK调控MCP-1的表达，表明P38MAPK可能是DM致AS发生的始动信号之一。     

刺五加总黄酮对脑缺血大鼠脑组织P38及GAP-43蛋白表达影响的实验研究

目的探讨脑缺血大鼠脑组织P38、GAP-43的变化及刺五加总黄酮的保护作用。方法制作大鼠脑缺血模型，应用免疫组化方法，测定正常对照组、治疗组、正常组P38、GAP-43表达的影响。结果P38和GAP-43的表达水平随再灌注延长而不断上升；在各时间点，治疗组P38和GAP-43的表达水平均高于对照组（P〈0．01）。结论刺五加总黄酮可上调突触素P38、生长相关蛋白GAP-43的表达，具有促进突触再建和增强、完善再建突触效能的作用。     

P38 MAPK通路在老年卵巢癌化疗药物耐药性产生中的作用

目的研究P38 MAPK通路在老年卵巢癌化疗药物耐药性产生中的作用,对可能的机制进行探讨。方法采用免疫组化法测定P38 MAPK、凋亡抑制蛋白Survivin、耐药相关蛋白切除修复交叉互补基因1(ERCC1),肺耐药相关蛋白(LRP),谷胱甘肽转移酶(GST-π)在25例老年原发性卵巢上皮癌和32例老年复发性卵巢上皮癌治疗前后标本中的表达情况。结果 P38 MAPK在原发性卵巢癌中的表达显著高于复发性卵巢上皮癌(P0.01),而Survivin、ERCC1、GST-π的表达则明显低于复发性卵巢癌组(P0.01),P38 MAPK与Survivin、ERCC1、LRP之间存在负相关性(P0.01),但与GST-π之间无相关性(P0.05)。结论化疗抑制了P38 MAPK信号通路,增加了Survivin、ERCC1、GST-π的表达,进一步导致了耐药性的发生,P38 MAPK信号通路开通可能是改善卵巢癌化疗效果的理论途径。     

P38MAPK抑制剂对皮瓣缺血再灌注损伤发展及TNF-α与IL-10表达的影响

目的探讨P38MAPK抑制剂对皮瓣缺血再灌注损伤发展及肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-10表达的影响。方法选取48只12~14周龄的健康Wistar大鼠,并将其制作为大鼠腹部轴型浅动静脉皮瓣模型,按照随机数字表法将其均分为对照组、缺血再灌注组、生理盐水组和抑制剂组。术后第7天分别采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定各组大鼠的皮瓣存活率和血清TNF-α、IL-10浓度,同时采用免疫组织化学法检测各组大鼠皮瓣的P38MAPK和P-P38MAPK表达情况。结果 1对照、抑制剂组大鼠皮瓣存活率高于缺血再灌注、生理盐水组(P0.05),对照、抑制剂组,缺血再灌注、生理盐水组之间皮瓣存活率均无统计学差异(P0.05);2对照、抑制剂组大鼠血清TNF-α浓度低于缺血再灌注、生理盐水两组(P0.05),对照、抑制剂组,缺血再灌注、生理盐水组之间血清TNF-α浓度比较无统计学差异(P0.05);抑制剂组大鼠血清IL-10浓度高于对照、缺血再灌注、生理盐水组(P0.05),缺血再灌注、生理盐水、抑制剂三组大鼠血清IL-10浓度无统计学差异(P0.05);3缺血再灌注、生理盐水、抑制剂组大鼠P38MAPK、P-P38MAPK评分高于对照组,而缺血再灌注、生理盐水组评分高于抑制剂组(P0.05);4皮瓣存活率与TNF-α呈负相关(r=-0.582,P0.05),P38MAPK、P-P38MAPK评分与TNF-α均呈正相关(r=0.608、0.775,P0.05),皮瓣存活率、P38MAPK、P-P38MAPK评分与IL-10均无相关关系(P0.05)。结论 P38MAPK抑制剂通过抑制皮瓣中P38MAPK信号通路,减少P38MAPK和P-P38MAPK的表达,从而降低血清TNF-α的浓度,减轻缺血再灌注损伤,提高皮瓣的存活率。     

辛伐他汀抑制P38MAPK信号通路减少大鼠肾小球系膜细胞MCP-1及ICAM-1表达的研究

目的探讨P38促分裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）信号通路在糖尿病肾病（DN）中的作用及辛伐他汀（SI）在防治DN中的作用机制。方法分别以高糖、糖基化终产物（AGE）或过氧化氢体外孵育大鼠肾小球系膜细胞（MC）,检测P38MAPK和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）及细胞间黏附因子1（ICAM-1）在MC的表达。比较有无P38MAPK特异性抑制剂SB203580（SB）或辛伐他汀（SI）预处理时以上3种因素对P38MAPK和MCP-1及ICAM-1在MC表达的影响。结果高糖、AGE或H2O2均可独立激活P38MAPK,并增加MCP-1及ICAM-1在MC的表达;SB显著抑制MCP-1及ICAM-1的表达;SI抑制P38MAPK的活化并减少MCP-1及ICAM-1的表达。结论P38MAPK是MCP-1及ICAM-1的上游信号分子,表明P38MAPK可能是DN发生的始动信号之一。SI可能通过抑制P38MAPK磷酸化而抑制MCP-1及ICAM-1的表达,有防治DN的作用。     

P38 MAPK在大鼠体外循环肺组织炎症反应中的作用

54只SD大鼠随机分为3组,全麻开胸组(S组)、体外循环组(CPB组)、体外循环 P38 MAPK阻断剂组(SB组).Western blot法检测大鼠肺组织中P38 MAPK、磷酸化P38 MAPK,EMSA法检测激活蛋白(AP-1)的DNA结合活性变化,ELISA法检测TNF-α和IL-1β产量,并留取肺组织做HE染色病理检查.发现在磷酸化P38 MAPK、AP-1、TNF-α、IL-1β方面,CPB组较S组明显增高,SB组较CPB组明显减少.认为P38 MAPK通过影响AP-1的激活而参与体外循环术后肺炎症反应的发生,SB203580通过阻断P38 MAPK的激活而减轻体外循环术后肺炎症反应的发生.     

高血压脑出血患者外周血单个核细胞中P38MAPK的表达

目的探讨P38 MAPK在高血压脑出血外周血单个核细胞中的表达情况及其临床意义。方法选择宁夏医科大学总医院神经外科确诊的高血压脑出血患者50例作为实验组,在发病后1、3、7、14 d分别抽取静脉血,用PCR荧光检测法测定P38 MAPK mRNA的表达,同时ELISA检测外周血IL-6/8含量,与正常体检者(25例,对照组)对比,并分析表达意义。结果实验组患者外周血单个核细胞核内P38 MAPK mRNA表达和血清IL-6/8含量均高于正常体检者(P0.05),病情越重,P38 MAPK mRNA及IL-6/8含量越高,在脑出血后3 d时P38 MAPK mRNA及IL-6/8含量达到高峰,此后表现为下降趋势,P38MAPK mRNA及IL-6/8含量之间呈正相关(P0.05)。结论 P38 MAPK、IL-6、IL-8参与了高血压脑出血的炎症反应,与脑出血后脑组织损伤机制相关。     

MMP-2、TIMP-2、HER-2及p38MAPK在卵巢浆液性上皮性肿瘤组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子（TIMP-2）、HER-2、p38丝裂原蛋白激酶（p38MAPK）在卵巢浆液性上皮性肿瘤组织中的表达及意义。方法采用组织微阵列技术和免疫组化法检测MMP-2、TIMP-2、HER-2、p38及其活化体P—p38在25例浆液性腺癌、7例卵巢交界性肿瘤和17例卵巢浆液性囊腺瘤组织中的表达。结果MMP-2、TIMP-2和p38MAPK表达阳性率及HER-2的过表达率在卵巢浆液性腺癌及交界性肿瘤中明显高于浆液性囊腺瘤（P〈0．05）;p38表达阳性率和MMP-2／TIMP-2随着卵巢恶性肿瘤的发展逐步提高（P〈0．05）,P—p38与肿瘤分期、大小、转移情况及患者年龄明显相关（P〈0．05）;MMP-2、HER-2和P—p38在卵巢浆液性腺癌中的表达两两相关（P〈0．05）。结论HER-2、p38MAPK、MMP-2和TIMP-2通路可能参与了卵巢癌的发生、侵袭和转移;p38MAPK的磷酸化可能成为卵巢浆液性肿瘤恶化的分子指标及卵巢癌治疗的分子靶标之-。     

活脑康对缺血大鼠脑组织P38蛋白表达影响的实验研究

目的探讨缺血大鼠脑组织P38的变化及中药活脑康的保护作用.方法应用免疫组化方法,测定正常对照组(A组)、假手术组(B组)、模型组(C组)、活脑康治疗组(D组)、脑心通组(E组)P38的表达.结果与A组、B组比较,C组、D组、E组P38表达增多(P＜0.001),与C组比较,D组、E组表达明显增多(P＜0.001或P＜0.05).结论活脑康可上调突触素P38的表达,具有促进突触再建和增强、完善再建突触效能的作用.     

PPAR-γ和P38MAPK蛋白在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨人肝细胞癌组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和P38MAPK蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测57例肝细胞癌及20例正常肝组织中PPAR-γ和P38MAPK蛋白的表达,分析其与肝细胞癌临床病理特征及预后的关系。结果肝细胞癌组织中PPAR-γ蛋白的阳性表达率为45.6%,显著高于正常肝组织(15.0%,P0.05);P38MAPK蛋白的高表达率为64.9%,显著高于正常肝组织(14.3%,P0.05)。PPAR-γ蛋白的表达与肿瘤直径、门静脉癌栓及TNM分期有关(P0.05);P38MAPK蛋白的表达与肿瘤直径、门静脉癌栓、侵及周围脏器或淋巴结转移及TNM分期无关。PPAR-γ与P38MAPK蛋白表达呈正相关(r=0.378,P=0.004)。P38MAPK蛋白和PPAR-γ蛋白的表达与患者术后生存率无关。结论肝细胞癌组织中PPAR-γ蛋白的表达水平与肝细胞癌的恶性生物学行为密切相关,PPAR-γ与P38MAPK蛋白在肝细胞癌的发生、发展过程中发挥作用。     

RAGE、P-P38在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的检测晚期糖基化终末产物受体(Receptor for Advanced Glycation Endproducts,RAGE)、磷酸化信号蛋白P38(Phosphorylated signal protein P38,P-P38)在非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer,NSCLC)癌组织、癌旁正常组织中的表达并探讨RAGE与P-P38在NSCLC发生、发展过程中的相关性。方法采用免疫组化法检测52例NSCLC癌组织及47例癌旁正常肺组织中RAGE、P-P38的表达情况,分析其表达水平与NSCLC患者临床病理特征间的关系,并探讨其相关性。结果 RAGE在NSCLC中的表达率(63.46%)明显低于正常肺组织(100%)中的表达率(P0.05),P-P38在NSCLC组织中的表达率为55.77%,明显高于正常肺组织(21.28%)中的表达率(P0.05);RAGE和P-P38的表达均与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期有关(P0.05),相关性分析显示,NSCLC中RAGE和P-P38的表达呈负相关性(r=-0.354,P0.05)。结论 NSCLC组织中存在RAGE低表达,P-P38高表达,RAGE表达的降低与P-P38表达的增高提示较高恶性生物学行为。在NSCLC组织中,RAGE和P-P38可能是有利于临床判断肿瘤恶性程度及指导临床治疗的生化指标。     

血管紧张素Ⅱ诱导自发性高血压大鼠血管外膜成纤维细胞迁移活性涉及P38 MAPK

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导自发性高血压大鼠(SHR)血管外膜成纤维细胞迁移活性的变化及该过程是否涉及P38MAPK信号途径。方法用Transwell Chamber观察AngⅡ诱导的血管外膜成纤维细胞的迁移活性,及AT1受体拮抗剂氯沙坦、P38MAPK特异性的抑制剂SB202190对AngⅡ诱导的迁移活性的影响。进一步用免疫印迹技术观察AngⅡ诱导后P38MAPK的磷酸化,及氯沙坦、SB202190对P38MAPK磷酸化的影响。结果AngⅡ诱导SHR大鼠血管外膜成纤维细胞迁移活性较WKY大鼠显著增高,且呈剂量依赖性。氯沙坦及SB202190能抑制AngⅡ诱导的迁移活性。AngⅡ诱导SHR外膜成纤维细胞P38MA：PK的磷酸化,呈剂量和时间依赖性;该作用能够被氯沙坦、SB202190抑制。结论AngⅡ诱导SHR大鼠血管外膜成纤维细胞迁移活性增强,该过程涉及P38MAPK信号途径。     

p38和CARP的表达与大鼠心肌梗死后心肌重塑的关系

目的探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶（p38）和心锚重复蛋白（CARP）的表达与大鼠心肌梗死（MI）后心肌重塑的关系。方法结扎大鼠冠脉前降支致MI,术后2 h存活大鼠随机分为MI组、p38抑制剂SB203580组（SB组）和假手术组（Sham组）。测定各组第1、7和28天左心室质量指数（LVWI）、心肌细胞横切面面积（CSA）。RT-PCR法测定p38和CARP在心脏的表达。结果与Sham组相比,MI组LVWI和CSA在第7、28天时明显增加（P均〈0.05）,各时间点磷酸化p38（p-p38）表达均明显升高（P均〈0.05）,CARP在第1、7天时表达明显升高（P均〈0.05）。与MI组相比,SB组LVWI在第7天时明显降低（P〈0.01）;CSA在第1天时增大（P〈0.01）,第7、28天时明显缩小（P均〈0.01）;p-p38在第1天时表达降低,CARP在第7天表达降低（P〈0.01）。结论MI后早期p38和CARP即被激活,并促进随后心肌重塑的发展,抑制p38可以抑制CARP,改善心肌重塑。     

吡格列酮对L6肌细胞脂联素和葡萄糖转运蛋白4表达的影响及其机制研究

建立棕榈酸诱导的大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型后,以吡格列酮、c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580进行干预.应用Western 印迹法检测脂联素、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达和JNK、p38MAPK磷酸化水平.结果显示,吡格列酮可显著增加胰岛素抵抗状态下L6细胞p38MAPK磷酸化、脂联素和GLUT4蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01),降低JNK磷酸化水平(P＜0.01).阻断p38MAPK信号通路后,吡格列酮上调L6细胞GULT4蛋白表达的效应显著降低(P＜0.01),而阻断JNK信号通路却无显著影响(P＞0.05).     

内皮素-1诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化的可能机制

目的:探讨内皮素-1(ET-1)是否可诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化(TEMT)及可能的分子机制.方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)并进行分组;倒置显微镜观察细胞的形态变化;Western印迹法检测细胞E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)及磷酸化-p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞E-cadherin及α-SMA mRNA的表达. 结果:ET-1可诱导细胞由鹅卵石样变为梭形,下调E-cadherin表达,上调α-SMA、p38 MAPK及p-p38MAPK表达,增强p38MAPK活性(P＜0.05),而内皮素A受体拮抗剂BQ123能明显抑制这些变化(P＜0.05).p38MAPK特异性抑制剂SB203580可抑制ET-1诱导的细胞梭形性变,ET-1诱导的E-cadherin、α-SMA及p-p38MAPK表达改变及p38MAPK活性改变(P＜0.05),但对p38MAPK表达无明显影响(P＞0.05). 结论:ET-1可能通过激活肾小管上皮细胞p38 MAPK通路,下调E-cadherin的表达,同时上调d-SMA的表达,从而诱导肾小管上皮细胞转分化.     

血吸虫虫卵主要抗原P38分子的研究进展

P38是血吸虫虫卵的主要抗原，其重要性越来越受到人们的重视。本概述了P38诱导的细胞免疫、体液免疫、肉芽肿形成及其表位鉴定了分子克隆方面的研究进展。     

活性维生素D3对UUO模型大鼠P38MAPK信号通路的影响

目的探讨活性维生素D 3对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响及其机制。方法54只雄性SD大鼠随机分为UUO模型组、假手术组、活性维生素D 3干预组,其中36只SD大鼠建立UUO模型,活性维生素D 3干预组在建模起给予活性维生素D 30.5μg/d灌胃,分别于术后3、7、14 d各处死6只大鼠,免疫组化观察肾小管间质损害程度;Western印迹法检测P38MAPK及磷酸化P38MAPK蛋白表达量。结果与假手术组相比,UUO模型组磷酸化P38MAPK蛋白表达量随时间延长显著增加(P<0.01);活性维生素D 3干预组7 d、14 d磷酸化P38MAPK蛋白表达量较UUO模型组表达显著减少(P<0.05);P38MAPK蛋白表达量各组差异无统计学意义。结论活性维生素D 3抑制UUO大鼠肾组织中P38MAPK信号通路的激活,延缓肾间质纤维化。     

P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路与肝星状细胞

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated proteinkinase, MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一, 是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶, 在细胞的生长、发育、分化等方面发挥重要作用,P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)是其中的一个亚类. 肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝纤维化形成过程中主要的效应细胞, 本文主要讨论P38 MAPK信号通路及其在肝星状细胞中发挥的作用.     

活化蛋白1在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用

目的观察活化蛋白1(AP-1)在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组和实验组,实验组包括22.0 mmol/L D-葡萄糖组(高糖组)、P38MAPK-shRNA慢病毒转染组、P38MAPK信号转导阻断剂组、无关shRNA转染组、AP-1抑制剂SP600125组。采用TUNEL和流式细胞术检测细胞凋亡,用EMSA检测MC3T3-E1细胞AP-1的活性。结果与正常对照组相比,高糖组MC3T3-E1成骨细胞P38MAPK表达、AP-1活性、细胞凋亡显著增加。P38MAPK-shRNA慢病毒转染组和P38MAPK信号转导阻断剂组MC3T3-E1细胞AP-1活性较高糖组分别下降57.9%(P0.01)和45.6%(P0.05)。AP-1抑制剂组MC3T3-E1细胞凋亡率较高糖组下降39.7%(P0.01)。结论高糖通过激活P38MAPK增加AP-1活性,诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡,抑制AP-1活性后高糖诱导的MC3T3-E1细胞凋亡显著下降。