CpG ODN增强乙型肝炎表面抗原免疫小鼠的抗体产生

目的：探讨合成含CpG基序的寡核苷酸（CpG ODN)对重组乙型肝炎表面抗原（rHBsAg)及乙型肝炎疫苗增强小鼠特异性抗体产生的效应。方法：采用非纯系（Km)及纯系（Balb/c)小鼠作为免疫对象，经后腱胫骨前肌免疫2次，ELISA法检测血清乙型肝炎表面抗体（抗－HBs)效价。结果：加CpG ODN组，其抗-HBs效价均较单独注射rHBsAg和疫苗组明显增高，持续时间长，且纯系鼠的抗体效价明显高于非纯系鼠。结论：CpG ODN对小鼠抗－HBs产生具有增强作用，具与疫苗中的铝佐剂有协同效应。     

日本血吸虫TCTP编码基因DNA免疫的效果评价

目的评价pEGFP—TCTP真核重组质粒联合免疫佐剂CpG诱导小鼠保护性免疫的效果。方法构建日本血吸虫TCTP真核重组质粒．将pEGFP—Tc口注射入BABL／c小鼠，采用ELISA法检测免疫小鼠血清中IFN-γ水平；尾蚴攻击感染后45d处死小鼠，收集成虫和虫卵，计算减虫率和减卵率；小鼠肝脏送病理切片，计算虫卵肉芽肿的数量。结果TCTP DNA免疫保护性效果显示：实验组与阴性对照组相比，显示出一定的保护性效果．TCTP组的减虫率和减卵率分别为43．91％和53．48％．与GST组效果相似。DNA免疫后及感染后期，TCTP组与PBS对照组血清IFN-γ水平有显著性差异（P〈0．05）；攻击感染前后组间比较发现，GST组和GST＋CpG组有显著性差异（P〈0．05），提示CpG显著提高了DNA免疫的效果。结论SjTCTP DNA免疫能诱导较明显的保护性Thl免疫应答。CpG基序可以有效的诱导保护性Th1免疫应答，是一种有效的DNA免疫佐剂。     

CpG ODN联合乙型肝炎疫苗与乙型肝炎疫苗免疫效果对比研究

目的探讨CpG ODN乙型肝炎疫苗与市售乙型肝炎疫苗对Balb/c小鼠的免疫作用效果。方法将乙肝疫苗、乙肝疫苗+100μgCpG ODN分别肌肉注射到4～6周龄,16～18g Balb/c小鼠体内,于第1次免疫后28d以同样剂量加强免疫1次。分别于第1次免疫后28、42、63 d收集小鼠血清,用ELISA方法检测抗HBs IgG抗体。结果实验组产生的抗HBs IgG与对照组HBsIgG相比P<0.05,具有显著性差异。28、42、63 d抗HBs IgG分别是对照疫苗的114倍、4.73倍、5.41倍以上。结论 CpG ODN能够显著增强小鼠对乙肝疫苗的免疫应答,在较短时间内显著的提高乙肝抗体的产生水平,免疫效果是乙肝疫苗的5倍以上。     

HBV与HCV融合DNA疫苗的构建及其体液免疫应答

目的 构建含乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原基因（S区基因）与丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原基因（C区基因）的嵌合真核表达载体,观察preS1和preS2基因对HBV表面抗原及HCV核心抗原体液免疫的影响。方法 用PCR方法,分别扩增HBV S区基因和HCV C区基因。将S区基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,酶切鉴定后,大量提取质粒并免疫Balb/c小鼠,用ELISA法检测抗HBs和抗HCV抗体。结果 成功地扩增出目的基因片段,克隆后酶切鉴定结果正确,序列分析与文献报告相一致。免疫后检测到抗HBs和抗HCV抗体。preS1与preS2基因对构建的融合DNA疫苗的体液免疫应答有一定的抑制作用。抗HBs抗体的产生低于只含S基因的真核表达载体;preS1基因对抗HCV抗体的产生具有抑制作用,而preS2无影响。结论 不同长度的HBV S区基因可影响抗HBs和抗HCV抗体的产生。     

重组乙型肝炎病毒变异s基因疫苗诱导小鼠产生特异性体液免疫应答

目的：构建乙型肝炎病毒(HBV)变异s基因真核表达载体，检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。方法：利用限制性内切酶定位克隆构建s基因nt587 G→A的真核表达载体pcMV-S2．S 145R(PR).用其转染人肝癌细胞系Hep G2后，用EIA、EILISA及免疫细胞化学法，观察其抗原性。以重组变异型s基因真核表达载体(PR)和载体pcDNA3．0分别免疫C57BL／6小鼠各5只。每只小鼠各肌肉注射纯化质粒100μg.用ELISA法检测血清抗-HBs及抗-HBs2抗体的效价。结果：体外实验证实，变异型HBs矩可与抗-HBs结合；PR免疫小鼠可诱导其产生抗-HBs抗体及抗．HBs2抗体，但抗-HBs2抗体的出现早于抗-HBs抗体约1～2wk。结论：HBV变异s基因(nt587G→A)的真核表达载体的表达产物具有良好的抗原性，能够诱导C57BL／6小鼠产生体液免疫应答。     

C3d对基因免疫诱导的HBV特异性体液免疫应答的调节作用

观察补体C3d对HBV基因免疫诱导的特异性体液免疫应答的调节作用 ,为增强HBV基因疫苗免疫效果寻求新途径。将HBV preS2 /S编码基因分别插入真核表达载体TR4 2 1和含有 3拷贝C3d编码基因的TR4 2 1 C3d3质粒 ,构建重组质粒TR4 2 1 preS2 /S和TR4 2 1 preS2 /S C3d3。采用肌肉注射法对BALB/c小鼠实施基因免疫 (10 0 μg/ 10 0 μl/只小鼠 ) ,以空质粒为对照 ,定期采集血清。ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗 HBs IgG及其亚型 ,并采用NaSCN竞争ELISA法检测其亲合力。结果表明 ,TR4 2 1 preS2 /S C3d3重组质粒免疫组诱导的特异性抗 HBs IgG水平明显高于TR4 2 1 preS2 /S重组质粒免疫组 (P <0 0 5 ) ;而且TR4 2 1 preS2 /S C3d3重组质粒免疫组诱导的抗 HBs IgG抗体的亲合力 (ED50 :1 375 )显著高于TR4 2 1 preS2 /S重组质粒组 (ED50 :0 875 ) ,但C3d并不改变基因免疫诱导的特异性抗HBs IgG各亚型水平的格局 ,仍以IgG2b和IgG2a为主。提示C3d可增强基因免疫诱导的HBV特异性体液免疫应答 ,并促进特异性抗体亲和力的成熟 ,这为提高HBV基因疫苗的免疫效果提供了新的途径。     

CpG ODN佐剂对乙肝疫苗抗原免疫原性的影响

目的探究CpG ODN佐剂对不同抗原含量乙肝疫苗免疫效果的影响。方法在体液免疫方面不同抗原浓度的CpG ODN与Al(OH)3佐剂乙肝疫苗免疫Balb/c小鼠,于免疫后第2、4、6、8、10周收集血清,检测小鼠体内相对效力ED50和血清中的anti-HBs抗体水平;在细胞免疫方面测定诱导产生IFN-γ水平及IgG2a应答水平。结果 CpG ODN与Al(OH)3佐剂可以有效协同HBs Ag诱导机体产生的抗体滴度达49 427 mIU/ml,抗体效价随时间延长而增加。乙肝抗原减半后双佐剂乙肝疫苗诱导机体产生的特异性抗体滴度可达41 225 mIU/ml,高于无CpG ODN佐剂的铝佐剂疫苗。在诱导细胞分泌方面,对照组诱导产生IFN-γ水平及IgG2a应答水平明显低于所有双佐剂疫苗组。结论 CpG ODN对HBsAg具有良好佐剂活性,并与铝佐剂有协同作用,二者联合应用可以降低乙肝抗原用量并提高疫苗免疫原性。     

DNA免疫诱导小鼠产生抗人心肌肌钙蛋白T抗血清的研究

目的 通过基因免疫诱导BALB／c小鼠产生抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)的抗体应答，并比较不同免疫佐剂、预处理方法对免疫应答的影响。方法 构建cTnT的真核表达质粒pCI-cTnT，大量提取、PEG纯化质粒，通过肌肉注射免疫BALB／c小鼠并加强免疫，每隔2周取血，ELISA法分析抗cTnT的体液应答，免疫印迹检测抗血清的特异性。并比较布吡卡因预处理、CpG ODN核酸佐剂、弗氏不完全佐剂对抗体应答效果的影响。结果 接种pCI-cTnT质粒的小鼠血清中检测出抗cTnT特异性抗体，加强免疫使抗体滴度提高；使用CpGODN后免疫应答增强，弗氏不完全佐剂可明显增强免疫效果，而吡卡因预处理使应答水平下降；初次免疫后14周仍可测得较高的抗体应答。结论 采用含cTnT基因的质粒DNA免疫，成功地诱导小鼠产生抗cTnT的抗体；传统的弗氏不完全佐剂可作为核酸免疫的佐剂使用。     

重组乙肝表面抗原真核表达质粒pVAX-S2S的构建及DNA免疫

目的为探索更安全的乙型肝炎病毒(HBV)DNA疫苗,构建编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒,并观察其诱导BALB/c小鼠产生体液免疫应答情况.方法采用限制性内切酶从重组的真核表达质粒pcDNA-S2S中分离出乙肝表面抗原中蛋白(preS2+S)基因片段,将其亚克隆于pVAX1真核表达载体,酶切鉴定,按不同剂量一次性肌内注射免疫小鼠,ELISA法检测小鼠血清抗-HBs.结果酶切鉴定重组质粒pVAX-S2S为正向插入的阳性克隆.HBVDNA疫苗(pVAX-S2S)高(100μg/只)、中(50μg/只)、低(10μg/只)三组剂量一次性免疫健康BALB/c小鼠,均能在2 w诱导抗-HBs产生,抗体效价随时间延长而增长.血清抗体水平比较,高剂量组(97.83±38.78)mU/ml较中剂量组(45.13±21.12)mU/ml、低剂量组(19.74±11.92)mU/ml差异均具显著性(P＜0.05),以后的4,8 w高、中剂量组间差别缩小,但两者较低剂量组差异均具显著性(P＜0.05)和非常显著性(P＜0.01).结论卡那霉素抗性的重组质粒pVAX-S2S能有效诱导正常小鼠产生体液免疫应答.     

重组弓形虫棒状体蛋白5诱导小鼠的免疫应答及其抗弓形虫感染的保护作用

为探讨重组弓形虫棒状体蛋白5诱导的免疫应答及其免疫保护效应,本研究克隆表达了弓形虫棒状体蛋白5,并分析其诱导的细胞免疫、体液免疫应答和抗弓形虫感染的保护作用。采用PCR方法从刚地弓形虫cDNA中扩增出ROP5基因片段,将该基因片段克隆至pET-28a原核表达载体表达,用重组ROP5蛋白免疫BALB／c小鼠,ELISA检测免疫后小鼠抗体和细胞因子的变化。以强毒型RH株弓形虫攻击感染免疫小鼠,统计小鼠不同时间存活率,评价重组蛋白产生的免疫保护性。结果表明ROP5重组蛋白疫苗免疫BALB／c小鼠诱导机体产生高水平的IgG、IgG1、IgG2a抗体和IFN—y、IL-2及IL-10细胞因子。与PBS及佐剂对照组相比,重组蛋白免疫组小鼠的存活时间明显延长。本实验证实了ROP5重组蛋白免疫BALB／c小鼠能够诱导其产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答,以及一定的抗弓形虫感染保护作用。     

C3d-P28增强乙型肝炎病毒特异性基因免疫效果的研究

目的　观察补体C3d P2 8对基因免疫的调节作用及其不同拷贝数对调节作用的影响 ,为增强基因免疫效果寻求新方法。方法　PCR法获得补体C3d P2 8编码基因并以头尾串连方式将1～ 4拷贝C3d P2 8编码基因克隆至pVAON33,构建pVAON33 P2 8.[1～ 4 ]重组质粒 ,然后将HBV preS2 S编码基因分别插入pVAON33和pVAON33 P2 8.[1～ 4 ]质粒获得pVAON33 S2 S和pVAON33 S2 S P2 8.[1～ 4 ]重组质粒。肌肉注射各重组质粒DNA(每只 10 0 μg 10 0 μl)初次免疫小鼠 ,并以pVAON33为对照 ;12周后皮下注射HBsAg蛋白加强免疫各组小鼠 ,ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗 HBs IgG。结果　pVAON33 S2 S重组质粒免疫小鼠可诱导产生特异性抗 HBs IgG ,含不同拷贝C3d P2 8编码基因的重组质粒可诱导更高的特异性抗体 ,其中pVAON33 S2 S P2 8.4重组质粒诱导的抗体水平最高 (P <0 .0 1)。蛋白加强免疫后 ,含C3d P2 8编码基因重组质粒免疫组抗 HBs IgG迅速上升 ,并明显高于pVAON33 S2 S重组质粒免疫组 (P <0 .0 5 ) ,pVAON33 S2 S P2 8.4重组质粒诱导的抗体仍维持最高水平。结论　不同拷贝的C3d P2 8能不同程度地增强HBV preS2 S基因免疫诱导的特异性体液免疫及其蛋白加强后的回忆反应 ,其中 4拷贝C3d P2 8的增强作用较为显著。     

小鼠GM-CSF基因真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定

目的：构建小鼠GM－GSF基因的高效真核表达载体，筛选导入该载体后高水平表达GM－CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA，并探讨转GM－CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法。方法：PCR扩增小鼠GM－CSF cDNA3‘端770bp的片段，将其插入真核表达载体pcDNA3；用电穿孔法将构建的载体导入小鼠淋巴瘤细胞系RNA，有限稀释法制备单个细胞克隆，经RT－PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达GM－CSF的RNA克隆，该克隆细胞经丝裂霉素灭活后免疫小鼠以诱导其产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力。结果：构建的重组质粒含有预期片段，插入方向正确，核酸序列无误，且获得了高表达GM－CSF的RMA克隆，将其用丝裂霉素灭活免疫小鼠后使它们产生了抗肿瘤免疫保护力。结论：转GM－CSF基因瘤苗可能作为有效的抗T淋巴细胞瘤瘤苗。     

质粒DNA促进HBsAg-抗HBs复合型疫苗诱生的免疫应答的研究

目的　研究HBsAg 抗HBs 质粒DNA复合型疫苗的免疫原性及其诱生细胞免疫应答的类型。方法　分别以HBsAg、HBsAg 抗 HBs(IC)、pI/AmpHBs、IC pI/AmpHBs及IC pI/Amp免疫小鼠 ,检测抗 HBs的效价 ,分析抗 HBsIgG亚类 (ELISA) ;取免疫小鼠脾细胞 ,体外抗原刺激 ,用竞争性RT PCR方法检测IFN γ及IL 4mRNA转录水平。结果　IC pI/AmpHBs诱生的抗 HBs效价明显高于IC或pI/AmpHBs单独免疫组 ,其IgG2a/IgG1比值高于IC免疫组 ,而低于pI/AmpHBs免疫组。IC pI/AmpHBs免疫小鼠脾细胞在HBsAg刺激下 ,IFN γmRNA转录水平明显高于其他免疫组 ,其IFN γmRNA的T/C(目的片段Target/竞争片段Competitor)比值为IC免疫小鼠脾细胞的 10倍 ;IC pI/AmpHBs免疫小鼠脾细胞IL 4mRNA转录水平亦高于其他免疫组 ,其IL 4mRNA的T/C比值为IC免疫小鼠脾细胞的 2倍。结论　HBsAg 抗HBs 质粒DNA复合型疫苗在增强体液免疫应答的同时可诱导脾细胞IFN γ的表达水平增高。     

人工合成免疫刺激DNA联合HBsAg DNA疫苗在HBV转基因鼠的免疫应答研究

目的 :探讨免疫刺激DNA序列联合基因免疫在HBV转基因鼠的免疫应答。方法 :用人工合成硫代修饰的免疫刺激DNA寡核苷酸 (CpGODN)与HBVS区基因真核表达载体 (V HBs)联合免疫HBsAg转基因鼠 ,通过ELISA观察小鼠血清HBsAg及抗 HBs抗体水平 ,并用免疫组化 (SP法 )及病理HE染色观察小鼠肝组织HBsAg表达量的改变及肝组织炎症活动度。结果 :V HBs联合CpGODN组 6只免疫鼠中有 2只血清抗 HBs抗体阳性 ,其平均效价为 (5 6 2 1± 15 16 )mU ml,血清HBsAg浓度在免疫后第 8周时有 2只转阴 ,而单用V HBs组及V 10 12对照组小鼠血清抗 HBs抗体均阴性、HBsAg含量无明显降低。V HBs +CpGODN组肝组织HBsAg的表达量低于V HBs组及对照组 ,并可见大量炎细胞浸润 ,炎症组织活动度积分明显高于V HBs组及对照组。结论 :CpGODN联合V HBs可增强其免疫应答及抗病毒效应。     

HBsAg重组腺病毒转染的树突状细胞诱导BALB/c小鼠抗HBV免疫的研究

目的 研究HBsAg重组腺病毒转染的小鼠树突状细胞（DC）体内外免疫刺激活性和诱导小鼠抗HBV免疫的特点。方法 BALB／c小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC，转染HBsAg重组腺病毒Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后，流式细胞术分析DC的表型，混合淋巴细胞反应（MLR）检测DC的刺激活性；或与pcDNA3．1（＋）-S质粒分别免疫小鼠后，LDH法测定脾细胞CTL活性，放免法检测血清抗．HBs；流式细胞术分析体外自体MLR中及免疫后小鼠脾脏T细胞内细胞因子。结果 DC／Ad-S、DC／HBsAg和各对照组DC之间的表型和MLR差异无统计学意义，并均刺激TH和Tc分泌IFN-γ。DC／Ad-S免疫后2周能诱导比DNA疫苗更强产生IFN-γ的TH（P〈0．05），以及比DC／HBsAg和DNA疫苗更强分泌IFN-γ的Tc（均P〈0．01）和特异性CTL（P〈0．05，P〈0．01）。但DC／Ad-S和DC／HBsAg诱导的CTL反应及Tc分泌IFN-γ在免疫后4周均明显减弱，且诱导抗．HBs作用弱于DNA疫苗。结论 HBsAg重组腺病毒转染的DC比HBsAg冲击的DC及DNA疫苗能诱导更强的TH1/Tcl（Ⅰ型）细胞免疫和特异性CTL反应，是诱导抗HBV细胞免疫的有效刺激细胞。     

脂质体介导弓形虫SAG1与SAG3复合基因诱导小鼠免疫应答研究

目的评价弓形虫SAG1与SAG3基因真核表达质粒DNA免疫小鼠的免疫应答效果。方法以PCR方法扩增出SAG1与SAG3目的基因片段,并插入载体pEGFP-N3以构建重组质粒pE- SAG1／SAG3,瞬时转染细胞Cos-7。质粒pESAG1／SAG3以10μg剂量,脂质体介导肌肉注射BALB／c小鼠,免疫3次,最后一次免疫后4周,观察体液和细胞免疫。RT-PCR方法检测注射部位目的基因的转录;斑点杂交方法检测目的基因是否与小鼠染色体基因组整合。结果质粒pESAG1／SAG3转染细胞后观察到绿色荧光;Western blot显示pESAG1/SAG3表达识别条带在相对分子质量(Mr)66．2×103附近。小鼠免疫后,血清产生抗弓形虫速殖子抗体,诱导IFN-γ及IL-2水平高于对照组。RT-PCR显示首次免疫15 d后,目的基因在肌肉组织中仍有转录,斑点杂交显示目的基因未与小鼠的基因组发生整合,混合质粒注射的小鼠抗弓形虫感染的存活时间延长。结论脂质体介导弓形虫SAG1与SAG3复合编码基因质粒接种小鼠能明显诱导体液和细胞免疫应答。     

含CpG序列PRRSV ORF5基因真核质粒对猪体免疫作用研究

目的：为了增强猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）DNA疫苗免疫效力,以pVAX1为真核表达载体,以PRRSV ORF5基因为目的基因,构建了含有CpG和PRRSV ORF5的真核表达质粒CpG-pVAX1-ORF5,并在猪体进行了免疫试验。方法：检测猪PRRSV的特异性抗体滴度、IL-2水平以及淋巴细胞增殖反应（MTT法）水平,并做了攻毒保护试验。结果：试验结果表明本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导产生针对PRRSV的体液免疫与细胞免疫（显著的淋巴细胞增殖反应水平）。攻毒结果表明CpG-pVAX1-ORF5组能够有效地抵抗经鼻攻毒,可以保护猪轻微病毒血症,比对照组减少80%,也不表现临床症状,对肺的损害能提供部分保护。结论：CpG的加入可使免疫猪的病变减轻或消失。从而表明含有CpG-ODN能作为PRRSVDNA疫苗的有效佐剂。     

大肠杆菌DNA对BXSB小鼠的抗dsDNA抗体产生的影响

抗dsDNA抗体是系统性红斑狼疮(SLE)的血清学标志,其产生机制尚不清楚。CpG基序是细菌、病毒等微生物基因组内含有的以CG为核心的功能片段,体内外证实CpG基序具有强烈的免疫激活功能。本实验评价了CpG对BXSB狼疮小鼠产生抗dsDNA抗体的影响,旨在为SLE的治疗学和发病学提供新的线索。提取含有丰富CpG基序的大肠杆菌DH5α(由武汉大学生命科学院胡远扬教授惠赠)DNA ,经S1核酸酶纯化,纯化的dsDNA给予HpaⅡ内切酶消化,然后进行CpG序列分析。将纯化的大肠杆菌dsDNA (nECDNA5 0 μg)、小牛血清白蛋白(75 μg)和完全弗氏佐剂(CFA …     

双顺反子载体构建及其在基因联合免疫中的应用

目的 为了便于多价DNA疫苗的制备和基因表达的研究.方法 以pcDNA3.0为基础构建了pcDNA3.0BA双顺反子载体,将HBV preS2S与HCV pc154基因插入pcDNA3.0BA构建了单价和双价质粒.质粒转染Cos-7细胞瞬时表达,并经肌肉免疫BALB/c小鼠测定抗体应答和淋巴细胞增殖能力.结果 pcDNA3.0BA全长为6.4kb,具有两个外源基因表达单元,其调控元件均为CMV启动子和BGH pol A;两个表达单元中多克隆位点单酶切分别为：MCS1为EcoRⅤ、Not Ⅰ、Xho Ⅰ;MCS2为：Kpn Ⅰ、BamHⅠ、EcoRⅠ.双价质粒在Cos-7细胞中preS2S与HCV pc154两个基因都同时表达,诱导小鼠产生了抗HBs和HCV核心蛋白抗体,抗体效价和淋巴细胞对抗原刺激的增殖能力单价和双价质粒相比差异不显著.结论 pcDNA3.0BA双顺反子载体可以共表达多个基因,并诱导产生免疫应答.     

小鼠4-1BBL cDNA的克隆和表达及其抗肝癌的免疫作用

目的 :克隆小鼠 4 1BBL基因 ,构建其真核表达载体 ,并观察其在抗肝癌免疫中的作用。方法 :取C5 7BL/6小鼠脾细胞 ,经PHA诱导后 ,以RT PCR克隆 4 1BBLcDNA ,测序 ,构建真核表达质粒 pcDNA3.1( ) m4 1BBL。以重组体转染小鼠肝癌细胞Hepa1 6 ,经G4 18筛选后 ,以RT PCR、间接免疫荧光及流式细胞仪 ,检测m4 1BBL以获得稳定高表达克隆。然后将其制成肿瘤细胞疫苗与同源小鼠脾淋巴细胞混合培养 ,采用MTT比色法测定淋巴细胞的特异性杀伤活性。结果 :从小鼠脾细胞中克隆到m4 1BBLcDNA ,经测序完全正确。所构建的真核表达质粒pcDNA3.1( ) m4 1BBL ,在小鼠肝癌细胞Hepa1 6中获得稳定高效表达。与野生型Hepa1 6细胞相比较 ,m4 1BBL基因转染的Hepa1 6细胞疫苗能较有效地诱导淋巴细胞产生针对野生型Hepa1 6细胞的特异性杀伤活性 (P <0 .0 1)。结论 :将m4 1BBL基因导入肝癌细胞中表达 ,能提高其免疫原性 ,诱导有效地抗肝癌免疫应答