2018—2020年多中心耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药及分布特点

摘要：目的 分析全国11家三级医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的分布和耐药情况,为预防和控制医院感染,合理使用 抗生素提供依据。方法 回顾性分析2018—2020年,全国11家三级医院临床分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌分布及耐药性特 点;药敏分析采用WHONET5.6软件。结果 2018—2020期间11家三级医院临床各类标本中共检出鲍曼不动杆菌17599株,检 出率8.05％,其中耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)检出11508株,占检出鲍曼不动杆菌的65.39%;11家医院中10家医院检出 CRAB在鲍曼不动杆菌中的占比>50%;检出CRAB患者中以70岁以上患者最多,占全部患者的28.9%~35.3%;CRAB主要分离自 呼吸道标本(78.59%)、脓/分泌物标本(5.81%)及血培养标本(4.02%);CRAB对常用抗菌药物耐药性都处于较高水平,5种抗生素 耐药率在95%以上,2种抗生素耐药率在85%以上,妥布霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、复方磺胺甲恶唑耐药率介于61%~81%之 间,对米诺环素相对较为敏感。结论 整体来看鲍曼不动杆菌中CRAB占比一直较高,各地区各级医院应继续做好医院感染的 监测,加强对多重耐药菌的管理工作,指导临床准确用药,延缓耐药菌上升趋势。     

膜蛋白新机制参与的体诱导鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素

目的:通过研究膜蛋白改变与碳青霉烯类抗生素耐药,阐述膜蛋白参与的耐药机制,更好地为临床选择抗生素提供合理建议,同时为新药开发提供参考。方法:采用琼脂纸片扩散法(K-B法)及琼脂稀释法从76株广泛耐药鲍曼不动杆菌中筛选出8株仅对多黏菌素敏感、1株全敏感临床株。采用PAβN外排泵抑制试验检测其外排泵表型。结果:外排泵抑制剂(PAβN)抑制试验显示受试8株菌中4株亚胺培南最低抑制浓度(MIC)值下降≤1/4,而美罗培南MIC值下降至1/4及以下。耐药菌株和敏感菌株差异膜蛋白组学鉴定出肌肉(Car),外膜蛋白(Omp A)和推测分子量为41 ku外排泵膜蛋白。结论:本次试验中膜孔蛋白Car O表达缺失可能参与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯抗生素耐药,外排泵过度表达可能参与细菌对美罗培南的耐药。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌耐药机制研究进展

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)作为医院感染中最重要的致病菌之一,因抗生素不合理使用等多个因素使耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(Carbapenem resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)检出率逐年上升,导致交叉耐药或多重耐药。其耐药机制主要包括碳青霉烯酶产生、外膜孔蛋白改变、外排泵活性增强、青霉素结合蛋白位点改变及整合子机制。本文就耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌耐药机制研究进展做一综述,为临床抗感染治疗及新药研制提供参考。     

产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌检测及耐药性分析

目的 了解鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶状况及耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 2011年7-12月南京医科大学第一附属医院住院患者标本中分离出鲍曼不动杆菌361株,对其来源、科室分布及耐药率进行统计分析,药物敏感试验采用K-B法,用改良Hodge试验检测鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶的情况.结果 分离出的361株鲍曼不动杆菌中耐亚胺培南和美罗培南菌株328株,改良Hodge试验阳性株278株(84.8％).临床常用的16种抗菌药物中对多粘菌素E耐药率8.4％,米诺环素耐药率47.5％,对其他14种抗生素耐药率均＞60％.结论 鲍曼不动杆菌耐药性升高主要是产碳青霉烯酶;多粘菌素对产碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌有较好的抑菌作用.     

158株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的分布及耐药性分析

目的：了解耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染的分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。方法对2013年1月～12月医院临床各类标本培养中检出的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）来源和对抗菌药物的耐药率进行分析。结果2013年1月～12月医院临床各类标本共培养分离出291株鲍曼不动杆菌,检出CRAB 158株,占54.3%。158株CRAB中,呼吸道标本146株,占92.4%。CRAB除对头孢哌酮舒巴坦、左氧氟沙星敏感外,对亚胺培南、美罗培南的耐药率高达98.6%,对其他抗菌药物耐药率也极高。结论 CRAB的感染以呼吸道为主,对于CRAB感染的治疗,应根据我院细菌耐药监测结果和细菌药敏试验结果合理选择抗菌药物。     

耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌耐药机制的研究

目的：调查和研究南昌地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法：收集南昌大学第二附属医院2012年间临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（CRAB）非重复株。Vitek-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,K-B法进行药敏试验,三维试验检测AmpC酶,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,采用聚合酶链反应（PCR）扩增耐药基因,并对阳性产物进行双向测序分析,确定其基因型。结果：84株CRAB对临床常用的12种抗菌药物有9种耐药率〉90%,对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低（44.0%）,所有菌株均为多重耐药株。三维试验在83株菌（98.8%）中检出AmpC酶,协同试验未检出产金属酶菌株。所有菌株均携带blaOXA-23、blaOXA-51及blaADC基因,1株携带blaOXA-58基因,未检测到blaOXA-24及金属酶基因（blaIMP、blaVIM-2、blaNDM-1及blaSIM-1）;外排泵编码基因adeB、调控基因adeS和adeR的检出率分别为98.8%（83/84）、81.0%（68/84）和67.9%（57/84）;所有菌株均检出外膜蛋白carO基因;69株（82.1%）检测出I类整合酶基因（intI1）,全部菌株携带插入序列ISAba1。结论：南昌地区CRAB耐药性及多重耐药性非常严重,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制为产OXA-23型碳青霉烯酶,AmpC酶、外排泵AdeABC、I类整合子和插入序列ISAba1,可能与CRAB的多重耐药性密切相关。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的主动外排泵基因对β-内酰胺类抗菌药物耐药性的影响

目的 探讨对β-内酰胺类抗菌药物耐药的多重耐药鲍曼不动杆菌主动外排泵基因在耐药机制中表达情况.方法 多重耐药鲍曼不动杆菌96株,分析其对9种β-内酰胺类抗菌药物的耐药性.以加入泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)后最低抑菌浓度(MIC)降低至≤1/4为标准,筛选出34株外排泵表型阳性的鲍曼不动杆菌,用聚合酶联链反应(PCR)扩增法对其行外排泵蛋白基因adeB进行检测和分析.结果 多重耐药鲍曼不动杆菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为92.3％,86.6％,83.0％,70.8％,68.3％;对氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为90.1％,77.5％,72.4％和67.3％.34株外排泵表型阳性的鲍曼不动杆菌检测到adeB基因有33株,检出阳性率97.06％.对33株鲍曼不动杆菌的外排泵基因adeB进行测序,经比对所测序列与Genebank中序列同源性为100.0％.结论 主动外排泵基因是多重耐药鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的一个重要因素.     

重症监护病房耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌6种耐药基因检测

目的 研究医院重症监护病房(intensive care unit,ICU)患者感染鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因,以指导临床合理用药,控制ICU病房感染暴发流行。方法 采用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定药敏系统对细菌进行鉴定及药敏试验,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法检测6种常见碳青霉烯酶耐药基因(blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-23、blaOXA-24和blaOXA-58)。结果 38株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对15种临床常用青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类及β-内酰胺酶抑制剂类抗菌药物全部耐药,对头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素的耐药率分别为92.1%和81.6%,仅对替加环素保持较高敏感性,敏感率为94.7%。38株CRAB中携带blaOXA-23基因共36株(94.7%),未检出blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-24和blaOXA-58基因。结论 我院ICU分离耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物耐药广泛,携带blaOXA-23基因是可能该院ICU耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因。临床医生应合理使用抗菌药物,加强细菌耐药性监测,防止耐药菌株的产生和进一步传播。     

鲍曼不动杆菌耐药表型与外排泵基因表达水平的研究

目的 探讨鲍曼不动杆菌临床分离株对常用抗菌药物的耐药性及与外排泵adeA基因表达水平之间的关系.方法 琼脂二倍稀释法检测鲍曼不动杆菌临床分离株对17种常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);PCR法扩增外排泵编码基因adeA:实时荧光定量RT-PCR(Real Time Fluorescent Quantitative RT-PCR)法检测adeA基因的mRNA表达水平.结果 药敏结果显示86株鲍曼不动杆菌对多粘菌素B全部敏感(100%),其次是美罗培南(73.2%)、亚胺培南(70.9%).耐药率最高的是庆大霉素(84.9%),其次为美罗西林(83.7%)和环丙沙星(79.1%).55株菌为多重耐药株(64%),其中5株(5/86)对多粘菌素B外的所有抗菌药物耐药(5.8%).adeA的检出阳性率为84.9%(73/86),Real Time RT-PCR结果显示多重耐药菌株adeA基因的mRNA相对表达量均高于敏感菌株,其中3株相对表达量为敏感菌株平均表达水平的30倍以上.结论 鲍曼不动杆菌临床分离株耐药情况严重,其主动外排系统adeA基因表达增强在多重耐药性形成中起重要作用.     

某院2011年12月-2012年12月ICU亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型的研究

目的:对重症监护病房(ICU)临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,为临床防治提供理论依据。方法:收集2011年12月-2012年12月青岛市海慈医疗集团ICU临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌65株,采用K-B琼脂纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、IMP、VIM 6种碳青霉烯酶基因,并对PCR产物进行测序。结果:65株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌除对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、多黏菌素B的耐药率较低外,对其他药物的耐药率均在90%以上。65株扩增出OXA-51基因,56株扩增出OXA-23基因,6株扩增出VIM基因,检出率分别为100%、86.15%、9.23%,OXA-24、OXA-58及IMP均未检出;PCR产物测序表明与GenBank相关基因同源性为100%。结论:该单位ICU亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药现象严重;OXA-23型碳青霉烯酶的产生是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制之一。     

鲍曼不动杆菌多重耐药性与外排泵机制研究

目的分析江苏大学附属医院鲍曼不动杆菌外排泵对其耐药性形成的作用。方法收集2012年8月至2013年2月江苏大学附属医院住院患者44株鲍曼不动杆菌。应用K-B纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌对抗生素的敏感性。经Realtime PCR法检测外排泵基因ade B m RNA水平。扩增外排泵调控基因ade R和ade S全长片段并测序比对。结果在44株鲍曼不动杆菌中,27株为多重耐药株且对头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦、米诺环素较为敏感。耐药菌株ade B m RNA表达水平明显高于敏感株,且发现ade R的2639位碱基发生A→G突变,其对应的219位氨基酸则呈现AAA(赖氨酸)→GAA(谷氨酸)改变,而ade S无有义突变。结论鲍曼不动杆菌的多重耐药性可能与ade ABC外排泵系统的过表达相关,且其表达可能与调控基因ade R的突变相关。     

3株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌临床株耐药机制的研究

目的 研究鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）对碳青霉烯耐药的分子机制。方法 采用琼脂纸片扩散法（KB法）及微量肉汤法筛选出3株对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌临床株，PCR扩增blaox-23基因和测序、提取外膜蛋白及进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。结果 3株耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌具有多重耐药性；耐药基因PCR扩增和测序证实3株耐药菌均有blaOX-23 基因；其中1株耐药菌AB173的外膜蛋白电泳条带在28．8ku处出现明显缺失，其余2株耐药菌在该条带处与敏感菌相比较无明显差异。结论 本次试验中对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌全部含有blaoxhm基因，其中一株耐药菌还出现了外膜蛋白孔道的缺失可能与其多重耐药性有关。     

191株鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌的医院感染分布及耐药状况,为临床治疗提供依据。方法对本院2009年6月~2010年6月分离的191株鲍曼不动杆菌,采用标准纸片扩散法（K-B法）进行药物敏感性试验,并用WHONET 5.4软件进行统计分析。结果 191株鲍曼不动杆菌中,痰液分布率最高,占87.4%（167/191）。药敏结果显示,鲍曼不动杆菌对多黏菌素B最为敏感,敏感率为99.5%,其次是米诺环素和哌拉西林/他唑巴坦,分别为71.7%和56.0%;耐药率最高的抗生素是头孢曲松,为94.2%,对复方新诺明、哌拉西林、替卡西林/克拉维酸、美罗培南和亚胺培南的耐药率分别达到了74.3%、73.2%、72.8%、67.9%和66.0%。结论鲍曼不动杆菌是医院感染主要病原菌之一,并且对多种抗菌药物耐药,且多重耐药性明显。实验室应加强耐药性监测,以指导临床合理使用抗生素,提高疗效和减缓耐药株的产生。     

鲍曼不动杆菌的耐药性及产ESBL和碳青霉烯酶分析

目的:分析我院鲍曼不动杆菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和产碳青霉烯酶情况.方法:K-B法进行药物敏感试验,运用表型确证试验检测ESBL,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶.结果:135株鲍曼不动杆菌中,对亚胺培南和关罗培南的耐药率高达72.6％,对阿米卡星、头孢噻肟等10种抗菌药物耐药率为61.5％～100.0％,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为34.8％,其次是左氧氟沙星耐药率为54.1％.其中有22株检出ESBL占16.3％;46株检出碳青霉烯酶占34.1％.结论:我院鲍曼不动杆菌耐药率高,应加强细菌检测和药敏试验,指导临床合理应用抗茵药物.对于临床经验用药建议选用头孢哌酮/舒巴坦;鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药可能与产ESBL和碳青霉烯酶有关.     

合肥市三家医院鲍曼不动杆菌的耐药特征和碳青霉烯酶基因检测

目的 了解合肥市3家三级医院鲍曼不动杆菌的耐药性特点,分析对碳青霉烯类敏感和耐药的鲍曼不动杆菌携带碳青霉烯酶基因情况。方法 利用Whonet 5.6数据库对2018年1月—2020年12月合肥市3家三级医院分离的鲍曼不动杆菌菌株进行回顾性分析,统计3年间鲍曼不动杆菌菌株数量和药敏情况;随机挑取各家医院冻存的对碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌44株(耐药组)及敏感菌15株(对照组),利用PCR技术检测12种碳青霉烯酶基因(bla_OXA-23、bla_OXA-24、bla_OXA-51、bla_OXA-58、bla_OXA-143、bla_OXA-235、bla_IMP、bla_VIM、bla_SIM、bla_NDM、bla_TEM、bla_KPC)的携带情况。结果 临床分离的鲍曼不动杆菌菌株约有70%对碳青霉烯类药物耐药。2020年分离的鲍曼不动杆菌对头孢...     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶基因的检测

目的 研究本院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)中碳青霉烯酶基因流行状况,为治疗和控制其感染提供参考依据。方法 收集抚州市第一人民医院2015—2016年间临床分离的CRAB非重复株,Vitek-2 Compact型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏实验,改良Hodge试验进行碳青霉烯酶初筛,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,采用聚合酶链反应(PCR)扩增耐药基因。结果 69株CRAB对替加环素耐药率为1.4%,复方磺胺甲噁唑耐药率81.2%,其他抗生素耐药率均在90%以上,全部表现为多重耐药。改良Hodge试验阳性55株(80.0%),EDTA协同试验未检出阳性菌株。基因扩增KPC酶基因38株(55%),OXA-23酶基因68株(98.6%),OXA-51酶基因69株(100%),未检测出IMP-1、VIM-1、NDM-1、SIM-1、OXA-24和OXA-58等酶基因。结论 本院69株CRAB耐药性非常严重,OXA-23和OXA-51型酶基因是其携带的主要碳青霉烯酶基因。     

130株鲍曼不动杆菌分布及耐药分析

目的了解我院鲍曼不动杆菌临床分布及耐药性,为临床合理选用抗生素提供参考依据。方法用VITECK-2 compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,并依据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)的标准,用世界卫生组织细菌耐药中心推荐的WHONET5.5进行统计。结果 1年来我院鲍曼不动杆菌分离株在主要集中在重症监护病房(ICU),多重耐药和泛耐药菌株日益增多,头孢哌酮/舒巴坦耐药率为34.37%,亚胺培南和美洛培南耐药率均为73.9%,左氧氟沙星和哌拉西林/他唑巴坦耐药率分别为80.4%、89.0%,阿米卡星耐药率为10.4%,其余抗菌药物耐药率偏高。结论我院鲍曼不动杆菌耐药情况相当严重,应加强对鲍曼不动杆菌的耐药性监测,规范抗生素应用,对降低鲍曼不动杆菌的耐药率,控制院内感染具有重要意义。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药性与毒力基因的相关性分析

摘要：目的 探讨耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药性与毒力基因的相关性。方法 收集2018年11月至2019年11月安徽医 科大学第一附属医院173株非重复的鲍曼不动杆菌菌株,分析其对碳青霉烯类抗生素的耐药性。采用PCR检测耐药相关基因 (blaOXA-23、blaOXA-51、blaKPC、blaOXA-24、blaIMP、blaOXA-58、blaVIM和blaSIM)和毒力基因(cusE、bap、abaI和bfmS)。分析鲍曼不 动杆菌耐药性与毒力基因的关系。结果 经筛选后有84株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌对哌拉西林/舒巴坦、头孢他啶、头孢吡 肟、头孢噻肟、头孢曲松、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星、复方磺胺甲恶唑、米诺环素、替加环 素、亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为95.23%、94.04%、94.04%、96.42%、95.23%、95.23%、84.52%、96.42%、76.19%、 79.76%、97.61%、57.14%、0、100.00%和100.00%;其中检测出带有耐药基因blaOXA-23有76株;带有耐药基因blaOXA-51有84株, 未检测出blaKPC、blaOXA-24、blaIMP、blaOXA-58、blaVIM、blaSIM基因;不同毒力基因的鲍曼不动杆菌均具有较高的耐药性,其中 含有毒力基因abaI和bfmS的鲍曼不动杆菌与不含abaI和bfmS基因的耐药性比较存在明显差异(P<0.05)。结论 本院鲍曼不动杆菌 对碳青霉烯类抗生素耐药严重,主要携带blaOXA-23和blaOXA-51耐药基因。耐药性与毒力基因abaI和bfmS密切相关。     

22株多重耐药鲍曼不动杆菌临床株的外排泵AdeABC和AdeIJK的表达研究

目的 研究鲍曼不动杆菌2个多重药物外排泵AdeABC和AdeIJK在临床株中的表达及与耐药的关系.方法 微量肉汤稀释法检测鲍曼不动杆菌临床株对9种抗菌药物的敏感性,分别提取临床菌株的DNA和RNA进行adeB、adeJ的PCR及RT-PCR扩增,用凝胶扫描半定量分析外排泵的表达情况.结果 22株多重耐药的鲍曼不动杆菌临床株在应用CCCP后,其中3株(13.64%)对头孢他啶的MIC值降至原值的1/4.6株(27.28%)对氧氟沙星的MIC值降至原值的1/4或1/4以下,12株(54.54%)对氯霉素的MIC值降至原值的1/4或1/4以下,22株(100%)对庆大霉素的MIC值降至原值的1/4以下.22株多重耐药临床株和4株敏感株进行基因adeB、adeJ的PCR扩增,均可见预期扩增产物.RT-PCR结果10株多重耐药株为adeB相对表达水平(灰度)1.211～9.169,平均3.897,4株敏感株未检测到adeB的表达.10株多重耐药株为adeJ相对表达水平(灰度)0.956～4.519,平均1.75,4株敏感株为0.356～0.576.平均0.447.结论 鲍曼不动杆菌临床株外排泵AdeABC的表达、AdeIJK的高表达可能与耐药性有关.     

多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布及外排泵基因的检测

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布并检测其外排泵基因型。方法统计96株多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布,用Kirby-Bauer法检测96株多重耐药鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的耐药情况,并用PCR扩增进行外排泵基因的检测。结果 96株多重耐药鲍曼不动杆菌主要分布在重症监护病房(54.2%)和呼吸内科(18.8%);对喹诺酮类、头孢菌素类、氨基糖苷类、四环素类抗菌药物的耐药率均在70%以上;分布在重症监护病房的52株多重耐药鲍曼不动杆菌中检测到ade B、ade R、ade S、ade J、ade E、abe M基因分别有18株(34.62%)、16株(30.77%)、18株(34.62%)、18株(34.62%)、0株、18株(34.62%);分布在呼吸内科的18株多重耐药鲍曼不动杆菌中检测到ade B、ade R、ade S、ade J、ade E、abe M基因分别有9株、8株、8株、8株、0株、8株。结论外排泵基因是分布在重症监护病房和呼吸内科的鲍曼不动杆菌发生多重耐药的重要因素。