联合应用荧光原位杂交与核型分析在产前诊断的对比研究

目的 探讨荧光原位杂交(FISH)和核型分析技术在产前诊断中的优势和不足.方法 在B超引导下抽取150例孕妇的羊水,用特异性探针GLP13/21和CSP18/X/Y对未培养的羊水细胞进行原位杂交;同时培养羊水细胞进行核型分析,并结果对比.结果 150例羊水细胞核型分析和FISH检测结果均成功.核型分析报告时间为10～15 d,而FISH仅为2d.150例羊水细胞,染色体非整倍体46例,结构异常7例.FISH检测出非整倍体45例,敏感性97.83％;未能检测出1例X染色体部分缺失及其他结构多态性;无假阳性结果,特异性保持在100.00％.结论 FISH可以快速、准确地诊断胎儿染色体数目异常,但判断结构异常仍需核型分析.     

二维联合三维超声诊断胎儿脑沟脑回发育异常的临床应用价值

目的：探讨二维联合三维超声诊断胎儿脑沟脑回发育异常的应用价值。方法对疑有中枢神经系统畸形的66胎胎儿,行二维超声检测记录脑沟脑回发育情况,后行三维超声容积扫描,以三正交多平面模式显示并储存,下线诊断,并将诊断结果与随访结果进行比较。结果经随访或尸检证实36胎胎儿存在或合并有脑沟回发育异常（10胎脑沟回未发育,26胎脑沟回发育迟缓）;30胎正常。二维联合三维超声诊断符合率为92．42％（61/66）,单纯二维超声诊断符合率为75．76％（50/66）,两者有显著差异（χ2＝6．68,P＜0．01）。结论二维联合三维超声可提高胎儿脑沟脑回发育异常诊断的准确性,具有重要的临床应用价值。     

引物原位标记法产前诊断18号染色体数目异常

目的：探讨引物原位标记法（PRINS）结合经腹脐血穿刺，应用于脐血中期细胞快速产前诊断18号染色体数目异常的可行性。方法：B超监护下经腹采集胎儿脐血共16例，外周血34例，应用18号染色体特异性引物，标记分裂中期细胞18号染色体，PRINS结果与中期细胞染色体G带分析结果进行比较。结果：16例脐血中，PRINS检测2例为18号三体，34例外周血中，1例为18三体，与染色体核型分析一致。结论：PRINS是一种简便、快速、可靠的产前诊断染色体数目异常的临床检测方法，值得进一步研究与推广。     

Prenatal diagnosis of nonmosaic tetrasomy 9p by microdissection and FISH: case report

Marker chromosome （mar） is a structurally abnormal chromosome that can not be identified with conventional cytogenetic techniques （ISCN, 2005）. The incidence of supernumerary marker chromosomes （SMCs） found at prenatal diagnosis varies from 0.4/1000 to 1.5/1000. Their genetic effects may range from harmless to detrimental, and in de novo cases, the rate of phenotypic abnormalities is statistically increased. Therefore, identification of SMCs has become imperative in prenatal diagnosis.     

胎儿畸形产前诊断与干预的伦理学研究

在产前诊断与干预处理中,医师应该遵循病人利益第一和尊重病人自主选择的伦理学原则,并提出应当把胎儿当作病人对待的伦理学概念.产前诊断与干预处理前,医师应向孕妇详细告知方案的利弊,供孕妇选择和做出最终的决定.对于出生后具有生存能力的畸形胎儿,尽管存在增加发病率和死亡率的危险,然而除非孕妇本身的情况不允许继续妊娠,否则胎儿伦理学原则反对终止妊娠.     

Prenatal diagnosis of methylmalonic aciduria by analysis of organic acids and total homocysteine in amniotic fluid

Background Methylmalonic aciduria （MMA） is the most frequent disease of organic aciduria in China. Various biochemical strategies are followed for the prenatal diagnosis of MMA. However, since fetuses affected by MMA have decreased excretion of methylmalonic acid, the difficulties of prenatal biochemical diagnosis are obvious. Gas chromatography mass spectrometry （GC/MS） and tandem mass spectrometry （ESl/MS/MS） have allowed us to identify the disease in affected fetuses. The aim of this study was to determine the value of analysis of organic acids and total homocysteine in amniotic fluid in prenatal diagnosis of MMA.
Methods The clinical diagnoses and outcomes of nine probands with MMA and the prenatal diagnoses based on biochemical analysis of nine fetuses at risk for MMA were investigated. Amniotic fluid samples from pregnancies at risk for MMA and metabolically normal pregnancies were obtained at 16-24 weeks of gestation. Methylmalonic acid and methylcitric acid were measured by GC/MS, propionylcarnitine was analyzed by ESl/MS/MS, and total homocysteine was determined by fluorescence polarization immunoassay.
Results In two pregnancies, high levels of methylmalonic acid, methylcitric acid, propionylcarnitine, and total homocysteine indicated combined MMA and homocysteinemia in the fetuses. One of the mothers continued pregnancy and received cobalamin supplement as prenatal treatment, and the other terminated her pregnancy. In one pregnancy, significantly elevated levels of methylmalonic acid, methylcitric acid, and propionylcarnitine, and normal level of total homocysteine was found indicating isolated MMA in the fetus; abortion was performed on this case. In the other six pregnancies, all the levels of the above mentioned metabolites were normal suggesting that the fetuses were not affected by MMA. The diagnoses were confirmed after delivery by testing urinary organic acids and plasma total homocysteine.
Conclusions The metabolic abnormalities of MMA occur early in gestation. The level of to     

采用FVⅢ基因内三个多态性标志检测血友病A携带者及其产前诊断

目的 采用FVⅢ基因内BclⅠ（intron18），XbaⅠ（intron22），HindⅢ（intron 19）三个多态性标志对血友病A家系进行连锁分析，对可能携带者进行检测并对血友病A高危胎儿进行产前诊断。方法 通过PCR扩增FVⅢ基因内含BclⅠ（intron 18），XbaⅠ（intron22），Hindm（intron19）位点的相应片段后，分别用限制性内切酶BclⅠ，XbaⅠ，HindⅢ酶解，对7个血友病A家系进行多态性分析。对有多态性意义者进行携带者检测和产前诊断。结果 结合FVⅢ基因内标志BclⅠ（intron18），XbaⅠ（intron22），HindⅢ（intron19）．对7个血友病A家系进行分析，4个家系至少有一个标志以上有意义，从而对5名可能携带者进行了检测．并对3个血友病A的高危胎儿进行了产前诊断。结论 结合三个基因内的多态性标志，对血友病A家系进行分析，是临床上简便及可靠的携带者检测及产前诊断方法。     

产前超声监测对双胎妊娠并发症的诊断及治疗选择的价值

目的：探讨双胎妊娠的产前超声监测方法对双胎并发症的诊断及治疗选择的价值。方法回顾性分析81例双胎妊娠孕妇的临床资料和超声监测方法,综合评估是否出现双胎输血综合征（TTTS）、选择性胎儿生长受限（sIUGR）等单绒毛膜双胎（MC双胎）特有的并发症,进行相应分期、分型和监测;随访至妊娠终止。结果81例双胎妊娠中双绒毛膜双羊膜囊双胎（DCDA ）40例出现双胎之一宫内死亡1例,双胎生长不一致1例;38例单绒毛膜双羊膜囊双胎（MCDA）出现TTTS 4例,sIUGR 2例,双胎之一唇腭裂畸形1例,双胎之一宫内死亡1例;3例单绒毛膜单羊膜囊双胎（MCMA）并发双胎之一无心畸形1例,联体双胎1例。DCDA并发症明显小于MC双胎并发症（P＜0．05）。DCDA双胎丢失率1/80（胎）,MC双胎丢失率11/82（胎）。DCDA胎儿丢失率明显低于MC双胎胎儿丢失率（ P＜0．05）。产前超声监测与终止妊娠结果100％符合。结论早孕期诊断双胎妊娠的绒毛膜性具有重要的临床意义;对＜26孕周的 MC双胎每2周监测1次,可早期诊断并发症;对≥26孕周的 TTTS及sIUGR在超声严密监测下选择分娩时机,可提高MC双胎围生儿生存率。     

无创产前筛查高风险胎儿的产前诊断结果分析及妊娠结局研究

背景 无创产前筛查针对胎儿非整倍体的筛查效率明显高于传统的血清学筛查方式,本研究试图获得真实的无创产前基因检测（NIPT）筛查染色体非整倍体及染色体拷贝数变异（CNVs）的阳性预测值（PPV）数据,并初步探讨孕妇对于性染色体非整倍体及染色体微缺失、微重复胎儿的妊娠选择。 目的 评估应用胎儿染色体核型分析、染色体微阵列分析（CMA）明确NIPT筛查提示高风险病例的临床意义。 方法 选择2014-01-01至2018-12-31就诊于河北省人民医院生殖遗传科,经无创产前筛查提示胎儿染色体非整倍体高风险以及胎儿CNVs高风险而需进行产前诊断的528例孕妇为研究对象。经羊膜腔穿刺或脐静脉穿刺获取胎儿细胞,进行染色体核型分析、CMA的产前诊断。对所有分娩病例在1年内进行电话随访,记录其妊娠结局。 结果 NIPT提示528例胎儿中447例为染色体非整倍体高风险,产前诊断的PPV分别为21-三体82.86%（174/210）、18-三体51.52%（34/66）、13-三体12.50%（4/32）、性染色体非整倍体50.82%（62/122）、其他类型三体5.88%（1/17）。NIPT提示81例为CNVs高风险,CMA发现拷贝数变异28例（PPV为34.57%）,CMA有明确致病意义者占24.69%（20/81）。<35岁和≥35岁孕妇经产前诊断明确结果异常的比例分别为48.51%（147/303）、70.22%（158/225）,<35岁和≥35岁孕妇产前诊断结果异常率比较,差异有统计学意义（χ2=24.938,P<0.05）。62例确诊为胎儿性染色体非整倍体的孕妇中,继续妊娠率为20.97%（13/62）;CMA无明确意义8例,其中1例失访、7例选择继续妊娠（1例婴儿具体情况未告知;1例女婴,双手为六指;余5例婴儿发育正常）。 结论 本研究获得了真实的NIPT筛查染色体非整倍体及CNVs的PPV数据和妊娠结局随访情况,为临床遗传咨询及处理提供了可靠的依据;无创高风险提示染色体存在可疑异常（染色体偏多/偏少/微缺失/微重复）时,建议同时行染色体核型及CMA检查,以便发现染色体倒位、平衡易位、低比例嵌合以及某些形态上的异常,提高胎儿染色体异常的检出率。     

孕妇血浆Amelogenin基因6bp差异检测对产前胎儿性别的鉴定价值

目的 建立一种可靠性强的非创伤性鉴别胎儿性别的方法。方法 根据Amelogenin基因第3内含子在X-Y染色体上6bp的差异，采用PCR技术扩增孕妇血浆游离DNA，运用聚丙烯酰胺凝胶电泳、溴化乙锭染色鉴定其基因型，从而判断胎儿性别。结果 32例孕妇血浆DNA标本中，19例被诊断为男性，13例被诊断为女性，所得结果与产后胎儿实际性别相比较，符合率为96、88％。结论 通过检测孕妇血浆DNA Amelogenin基因6bp差异产前诊断胎儿性别方法可行，结果可靠。     

羊水胆碱酯酶凝胶圆盘电泳改良法与其它方法对神经管缺损畸胎产前诊断价值的比较

三年内我们通过胆碱酯酶凝胶圆盘电泳法、甲胎蛋白放免法、总胆碱酯酶定量测定法对617例正常妊娠和42例神经管缺损(NTD) 畸胎羊水进行测定。用以上三种方法对NTD的阳性诊断率进行比较,结果指出,凝胶圆盘电泳法对NTD的阳性诊断率可达100％,对正常妊娠的假阳性率较低。故此法对产前诊断NTD是一项比较特异的有效的方法。     

重组酶介导等温扩增技术检测疟原虫方法的建立和评价

目的 建立一种重组酶介导等温扩增技术（RAA）检测疟原虫的方法。方法 针对疟原虫属保守18S小亚基核糖体RNA （18S rRNA）基因设计特异性引物,筛选确定最佳引物对组合并建立疟原虫重组酶介导核酸等温扩增体系。通过该RAA体系检测疟原虫标准质粒、4种疟原虫[恶性疟原虫( Plasmodium falciparum, P.f )、间日疟原虫( P. vivax, P.v)、三日疟原虫( P. malaria, P.m)、卵形疟原虫( P. ovale, Po)]病原体以及其他6种输血传播寄生虫（婴儿利士曼原虫、杜氏利士曼原虫、刚地弓形虫、溶组织阿米巴虫、犬吉氏巴贝西虫、田鼠巴贝虫）,以评估该体系的灵敏度和特异度。 结果 筛选出一组扩增效果较好的引物对,整个RAA体系使用最佳引物对在37 ℃,20 min即可完成扩增,对标准质粒的检测下限为10^-2 copies/μL,恶性疟原虫、间日疟原虫和卵形疟原虫为10² copies/μL,三日疟原虫为10 copies/μL。RAA检测体系未与其他输血传播寄生虫产生交叉反应,特异性良好。应用RAA方法检测外籍学生献血者标本,结果与荧光定量PCR结果一致。结论 成功建立了一种快速、简便和特异的疟原虫RAA检测方法,将会给血液筛查和一些基层偏远医院的临床检测提供很大帮助。     

胎儿畸形产前超声诊断及误诊漏诊分析

目的了解该院产前超声对胎儿畸形的检出情况,以及误诊漏诊情况,分析误诊漏诊原因,提高产前超声诊断水平。方法回顾性分析该院自2009年9月—2014年5月所进行的全部35 329例孕妇孕期超声检出的胎儿畸形结果,并与临床分娩或引产的结果进行对比。结果 35329例胎儿中,临床证实的胎儿畸形共148例,该院产前超声共检出畸形胎儿139例,符合率94.5%,误诊漏诊9例,误诊率6.1%。结论产前超声诊断安全有效,是检出胎儿畸形的可靠方法,加强理论学习,掌握筛查技能,并且规范操作可以提高胎儿畸形的超声诊断水平,该院的产前超声诊断水平仍有提升的空间。     

宫颈息肉的宫腔镜诊断和治疗

目的解决宫颈息肉漏诊率高、复发率高的问题,对宫颈息肉采用宫腔镜下治疗。方法对359例宫颈糜烂患者用宫腔镜进行诊断和治疗。结果肉眼息肉诊断率为19.2%(69/359),而宫腔镜诊断率为50.7%(182/359,P<0.05)。宫腔镜能发现肉眼不易发现的息肉,诊断率大大提高。在宫腔镜的直视下切除息肉蒂部及其附着的浅肌层,1年息肉复发率明显下降为1.1%(2/182)。结论宫腔镜在宫颈息肉的诊断及治疗方面有较大优势。     

小肠癌p21蛋白表达与其发生及预后的关系

应用免疫组化的方法对小肠良、恶性病变中ｐ２１蛋白表达进行了研究。结果表明：小肠癌ｐ２１蛋白的阳性率为３８．８９％，癌旁组织为６８．４２％，正常的小肠组织ｐ２１蛋白为阴性。表明ｒａｓ基因突变主要发生在小肠癌的癌前病变，对小肠癌的早期诊断具有重要的意义，ｐ２１蛋白表达与小肠癌的分化程度、发生部位、浸润、转移及预后无关，说明在小肠癌的发展过程中可能存在其它致癌机制。     

IPCL分型联合Cyclin D1、PDGFR对食管早期肿瘤的诊断和预后预测价值

目的 探讨食管上皮乳头内毛细血管袢(intrapapillary capillary loop,IPCL)分型联合细胞周期素D1(Cyclin D1)、血小板衍生生长因子受体(platelet derived growth factor,PDGFR)对食管癌的诊断和预后预测价值.方法 收治经NBI-ME检查的食管浅表型...     

miR-21在川崎病急性期患者血清中的表达及其临床意义

目的：探讨micrRNA-21（miR-21）在川崎病（KD）患者血清中的表达及其临床意义。方法：收集温州医科大学附属第二医院育英儿童医院2014年1月-2015年6月收治的33例KD患者以及15例健康体检者的血清标本,以 cel-miR-39为外参基因,通过实时定量PCR（RT-qPCR）检测血清miR-21的表达,并通过受试者工作特征（ROC）曲线评估其作为KD疾病标记物的诊断价值。结果：miR-21在KD急性期患儿血清中表达水平明显高于健康儿童血清（P＜0.05）,恢复期则降低至正常水平。ROC曲线显示,以miR-21诊断KD的曲线下面积（AUC）为0.736（95%CI：0.531～0.941）,当临界值（诊断阈值）取1.09时,其诊断灵敏度和特异度分别为0.846和0.714。血清miR-21表达与KD临床特征相关分析显示,高血小板水平血清中miR-21表达更高。结论：KD患者血清miR-21水平显著升高,可能是KD诊断的潜在血清标志物之一。     

专家督导科主任查房 提高三级检诊质量

目的通过专家督导科主任查房,提高三级检诊质量,促进医疗制度的落实,规范医疗行为,确保医疗安全。方法制定标准及细则,通过信息化平台选择病例,以专家组为主体进行逐科查房督导。评选出好的科室和个人,讲评存在问题并建立长效机制。结果规范了查房模式,明确了查房标准,加强了医疗质量建设。结论专家组督导科主任查房是落实三级检诊制度,对中、青年医务人员进行传、帮、带的可行办法。     

论辨体论治的科学意义及其应用(一)

不同个体的特征分别具有各自不同的遗传背景及后天影响因素,其生命信息,表达着健康与疾病现象与认知,直接关系到诊断、发病与治疗。辨体论治体现以人为本、因人制宜的思想,而辨体-辨病-辨证诊疗模式的建立,不仅揭示中医临床医学的自身规律,也将突破辨证论治的单一思维定势,适应多元复杂的临床需求,发挥中医的特色与优势,使中医临床医学形成新的格局,得以长足发展。     

论辨体论治的科学意义及其应用(二)

不同个体的特征分别具有各自不同的遗传背景及后天影响因素,其生命信息,表达着健康与疾病现象与认知,直接关系到诊断、发病与治疗。辨体论治体现以人为本、因人制宜的思想,而辨体-辨病-辨证诊疗模式的建立,不仅揭示中医临床医学的自身规律,也将突破辨证论治的单一思维定势,适应多元复杂的临床需求,发挥中医的特色与优势,使中医临床医学形成新的格局,得以长足发展。