缺血预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨缺血预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响. 方法 建立糖尿病大鼠模型,将18只糖尿病大鼠随机分为3组,即心肌缺血再灌注组、心肌缺血预处理组及假手术组,每组6只.硝酸还原酶法测定各组大鼠的血清和心肌组织中一氧化氮(NO)水平,免疫组织化学法测定大鼠的心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达. 结果 假手术组大鼠血清NO水平为(46±11)μmol/L,心肌缺血再灌注组为(66±18)μmol/L,心肌缺血预处理组为(45±11)μmol/L,心肌缺血再灌注组的血清NO水平与假手术组间差异有统计学意义(P<0.05),与心肌缺血预处理组间差异亦有统计学意义(P<0.05).假手术组大鼠心肌组织NO水平为(21.4±5.3)μmol/mgprot,心肌缺血再灌注组为(30.2±3.3)μmol/mgprot,心肌缺血预处理组为(25.6±2.9)μmol/mgprot,心肌缺血再灌注组的心肌组织NO水平与假手术组间差异有统计学意义(P<0.01),与心肌缺血预处理组间差异亦有统计学意义(P<0.05).假手术组大鼠心肌组织中MMP-2阳性细胞百分比为(30.4±2.2)%,心肌缺血再灌注组为(44.2±6.3)%,心肌缺血预处理组为(25.2±4.5)%,心肌缺血再灌注组与假手术组间差异有统计学意义(P<0.05),与心肌缺血预处理组间差异亦有统计学意义(P<0.05). 结论 缺血预处理可通过减少NO生成和MMP-2表达,降低糖尿病大鼠的心肌缺血再灌注损伤.     

针刺预处理对瞬时受体电位通道1介导的大鼠心肌缺血改善作用

目的通过观察针刺预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织中瞬时受体电位通道1(TRPC1)的表达,进而揭示针刺预处理对心肌保护作用的机理。方法选择Wistar大鼠为受试对象,心肌缺血前给予针刺,采用推管法结扎大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,心肌缺血再灌注损伤后用Elisa法测定血清中血管内皮生长因子(VEGF)含量变化,在心肌损伤区采用免疫组化法观察心肌组织TRPC1的表达变化,原代培养各组心肌组织并检测各组心肌细胞钙离子浓度。结果与正常组、假手术组比较,心肌缺血组血清中VEGF含量减少(P0.05);与心肌缺血组比较,针刺预处理组血清中VEGF含量升高(P0.05);与心肌缺血组比较,针刺预处理组心肌TRPC1的表达明显增加(P0.05),而且心肌细胞内钙离子浓度明显降低(P0.05)。结论针刺预处理对心肌缺血大鼠心肌具有保护作用;其保护作用机制可能是通过增加心肌中表达TRPC1和降低细胞内钙离子浓度实现的。     

人参总皂昔和异氟醜预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

【摘要】 目的 观察人参总皂昔和异氟醍联合预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠的作用,并从TLR-4/NF-kB信 号通路探讨其发生机制。方法 选取雄性清洁级SD大鼠50只,分为假手术组、灌注损伤组、异氟醍预处理组、人参总 皂昔组和异氟酵+人参总皂昔预处理组,每组各10只。对应手术处理后处死,收集血液测定炎性因子IL-6及TNF-a 的含量,收集心脏计算心肌梗死面积,观察心肌组织病理学,检测NF-kB和TLR4蛋白和mRNA的表达特点。结果 假手术组心肌细胞呈纤维状排列,心肌缺血再灌注损伤组有明显细胞形态紊乱,与心肌缺血再灌注损伤组相比,其余各 组均有一定程度的减轻。与假手术组相比,心肌缺血再灌注损伤组心肌NF-kB、心肌TLR4、血清IL-6和TNF-a明显增 加（P＜O.05）o与心肌缺血再灌注损伤组相比,异氟醍组、人参总皂昔组和异氟醍+人参总皂昔组心肌梗死面积、IL-6、 TNF-a、心肌NF-kB和TLR4表达均明显降低（P＜0.05）。此外,异氟醜+人参总皂昔组心肌梗死面积、血清IL-6、血清 TNF-a、心肌NF-kB和TLR4表达低于异氟醍组和人参总皂昔组（P＜0.05）。结论 人参总皂昔和异氟酵联合预处理 能有效改善心脏病理学和心肌梗死面积,其作用机理可能是二者联合应用降低了心肌中TLR4和NF-kB蛋白及mRNA 表达,进而改善炎症反应有关。     

无创性肢体预适应对缺血再灌注损伤大鼠心肌的保护作用

目的 观察大鼠无创性肢体预适应（RIP）后对心肌缺血再灌损伤后心肌形态学、梗死面积和心肌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9和组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的影响。方法 通过连续3d,每天1次3个循环下肢无创性5min缺血、5min再灌注,建立RIP模型。将大鼠随机分成3组,心肌缺血再灌组（I/R组）、心肌缺血预适应组（CIP组）和RIP组。以HE染色法观察心肌形态学改变;以红四氮唑染色法确定心肌梗死范围;以免疫组化法测定心肌MMP-2、MMP-9和TIMP-1的水平。结果 与I/R组比较,CIP和RIP均能明显改善心肌损害的形态学改变,降低心肌细胞的肿胀、减少间质出血和炎性细胞的浸润;显著降低心肌梗死面积（P〈0.01）;降低缺血区心肌MMP-2和MMP-9的水平,增加TIMP-1的水平（P〈0.05）。结论 RIP不仅能改善缺血再灌注损伤大鼠心肌形态学改变、减少心肌梗死面积,而且能降低心肌细胞基质的损伤,起到保护心肌的作用。     

心肌缺血再灌注时氧化亚氮与氧化亚氮合酶的变化及L-精氨酸对其的影响

目的：观察大鼠心肌缺血再灌注时氧化亚氮（nitric oxide,NO）和氧化亚氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）的变化及L-精氨酸对其的影响,探讨心肌缺血再灌注损伤的可能机制。方法：大鼠80只,分为假手术对照（sham）组,心肌缺血再灌注组,肾脏缺血预处理＋心肌缺血再灌注组和L-精氨酸治疗＋心肌缺血再灌注组,检测血清NO及NOS水平,光镜下进行中性粒细胞计数。结果：缺血再灌注（MIR）组缺血30min时相点与对照组相比NO,NOS无差异,再灌注后NO,NOS开始下降,随时间延长,NO,NOS逐渐减少。与MIR组再灌注对应时相比较,肾脏缺血预处理＋MIR组及精氨酸治疗＋MIR组NO及NOS均显著增加。缺血后再灌注时随时间延长,中性粒细胞数量逐渐增加,给予精氨酸干预或肾脏缺血预处理后中性粒细胞数量显著下降。结论：心肌缺血后再灌注时有大量中性粒细胞浸润,与心肌损伤关系密切。缺血预处理可通过增加NO水平减轻随后的缺血再灌注损伤,L-精氨酸可通过增加NO,减少中性粒细胞浸润起心肌保护作用。     

苯那普利对大鼠缺血再灌注的影响

目的 观察苯那普利对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制.方法 32 只SD大鼠随机分为3 组:假手术组、缺血再灌注组、苯那普利预处理组.大鼠在体结扎冠状动脉前降支30 min后,松开结扎线再灌注120 min制备心肌缺血再灌注损伤模型,测定血清肌酸激酶(CK)的含量,TTC染色后计算心肌梗死范围(MIS),TUNEL法检测心肌细胞凋亡并用免疫组化方法测定抑凋亡基因(Bcl-2)和促凋亡基因(Bax)的表达.结果 缺血再灌注损伤组较假手术组的CK明显增高,其凋亡指数增多,Bcl-2的蛋白表达减少而Bax的蛋白表达增加.苯那普利预处理组的CK较缺血再灌注组明显降低,其凋亡指数减少,Bcl-2蛋白表达增加而Bax的蛋白表达降低;心肌梗死面积明显减小.结论 苯那普利预处理通过抑制心肌细胞的凋亡而对缺血再灌注的心肌起保护作用.     

胰岛素对糖尿病大鼠再灌注损伤性心肌的影响及可能机制

目的 观察胰岛素对糖尿病和非糖尿病大鼠再灌注损伤性心肌的影响并探讨其可能机制.方法 复制实验性糖尿病大鼠模型,造模9周,结扎左冠状动脉前降支复制心肌缺血/再灌注模型.动物随机分为6组,糖尿病组和非糖尿病组分别给予生理盐水、胰岛素或胰岛素+渥曼青霉素.观察心肌血清酶学、心律失常评分及心肌磷酸化蛋白激酶b(p-Akt)和磷酸化Bad(p-Bad)表达.结果 与非糖尿病对照组比较,胰岛素组可以使血清肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)降低;胰岛素组心律失常评分降低;心肌组织p-Akt和p-Bad蛋白表达高于非糖尿病对照组,胰岛素的这种作用被渥曼青霉素取消.与糖尿病对照组比较,胰岛素组可以使血清CK和CK-MB降低;胰岛素组心律失常评分降低;心肌组织p-Akt和p-Bad蛋白表达增强,该变化可以被渥曼青霉素取消.胰岛素对糖尿病大鼠和非糖尿病大鼠的心肌再灌注损伤的影响的比较:糖尿病大鼠的血清CK和CK-MB高于非糖尿病大鼠;两者的心律失常评分比较无显著差异;非糖尿病胰岛素组心肌p-Akt表达高于糖尿病胰岛素组.结论 胰岛素通过PI3K/Akt信号转导途径对于非糖尿病再灌注损伤心肌具有保护作用,胰岛素对于糖尿病再灌注损伤心肌同样具有保护作用,但保护作用效果弱于非糖尿病心肌.     

大鼠心肌缺血预处理对细胞凋亡的影响

目的：研究缺血预处理对急性心肌缺血／再灌注细胞凋亡的影响。方法：用在体心肌缺血／再灌注模型，将实验动物分为3组：对照组、缺血／再灌注组、缺血预处理组。分别测定心肌梗死面积，观察心肌超微结构，用原位末端标记法测定凋亡心肌细胞，用免疫组化法测定Fas蛋白表达。结果：与缺血／再灌注相比，缺血预处理能减小心肌梗死面积（P＜0．01），保护心肌超微结构，减少凋亡指数（P＜0．01）及降低Fas蛋白表达（P＜0．01）。结论：缺血预处理的心肌保护作用一定程度上可能是通过减少Fas介导的心肌缺血／再灌注细胞凋亡而实现的。     

细胞焦亡在糖尿病心肌缺血再灌注损伤的变化及作用机制

目的:探究细胞焦亡在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的变化及作用机制。方法:选择成年健康雄性SD大鼠,体重210-230g。大鼠糖尿病模型采用腹腔注射1%链脲佐菌素60mg/kg制备,取造模成功的SD大鼠40只,将其随机分为2组(n=20):糖尿病假手术组(DS组)、糖尿病心肌缺血再灌注组(DIR组);另取非糖尿病大鼠40只,将其随机分为2组(n=20):假手术组(NS组)、心肌缺血再灌注组(NIR组)。采用结扎左冠状动脉前降支30min再灌注120min的方法制备心肌缺血再灌注模型;NS组、DS组只穿线不结扎。再灌注结束后,采集动脉血样,检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;采用TTC法检测心肌梗死面积;HE染色观察心肌组织病理学变化;Western Blot法检测NLRP3、caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和IL-1β在心肌组织的表达。结果:DS与NS相比,NLRP3、caspase-1、ASC和IL-1β蛋白表达增加;非糖尿病和糖尿病大鼠在心肌缺血再灌注时,CK-MB和LDH的活性增加,NLRP3、caspase-1、ASC和IL-1β蛋白表达增加;DIR组与NIR相比,心脏病理学损伤加重,心肌梗死面积增加,CK-MB和LDH活性增高,NLRP3、caspase-1、ASC和IL-1β蛋白表达增加。结论:糖尿病大鼠心肌对缺血再灌注敏感性增加,缺血再灌注损伤加重,其机制可能与NLRP3介导的caspase-1依赖性细胞焦亡的作用密切相关。     

苯那普利对大鼠缺血再灌注的影响

目的观察苯那普利对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法32只SD大鼠随机分为3组：假手术组、缺血再灌注组、苯那普利预处理组。大鼠在体结扎冠状动脉前降支30 min后,松开结扎线再灌注120 min制备心肌缺血再灌注损伤模型,测定血清肌酸激酶（CK）的含量,TTC染色后计算心肌梗死范围（MIS）,TUNEL法检测心肌细胞凋亡并用免疫组化方法测定抑凋亡基因（Bcl-2）和促凋亡基因（Bax）的表达。结果缺血再灌注损伤组较假手术组的CK明显增高,其凋亡指数增多,Bcl-2的蛋白表达减少而Bax的蛋白表达增加。苯那普利预处理组的CK较缺血再灌注组明显降低,其凋亡指数减少,Bcl-2蛋白表达增加而Bax的蛋白表达降低;心肌梗死面积明显减小。结论苯那普利预处理通过抑制心肌细胞的凋亡而对缺血再灌注的心肌起保护作用。     

缺血修饰白蛋白在诊断急性心肌缺血中的作用

 目的 观察急诊胸痛患者中,缺血修饰白蛋白（ischemia modified albumin,IMA）在心肌缺血引起的心源性胸痛者中的变化情况、其在不同疾病组人群中水平的差异以及对急性心肌缺血严重程度的反映。方法 连续收集2008年4月5日起因“胸闷胸痛”至中山医院急诊就诊的患者100例,除外慢性心功能不全、肾功能不全者,留取其不同时间送检的血清标本人工测定IMA值。检测前综合所有临床资料将病例分为非缺血性胸痛（non-ischemic chest pain,NICP）组和急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）组,后者又进一步分成不稳定心绞痛（unstable angina,UA）组、非ST段抬高心梗（non-ST elevated myocardial infarction,NSTEMI）组和ST段抬高心梗（ST elevated myocardial infarction,STEMI）组。比较不同组人群中血清IMA的水平,并结合其他辅助检查结果分析该指标是否能反映心肌缺血的程度。结果 共收集病例100例,血清标本188份,其中男性63例,女性37例,年龄31~88（64.6 ± 17.3）岁。各组血清IMA水平（ABSU/mL）：NICP组（54.1 ± 16.8）,ACS组（69.7 ± 15.3）,两组间差异有统计学意义;UA组（64.4 ± 11.7）,NSTEMI组（68.3 ± 12.9）,STEMI组（75.6 ± 15.2）,其余4组与NICP组进行组间比较,各组间IMA均值不全相等,其中NICP与其余各组、STEMI与UA组之间差异有统计学意义。以最终的出院诊断为标准,由ROC曲线得出IMA诊断ACS的最佳截断值为66.1 ABSU/mL,曲线下面积（area under the curve,AUC）为0.745（0.649~0.841）,敏感性 71.0%,特异性 64.8%。IMA升高的水平与心电图ST-T异常的程度及范围有关（P<0.05）。结论 在不稳定型冠心病患者中血清IMA水平升高,可以帮助鉴别急性心肌缺血引起的胸痛,并能反映缺血的严重程度。     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注所致急性肺损伤的保护作用

目的:观察全肝缺血再灌注后所致急性肺损伤的发病机制及缺血顸处理的保护作用.方法:通过脾静脉-股静脉转流建立大鼠全肝缺血再灌注模型.18只大鼠随机分3组,全肝缺血40 min再灌注3 h组(IR组);缺血预处理组(IP组),阻断肝脏血流5 min再灌注5 min后,再行全肝缺血40 mjn再灌注3 b;对照组(C组)仅行麻醉及假手术.3 h后检测各组肺泡灌洗液中总蛋白的含量、肺组织含水量以及髓过氧化物酶(MPO)含量和组织及血中丙二醛(MDA)含量.结果:与C组比较,IR组肺泡灌洗液总蛋白含量和肺组织含水量明显升高,而IP组增高不明显.IR组肺组织MPO和MDA及血清中MDA含量明显高于对照组,而预处理可以减少MPO和MDA的升高.结论:肝脏缺血再灌注通过中性粒细胞浸润和氧化应激反应导致急性肺损伤.缺血预处理可以减少粒细胞的浸润,增加抗氧化的能力,减轻肺损伤.     

大鼠四血管脑缺血模型建立方法的改进

目的：探讨提高大鼠四血管脑缺血模型成功率的方法。方法：在四血管脑缺血模型制作方法基础上,采用2阶段制作,首先阻断椎动脉,次日阻断颈总动脉;通过翼突这一骨性标态寻找翼突孔。观察缺血10min、20min、30min时造模成功率。结果：造模总成功率达57．7％．动物存活率达93．3％。随着缺血时间延长,模型成功率有逐渐降低的趋势。结论：采用改进的手术方法可有效提高大鼠四血管脑缺血模型成功率。     

心肌缺血期短暂肢体缺血处理对大鼠心肌梗死范围的影响

目的探讨心肌缺血期短暂肢体缺血处理对大鼠心肌梗死范围的影响及其细胞凋亡机制。方法健康雄性Wistar大鼠经胸骨下段切口暴露心脏,以打活结的方式结扎或旷置冠状动脉左前降支(LAD)后,建立在体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤模型。实验共分三组:①假手术组(Sham组,n=8),经LAD下穿线后,旷置;②缺血/再灌注组(IR组,n=12),对心脏LAD实施30 min缺血/180 min再灌注处理;③心肌缺血期短暂肢体缺血处理组(RP组,n=12),对心脏LAD实施30 min缺血/180 min再灌注处理,同时在实施心肌缺血期间对双下肢实施5 min缺血/5 min再灌注3次。TTC染色法测定心肌梗死面积,免疫组化法检测心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达。结果三组的左室心肌危险区域(缺血范围)并无显著差异,但RP组心梗范围显著小于IR组(P=0.001)。且与IR组相比,RP组中Bax蛋白表达阳性的心肌细胞比率显著降低(P=0.013),Bcl-2蛋白表达阳性的心肌细胞比率则无明显变化(P=0.131),Bcl-2/Bax比值明显升高(P=0.036)。结论心肌缺血期行短暂肢体缺血处理能减少大鼠心肌梗死...     

老年大鼠大脑中动脉永久性缺血与缺血再灌注 对大脑损伤的比较研究

目的 探讨老年大鼠缺血再灌注对大脑的影响。方法 将30 只健康雄性老年（18 ～ 20 月龄） SD 大鼠随机分为假手术组（Sham 组）、永久性缺血组（I 组）及缺血再灌注组（I/R 组）,除Sham 组外,其 余两组采用线栓法复制老年大鼠大脑中动脉局灶缺血再灌注损伤模型。术后24 h,2,3,5- 氯化三苯基四氮 唑检测大鼠脑梗死体积,ELISA 法检测脑组织高迁移率族蛋白-1（HMGB1）和丙二醛（MDA）含量及超氧 化物歧化酶（SOD）活性,Western blotting 检测脑组织HMGB1 的表达。结果 与Sham 组比较,I 组脑梗死 体积增加,SOD 活性降低（P <0.05）,MDA 含量和HMGB1 相对表达量升高（P <0.05）。与I 组比较,I/R 组 大鼠脑梗死体积百分比减少,SOD 活性上升（P <0.05）,MDA 含量和HMGB1 相对表达量下降（P <0.05）。 结论 与永久性缺血相比,老年大鼠大脑中动脉缺血再灌注可减轻大脑损伤。     

缺血后适应对脑缺血再灌注损伤保护作用的研究进展

后适应是在缺血后再灌注早期机械地阻断血流从而减轻器官缺血/再灌注损伤的一种现象.本文对后适应对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制作一综述.     

二甲基亚砜对小鼠脑缺血的影响

目的研究二甲基亚砜(DMSO)对小鼠脑缺血的影响,并初步探讨其机制.方法应用小鼠断头张口喘气模型观察喘气时间的变化;离体大鼠血管平滑肌条记录等张收缩.结果DMSO使小鼠张口喘气时间明显延长,呈剂量依赖性,同时DMSO呈浓度依赖性地松弛去氧肾上腺素预收缩的离体兔胸主动脉螺旋条.结论DM-SO具有一定的抗脑缺血作用,其作用机制可能涉及其舒血管作用,而增加脑血流量.     

动态心电图对无症状心肌缺血的诊断价值

目的　探讨动态心电图 (DCG)对冠状动脉粥样硬化性心脏病 (简称冠心病 )患者无症状心肌缺血发作的识别价值及规律。　方法　按年龄将患者分为老年组 2 1例 ,非老年组 30例。应用DCG对冠心病 5 1例的心肌缺血进行动态分析。　结果　 5 1例经DCG检测共发生缺血性ST段下移 36 8次 ,其中无症状缺血发作占 85 87% ,ST段压低值平均为 ( 1 6 6± 0 13)mm ,78%缺血性ST段下降时心率增快 ,夜间心肌缺血阈值低 ,缺血时间和ST段压低程度劣于日间。老年组混合型心肌缺血及心肌缺血阈变异度 (IV)较对照组有显著差异。　结论　DCG对无症状心肌缺血检测有重要意义 ,临床上应对无症状心肌缺血予以足够的重视     

p38 MAPK在局灶性脑缺血大鼠缺血中心区和半影区的表达

目的研究大鼠局灶性脑缺血不同缺血时间皮质半暗带和中心区p38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）磷酸化水平和蛋白水平的表达。方法用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,分别于术后1、3、6、12、24h剥取缺血半暗带及中心区皮质组织,应用Western blot并结合Gel Doc凝胶成像系统,定量检测p38MAPK磷酸化水平和蛋白表达量。结果与假手术组相比,模型组大鼠皮层缺血核心区和半影区p38MAPK磷酸化水平显著升高（P〈0．05,n=6）,缺血中心区p38MAPK在缺血6h磷酸化程度达高峰,半暗带在3h时达高峰;各组间p38MAPK蛋白表达量水平无明显变化。结论p38MAPK磷酸化激活参与了大鼠脑缺血损伤过程的信号转导,在缺血中心区和半影区的磷酸化增强可能与局部脑缺血损伤的神经元坏死和凋亡过程有密切关系。