卵巢上皮性癌组织中水通道蛋白3的表达

目的:检测卵巢上皮性癌组织中水通道蛋白3(AQP3)的表达,探讨其在卵巢上皮性癌发病中的意义.方法:取66例卵巢上皮性肿瘤(恶性46例,交界性10例,良性10例)、12例正常卵巢组织,应用免疫组织化学SP法检测AQP3的表达.结果:AQP3主要在卵巢上皮性癌癌细胞的胞质中和部分胞膜上表达,在良性卵巢上皮性肿瘤和交界性肿瘤部分肿瘤细胞胞质中、少量间质细胞胞质中也有表达.AQP3在交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤组织中表达水平高于良性肿瘤组织和正常组织(P＜0.05).组织学分级为G2、G3的卵巢上皮性癌组织中AQP3的表达高于G1者,Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌组织AQP3表达高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05),腹水量超过1 000 mL者AQP3表达水平高于1 000 mL以下者(P<0.05),伴淋巴结转移的卵巢癌组织中AQP3表达水平高于无淋巴结转移者(P<0.05).结论:AQP3可能通过增加肿瘤上皮细胞和血管内皮细胞的水通透性,增强卵巢上皮性癌的侵袭和转移能力.     

卵巢上皮性肿瘤中AQP-1的表达及临床意义

目的 研究卵巢癌中水通道蛋白1（AQP1）的表达及临床意义。方法 卵巢上皮性癌组38例;卵巢交界性上皮性肿瘤组12例;卵巢良性上皮性肿瘤组9例;正常卵巢组织7例为对照（正常组）。免疫组织化学（SP）进行染色。将AQP1的表达与卵巢上皮性肿瘤的关系作出研究。结果 1）在细胞的细胞浆内及血管内皮细胞中表达阳性。卵巢上皮性癌中78.95%及卵巢交界性肿瘤中66.67%,显著高于卵巢良性肿瘤33.33%和正常卵巢组织28.57%的表达率,差异有显著性（P〈0.05）;2）卵巢癌有腹水者其AQP1表达率水平明显高于无腹水量者,差异有显著性（P〈0.05）;与病理分型及分化程度无关;3）恶性肿瘤,交界性肿瘤,良性肿瘤及正常卵巢MVD有明显差异;证明MVD值与AQP1表达上调有关。结论 AQP1在卵巢癌的病理机制和卵巢癌腹水的发生到增多可能起到作用。     

宫颈癌组织中水通道蛋白1mRNA的表达及临床意义研究

目的 探讨水通道蛋白1(AQPl)mRNA在宫颈癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组化Eli Vision法、RT-PCR技术检测20例正常宫颈组织(对照组)和89例宫颈癌患者手术切除标本组织中AQP1蛋白、AQPl mRNA的表达,应用图像分析软件分析AQPl mRNA的平均光密度和灰度值.结果 宫颈癌组织AQPl mRNA、AQP1蛋白的表达明显高于正常对照组,有淋巴转移组高于无转移组;FIGO分期Ⅲ期组明显高于Ⅰ+Ⅱ期组,差异均有统计学意义(P＜0.05).肿瘤组织中AQPl蛋白表达与肿瘤分期有关(P＜0.05),而与患者年龄及肿瘤大小无关(P＞0.05).结论 AQPl mRNA及AQPl蛋白在宫颈癌组织中呈高表达,AQPl蛋白的表达上调可能参与了宫颈癌的侵袭和转移.     

卵巢上皮性癌组织中PAX2基因的表达及临床意义

目的 探讨PAX2 mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应和免疫组化方法检测PAX2 mRNA和蛋白在31例卵巢上皮性癌、11例卵巢上皮性交界性肿瘤、10例卵巢上皮性良性肿瘤和11例正常卵巢组织中的表达,并分析其表达与卵巢上皮性癌临床病理学指标的关系.结果 正常卵巢表面上皮无PAX2的表达,PAX2 mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达显著高于卵巢交界性肿瘤组织、卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织,差异均有统计学意义(P＜0.01);卵巢交界性肿瘤组织、卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织中PAX2mRNA和蛋白表达的差异无统计学意义(P＞0.05).在晚期(Ⅲ～Ⅳ)及低分化的卵巢上皮性癌中PAX2 mRNA和蛋白的表达高于早期(Ⅰ～Ⅱ)及高中分化者,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PAX2在卵巢癌的发生发展中起一定作用,可能对卵巢癌恶性程度的评估有指导意义.     

乌司他丁对急性肺损伤小鼠水通道蛋白1、5表达的影响

目的 研究急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白5(AQP5)的表达变化,探讨乌司他丁(UTI)治疗ALI的机制.方法 32只昆明小鼠随机分为空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、乌司他丁疗组(UTI组)、地塞米松组(Dex组),观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RT-PCR检测AQP1、AQP5、TNF-α、IL-1β mRNA的表达变化.结果 乌司他丁及地塞米松治疗后,肺组织炎症、充血明显改善.与NS组相比,ALI组AQP1mRNA的表达显著降低(P＜0.05),与ALI组相比,UTI组、Dex组的AQP1 mRNA的表达显著升高(P＜0.05).AQP5mRNA表达的变化与AQP1mRNA的变化相似.与NS组相比,ALI组TNF-α mRNA的表达显著升高(P＜0.05),与ALI组相比,UTI组、Dex组TNF-α mRNA的表达显著降低(P＜0.05).IL-1 β mRNA表达的变化与TNF-omRNA的变化相似.结论 UTI可通过上调AQP1、AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿.可能通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现.     

利尿剂对大鼠肾脏水通道蛋白-2基因表达和尿液水通道蛋白2的影响

目的 探讨临床常用利尿剂呋塞米、双氢克尿噻及安体舒通对正常大鼠肾脏水通道蛋白-2(AQP2)基因表达及尿液水通道蛋白-2浓度的影响.方法 40只健康SD大鼠随机分成4组:对照组、呋塞米组、安体舒通组、双氢克尿噻组.观测尿量、血钠及尿渗量,应用RT-PCR半定量检测肾内髓质AQP2和血管加压素-2型受体(V2-R)mRNA水平,Westernblotting检测肾髓质AQP2蛋白含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测尿液AQP2浓度.结果 ①与对照组比较,利尿剂组大鼠尿量均显著增多(P＜0.05),尿液中AQP2浓度明显增加(P＜0.05).但呋塞米组尿渗量低于对照组(P＜0.05),而双氢克尿噻组和安体舒通组尿渗量高于对照组(P＜0.05).②呋塞米组肾脏AQP2 mRNA、V2-RmRNA和AQP2蛋白表达较对照组明显增加(P＜0.05),而双氢克尿噻组较对照组明显降低(P＜0.05),安体舒通组有所减少但无统计学差异.结论 三类利尿剂均可显著增加正常大鼠尿液AQP2蛋白的排出.但对正常大鼠肾脏水通道蛋白2基因表达的影响并不相同,双氢克尿噻可以抑制正常大鼠肾内髓质AQP2mRNA和蛋白的表达,呋塞米能增加正常大鼠肾内髓质AQP2mRNA和蛋白的表达.     

变应性鼻炎小鼠鼻黏膜水通道蛋白5的表达

目的探讨水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中的表达。方法应用qPCR和Western blot分别检测20只正常小鼠和20只变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5 mRNA和蛋白的表达。结果变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5mRNA和蛋白显著高于正常小鼠(P<0.05)。结论 AQP5在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中高表达,对AQP5的研究开发可能会成为变应性鼻炎新的基因治疗靶点。     

卵巢上皮性癌组织中闭合蛋白-3和闭合蛋白-4蛋白的表达

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中闭合蛋白(Claudin)-3和Claudin-4蛋白的表达及其相关性.方法:采用免疫组化方法检测65例卵巢上皮性癌、12例交界性卵巢肿瘤、15例良性卵巢肿瘤和10例正常卵巢组织中Claudin-3和Claudin-4蛋白的表达情况,并分析Claudin-3和Claudin-4蛋白表达与卵巢上皮性癌患者临床病理特征的关系以及2者的相关性.结果:①卵巢上皮性癌组织中Claudin-3蛋白的阳性表达率高于交界性卵巢肿瘤组织、良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织(λ2=35.443,P＜0.05);卵巢上皮性癌组织和交界性卵巢肿瘤组织中Claudin-4蛋白的阳性表达率高于良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织(λ2=40.258,P＜0.05).②卵巢上皮性癌中、低分化组Claudin-3和Claudin-4的表达高于高分化组(λ2分别为14.249和9.991,P＜0.05);有淋巴结转移组Claudin-3和Claudin-4的表达高于无淋巴结转移组(λ2分别为4.710和4.065,P＜0.05).③在卵巢上皮性癌组织中Claudin-3与Claudin-4的表达呈正相关(rP=0.588,P＜0.05).结论:Claudin-3和Claudin-4的高表达与卵巢上皮性癌的发生发展及侵袭转移密切相关.     

氨溴索对脂多糖-烟雾诱导大鼠水通道蛋白5表达的影响

目的研究脂多糖-香烟烟雾诱导大鼠水通道蛋白5(AQP5)的表达,以及氨溴索(AMB)对其表达的影响。方法21只SD大鼠随机分为AMB干预组、模型组(脂多糖-香烟烟雾诱导组)与对照组。应用ELISA法检测肺组织匀浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中的TNF-α,原位杂交、免疫组化及图像分析法观察并测定各组AQP5的表达水平。结果模型组肺组织匀浆和BALF中的TNF-α显著高于AMB干预组和对照组(P<0.01);模型组支气管上皮AQP5 mRNA与AQP5蛋白的表达水平低于AMB干预组和对照组(P<0.01);BALF中的TNF-α与AQP5 mRNA和AQP5蛋白的表达呈负相关。结论脂多糖-香烟烟雾可降低支气管上皮AQP5的表达;AMB可能通过抑制BALF中的TNF-α释放而上调AQP5的表达。     

水通道蛋白１在肺腺癌组织中的表达和分布

目的:观察水通道蛋白1(AQP1)在肺腺癌组织中的表达并分析其临床意义.方法:取肺腺癌组织30例及正常肺组织30例,应用免疫组织化学,Western blot技术检测AQPl蛋白在肺腺癌和正常对照组织中的表达及分布,并收集临床资料,分析其与临床病理资料关系.结果:AQP1散在表达于正常肺组织的毛细血管内皮细胞,在肺腺癌组织中AQP1大量表达于肿瘤的血管内皮细胞以及肿瘤细胞膜、细胞浆;肺腺癌中AQP1蛋白表达水平较正常组织明显增多,二者之间差异有统计学意义;AQP1在肺腺癌组织中表达与肿瘤病理分级、淋巴结转移相关(P＜0.05),而与肺腺癌的TNM分期无明显相关性(P＞0.05).结论:AQP1在肺腺癌组织中表达增高,在正常组织中较低.提示AQP1可能与肺腺癌的发生和发展密切相关,具体机制有待深入研究.     

水通道蛋白-4在急性高眼压大鼠眼组织的表达变化

目的观察急性离眼压时水通道蛋白-4（AQP4）在大鼠眼组织的表达变化,以探讨AQP4与某些眼压畀常性疾病的关系。方法前房加压灌注法制作大鼠急性高眼压模型;应用免疫组化和原位杂交法观察AQP4庭其mRNA在眼组织的表达变化,并进行半定量分析。结果与对照组相比,AQP4及其mRNA在急性高眼压大鼠视网膜上的表达明显增强,主要集中在节细胞层、内核层。结论急性高眼压状态下,AQP4反其mRNA在视网膜上的表达增加,提示AQP4可能参与了高眼压所致视网膜损伤的病理生理过程。     

颅脑外伤早期与AQP4表达的研究进展

颅脑损伤后脑水肿的发生与AQP4表达密切相关,AQP4的分子结构和分布特点决定了其在脑水肿的病理生理变化中起到重要的作用,而脑损伤区血脑屏障的完整与否则是影响该部位AQP4表达的重要因素。     

AQP1在心肌缺血组织中的作用

水通道蛋白1（AQP1）是一组参与跨膜转运水的膜通道蛋白家族,在心肌缺血再灌注损伤、心肌缺血后水肿和微血管通透性改变方面具有重要作用。所以借助各种手段干预AQP1表达,有望从分子水平治疗心肌缺血再灌注损伤、心肌水肿和改善微血管通透性,为临床治疗心肌缺血提供新的方向。     

慢性应激对大鼠肾脏水通道蛋白1 的影响及机制研究

目的 研究慢性应激（足底电击）对大鼠肾脏水通道蛋白1（AQP1）的影响及其机制。方法 以足底电击SD 雄性大鼠为慢性应激模型,分为对照组、电击组、肾交感神经切除组、肾交感神经切除+ 电击组、注射血管紧张素转换酶抑制剂（卡托普利）+ 电击组、注射抗氧化剂（Tempol）+ 电击组,每组6 只大鼠。应用尾套法测量大鼠的血压,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定各组大鼠肾脏AQP1 mRNA 的表达变化,免疫组织化学法（IHC）观察AQP1 在各组大鼠肾脏中的表达及分布。结果 电击组大鼠肾脏AQP1 及血压与对照组比较,均差异有统计学意义（P <0.05）,电击组大鼠肾脏AQP1 表达明显,血压升高;肾交感神经切除组大鼠肾脏AQP1 与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,AQP1 表达减少,血压未见升高。肾交感神经切除+ 电击组、注射卡托普利+ 电击组、注射Tempol+ 电击组大鼠肾脏AQP1 表达及血压与电击组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,肾脏AQP1 表达均减少,血压均降低。结论 交感神经可调节AQP1 的表达,足底电击通过兴奋肾交感神经上调AQP1,另外,AQP1 还受氧化应激及肾素- 血管紧张素系统调控。AQP1 在慢性应激诱导的高血压中可能起着一定的作用。     

胃癌中水通道蛋白3的表达与淋巴结转移的关系

目的:探讨水通道蛋白3(AQP3)在胃腺癌不同分期中的差异表达与淋巴结转移的关系?方法:采用定量PCR?Western blot法对80例不同分期的胃腺癌组织及作为对照的癌旁非肿瘤组织中AQP3 mRNA和蛋白的表达分别进行检测,并与各临床病理分期中淋巴结转移情况进行分析?结果:AQP3在胃腺癌不同分期中的差异表达影响胃癌的淋巴结转移,有淋巴结转移的T1?T2?T3?T4期(UICC,2010)肿瘤组织中AQP3的表达明显高于无淋巴结转移者?结论:胃腺癌肿瘤组织中高表达的AQP3可能对患者淋巴结转移的发生有促进作用,因此AQP3有望成为预测胃腺癌转移和评估预后的重要指标,并可能是胃癌治疗靶点之一?     

水通道蛋白3介导过氧化氢转运对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移的作用研究*

目的 探讨水通道蛋白3（AQP3）介导肿瘤微环境中过氧化氢（H2O2）转运对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移的作用。方法 应用宫颈癌HeLa细胞,构建AQP3 shRNA慢病毒稳定转染宫颈癌细胞系,通过克隆形成、CCK-8、细胞平板克隆形成、Western blotting等比较H2O2处理前后细胞表型的差异。结果 成功构建AQP3-464- shRNA慢病毒稳定转染HeLa细胞系,AQP3 shRNA抑制肿瘤微环境中H2O2转运,抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移,AQP3 shRNA抑制肿瘤微环境中H2O2转运调控下游信号蛋白激酶B（PKB）。结论 AQP3介导宫颈癌HeLa细胞中H2O2跨膜转运,激发细胞内依赖第二信使H2O2的下游信号PKB,促进HeLa细胞的增殖、迁移。     

短暂性脑缺血再灌注损伤对老年大鼠海马脑组织水通道蛋白4表达及神经元凋亡的影响

目的 探讨短暂性脑缺血再灌注损伤对老年大鼠海马脑组织水通道蛋白4表达及神经元凋亡的影响.方法 健康老年Wistar大鼠160只按Pnsinelli方法建立四动脉阻断法全脑缺血模型,随机分为脑缺血1 min组、脑缺血3 min组、脑缺血5 rain组和假手术组,每组40只.每组又按再灌注时间分为再灌注12 h、1 d.2 d.3 d和7 d 5个亚组,每个亚组8只.应用干湿重法计算脑含水量、组织病理学染色观察神经元微观结构,免疫组化方法观察AQP4的表达,TUNEL法检测神经元凋亡.结果 缺血1 rain及3 min组各再灌注时间点脑组织含水量及AQP4表达与假手术组比较差异无统计学意义(P0.05),而缺血5 min组各再灌注时间点脑组织含水量及AQP4表达与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).假手术组及缺血1 min组有少量神经元凋亡,缺血3 min及缺血5 min后海马区神经元凋亡明显增加.神经元凋亡在缺血后再灌注12 h即有表达,在1 d达高峰,持续至第3天开始下降.结论 老年脑对缺血再灌注损伤的敏感性增加,短暂的脑缺血即可造成老年大鼠脑组织的水肿和AQP4表达及神经元凋亡的增加,神经元的凋亡较脑水肿或AQP4表达对缺血更为敏感;再灌注后神经元凋亡高峰出现得早,持续时间长.     

人AQP1基因的重组腺病毒构建及鉴定

目的构建人AQP1(hAQP1)基因的重组腺病毒载体.方法采用DNA重组与细菌内同源重组技术,构建含hAQP1的复制缺陷型重组腺病毒载体(pAdEasy-1/ hAQP1),并观察pAdEasy-1/ hAQP1在ECV-304中的感染情况.PCR方法鉴定重组腺病毒载体,利用绿色荧光蛋白GFP检测病毒滴度和感染效率.结果 PCR及限制性内切酶酶切鉴定证明pAdEasy-1/ hAQP1构建成功.结论应用细菌内同源重组法成功构建了含hAQP1基因的重组腺病毒载体.     

水甘油通道蛋白在非酒精性脂肪变性肝细胞模型中的表达及意义

目的研究水甘油通道蛋白(aquaglyceroporins)AQP3、AQP7、AQP9基因在油酸钠诱导的脂肪变性肝细胞模型中的表达变化及其意义。方法以常规培养的人肝癌HepG2细胞为对照,采用油酸钠诱导HepG2细胞脂肪变性,建立非酒精性脂肪变性肝细胞模型,利用油红O染色及细胞内甘油三酯含量测定检测肝细胞脂肪变性程度,并分别于0、12、24、48 h采用实时荧光定量PCR与Western blot方法检测水甘油通道蛋白AQP3、AQP7、AQP9基因的表达。结果油红O染色观察及肝细胞内甘油三酯含量测定显示HepG2细胞在油酸钠处理12 h后即开始出现脂肪变性,随着刺激时间延长,脂肪变性程度逐渐加重,肝细胞内甘油三酯含量在48 h组(79.76±0.75)较0 h组明显升高(P<0.05)。模型组中,AQP3mRNA水平12 h时表达开始减低,48 h时(0.39±0.08)表达最低,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);AQP7mRNA表达与对照组相比略有升高,差异无统计学意义(P>0.05);而AQP9 mRNA表达水平自12 h(1.59±0.11)即开始增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。模型组中,AQP3蛋白水平12 h时表达开始减低,24、48 h组[(0.016±0.002),(0.012±0.001)]与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);AQP7蛋白表达与对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05);AQP9蛋白水平12 h表达开始增高,24、48 h[(0.050±0.002)、(0.079±0.002)]组与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肝细胞脂肪变性模型中水甘油通道蛋白AQP3表达下调、AQP9表达上调、AQP7表达无明显差异,提示不同亚型的水甘油通道蛋白可能通过不同的机制参与了肝细胞非酒精性脂肪变性。     

水通道及其在脑内的表达

水对维持内环境的稳态起重要作用 ,也参与完成一些机体重要的生理功能。水通道 (ｗａｔｅｒｃｈａｎ ｎｅｌ)即水孔蛋白 (ａｑｕａｐｏｒｉｎ ,ＡＱＰ) ,分布广泛。迄今为止至少已发现并鉴定出 10种水孔蛋白 (ＡＱＰ0 ～ＡＱＰ9) [1] ,而水通道在脑内表达的主要是ＡＱＰ4 ,此文简要介绍水通道的分布、结构、作用及ＡＱＰ4 在脑内表达的研究进展。1　水通道家族的发现及分类1.1　水通道家族的发现研究表明水穿越细胞膜有两种方式[2 ] ,一是弥散通过脂质双分子层 ,其通透性 (ｐｄ)与温度有关 ;二是通过细胞膜上能选择性通透水的通道蛋白。渗透…